Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®是针对MGI^®高通量文库构建专用配套试剂盒，共分为3个Set，每个Set中包含8到96种不同的Barcode接头，适用于MGI^®高通量测序平台多样品DNA文库构建。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度保证了文库构建的稳定性和可重复性。

Set 1：8 index ，41-48

Set 2：16 index ，57-72

Set 3：96 index

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输，-20℃保存，有效期18个月。

注意事项

1）切勿加热接头，应在室温让其缓慢溶解，实验室温度最好设置为20-25℃。接头避免反复冻融，可短暂存放于4℃。

2）使用Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®试剂盒构建的DNA文库结构如下：

   5’ – Bottom Adapter – Insert DNA Sequence – Barcode Adapter- 3’

3) 试剂盒中提供的每种DNA Adapter中都包含Bottom Adapter，且提供一种Barcode序列标签，用于高通量测序时区分样品。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）MGI接头最多有96种index，当使用96 index规格的产品进行建库测序时，index的选择需按照MGI推荐的组合进行操作，具体规格见使用方法。

6）本产品index序列请索要excel格式的文件，或在官网上下载。

7）接头浓度为10μM。

使用方法

DNA Adapter的序列如下：

Barcode Adapter：5’-phos-AGTCGGAGGCCAAGCGGTCTTAGGAAGACAAXXXXXXXXXXCAACTCCTTGGCTCACA-3’

Bottom Adapter：5’-TTGTCTTCCTAAGGAACGACATGGCTACGATCCGACTT-3’

¹XXXXXXXXXX表示接头的Barcode区域，其在每个接头中的序列见下表。测序前在Sample Sheet中只需输入这个Barcode序列（10 bp）即可。

图1. 96种MGI index成组规则

Index序列如下：

红色框中的8种index

蓝色框中的64种index

紫色框中的24种index

说明：

4 个 Adapter 成组：第 1 列（01-04，13-16），共计 2 组（图 1 红色框）；

8 个 Adapter 成组：第 2-9 列（41-48、57-64、65-72、73-80、81-88、89-96、97-104 和 121-128），共计 8 组（图 1  蓝色框）；

24 个 Adapter 成组：第 10-12 列，共计 1 组（图 1  紫色框）。

成组规则：

1）样本数1-4：选择红色框中index；也可以选择蓝色框中的index，尽量选择一列上的index，不要跨列选择。

2）样本数5–24：选择蓝色框中的index进行操作，尽量先选择同一列上的index，然后再选择第二列

3）样本数25–64：按照规格2进行操作；也可以选择紫色框中的所有index，然后加上蓝色框中的index。但不可以一部分index选择紫色框，一部分选择其他组别。

4）样本数：65–72：选择蓝色框中的所有index，然后再加上红色框中的index。

5）样本数：73–96：可以选择紫色框中全部index，再加红色框或蓝色框中的index.

【注】请按照以上说明，选择合适的接头进行文库构建，否则影响后期下机数据的拆分（不按照要求使用，会造成下机数据拆分均一性较差）

HB220530

Q: 接头中 index/Barcode 组合原则是什么？

A: 碱基平衡，荧光平衡（详情可查看翊圣生物公众号微信软文“一文全面解析NGS 接头的奥秘”）

Q: 双端接头，连接过程的注意事项，长接头和短接头有区别吗？

A: 长接头带完整的 index 序列，所以接头连接的时候直接完成文库构建，此时如果文库浓度达到测序要求，那么可以直接PCR-Free 建库；短接头建库，接头连接步骤双端同时连接相同的 PE Adapter。

Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®是针对MGI^®高通量文库构建专用配套试剂盒，共分为3个Set，每个Set中包含8到96种不同的Barcode接头，适用于MGI^®高通量测序平台多样品DNA文库构建。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度保证了文库构建的稳定性和可重复性。

Set 1：8 index ，41-48

Set 2：16 index ，57-72

Set 3：96 index

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输，-20℃保存，有效期18个月。

注意事项

1）切勿加热接头，应在室温让其缓慢溶解，实验室温度最好设置为20-25℃。接头避免反复冻融，可短暂存放于4℃。

2）使用Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®试剂盒构建的DNA文库结构如下：

   5’ – Bottom Adapter – Insert DNA Sequence – Barcode Adapter- 3’

3) 试剂盒中提供的每种DNA Adapter中都包含Bottom Adapter，且提供一种Barcode序列标签，用于高通量测序时区分样品。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）MGI接头最多有96种index，当使用96 index规格的产品进行建库测序时，index的选择需按照MGI推荐的组合进行操作，具体规格见使用方法。

6）本产品index序列请索要excel格式的文件，或在官网上下载。

7）接头浓度为10μM。

使用方法

DNA Adapter的序列如下：

Barcode Adapter：5’-phos-AGTCGGAGGCCAAGCGGTCTTAGGAAGACAAXXXXXXXXXXCAACTCCTTGGCTCACA-3’

Bottom Adapter：5’-TTGTCTTCCTAAGGAACGACATGGCTACGATCCGACTT-3’

¹XXXXXXXXXX表示接头的Barcode区域，其在每个接头中的序列见下表。测序前在Sample Sheet中只需输入这个Barcode序列（10 bp）即可。

图1. 96种MGI index成组规则

Index序列如下：

红色框中的8种index

蓝色框中的64种index

紫色框中的24种index

说明：

4 个 Adapter 成组：第 1 列（01-04，13-16），共计 2 组（图 1 红色框）；

8 个 Adapter 成组：第 2-9 列（41-48、57-64、65-72、73-80、81-88、89-96、97-104 和 121-128），共计 8 组（图 1  蓝色框）；

24 个 Adapter 成组：第 10-12 列，共计 1 组（图 1  紫色框）。

成组规则：

1）样本数1-4：选择红色框中index；也可以选择蓝色框中的index，尽量选择一列上的index，不要跨列选择。

2）样本数5–24：选择蓝色框中的index进行操作，尽量先选择同一列上的index，然后再选择第二列

3）样本数25–64：按照规格2进行操作；也可以选择紫色框中的所有index，然后加上蓝色框中的index。但不可以一部分index选择紫色框，一部分选择其他组别。

4）样本数：65–72：选择蓝色框中的所有index，然后再加上红色框中的index。

5）样本数：73–96：可以选择紫色框中全部index，再加红色框或蓝色框中的index.

【注】请按照以上说明，选择合适的接头进行文库构建，否则影响后期下机数据的拆分（不按照要求使用，会造成下机数据拆分均一性较差）

HB220530