Hieff Unicon®2×实时多重荧光定量 PCR|TaqMan multiplex qPCR master mix
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产品描述
本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|||
|
11208ES03 (1 mL) |
11208ES06 (5 × 1mL) |
11208ES08 (5 mL) |
11208ES60 (20×5 mL) |
||
|
11208-A |
2×Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
1 mL |
5 × 1 mL |
5 mL |
20 × 5 mL |
|
11208-B |
50×Low Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
|
11208-C |
50×High Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C储存，有效期18个月。
反应体系
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
10 |
1× |
|
Primer mix |
x |
0.1-1 μM |
|
TaqMan Probe mix |
y |
50–300 nM |
|
50×Low or High Rox |
0.4 |
1× |
|
模板DNA/cDNA |
1-100 ng |
– |
|
ddH2O |
up to 20 |
– |
【注】
a. 上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度
b. 一般情况下，每条引物浓度为 0.2 μM 即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在 0.1-1 μM 的范围内进行调节；
c. 反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的 1/10。
适用机型
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
参考扩增程序
|
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
95°C |
5 min |
1 |
|
变性 |
95°C |
5 sec |
40 |
|
退火/延伸 |
60°C |
30 sec |
【注】
a. 某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重 qPCR 反应的性能；
b. 反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性；
注意事项
1. 请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
2. 为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3. 使用过程中避免产品的反复冻融。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
HB220808
产品描述
本产品是2×Mix预混合试剂，能够实现在单个反应孔中进行多重荧光定量PCR。本产品含有基因改造的热启动Taq酶，极大地提高了扩增灵敏度和特异性，本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化，能够提高反应的扩增效率，促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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11208ES03 (1 mL) |
11208ES06 (5 × 1mL) |
11208ES08 (5 mL) |
11208ES60 (20×5 mL) |
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11208-A |
2×Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
1 mL |
5 × 1 mL |
5 mL |
20 × 5 mL |
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11208-B |
50×Low Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
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11208-C |
50×High Rox |
40 μL |
200 μL |
200 μL |
20 × 200 μL |
运输和保存方法
冰袋运输。-20°C储存，有效期18个月。
反应体系
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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Hieff Unicon® TaqMan Multiplex qPCR Master Mix |
10 |
1× |
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Primer mix |
x |
0.1-1 μM |
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TaqMan Probe mix |
y |
50–300 nM |
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50×Low or High Rox |
0.4 |
1× |
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模板DNA/cDNA |
1-100 ng |
– |
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ddH2O |
up to 20 |
– |
【注】
a. 上表中模板量和引物浓度以及探针浓度均为推荐量，可根据具体实验情况进行调整，选择最适投入量和浓度
b. 一般情况下，每条引物浓度为 0.2 μM 即可得到较好的扩增效果，引物浓度可在 0.1-1 μM 的范围内进行调节；
c. 反应体系可根据实验需求进行等比例调节，模板体积不超过总体积的 1/10。
适用机型
Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.
参考扩增程序
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循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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预变性 |
95°C |
5 min |
1 |
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变性 |
95°C |
5 sec |
40 |
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退火/延伸 |
60°C |
30 sec |
【注】
a. 某些情况下，可通过调节退火延伸时间提高多重 qPCR 反应的性能；
b. 反应结束后可通过琼脂糖凝胶电泳确认产物的特异性；
注意事项
1. 请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀，短暂离心收集至管底后置于冰上备用。
2. 为避免样品间交叉污染和气溶胶污染，推荐在超净台中进行反应体系的配制。
3. 使用过程中避免产品的反复冻融。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
HB220808
Q：11208 跟 11205 有什么区别？
A：酶不一样，11208 是可以做多重PCR，11205 只能做单重PCR，做qPCR 是没有问题的。
Q：11208 的qPCR 反应体系可以用 5 μL/10 μL 吗？
A：可以，但一般推荐 20ul。大体系减少误差。5μl 体系太小，加样误差会很大，不推荐。
Q：11208 可扩增多长的产物啊？
A：建议在 300bp 以下，过长的产物会导致酶效降低。若一定要用，建议用三步法。
[1] Han S, Cao D, Sha J, Zhu X, Chen D. LncRNA ZFPM2-AS1 promotes lung adenocarcinoma progression by interacting with UPF1 to destabilize ZFPM2. Mol Oncol. 2020;14(5):1074-1088. doi:10.1002/1878-0261.12631(IF:6.574)
[2] Zhang Y, Fang Z, Guo X, et al. lncRNA B4GALT1-AS1 promotes colon cancer cell stemness and migration by recruiting YAP to the nucleus and enhancing YAP transcriptional activity. J Cell Physiol. 2019;234(10):18524-18534. doi:10.1002/jcp.28489(IF:4.522)
[3] Li H, Liu F, Qin W. Circ_0072083 interference enhances growth-inhibiting effects of cisplatin in non-small-cell lung cancer cells via miR-545-3p/CBLL1 axis. Cancer Cell Int. 2020;20:78. Published 2020 Mar 12. doi:10.1186/s12935-020-1162-x(IF:4.175)
[4] Zhao W, Wu M, Cui L, Du W. Limonin attenuates the stemness of cervical carcinoma cells by promoting YAP nuclear-cytoplasmic translocation. Food Chem Toxicol. 2019;125:621-628. doi:10.1016/j.fct.2019.02.011(IF:3.775)
[5] Cao X, Zhang C, Zhang X, Chen Y, Zhang H. MiR-145 negatively regulates TGFBR2 signaling responsible for sepsis-induced acute lung injury. Biomed Pharmacother. 2019;111:852-858. doi:10.1016/j.biopha.2018.12.138(IF:3.743)
[6] Su Z, Wang C, Chang D, Zhu X, Sai C, Pei J. Limonin attenuates the stemness of breast cancer cells via suppressing MIR216A methylation. Biomed Pharmacother. 2019;112:108699. doi:10.1016/j.biopha.2019.108699(IF:3.743)
[7] Zhang C, Li J, Qiu X, Chen Y, Zhang X. SUMO protease SENP1 acts as a ceRNA for TGFBR2 and thus activates TGFBR2/Smad signaling responsible for LPS-induced sepsis. Biomed Pharmacother. 2019;112:108620. doi:10.1016/j.biopha.2019.108620(IF:3.743)
[8] Ma F, Li Z, Cao J, Kong X, Gong G. A TGFBR2/SMAD2/DNMT1/miR-145 negative regulatory loop is responsible for LPS-induced sepsis. Biomed Pharmacother. 2019;112:108626. doi:10.1016/j.biopha.2019.108626(IF:3.743)
[9] Guo J, Zhang L, Lian L, Hao M, Chen S, Hong Y. CircATP2B4 promotes hypoxia-induced proliferation and migration of pulmonary arterial smooth muscle cells via the miR-223/ATR axis. Life Sci. 2020;262:118420. doi:10.1016/j.lfs.2020.118420(IF:3.647)
[10] Song H, Xu Y, Shi L, et al. LncRNA THOR increases the stemness of gastric cancer cells via enhancing SOX9 mRNA stability. Biomed Pharmacother. 2018;108:338-346. doi:10.1016/j.biopha.2018.09.057(IF:3.457)
[11] Lou W, Yan J, Wang W. Downregulation of miR-497-5p Improves Sepsis-Induced Acute Lung Injury by Targeting IL2RB. Biomed Res Int. 2021;2021:6624702. Published 2021 Apr 12. doi:10.1155/2021/6624702(IF:3.411)
[12] Song H, Shi L, Xu Y, et al. BRD4 promotes the stemness of gastric cancer cells via attenuating miR-216a-3p-mediated inhibition of Wnt/β-catenin signaling. Eur J Pharmacol. 2019;852:189-197. doi:10.1016/j.ejphar.2019.03.018(IF:3.170)
