热敏UDG(无甘油) 尿嘧啶-DNA糖基化酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(Glycerol-Free)

热敏UDG(无甘油) 尿嘧啶-DNA糖基化酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(Glycerol-Free)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

热敏UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10707ES60

(100 U)

10707ES76

(500 U)

10707ES90

(5 KU)

10707ES92

(10 KU)

10707

Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)

100 μL

500 μL

5 mL

10 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位 (U)

 

失活方式

94℃2-5 min

 

运输储存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期1年。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。

 

应用实例

1. 按下列组份配制PCR反应液:

试剂

体积

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5 μL

25 mmol/L MgCl2

3 μL

dUTP

0.6 mmol/L

dCTP / dGTP/ dATP

0.2 mmol/L each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μmol/L)

2 μL

引物2 (10 μmol/L)

2 μL

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5 μL

Heat-Labile UDG (1 U/μL)

1 μL

ddH2O

To 50 μL

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mmol/L之间调整。可选择性掺入0.2 mmol/L dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

 

相关产品

产品定位

产品名称

产品货号

dUTP

dUTP Solution (100 mM) 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM

10128ES

鼠源RNase抑制剂

Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

10603ES

Murine RNase Inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

10703ES

逆转录酶

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase, 600 U/μL

13158ES

Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL)

11300ES

热启动Taq

Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase,50 U/μL

10718ES

Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA Polymerase, 5 U/μL

10726ES

Hieff Unicon® Hotstart J-Taq DNA Polymerase, 6 U/μL, Glycerol-free

13705ES

 

HB220916

热敏UDG(无甘油) 尿嘧啶-DNA糖基化酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(Glycerol-Free)

暂无内容

热敏UDG(无甘油) 尿嘧啶-DNA糖基化酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(Glycerol-Free)

暂无内容

热敏UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10707ES60

(100 U)

10707ES76

(500 U)

10707ES90

(5 KU)

10707ES92

(10 KU)

10707

Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)

100 μL

500 μL

5 mL

10 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位 (U)

 

失活方式

94℃2-5 min

 

运输储存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期1年。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。

 

应用实例

1. 按下列组份配制PCR反应液:

试剂

体积

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5 μL

25 mmol/L MgCl2

3 μL

dUTP

0.6 mmol/L

dCTP / dGTP/ dATP

0.2 mmol/L each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μmol/L)

2 μL

引物2 (10 μmol/L)

2 μL

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5 μL

Heat-Labile UDG (1 U/μL)

1 μL

ddH2O

To 50 μL

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mmol/L之间调整。可选择性掺入0.2 mmol/L dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

 

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产品定位

产品名称

产品货号

dUTP

dUTP Solution (100 mM) 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM

10128ES

鼠源RNase抑制剂

Murine RNase Inhibitor (40 U/µL)

10603ES

Murine RNase Inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

10703ES

逆转录酶

Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase, 600 U/μL

13158ES

Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL)

11300ES

热启动Taq

Hieff Unicon® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase,50 U/μL

10718ES

Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA Polymerase, 5 U/μL

10726ES

Hieff Unicon® Hotstart J-Taq DNA Polymerase, 6 U/μL, Glycerol-free

13705ES

 

HB220916

热敏UDG(无甘油) 尿嘧啶-DNA糖基化酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(Glycerol-Free)

暂无内容

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暂无内容

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,本产品含有 UDG 酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA,并利用 UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer,Enzymes Mix 等,缓冲液中已含有 Mg2+ dNTP 等,并添加了有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。

 

产品信息

货号

11214ES60 / 11214ES80 / 11214ES92

规格

100 T / 1000 T / 10000 T

 

组分信息

组分编号

组分名称

11214ES60

(100 T)

11214ES80

(1000 T)

11214ES92

(10000 T)

11214-A

2×Hifair® VN MP Buffer

1.25 mL

12.5 mL

125 mL

11214-B

Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus)

150 μL

750 μL×2 

15 mL

11214C

RNase Free H2O

1.2 mL

12 mL

120 mL

【注】1. 2×Hifair® VN MP Buffer 为 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer 的简写。本组分含有 dNTP 和 dUTP。

  1. Hifair® VN Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® Hot Start Taq DNA Polymerase 和 UDG 酶。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期18个月。

 

使用说明

  1. 反应体系(以25 μL为例

组分

体积(μL

终浓度

2×Hifair® VN MP Buffer

12.5

Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus)

1.5

Primer/Probe Mix (10 μM)

1-4

0.4 μM

模板RNA

1-5

RNase Free H2O

to 25

【注】使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

1. 引物浓度Primer Mix 中包含多对引物,也可以根据情况在 0.1-1.0 μM 间进行调整。

2. 探针浓度Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

3. 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。

4. 反应体系:推荐使用 25-50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

5. 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头避免交叉污染和气溶胶污染。

  1. 参考扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

逆转录

50℃a

10 min

1

预变性

95℃

5 min

1

扩增反应

95℃

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)15 sec

45

60b

30 secc

a. 逆转录42℃或者50℃均可时间 10-15 min。

b. 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

c. 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

  1. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR

 

注意事项

1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230731

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

暂无内容

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

暂无内容

Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,本产品含有 UDG 酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA,并利用 UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer,Enzymes Mix 等,缓冲液中已含有 Mg2+ dNTP 等,并添加了有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。

 

产品信息

货号

11214ES60 / 11214ES80 / 11214ES92

规格

100 T / 1000 T / 10000 T

 

组分信息

组分编号

组分名称

11214ES60

(100 T)

11214ES80

(1000 T)

11214ES92

(10000 T)

11214-A

2×Hifair® VN MP Buffer

1.25 mL

12.5 mL

125 mL

11214-B

Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus)

150 μL

750 μL×2 

15 mL

11214C

RNase Free H2O

1.2 mL

12 mL

120 mL

【注】1. 2×Hifair® VN MP Buffer 为 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer 的简写。本组分含有 dNTP 和 dUTP。

  1. Hifair® VN Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® Hot Start Taq DNA Polymerase 和 UDG 酶。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期18个月。

 

使用说明

  1. 反应体系(以25 μL为例

组分

体积(μL

终浓度

2×Hifair® VN MP Buffer

12.5

Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus)

1.5

Primer/Probe Mix (10 μM)

1-4

0.4 μM

模板RNA

1-5

RNase Free H2O

to 25

【注】使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

1. 引物浓度Primer Mix 中包含多对引物,也可以根据情况在 0.1-1.0 μM 间进行调整。

2. 探针浓度Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。

3. 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。

4. 反应体系:推荐使用 25-50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

5. 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头避免交叉污染和气溶胶污染。

  1. 参考扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

逆转录

50℃a

10 min

1

预变性

95℃

5 min

1

扩增反应

95℃

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)15 sec

45

60b

30 secc

a. 逆转录42℃或者50℃均可时间 10-15 min。

b. 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

c. 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

  1. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR

 

注意事项

1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230731

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

暂无内容

RT-qPCR探针试剂盒(一步法多重荧光定量PCR)(含UDG酶)|Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG plus)

暂无内容

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)2×Mix预混合试剂,能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时,本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

 

产品信息

货号

11212ES03/ 11212ES08 / 11212ES10/ 11212ES12 / 11212ES13/ 11212ES60/ 11212ES62

规格

1 mL /5×1 mL /10 mL /12.5 mL /1×12.5 mL /20×5 mL /125 mL

 

组分信息

组分编号

组分名称

11212ES03

(1 mL)

11212ES08

(5×1 mL)

11212ES10

(10 mL)

11212ES12

(12.5 mL)

11212ES13

(1×12.5 mL)

11212ES60

(20×5 mL)

11212ES62

(125 mL)

11212

2×TaqMan qPCR Mix

1 mL

5×1 mL

10 mL

12.5 mL

1×12.5 mL

20×5 mL

125 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期18个月

 

使用说明

  1. 反应体系******

组分

体积(μL)

终浓度

2×TaqMan qPCR Mix

12.5

Primer Mix (10 μM)

x

0.1-0.5 μM*

Probe Mix (10 μM)

x

50-250 nM**

Rox reference dye***

0.5

模板****

1-10

ddH2O

up to 25*****

*引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。

**探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。

***Rox reference dye:使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差;本产品不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。

****模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液,则模板体积不超过总体积的1/10。

*****反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

******体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

  1. 参考扩增程序

步骤

温度

时间

循环数

污染消化

25

10 min

1

预变性

95

5 min

1

变性

95

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)15 sec

45

退火/延伸*

60℃

30 sec**

*退火/延伸:温度和时间可根据实验要求适当调整。

**荧光信号采集:请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置,几种常见仪器的时间设定如下:

20 sec:Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast

31 sec:Applied Biosystems 7300

32 sec:Applied Biosystems 7500

  1. 适用机型

Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.  

 

注意事项

  1. 关于操作

1)请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀,短暂离心收集至管底后,置于冰上备用。

2)为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台中进行反应体系的配制。

3)使用过程中避免产品的反复冻融。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 实验方法

1)引物设计

a. 引物必须具有特异性。

b. 引物的Tm值必须在58-60°C,而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C

c. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。

2)探针设计

a. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C68-70°C)。

b. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。

 

Ver.CN20240226

 

 

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

暂无内容

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

暂无内容

产品简介

 

Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)2×Mix预混合试剂,能够实现在单个反应孔中进行多达四重的荧光定量PCR反应。本产品含有基因改造的抗体法热启动Taq酶,极大地提高了扩增灵敏度和特异性。同时,本产品对多重反应缓冲体系进行了深度优化,能够提高反应的扩增效率,促进低浓度模板的有效扩增。本产品可用于基因分型和基因多重定量分析。本产品含有UDG酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

 

产品信息

货号

11212ES03/ 11212ES08 / 11212ES10/ 11212ES12 / 11212ES13/ 11212ES60/ 11212ES62

规格

1 mL /5×1 mL /10 mL /12.5 mL /1×12.5 mL /20×5 mL /125 mL

 

组分信息

组分编号

组分名称

11212ES03

(1 mL)

11212ES08

(5×1 mL)

11212ES10

(10 mL)

11212ES12

(12.5 mL)

11212ES13

(1×12.5 mL)

11212ES60

(20×5 mL)

11212ES62

(125 mL)

11212

2×TaqMan qPCR Mix

1 mL

5×1 mL

10 mL

12.5 mL

1×12.5 mL

20×5 mL

125 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期18个月

 

使用说明

  1. 反应体系******

组分

体积(μL)

终浓度

2×TaqMan qPCR Mix

12.5

Primer Mix (10 μM)

x

0.1-0.5 μM*

Probe Mix (10 μM)

x

50-250 nM**

Rox reference dye***

0.5

模板****

1-10

ddH2O

up to 25*****

*引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。

**探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-250 nM间调整。

***Rox reference dye:使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差;本产品不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。

****模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用。若模板为cDNA原液,则模板体积不超过总体积的1/10。

*****反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。

******体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

  1. 参考扩增程序

步骤

温度

时间

循环数

污染消化

25

10 min

1

预变性

95

5 min

1

变性

95

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)15 sec

45

退火/延伸*

60℃

30 sec**

*退火/延伸:温度和时间可根据实验要求适当调整。

**荧光信号采集:请按照仪器使用说明书要求进行实验程序设置,几种常见仪器的时间设定如下:

20 sec:Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast

31 sec:Applied Biosystems 7300

32 sec:Applied Biosystems 7500

  1. 适用机型

Applied Biosystems: 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™, 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;

Stratagene: MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR.  

 

注意事项

  1. 关于操作

1)请于使用前确保产品完全解冻并彻底混匀,短暂离心收集至管底后,置于冰上备用。

2)为避免样品间交叉污染和气溶胶污染,推荐在超净台中进行反应体系的配制。

3)使用过程中避免产品的反复冻融。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 实验方法

1)引物设计

a. 引物必须具有特异性。

b. 引物的Tm值必须在58-60°C,而且各组引物的Tm差异应控制在1-2°C

c. 引物的长度一般控制在15-30 bp之间。

2)探针设计

a. TaqMan探针的Tm值要比对应的引物高约10°C68-70°C)。

b. TaqMan探针和引物间不能形成二聚体。

 

Ver.CN20240226

 

 

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

暂无内容

TaqMan多重qPCR预混液(含UDG酶)|Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(UDG plus)

暂无内容

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)中包含Bst Ⅱ DNA Polymerase、耐热 Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、MRI和UDGase,适用于以RNA为模板的LAMP反应。本产品含有UDG酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

13762ES60

(100 T)

13762ES80

(1000 T)

13762-A

Bst Buffer

600   µL

6 mL

13762-B

Bst Enzyme Mix(UDG plus)

100 µL

1 mL

 

运输合保存方法

1. 运输方式:干冰运输。

2. 保存方式:

Part 1:13762-A【Bst Buffer】 -20℃,避光保存,有效期 6个月。          

Part 2:13762-B【Bst Enzyme Mix(UDG plus)】 -20℃保存,有效期 6个月。

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

反应体系

组分

体积(μL)                    

终浓度

RNase   free ddH2O

to   25

Bst   Buffer

6

10×   Primers

2.5

Bst   Enzyme Mix(UDG plus)

1

模板

10   ng-1 μg

【注】:1)Bst Buffer中包含dN(U)TP和SYTO-9等,且1×Bst Buffer中已含8 mmol/L Mg2+

2)Bst Enzyme Mix(UDG plus)中包含UDGase、Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、Bst Ⅱ Polymerase、MRI;

3)10× Primers推荐引物组:16 μM FIP/BIP,2 μM F3/B3,4 μM Loop F/Loop B;可测试其它最佳引物组的比例。

 

反应条件

加样,混匀离心后,在荧光定量PCR仪中反应,37℃孵育2-5 min,恒温60-65°C孵育30~60 min,85℃,5 min失活,反应类型选择SYBR Green Reagents。

HB220708

 

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

暂无内容

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

暂无内容

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)中包含Bst Ⅱ DNA Polymerase、耐热 Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、MRI和UDGase,适用于以RNA为模板的LAMP反应。本产品含有UDG酶,可有效防止气溶胶污染的风险。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

13762ES60

(100 T)

13762ES80

(1000 T)

13762-A

Bst Buffer

600   µL

6 mL

13762-B

Bst Enzyme Mix(UDG plus)

100 µL

1 mL

 

运输合保存方法

1. 运输方式:干冰运输。

2. 保存方式:

Part 1:13762-A【Bst Buffer】 -20℃,避光保存,有效期 6个月。          

Part 2:13762-B【Bst Enzyme Mix(UDG plus)】 -20℃保存,有效期 6个月。

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

反应体系

组分

体积(μL)                    

终浓度

RNase   free ddH2O

to   25

Bst   Buffer

6

10×   Primers

2.5

Bst   Enzyme Mix(UDG plus)

1

模板

10   ng-1 μg

【注】:1)Bst Buffer中包含dN(U)TP和SYTO-9等,且1×Bst Buffer中已含8 mmol/L Mg2+

2)Bst Enzyme Mix(UDG plus)中包含UDGase、Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase、Bst Ⅱ Polymerase、MRI;

3)10× Primers推荐引物组:16 μM FIP/BIP,2 μM F3/B3,4 μM Loop F/Loop B;可测试其它最佳引物组的比例。

 

反应条件

加样,混匀离心后,在荧光定量PCR仪中反应,37℃孵育2-5 min,恒温60-65°C孵育30~60 min,85℃,5 min失活,反应类型选择SYBR Green Reagents。

HB220708

 

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

暂无内容

RT-LAMP染料检测试剂盒(含UDG)|RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

暂无内容

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

防污染UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。本酶可作用于含有dU的单链或双链DNA,对RNA无活性。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

14455ES60

(100 U)

14455ES76

(500 U)

14455ES96

(10000 U)

14455

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

100 μL

500 μL

10 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。

 

失活方式

95℃5~10 min

 

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. UDG酶在多数PCRRT-PCR反应缓冲液中均有活性,但对于自行使用的PCRRT-PCR体系,首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液:

组分

体积(μL

终浓度

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dUTP (10 mM)

3

0.6 mM

dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

1

0.2 mM each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μM)

2

0.4 μM

引物2 (10 μM)

2

0.4 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

0.05 U/μL

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

1

1 U/50 μL

ddH2O

Up to 50

 

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

95℃

5~10 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

HB220908

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

暂无内容

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

暂无内容

防污染UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。本酶可作用于含有dU的单链或双链DNA,对RNA无活性。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

14455ES60

(100 U)

14455ES76

(500 U)

14455ES96

(10000 U)

14455

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

100 μL

500 μL

10 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。

 

失活方式

95℃5~10 min

 

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. UDG酶在多数PCRRT-PCR反应缓冲液中均有活性,但对于自行使用的PCRRT-PCR体系,首次使用时建议先测试一下是否和所使用的体系兼容;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液:

组分

体积(μL

终浓度

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dUTP (10 mM)

3

0.6 mM

dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

1

0.2 mM each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μM)

2

0.4 μM

引物2 (10 μM)

2

0.4 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

0.05 U/μL

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), 1 U/μL

1

1 U/50 μL

ddH2O

Up to 50

 

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

95℃

5~10 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

HB220908

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

暂无内容

UDG酶(尿嘧啶-DNA糖基化酶)|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),1U/μL

暂无内容

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

10303ES60

(100 U)

10303ES76

(500 U)

10303ES96

(10,000 U)

10303ES97

(100 mL)

10303ES98

(500 mL)

10303

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL

100 μL

500 μL

10 mL

100 mL

500 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。

 

失活方式

50℃10 min

 

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液:

组分

体积(μL

终浓度

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dUTP (10 mM)

3

0.6 mM

dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

1

0.2 mM each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μM)

2

0.4 μM

引物2 (10 μM)

2

0.4 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

0.05 U/μL

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL

1

1 U/50 μL

ddH2O

Up to 50

 

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

 

HB220930

 

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

暂无内容

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

暂无内容

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。

 

产品组分

编号

组分名称

产品编号/规格

10303ES60

(100 U)

10303ES76

(500 U)

10303ES96

(10,000 U)

10303ES97

(100 mL)

10303ES98

(500 mL)

10303

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL

100 μL

500 μL

10 mL

100 mL

500 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。

 

失活方式

50℃10 min

 

运输储存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

应用实例

1. 按下列体系配制PCR反应液:

组分

体积(μL

终浓度

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dUTP (10 mM)

3

0.6 mM

dCTP / dGTP/ dATP/ dTTP (10 mM each)

1

0.2 mM each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μM)

2

0.4 μM

引物2 (10 μM)

2

0.4 μM

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

0.05 U/μL

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), heat-labile, 1 U/μL

1

1 U/50 μL

ddH2O

Up to 50

 

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mM 之间调整。可选择性掺入0.2 mM dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

 

HB220930

 

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

暂无内容

热敏UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶) 热敏UDG酶|Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG),heat-labile​

暂无内容