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Western blot电泳电转通用缓冲液 WB电泳电转缓冲液|Universal Eectrophoresis and Transfer buffer(for Western blot)

发表于由

Western blot电泳电转通用缓冲液 WB电泳电转缓冲液|Universal Eectrophoresis and Transfer buffer(for Western blot)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

Western blot实验首先需要进行电泳分离目的蛋白，然后将分开的蛋白从凝胶转移到固相基质如硝化纤维素膜或PVDF膜上，从而进行随后的免疫印迹检测。Tris-甘氨酸是最通用的电泳和转膜缓冲液，本品是经改进的缓冲液配方，以干粉的形式提供，使用时只需要用去离子水溶解即可。

 

产品信息

 

货号

20329ES10/20329ES50

规格

10×1 L /50×1 L

 

储存条件

 

室温密封保存。有效期2年。

 

使用说明

 

将本品1包溶解于1 L去离子水中，混匀，即形成1×电泳缓冲液（1×电泳缓冲液中含有25 mM Tris、192 mM Glycine、0.1% SDS）；取800 mL的1×电泳缓冲液加入200 mL乙醇即得到湿转及半干转通用电转缓冲液。

 

注意事项

 

1.不建议反复使用或长期放置缓冲液，否则会降低电泳及转膜效果。

2. 本产品仅作科研用途！

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230921

Q：该产品如何配置工作液？

A：用去离子水溶解即可。

Q：配置的电泳或电转缓冲液如何贮存？

A：室温运输，低温保存。

Q：配置好的电泳或电转缓冲液可以储存多久？

A：不建议反复使用或长期放置缓冲液，否则会降低电泳及转膜效果。

Q：大分子蛋白在转膜过程中容易形成沉淀，怎么办？

A：对于大蛋白>100KD 而言，其在凝胶电泳分离迁移较慢，从凝胶中转出也非常慢， 大蛋白易在凝胶中形成沉淀，从而影响转膜，在转膜时在转膜缓冲液中加入 SDS 至终浓度为 0.1%可以避免这种情况的发生；同时由于甲醇易使 SDS 从蛋白上脱失，因此应降低甲醇的浓度至 10%或者更低。

Q：电泳液适合什么体系？配成的电转液适合什么体系？

A: 本产品配置的电泳液是甘氨酸体系的，可以用于甘氨酸体系的自配胶和hepes体系的预制胶（建议分离30kD以上的蛋白）。加甲醇或乙醇配成转膜液后，适用于所有体系的胶（甘氨酸体系的自配胶、hepes体系和Bis tris的预制胶）。

Western blot电泳电转通用缓冲液 WB电泳电转缓冲液|Universal Eectrophoresis and Transfer buffer(for Western blot)

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产品简介

 

Western blot实验首先需要进行电泳分离目的蛋白，然后将分开的蛋白从凝胶转移到固相基质如硝化纤维素膜或PVDF膜上，从而进行随后的免疫印迹检测。Tris-甘氨酸是最通用的电泳和转膜缓冲液，本品是经改进的缓冲液配方，以干粉的形式提供，使用时只需要用去离子水溶解即可。

 

产品信息

 

货号

20329ES10/20329ES50

规格

10×1 L /50×1 L

 

储存条件

 

室温密封保存。有效期2年。

 

使用说明

 

将本品1包溶解于1 L去离子水中，混匀，即形成1×电泳缓冲液（1×电泳缓冲液中含有25 mM Tris、192 mM Glycine、0.1% SDS）；取800 mL的1×电泳缓冲液加入200 mL乙醇即得到湿转及半干转通用电转缓冲液。

 

注意事项

 

1.不建议反复使用或长期放置缓冲液，否则会降低电泳及转膜效果。

2. 本产品仅作科研用途！

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230921

Q：该产品如何配置工作液？

A：用去离子水溶解即可。

Q：配置的电泳或电转缓冲液如何贮存？

A：室温运输，低温保存。

Q：配置好的电泳或电转缓冲液可以储存多久？

A：不建议反复使用或长期放置缓冲液，否则会降低电泳及转膜效果。

Q：大分子蛋白在转膜过程中容易形成沉淀，怎么办？

A：对于大蛋白>100KD 而言，其在凝胶电泳分离迁移较慢，从凝胶中转出也非常慢， 大蛋白易在凝胶中形成沉淀，从而影响转膜，在转膜时在转膜缓冲液中加入 SDS 至终浓度为 0.1%可以避免这种情况的发生；同时由于甲醇易使 SDS 从蛋白上脱失，因此应降低甲醇的浓度至 10%或者更低。

Q：电泳液适合什么体系？配成的电转液适合什么体系？

A: 本产品配置的电泳液是甘氨酸体系的，可以用于甘氨酸体系的自配胶和hepes体系的预制胶（建议分离30kD以上的蛋白）。加甲醇或乙醇配成转膜液后，适用于所有体系的胶（甘氨酸体系的自配胶、hepes体系和Bis tris的预制胶）。

Western blot电泳电转通用缓冲液 WB电泳电转缓冲液|Universal Eectrophoresis and Transfer buffer(for Western blot)

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OneMinute Western印迹剥离缓冲液

发表于由

gmbiosciences  OneMinute  Western印迹剥离缓冲液

 

  OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液在一分钟内，你的膜是准备重新探测 
                                         
GM6001  OneMinute ® WB剥离缓冲液 25项测试 $ 115.00    
GM6002  OneMinute ® WB剥离缓冲液 4项测试 $ 37.00    
OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液，革命性的剥离缓冲液，被设计成特异性地剥离抗体而不是其它非抗体蛋白。因此，不仅印迹可以多次重新印迹，而且通常不需要重新封闭。
OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液 ，立即使你的膜准备重新印迹在 一 分钟。剥离仅花费30秒，洗涤仅花费3x 10秒。
   强调：
 
  • 更快，更方便和更有效的：只需要1分钟（图2， 3）
  • 的无损失显著转移蛋白质（图1，5）
  • 多次重探测：〜10次（图6）
  • 通常无需重新屏蔽
  • 在室温下表演，没有令人讨厌的气味
  • 硝酸纤维素膜和PVDF膜的工作（图4）
   协议：
       1.浸入膜OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液 持续30秒。      2.用洗涤缓冲液（TBST或PBST）洗涤印迹3 x 10秒*。 

         *印迹已准备好进行重新探测。通常不需要重新封闭膜。
 
                           一分钟：在室温下30秒，洗涤3次10秒，无重新阻塞。 
                           竞争者：在50℃下15分钟，洗涤3x 10min，重新封闭1小时，洗涤3x 15min		  
图1. OneMinute ® 防止相对于传统剥离缓冲液转移蛋白的损失。 详细请点击图。 
 
 

苛刻的剥离缓冲液（2％SDS，100mM 2-ME，50mM Tris，pH6.8，在50°C下运行15分钟）通常会导致转移的蛋白质大量流失，从而在随后的重新印迹中导致信号显着损失。当使用温和的剥离缓冲液（例如Pierce's Restore）时，研究人员总是会遭受抗体（尤其是一抗）去除不*的困扰。OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液 代表可有效去除抗体的仅有缓冲液（图2、3、4），而将转移的蛋白质很大程度地保留在膜上（图1、5、6）。
图2示出，与汽提 OneMinute ®半分钟*除去两者的二级抗体（图B）和初级抗体蛋白1（图C）。相反，用Pierce's Restore剥离15分钟不能剥离一级抗体（图C）。该图展示的高超的剥离效率 OneMinute ®。

通过以剥离的高亲和力抗体的能力OneMinute ® 比皮尔斯的还原（图3）要好得多。
图2. OneMinute ® 是不是皮尔斯的恢复更为有效。 请单击该图以获取详细信息。 
 
     
图3. OneMinute ® 是不是皮尔斯的恢复更为有效。请单击该图以获取详细信息。  
 
图4. OneMinute ® 不仅对硝酸纤维素膜也对PVDF膜炒菜锅。请单击该图以获取详细信息。
 

          

  
                  一分钟：在室温下10秒，洗3次10秒，无重新阻塞。 
                  竞争者：在50℃下15分钟，洗涤3x 10min，重新封闭1小时，洗涤3x 15min		  
图5.转移蛋白的小损失是由实现OneMinute ®。请单击该图以获取详细信息。

                

  
图6.多次汽提（10×）由OneMinute ® 上膜（图B的第三泳道）留存足够转移蛋白。 请单击该图以获取详细信息。
 
        
图7.通过用汽提检测磷酸和未磷酸化的相同蛋白的形式OneMinute ®。 请单击该图以获取详细信息。
 

相关产品和链接

Western印迹剥离缓冲液选择指南
                   -比较OneMinute / OneMinuteAdvance和Pirece的还原/ RestorePlus
OneMinute ®加 Western印迹剥离缓冲液 
                   –Longer保质期，大/散装尺寸可用，使印迹准备重新探测，用1分钟OneMinute ®高级 西方印迹剥离缓冲液 

                   –2nd代制剂特别适用于剥离的高亲和力抗体OneMinute ® WB剥离增强缓冲 –Dramatically增加汽提效率的常见问题 

                   
 
 
 订购信息  
货号 描述 价钱
GM6001  OneMinute ® Western印迹剥离缓冲液（25个测试）   （125毫升，足够剥离8厘米x10cm的25个印迹）  $ 115
GM6002  OneMinute ®  Western印迹剥离缓冲液，（4个测试）   （20毫升，足够剥离4个印迹8厘米x10cm的）  $ 37

 

 

 

 

virusys HHV-6B Western Strips简介

发表于由

virusys H6G309说明书 

virusys  HHV-6B Western Strips (ICE) – 10/tube + MW Marker

 

HHV-6B西部带（ICE）-10 /管+ MW标记

 

这些试条旨在用于筛选抗体对病毒蛋白的反应性。该测定法仅用于研究目的，并不打算用于人类或动物的诊断。

提供的材料

十（10）条含有电泳的灭活抗原的硝酸纤维素条

来自同一电泳的一（1）个分子量指示条与测试条一起运行

储存和稳定性

条带应存储在-20°C或更低的温度下，以获得稳定性。在标签上打印的有效期之前使用。

所需材料但未提供

识别病毒抗原的一抗。

洗涤缓冲液（通常为磷酸盐缓冲盐水– 0.05％Tween-20 pH 7.4 – PBST20）

二抗识别一抗的种类/同种型

抗体稀释剂（通常为PBST20加5％的二抗正常血清。例如，在5％的PBST20正常山羊血清中稀释的山羊抗小鼠IgG-AP）

二抗酶底物

转换后的基材检测系统

适用于3毫米x 62毫米西方条的容器（15毫升离心管或多通道托盘）

 

 

H6G309   HHV-6B西部带（ICE）-10 /管+ MW标记       $ 225.00

WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

发表于由

WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Fast Blocking Western （快速封闭液）是新一代的即用型、高效快速Western封闭液。封闭时间仅需 10 分钟，效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液，简化了 Western 印迹方案。使用快速封闭液封闭可阻止抗体检测期间的非特异性结合，但允许进行特异性检测。与传统封闭液相比，有更高的信号，更低的背景值，信噪比更高。

该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分，避免与抗体发生交叉反应。该缓冲液可与磷酸化的抗体以及NC膜和 PVDF 膜兼容。但不适用于生物素标记的抗体。

 

产品特点

1）即用型封闭液，无需配制，使用便捷；

2）封闭时间短，仅需10 min，快速高效；

3）背景低、信噪比高，优于常规奶粉、BSA、酪蛋白等封闭效果；

4）不含哺乳动物来源的蛋白，确保低背景和高信噪比，可兼容磷酸化的抗体。

 

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品4ºC保存，有效期至少1年。

 

操作方法

1) 完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

2) 根据膜的大小，加入适量体积的 Fast Blocking Western 封闭液，确保充分浸没覆盖膜，对于 7.5x

8 cm 的膜推荐使用量 5-10 mL。

3) 置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育10分钟。

4) 取出封闭完成的膜，用洗涤液冲洗膜2-3次，即可用于一抗孵育等后续 Western blot 实验。

 

注意事项

1）通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为10分钟。对于背景低的抗体，可以缩短到5分钟，而对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。

2）由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验或抗体，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

3）信号弱或者无信号：有可能是上样量不足；转膜效率低；抗体效价低，特异性差等原因造成，需要根据实验情况优化实验条件。

4）背景高：有可能是抗体使用量过多；膜洗涤时间不足；抗体和封闭液发生交叉反应；试剂或仪器设备被污染等原因造成，需要根据实验具体情况进行调整。

5）为了您的安全和健康，实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

6）本产品仅作科研用途！

HB210917

WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

暂无内容

WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

暂无内容

Fast Blocking Western （快速封闭液）是新一代的即用型、高效快速Western封闭液。封闭时间仅需 10 分钟，效果优于脱脂奶粉、BSA、酪蛋白等传统封闭液，简化了 Western 印迹方案。使用快速封闭液封闭可阻止抗体检测期间的非特异性结合，但允许进行特异性检测。与传统封闭液相比，有更高的信号，更低的背景值，信噪比更高。

该试剂不含有哺乳动物来源的蛋白成分，避免与抗体发生交叉反应。该缓冲液可与磷酸化的抗体以及NC膜和 PVDF 膜兼容。但不适用于生物素标记的抗体。

 

产品特点

1）即用型封闭液，无需配制，使用便捷；

2）封闭时间短，仅需10 min，快速高效；

3）背景低、信噪比高，优于常规奶粉、BSA、酪蛋白等封闭效果；

4）不含哺乳动物来源的蛋白，确保低背景和高信噪比，可兼容磷酸化的抗体。

 

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品4ºC保存，有效期至少1年。

 

操作方法

1) 完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

2) 根据膜的大小，加入适量体积的 Fast Blocking Western 封闭液，确保充分浸没覆盖膜，对于 7.5x

8 cm 的膜推荐使用量 5-10 mL。

3) 置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育10分钟。

4) 取出封闭完成的膜，用洗涤液冲洗膜2-3次，即可用于一抗孵育等后续 Western blot 实验。

 

注意事项

1）通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封闭时间为10分钟。对于背景低的抗体，可以缩短到5分钟，而对于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。

2）由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验或抗体，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

3）信号弱或者无信号：有可能是上样量不足；转膜效率低；抗体效价低，特异性差等原因造成，需要根据实验情况优化实验条件。

4）背景高：有可能是抗体使用量过多；膜洗涤时间不足；抗体和封闭液发生交叉反应；试剂或仪器设备被污染等原因造成，需要根据实验具体情况进行调整。

5）为了您的安全和健康，实验时请穿实验服并戴一次性手套操作。

6）本产品仅作科研用途！

HB210917

WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

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WB快速封闭液 Western封闭液|Fast Blocking Western

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Santa Cruz Western Blotting投诉表

发表于由

Santa Cruz，Santa Cruz代理，Santa Cruz北京代理，Santa Cruz上海，Santa Cruz国内代理

热烈祝贺上海金畔生物获得Santa Cruz中国区代理 2013年9月开始Santa Cruz，所有产品售后均有上海Santa Cruz负责，100%负责，并在上海备有20000多种现货抗体，*，欢迎广大经销商咨询http://www.chem17.com/st178406/news_328698.html

 

 

荧光western blot注意事项

发表于由

随着荧光检测的普及，许多研究人员正考虑将western blot的检测方法从化学发光转到多重荧光。这一趋势背后有多个推动力。zui重要的是，荧光检测能够实现多重western blot分析，每次能够同时检测几个目标蛋白，而不再需要剥离和重新杂交。荧光的其他好处在于动态范围更宽、信号稳定性更好。

荧光blotting的小贴士

 

• 抗体浓度应当优化，在几种不同稀释度的抗体中孵育膜。选择信噪比zui高的稀释度。

• 从化学发光转到荧光检测时，一抗浓度应当增加；通常来说是增加2-5倍。二抗浓度可能也需要优化；1:5,000稀释是个不错的起点。在使用特定抗体时，可以参照生产商的建议。

• 为了让信噪比zui高，应使用自发荧光低的膜，如 Immun-Blot® low fluorescence （LF） PVDF membrane。

• 许多封闭液都成功用于荧光检测。我们建议使用0.5-5% 酪蛋白、zui多5%的脱脂奶粉，或zui多3% BSA，溶于TTBS中。

• 缓冲液中的颗粒可能停留在膜上，并造成荧光假象。只使用高质量的试剂，并对所有缓冲液过滤灭菌。

• 使用钝的镊子从边缘操作。避免划破膜或弄皱，这会在荧光检测时造成假象。

• 使用铅笔来标记膜，因为许多墨水都会发出荧光。

• 溴酚蓝会发出荧光。确保染料与样品已分开，切掉凝胶上包含染料的部分，或省掉样品缓冲液中的溴酚蓝。

• 无需在暗处开展免疫检测；正常的室内灯光不会使荧光标记的抗体发生光漂白。不过，荧光标记抗体的储液应保存在暗处。

• 在处理膜时，使用无粉末的手套，以避免膜上出现假象或指纹。

 

多重分析的小贴士

 

• 使用来自不同宿主的一抗（如小鼠和兔）。两个亲缘关系相近物种的抗体（如大鼠和小鼠）通常会造成交叉反应，即使抗体已经过交叉吸附。

• 使用经过交叉吸附的二抗，以避免交叉反应。

• 使用光谱上不同的荧光基团偶联物，避免交叉通道荧光。

• 在同时检测多个目标之前，单独优化每个目标的检测。由于一些一抗并非很特异，在膜上会产生多条带，故多重实验之前的单目标检测将有助于确定每个抗体的条带模式。

• 大部分膜在波长较短的激发光下会显示出较高的背景。记住，在蓝色通道检测zui强的目标，在绿色通道检测中等目标，而保留红色通道来检测zui弱的目标。