OncoImmunin专有技术

OncoImmunin专有技术

 

 

 

 

 

目标: 解决方案:
与细胞凋亡,细胞介导的细胞毒性,自噬,转移,炎症和病毒感染性有关的蛋白酶的肽底物。
新型的细胞和组织可渗透的荧光底物,可接触活细胞和组织的所有环境。
诊断细胞凋亡,细胞介导的细胞毒性,自噬,转移,炎症和病毒感染性。
细胞和组织可渗透抑制剂,可抑制细胞凋亡,自噬,转移,炎症和病毒感染。
对细胞和组织可渗透底物的OncoImmunin设计的修改:蛋白酶识别位点上不可裂解的键的取代
药物输送车
使用OncoImmunin的分子设计可实现细胞和组织的通透性
将寡核苷酸引入活细胞和动物,特别是人类,而不会造成损害,伤害或毒性。

 

 

 

OncoImmunin,Inc.设计,合成,验证并申请了专有的新型分子,可以用作荧光蛋白酶底物,用于测定活细胞以及血清寡核苷酸(例如siRNA)的体内递送酶活性,无毒性以及在溶液中表现出优异性能后复活或小分子药物在体内试验中均未通过

与其他荧光底物相比,OncoImmunin蛋白酶底物的优势是4倍:

选择荧光探针以确保不仅在溶液中而且在生物学样品(例如血清,活细胞和组织)中准确测定酶活性。
可以使用标准荧光显微镜观察细胞内蛋白酶的活性-无需任何修改! 
为了确保特异性,所有底物均包含来自切割位点两侧的氨基酸序列,即从P n至P n '。
底物在溶液中呈环状构象,可模仿天然存在的靶分子的活性位点环状构象。
 

OncoImmunin的荧光蛋白酶底物设计允许使用荧光显微镜确定细胞内酶活性。缓冲液和人血清中活性的测定可以使用标准荧光计完成,或者对于大样品通量,可以使用专有的高通量筛选(HTS)系统(请参阅页面)

注-吸收率测量也是可能的。

要了解有关OncoImmunin,Inc.及其酶活性测定试剂盒的更多信息,请从下面的类别中进行选择:

原理:荧光团的选择;底物设计和切割;显微镜检查
弹性蛋白酶底物:溶液测量;全细胞应用
细胞凋亡检测试剂盒:caspase-3(CPP32)和ICE;流式细胞仪 微粒

快来了!-用于钙蛋白酶,纤溶酶原激活物和Xa因子的检测试剂盒

 

荧光蛋白酶底物的基本原理

菜单

 

 

 

荧光团的选择

进行荧光团的选择,使得激发和发射都在可见波长范围内。选择这种特定染料的理由是,生物材料包含在紫外线波长域中既吸收又发出荧光的分子。这种自发荧光会阻碍样品中少量活性的测定,并降低活性测定的可靠性。

基板设计和计算机建模结构

肽底物与共价偶联的荧光团合成。后者在策略上远离靶序列,以确保不干扰蛋白水解切割。

弹性蛋白酶底物的代表性计算机模型结构如下所示,其中黄带代表肽主链构象,青色代表附着的荧光团。绿色箭头表示切割位点。

显示了该肽的两个不同视图。

 注意:首先,肽主链具有类似于
 SERPINs反应位点环中发现的环构象。

 第二,青色染料部分形成二聚体。这进一步稳定
 了肽主链构象。可以
 通过形成非荧光基态二聚体来适合地描述这种分子构型。

卵裂诱导的荧光和吸收变化

在完整的肽中,青色荧光团形成基态二聚体。该基态二聚体的吸收光谱可以用激子理论来适合地描述。肽裂解消除了这种染料与染料的相互作用,并导致荧光增加和吸收变化显着。

 

弹性蛋白酶测定

 

 

该弹性蛋白酶测定法可在多种条件下工作。在溶液或细胞悬液中进行测定。即使在显微镜下!

例如,一种应用是使用荧光酶标仪筛选抗炎药候选物。用猪胰弹性蛋白酶测定的该底物的Km在800 nM范围内,而其他基于pNA和AMC生色团的生色底物的Km值分别为6.2和0.8 mM [请参见MJ Castillo,K. Nakajima,M [Zimmerman and JC Powers Anal Biochem 99:53-64(1979)]。

当您认为现在可以在您认为不可能的条件下测量弹性蛋白酶活性时,这确实是技术驱动型科学的一个例子。

没有其他弹性蛋白酶检测法是喜欢的!

敏感 – 与公里在NM-800,这是荧光,所有后
广泛适用的 – 澄清溶液,血清,细胞悬浮液,或在显微镜载玻片上

从下面的应用笔记中选择:

溶液测量
全细胞

您也可以将这些荧光底物用于:

  1. 流式细胞仪分析
  2. 组织学冰冻切片

带有支持数据的应用笔记即将发布

凋亡测定和试剂

 

要求特殊的介绍价格。
PhiPhiLux ®是美国专有技术; 其他美国专有技术和PCT申请正在申请中。

与OncoImmunin的CaspaLux ® 基材,胱天蛋白酶的-1,6,8和活动-9可以被测量。此外,通过以互补色组合5种不同的底物,可同时通过流式细胞术和显微镜在活细胞中确定多种caspase活性。高通量分析也是可用的。 

半胱天冬酶具有细胞渗透性的荧光底物有两种颜色:(单击图标可下载协议)

半胱天冬酶 绿色 红色
半胱天冬酶1 CaspaLux ® -1 -电子1 d 2 CaspaLux ® -1 -电子22
半胱天冬酶6 CaspaLux ® -6 – J 1 d 2 CaspaLux ® -6 – J 2 d 2
半胱天冬酶8 CaspaLux ® -8 L – 1 d 2 CaspaLux ® -8 L – 2 d 2
半胱天冬酶9 CaspaLux ® -9 -中号1 d 2 CaspaLux ® -9 -中号22