Sumoylation控制试剂盒


 

laebio是一种很有前途的生物技术公司,致力于制造和高品质的开发 研究抗体和纯化的蛋白质。我们创新的 线性阵列抗原决定簇(LAE)技术 与众不同我们来自所有其他抗体制造商。这项新技术结合了受体介导的摄取和有效的抗原呈递的使用,可以诱导免疫反应以产生针对任何抗原(包括自身抗原)的抗体。先进的技术与多年的抗原制备和蛋白质纯化经验相结合,确保我们以可承受的价格提供优质的抗体和蛋白质。

 

我们专注于新的亲和纯化蛋白和高度特异性的抗体,可在体外检测Sumoylation的活性 。我们可以为您提供包括SAEI / SAEII,UBC9,SUMO-1,SUMO-3在内的全套sumoylation蛋白,以立即开始您的sumoylation化验。   屏幕的抗肿瘤靶向拓扑异构酶的药物,我们提供人类DNA拓扑异构酶I,II 一,和II b,和他们的抗体。这些试剂包括TOPO I,II TOPO 一,TOPO II b,TOPO我抗体F14,TOPO我抗体T8N,TOPO 1测定试剂盒,TOPO  I药物筛选试剂盒,TOPO II a 抗体和TOPO II b 抗体。我们还提供蛋白激酶A,DARPP-32,Phospho-DARPP-32,磷酸酶抑制剂1,Phospho-Inhibitor-1,磷酸酶抑制剂2,Phasephatase抑制剂2 Ab的催化亚基,以供您研究多巴胺能脑。

 

 laebio K007说明书

Sumoylation Control Kits 

Catalog # K007 supplied with proteins

 Sumoylation控制试剂盒

蛋白质随附的Sumoylation Control Kits 产品目录号K007

 

描述:
该测定试剂盒包含用于常规检测磺酰化活性的试剂。包含Sumoylation标记(人类拓扑异构酶I蛋白),可以清楚地检测反应。已经证明该测定法可用于粗提物。强烈建议将活跃的人EI(Cat#P001; P006),活跃的人E II(Cat#P002; P011)和活跃的人SUMO I(Cat#P003; P012)与该套件一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人类EI)(货号P006)
  • UBC9(人类E II)(货号P011)
  • SUMO I(活动表格)。(货号P012)
  • 人DNA拓扑异构酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓扑异构酶I抗体。(Cat#AP006)(冻干的抗体应在使用前用100ul H 2 O 复溶。)
  • 10X磺酰化反应缓冲液。(Cat#B006)(10x缓冲液包含200 mM Hepes pH 7.5、50 mM MgCl 2和20 mM ATP。)

上述试剂可用于50次磺酰化反应。

 

测定条件:
SUMO化测定在20微升的终体积在反应缓冲液含有20毫摩尔的Hepes pH为7.5,5mM的氯化镁进行2,2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP,以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I糖基化控制方案:

  1. 为每个反应添加2ul 50 kd拓扑异构酶I片段(Cat#B007)作为底物。
  2. 在每个反应中,先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1、2ul 10x反应缓冲液(Cat#B006),2ul E1和2ul 20 mM ATP。后,添加H 2 O使其总量达到20 ul 。
  3. LAE磺酰化蛋白的反应浓度如下:
    • EI:7.5 ug / ml
    • E II:50 ug / ml
    • SUMO-1:50 ug / ml

          对照分析的推荐条件是在37 o C下30〜60分钟。
     

  4. 使用1000毫升稀释的提供的拓扑异构酶I抗体在10毫升(目录号AP006)中进行蛋白质印迹。应检测到四个主要的磺酰化带。

用Topo-I抗体(目录号AP006)对磺酰化的 50 Kd Topo-I蛋白(目录号B007)进行蛋白质印迹(12.5%凝胶)。泳道1:磺酰化的50Kd Topo-I片段;泳道2:未磺酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-I抗体( Cat#AP006)可检测至少四个主要的磺酰化的Topo-I片段 。

 

Sumoylation协议:

  1. 准备合适的纯化底物蛋白。
  2. 在每个反应中,先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1、2ul 10x反应缓冲液,2ul E1和2ul 20mM ATP。后,添加H 2 O以使终体积达到20 ul。
  3. LAE蛋白的反应浓度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

运输/存储:
该套件随干冰一起运输,应在-70 o C或更低的温度下存储。  

法律上的考虑:仅供研究使用。