横纹金蛛rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Wasp spider rRNA Removal Kit

发表于2024年10月11日由上海金畔生物科技有限公司

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Wasp spider) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除横纹金蛛来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于横纹金蛛来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12286ES04	12286ES24	12286ES96
BOX I	12286-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12286-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12286-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12286-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12286-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

4.8 RNA洗脱：将PCR 管从磁力架上取下，加入 11 μL Nuclease free H₂O（或使用适合下游实验的相应体积Nuclease free H₂O或洗脱缓冲液），使用移液器轻轻吹打至充分混匀，室温静置 5 min。

4.9 将 PCR管短暂离心并置于磁力架中静置，待溶液澄清后（约3 min），小心移取 10 μL上清（可根据步骤4.8选择的实际洗脱体积进行相应调整）至新的Nuclease free PCR 管中。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于横纹金蛛来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12286ES04	12286ES24	12286ES96
BOX I	12286-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12286-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12286-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12286-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12286-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

横纹金蛛rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Wasp spider rRNA Removal Kit

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海绵动物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Sponge rRNA Removal Kit

发表于2024年9月17日由上海金畔生物科技有限公司

海绵动物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Sponge rRNA Removal Kit

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FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Sponge) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除海绵动物来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于海绵动物来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12282ES04	12282ES24	12282ES96
BOX I	12282-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12282-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12282-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12282-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12282-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于海绵动物来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12282ES04	12282ES24	12282ES96
BOX I	12282-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12282-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12282-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12282-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12282-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

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海绵动物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Sponge rRNA Removal Kit

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蜱虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Ixodes scapular rRNA Removal Kit

发表于2024年9月10日由上海金畔生物科技有限公司

蜱虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Ixodes scapular rRNA Removal Kit

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COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Ixodes scapular) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除蜱虫来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于蜱虫来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12289ES04	12289ES24	12289ES96
BOX I	12289-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12289-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12289-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12289-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12289-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于蜱虫来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12289ES04	12289ES24	12289ES96
BOX I	12289-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12289-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12289-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12289-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12289-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

蜱虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Ixodes scapular rRNA Removal Kit

暂无内容

堡礁海绵rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Amphimedon queenslandica rRNA Removal Kit

发表于2024年9月9日由上海金畔生物科技有限公司

堡礁海绵rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Amphimedon queenslandica rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Amphimedon queenslandica) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除堡礁海绵来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于堡礁海绵来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12277ES04	12277ES24	12277ES96
BOX I	12277-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12277-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12277-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12277-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12277-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于堡礁海绵来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12277ES04	12277ES24	12277ES96
BOX I	12277-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12277-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12277-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12277-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12277-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

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堡礁海绵rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Amphimedon queenslandica rRNA Removal Kit

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原核生物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Prokaryote rRNA Removal Kit

发表于2024年8月2日由上海金畔生物科技有限公司

原核生物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Prokaryote rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Prokaryote) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除原核生物（细菌和古生菌通用）来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于原核生物（细菌和古生菌通用）来源的10 ng~1 μg 总RNA样品（若实验时去除单一物种rRNA，总RNA量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng）。

产品组分

组分编号和名称			12265ES04	12265ES24	12265ES96
BOX I	12265-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12265-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12265-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12265-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12265-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng，但当实验时去除单一物种rRNA，总RNA量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA*	12（10 ng~1 μg）
Total	20

*注：若为单一物种，Total RNA总量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng。
1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于原核生物（细菌和古生菌通用）来源的10 ng~1 μg 总RNA样品（若实验时去除单一物种rRNA，总RNA量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng）。

产品组分

组分编号和名称			12265ES04	12265ES24	12265ES96
BOX I	12265-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12265-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12265-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12265-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12265-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng，但当实验时去除单一物种rRNA，总RNA量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA*	12（10 ng~1 μg）
Total	20

*注：若为单一物种，Total RNA总量不能超过200 ng，推荐使用100-200 ng。
1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

原核生物rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Prokaryote rRNA Removal Kit

暂无内容

血内寄生虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Blood Parasite rRNA Removal Kit

发表于2024年7月31日由上海金畔生物科技有限公司

血内寄生虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Blood Parasite rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Blood Parasite) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除血内寄生虫来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于血内寄生虫来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12283ES04	12283ES24	12283ES96
BOX I	12283-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12283-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12283-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12283-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12283-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于血内寄生虫来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12283ES04	12283ES24	12283ES96
BOX I	12283-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12283-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12283-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12283-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12283-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

血内寄生虫rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Blood Parasite rRNA Removal Kit

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蜜蜂rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Honeybee rRNA Removal Kit

发表于2024年7月24日由上海金畔生物科技有限公司

蜜蜂rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Honeybee rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Honeybee) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除蜜蜂来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于蜜蜂来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12285ES04	12285ES24	12285ES96
BOX I	12285-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12285-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12285-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12285-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12285-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于蜜蜂来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12285ES04	12285ES24	12285ES96
BOX I	12285-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12285-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12285-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12285-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12285-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

蜜蜂rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Honeybee rRNA Removal Kit

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MaxUp核糖体RNA去除试剂盒(Human rRNA&ITS/ETS)|Hieff NGS MaxUp Human rRNA Depletion Kit(rRNA & ITS/ETS)

发表于2024年7月23日由上海金畔生物科技有限公司

MaxUp核糖体RNA去除试剂盒(Human rRNA&ITS/ETS)|Hieff NGS MaxUp Human rRNA Depletion Kit(rRNA & ITS/ETS)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS^® MaxUp Human rRNA Depletion Kit (rRNA & ITS/ETS)利用RNase H消化法去除人、小鼠和大鼠来源总RNA中的核糖体RNA和45S ITS/ETS区域以保留信使RNA (mRNA)和其它非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA（如FFPE RNA）均具有良好的rRNA去除效果。由于降解的FFPE样本相比新鲜组织样本通常含有较高比例的ITS/ETS，该试剂盒人、小鼠和大鼠45S ITS/ETS区域的探针，经该试剂盒去除后可显著提高测序结果中有效数据比例。

适用范围
适用于人、小鼠和大鼠来源的100 ng~1 μg总RNA样品；适用于完整或部分降解RNA（如FFPE RNA）样品。

产品组分

组分编号和名称		12257ES24	12257ES96
12257-A	Hybridization Buffer	72 μL	288 μL
12257-B	Human Probe Mix (rRNA & ITS/ETS)	48 μL	192 μL
12257-C	RNase H Buffer	72 μL	288 μL
12257-D	RNase H	48 μL	192 μL
12257-E	DNase I Buffer	660 μL	2×1320 μL
12257-F	DNase I	60 μL	240 μL

运输与保存方法
干冰运输，-20 °C存放。有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. RNA样品最大投入体积为10 μL，若样品体积较大，可先进行浓缩。
4. RNase H 消化步骤如需配Mix使用，请现配现用。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 本产品仅作科研用途！

自备材料

1. RNA纯化磁珠：Hieff NGS^® Cleaner (Cat#12602)或其他等效产品。

2. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff^® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) (Cat#11201)或其他等效产品。

3. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针和杂交Buffer从-20 °C 取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至10 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表1 探针杂交反应体系

名称	体积 (μL)
Hybridization Buffer	3
Human Probe Mix (rRNA&ITS/ETS)	2
Total RNA	10 (100 ng~1 μg)
Total	15

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
95 °C	2 min
95 °C-22 °C	0.1 °C/s
22 °C	5 min
4 °C	hold

2. RNase H消化

2.1 将RNase H消化试剂从-20 °C取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。按照表 3 所示，配制RNase H消化反应体系。

表3 RNase H消化反应体系

名称	体积 (μL)
RNase H Buffer	3
RNase H	2
上步产物	15
Total	20

注：RNase H Buffer及RNase H需单独添加，若因样本量较多需配置mix，请现配现用，否则会影响去除效果。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 将上述 PCR 管置于PCR仪中，设置反应程序：热盖50 °C；37 °C，30 min； 4 °C，hold，进行RNase H消化反应。

3. DNase I 消化

3.1 将DNase I消化试剂从-20 °C 取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。按照表4所示，配制DNase I消化反应体系。

表4 DNase I消化反应体系

名称	体积 (μL)
DNase I Buffer	27.5
DNase I	2.5
上一步产物	20
Total	50

3.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

3.3 将上述 PCR 管置于PCR仪中，设置反应程序：热盖50 °C；37 °C，30 min；4 °C，hold，进行DNase I消化反应。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Hieff NGS^® RNA Cleaner (Cat#12602)磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少 30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取110 μL Hieff NGS^® RNA Cleaner (2.2×，Beads:DNA=2.2:1)至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠 (5~10 min)。

4.9 将PCR管短暂离心并置于磁力架中静置，待溶液澄清后（约3 min），小心移取10 μL上清（可根据步骤4.7选择的实际洗脱体积进行相应调整）至新的Nuclease free PCR 管中。

【注】：洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80 °C存放。

案例展示
不同Human RNA样本分别不含ITS/ETS去除rRNA、使用含ITS/ETS的Cat#12257去除rRNA及ITS/ETS后衔接RNA建库试剂盒进行文库构建，经测序分析rRNA与ITS/ETS在下机数据中的占比。

表：不同RNA质量样本使用含或者不含ITS/ETS探针的测试数据展示

RNA质量	去除方案	Input	rRNA (%)	ITS/ETS (%)	Mapping (%)
293T RNA; RIN=10	去除rRNA	1 μg	0.19	4.6	98.28
293T RNA; RIN=10	去除rRNA及ITS/ETS	1 μg	0.15	0.04	98.79
FFPE RNA DV₂₀₀ =90%	去除rRNA	500 ng	0.23	4.75	95.35
FFPE RNA DV₂₀₀ =90%	去除rRNA及ITS/ETS	500 ng	0.21	0.02	95.42
FFPE RNA DV₂₀₀ =50%	去除rRNA	500 ng	1.4	16.28	95.57
FFPE RNA DV₂₀₀ =50%	去除rRNA及ITS/ETS	500 ng	0.56	0.11	95.51
FFPE RNA DV₂₀₀=20%	去除rRNA	1 μg	0.35	67.61	58.4
FFPE RNA DV₂₀₀=20%	去除rRNA及ITS/ETS	1 μg	0.79	0.84	60.35

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Hieff NGS^® Ultima DNA Library Prep Kit for Illumina^®	12199ES24/96	24/96 T
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Hieff NGS^® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina^®	12205ES24/96	24/96 T
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Hieff NGS^® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina^®	12206/7ES24/96	24/96 T
Hieff NGS^® MaxUpⅡ Dual-mode RNA Library Prep Kit	12308ES24/96	24/96 T
Hieff NGS^® MaxUpⅡ Dual-mode mRNA Library Prep Kit	12309ES24/96	24/96 T
文库构建磁珠	产品编号	规格
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Hieff NGS^® DNA Selection Beads (Superior AMPure XP alternative)	12601ES08/56	5/60 mL
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Hieff NGS^® mRNA Isolation Master Kit	12603ES24/96	24/96 T
建库接头	产品编号	规格
Hieff NGS^® 96 Single Index Primer Kit for Illumina^®, Set 1/2	12611/12612ES02	48×2 T
Hieff NGS^® 384 Dual Index Primer Kit for Illumina^®, Set 1/2	12412/12413ES02	96×2 T
Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 1/2	12615/12616ES04/16	12×4/12×16 T
Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 3/4	12617/12618ES04/16	12×4/12×16 T
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建库模块	产品编号	规格
Hieff NGS^®Fast-Pace DNA Fragmentation Reagent	12609ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module	12604ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Ultima Endprep Mix	12605ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module	12607ES24/96	24/96 T
Hieff NGS^®Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module	12608ES24/96	24/96 T
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Hieff NGS® FFPE DNA Repair Reagent	12606ES24/96	24/96 T
文库定量	产品编号	规格
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Hieff NGS^®Library Quantification Kit for Illumina^®, DNA Standard (1-6)	12307ES09	6×96 μL
dsDNA HS Assay Kit for Qubit^®	12640ES60/76	100/500 T
多重PCR定制咨询
NGS建库原料酶咨询

HB220923

适用范围
适用于人、小鼠和大鼠来源的100 ng~1 μg总RNA样品；适用于完整或部分降解RNA（如FFPE RNA）样品。

产品组分

组分编号和名称		12257ES24	12257ES96
12257-A	Hybridization Buffer	72 μL	288 μL
12257-B	Human Probe Mix (rRNA & ITS/ETS)	48 μL	192 μL
12257-C	RNase H Buffer	72 μL	288 μL
12257-D	RNase H	48 μL	192 μL
12257-E	DNase I Buffer	660 μL	2×1320 μL
12257-F	DNase I	60 μL	240 μL

运输与保存方法
干冰运输，-20 °C存放。有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. RNA样品最大投入体积为10 μL，若样品体积较大，可先进行浓缩。
4. RNase H 消化步骤如需配Mix使用，请现配现用。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 本产品仅作科研用途！

自备材料

1. RNA纯化磁珠：Hieff NGS^® Cleaner (Cat#12602)或其他等效产品。

2. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff^® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox) (Cat#11201)或其他等效产品。

3. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针和杂交Buffer从-20 °C 取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至10 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表1 探针杂交反应体系

名称	体积 (μL)
Hybridization Buffer	3
Human Probe Mix (rRNA&ITS/ETS)	2
Total RNA	10 (100 ng~1 μg)
Total	15

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
95 °C	2 min
95 °C-22 °C	0.1 °C/s
22 °C	5 min
4 °C	hold

2. RNase H消化

2.1 将RNase H消化试剂从-20 °C取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。按照表 3 所示，配制RNase H消化反应体系。

表3 RNase H消化反应体系

名称	体积 (μL)
RNase H Buffer	3
RNase H	2
上步产物	15
Total	20

注：RNase H Buffer及RNase H需单独添加，若因样本量较多需配置mix，请现配现用，否则会影响去除效果。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 将上述 PCR 管置于PCR仪中，设置反应程序：热盖50 °C；37 °C，30 min； 4 °C，hold，进行RNase H消化反应。

3. DNase I 消化

3.1 将DNase I消化试剂从-20 °C 取出，解冻后颠倒混匀，置于冰上备用。按照表4所示，配制DNase I消化反应体系。

表4 DNase I消化反应体系

名称	体积 (μL)
DNase I Buffer	27.5
DNase I	2.5
上一步产物	20
Total	50

3.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

3.3 将上述 PCR 管置于PCR仪中，设置反应程序：热盖50 °C；37 °C，30 min；4 °C，hold，进行DNase I消化反应。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Hieff NGS^® RNA Cleaner (Cat#12602)磁珠由冰箱中取出，室温平衡至少 30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取110 μL Hieff NGS^® RNA Cleaner (2.2×，Beads:DNA=2.2:1)至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠 (5~10 min)。

【注】：洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80 °C存放。

表：不同RNA质量样本使用含或者不含ITS/ETS探针的测试数据展示

RNA质量	去除方案	Input	rRNA (%)	ITS/ETS (%)	Mapping (%)
293T RNA; RIN=10	去除rRNA	1 μg	0.19	4.6	98.28
293T RNA; RIN=10	去除rRNA及ITS/ETS	1 μg	0.15	0.04	98.79
FFPE RNA DV₂₀₀ =90%	去除rRNA	500 ng	0.23	4.75	95.35
FFPE RNA DV₂₀₀ =90%	去除rRNA及ITS/ETS	500 ng	0.21	0.02	95.42
FFPE RNA DV₂₀₀ =50%	去除rRNA	500 ng	1.4	16.28	95.57
FFPE RNA DV₂₀₀ =50%	去除rRNA及ITS/ETS	500 ng	0.56	0.11	95.51
FFPE RNA DV₂₀₀=20%	去除rRNA	1 μg	0.35	67.61	58.4
FFPE RNA DV₂₀₀=20%	去除rRNA及ITS/ETS	1 μg	0.79	0.84	60.35

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Hieff NGS^® DNA Selection Beads (Superior AMPure XP alternative)	12601ES08/56	5/60 mL
Hieff NGS^® RNA Cleaner	12602ES08/56	5/60 mL
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Hieff NGS^®Tagment Index Kit for Illumina^®, (96 Index)	12416ES96/384	96 T/384 T
建库模块	产品编号	规格
Hieff NGS^®Fast-Pace DNA Fragmentation Reagent	12609ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module	12604ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Ultima Endprep Mix	12605ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module	12607ES24/96	24/96 T
Hieff NGS^®Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module	12608ES24/96	24/96 T
2×Ultima Amplification Mix	12620ES24/96	24/96 T
2×Super Canace^®ⅡHigh-Fidelity Mix	12621ES03/08	24/96 T
Hieff NGS^®Dual-Mode cDNA Synthesis Kit	12250ES24/96	24/96 T
Hieff NGS® FFPE DNA Repair Reagent	12606ES24/96	24/96 T
文库定量	产品编号	规格
Hieff NGS^®Library Quantification Kit for Illumina^®, qPCR Master Mix	12302ES05	500 T
Hieff NGS^®Library Quantification Kit for Illumina^®, DNA Standard (1-6)	12307ES09	6×96 μL
dsDNA HS Assay Kit for Qubit^®	12640ES60/76	100/500 T
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NGS建库原料酶咨询

HB220923

Q：12257去除rRNA有残留？

A：（1）RNase H Buf&RNase H混Mix放置稳定性较差，建议RNase H消化步骤单加或配Mix现配现用（配置好后10min内用完）；（2）混匀不彻底导致rRNA残留，建议使用振荡器“隔手轻振”的方式混匀样品。

Q：RNaseH单酶稳定性如何？4℃放置会影响rRNA去除效果吗？

A：RNaseH单酶稳定性良好，翌圣测试4℃放置11天rRNA去除效果仍然正常。

[1]Liu Y, Han R, Zhou L, et al. Comparative performance of the GenoLab M and NovaSeq 6000 sequencing platforms for transcriptome and LncRNA analysis [published correction appears in BMC Genomics. 2022 Jan 26;23(1):81]. BMC Genomics. 2021;22(1):829. Published 2021 Nov 17. doi:10.1186/s12864-021-08150-8(IF:4.547)

[2]Li M, Guo D, Chen X, Lu X, Huang X, Wu Y. Transcriptome profiling and co-expression network analysis of lncRNAs and mRNAs in colorectal cancer by RNA sequencing. BMC Cancer. 2022;22(1):780. Published 2022 Jul 16. doi:10.1186/s12885-022-09878-6(IF:4.638)

放线菌rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Actinomycetes rRNA Removal Kit

发表于2024年7月22日由上海金畔生物科技有限公司

放线菌rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Actinomycetes rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Actinomycetes) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除放线菌来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于放线菌来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12279ES04	12279ES24	12279ES96
BOX I	12279-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12279-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12279-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12279-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12279-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于放线菌来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12279ES04	12279ES24	12279ES96
BOX I	12279-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12279-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12279-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12279-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12279-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

放线菌rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Actinomycetes rRNA Removal Kit

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果蝇rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Drosophila rRNA Removal Kit

发表于2024年7月17日由上海金畔生物科技有限公司

果蝇rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Drosophila rRNA Removal Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® MagSP rRNA Removal Kit (Drosophila) with purification beads是利用链霉亲和素标记的磁珠去除果蝇来源总RNA中的核糖体RNA以保留信使RNA（mRNA）和其他非编码RNA。该试剂盒对于完整和部分降解的总RNA均具有良好的rRNA去除效果。经rRNA去除所获得的RNA样本可用于高通量测序分析的mRNA和非编码RNA，可显著提高测序结果中有效数据比例，也可用于cDNA合成及其它下游应用。

适用范围

适用于果蝇来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12288ES04	12288ES24	12288ES96
BOX I	12288-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12288-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12288-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12288-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12288-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

适用范围

适用于果蝇来源的10 ng~1 μg 总RNA样品。

产品组分

组分编号和名称			12288ES04	12288ES24	12288ES96
BOX I	12288-A	PM, Probe Mix	13.5 μL	80 μL	317 μL
BOX II	12288-B	HB, Hybridization buffer	25 μL	150 μL	600 μL
	12288-C	DB, Depletion buffer	800 μL	4.6 mL	18.5 mL
	12288-D	SMB, Streptavidin-coated magnetic beads	176 μL	1056 μL	4.23 mL
	12288-E	PB, Purification beads	795 μL	4.75 mL	19 mL

储存条件

试剂盒BOXI（Probe Mix）-25~-15℃保存，BOXII2~8℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZap^TM高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。

2. RNA样品应不含基因组DNA污染，若样品中有gDNA残留，应先进行DNase I消化并纯化后再用于本试剂盒。

3. 使用前，磁珠需提前平衡至室温。

4. RNA投入量为10 ng- 1000 ng。

5. 在操作过程种，避免EP管或PCR管管盖开封（孵育过程中）或长时间处于室温状态。

6.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7.本产品仅用作科研用途！

自备材料

1. qRT-PCR质检rRNA去除效率：Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix(No Rox)（Cat#11201）或其他等效产品；

2. 其他材料：无水乙醇、无菌超纯水、低吸附枪头、PCR管、磁力架、PCR仪等。

操作步骤

1. 探针杂交

1.1 将探针、Streptavidin-coated magnetic beads和杂交Buffer从-20°C 取出，解冻后颠倒混匀，探针置于冰上放置，其余试剂平衡至室温备用。

1.2 准备RNA样品：根据投入量和样品浓度，计算RNA取样体积，用Nuclease free H₂O稀释至12 μL。

1.3 按照表1于200 μL PCR管中配制rRNA去除反应体系。

表 1 探针杂交反应体系

名称	体积（μL）
Hybridization Buffer	5
Probe Mix	3
Total RNA	12（10 ng~1 μg）
Total	20

1.4 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

1.5 将上述 PCR 管置于PCR仪中，按照表2所示反应程序，进行探针杂交反应。

表 2 探针杂交反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
68℃	10 min
68℃-37℃	0.1℃/s
37℃*	2 min

*注：采用梯度退火之后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
2. 链酶亲和素磁珠准备

2.1低速涡旋振荡链酶亲和素磁珠使磁珠重悬。

2.2 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底。

2.3 吸取40 μL Streptavidin-coated magnetic beads于新的PCR管中，将PCR管置于磁力架上，静置2 min；。

2.4待溶液澄清后，去掉所有上清液。

2.5向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

2.6将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，去上清。

2.7向PCR管中加入80 μL Depletion buffer后，用移液器吹打10次混匀。

3. rRNA去除

3.1瞬离将步骤1中杂交样品离心至管底。

3.2 将步骤2中的链酶亲和素磁珠加入步骤1的样品中，用移液器吹打10次混匀后，置于PCR仪中，按照表3所示反应程序，进行探针捕获。

表3 rRNA去除反应程序

温度	时间
热盖105°C	On
37℃	15 min
50℃	5 min
*立即进入下一步骤

*注：去除反应程序完成后，需要尽快进入下一操作步骤，严禁PCR程序中出现4℃ hold，否则会影响去除效果。
3.3 瞬离将反应液离心至管底。

3.4 将样品管置于磁力架上，静置2 min。

3.5 待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中。

3.6 将PCR管置于磁力架上，静置2 min，待溶液澄清后，小心转移上清至新的PCR管中（建议）。

4. RNA纯化

4.1 准备工作：将Purification beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。用Nuclease free H₂O配制 80%乙醇。

4.2 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

4.3 吸取 180 μL Purification beads至上一步产物中，移液器充分吹打混匀，室温孵育 5 min。

4.4 将PCR管置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约3 min），小心移除上清。

4.5 保持PCR管始终置于磁力架中，加入 200 μL Nuclease free H₂O新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育 30 sec 后，小心移除上清。

4.6 重复步骤 4.5，总计漂洗两次。用 10 μL移液器吸干净残留液体。

4.7 保持 PCR 管始终置于磁力架中，室温下开盖干燥磁珠（5~10 min）。

【注】洗脱后的样品请立即进行下游实验，或置于-80℃存放。

Ver.CN20230316

果蝇rRNA(核糖体RNA)去除试剂盒(含纯化磁珠)|Drosophila rRNA Removal Kit

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