Multi-CUT&Tag实验文库构建试剂盒(Multi-CUT&Tag Library Prep Kit)

发表于2024年11月23日由上海金畔生物科技有限公司

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台研发的用于Multi-CUT&Tag实验的文库构建试剂盒，适用于100-100,000个细胞起始量的样本建库。Multi-CUT&Tag是研究蛋白与DNA互作的技术，相较于传统的CUT&Tag，该技术使用nanobody-Tn5（Anti-mouse Tn5和Anti-rabbit Tn5），可实现一份细胞，两种靶标的研究，同时，该技术实验中无需再添加二抗。该技术具有一抗抗体投入量更少、无需二抗、文库产量更高等优点。经过细胞捕获、一抗孵育、转座酶孵育、转座酶激活、掺入DNA标准品、细胞裂解、磁珠回收gDNA、文库扩增和磁珠分选等步骤，靶蛋白结合的DNA片段最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。

本试剂盒包含两个独立模块：BOX-I和BOX-II。BOX-I的核心为结合细胞的ConA磁珠和回收DNA的磁珠，BOX-II包含细胞透化剂、蛋白酶抑制剂、抗体结合buffer、转座酶结合buffer、蛋白酶K以及后续文库扩增所需的所有试剂。此外，本试剂盒已在不同种类细胞（如293T、K562、CHO、ESC细胞等）和动物组织（脑组织、肝脏、脾等）中进行了验证，均具有良好的建库效率和建库产量。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库的稳定性和重复性。

组分信息

组分编号		组分名称	12592ES04	12592ES12	12592ES48
BOX-I	12592-A	ConA Beads	40 μL	120 μL	480 μL
	12592-B	DNA Selection Beads	840 μL	2.52 mL	10.08 mL
	12592-C	Cell wash buffer	3.6 mL	10.8 mL	43.2 mL
	12592-D	ConA bind buffer	400 μL	1.2 mL	4.8 mL
BOX-II	12592-E	Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free)	40 μL	120 μL	480 μL
	12592-F	5% Digitonin	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-G	3 M NaCl	120 μL	360 μL	1440 μL
	12592-H	50x Protein blocker	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-I	Anti-mouse Tn5	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-J	Anti-rabbit Tn5	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-K	30x Activating buffer	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-L	15x Terminate Solution	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-M	DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL)	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-N	30x Proteinase K	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-O	2×Ultima Amplification Mix	100 μL	300 μL	1.2 mL
	12592-P	i5 Universal Primer	8 μL	*	*
	12592-Q	i7 Index Primer (T701)	8 μL	*	*

【注】：*12592ES12/48试剂盒不含Index Primer，需搭配Cat#12417进行完整建库；
*12592ES04中，index信息为i5 index GCCTTATG（对应mouse来源抗体数据）、AGGATATG（对应rabbit来源抗体数据）、i7 index TAAGGCGA（不同测序平台，i5端对应的序列可能需要反向，具体见参考第六部分：文库结构）。

储存条件

BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。

Ver. CN20231208

组分信息

组分编号		组分名称	12592ES04	12592ES12	12592ES48
BOX-I	12592-A	ConA Beads	40 μL	120 μL	480 μL
	12592-B	DNA Selection Beads	840 μL	2.52 mL	10.08 mL
	12592-C	Cell wash buffer	3.6 mL	10.8 mL	43.2 mL
	12592-D	ConA bind buffer	400 μL	1.2 mL	4.8 mL
BOX-II	12592-E	Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-free)	40 μL	120 μL	480 μL
	12592-F	5% Digitonin	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-G	3 M NaCl	120 μL	360 μL	1440 μL
	12592-H	50x Protein blocker	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-I	Anti-mouse Tn5	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-J	Anti-rabbit Tn5	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-K	30x Activating buffer	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-L	15x Terminate Solution	8 μL	24 μL	96 μL
	12592-M	DNA Spike-in mix V2 (5 pg/uL)	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-N	30x Proteinase K	4 μL	12 μL	48 μL
	12592-O	2×Ultima Amplification Mix	100 μL	300 μL	1.2 mL
	12592-P	i5 Universal Primer	8 μL	*	*
	12592-Q	i7 Index Primer (T701)	8 μL	*	*

储存条件

BOX-I：2~8℃保存，BOX-II：-25~-15℃保存，有效期1年。

Ver. CN20231208

Multi-CUT&Tag实验文库构建试剂盒(Multi-CUT&Tag Library Prep Kit)

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Multi-CUT&Tag文库构建标签引物试剂盒(Hieff NGS® Tagment Index Kit)

发表于2024年7月16日由上海金畔生物科技有限公司

Multi-CUT&Tag文库构建标签引物试剂盒(Hieff NGS® Tagment Index Kit)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS® Tagment Index Kit for Multi-CUT&Tag是Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina® （Cat#12592）专用配套试剂盒。该试剂盒总共包含i5通用引物i5 Universal Primer 以及24种i7 Index Primer (T7XX)，可构建24种不同的Index文库。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

产品信息

货号	12417ES24
规格	48 T
目录价	425

组分信息

组分名称	12417ES24
i5 Universal Primer	96 μL
T701-T724	4 μL each

储存条件

-25~-15℃保存，有效期18个月。

适用范围

本试剂盒为Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®（Cat#12592）专用接头试剂盒

序列信息

使用Hieff NGS® Tagment Index Kit for Multi-CUT&Tag构建的DNA文库结构如下：

Index 2 (i5)

5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACIIIIIIITCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-NNNNNN-CTGTCTCTTATACACATCTCCGAGCCCACGAGACIIIIIIIIATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

Index 1 (i7)

IIIIIII: Index 2 (i5), 7 bases；IIIIIIII: Index 1 (i7), 8 bases；-NNNNNN-: 插入序列。

本试剂盒中共提供包含i5通用引物以及24种i7 Index Primer，用于高通量测序时区分不同样品。Index Primer序列如下表所示：

名称	序列
i5 Universal Primer	5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACA -3'
T7XX	5'-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[IIIIIIII]GTCTCGTGGGCTCGG-3'

注：IIIIIIII表示8 bp Index序列，测序前根据测序平台在Sample Sheet中输入所使用的Index对应序列。

注意事项

本产品仅作科研用途。
兔抗靶向文库和鼠抗靶向文库的i5 Index序列不一致，请根据对应的测序平台以及测序试剂进行序列填写，若实验时，添加了两种抗体，测序时，i5端需要将两种序列都填上。
不同Index之间注意防止串扰。
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230508

产品信息

货号	12417ES24
规格	48 T
目录价	425

组分信息

组分名称	12417ES24
i5 Universal Primer	96 μL
T701-T724	4 μL each

储存条件

-25~-15℃保存，有效期18个月。

适用范围

本试剂盒为Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®（Cat#12592）专用接头试剂盒

序列信息

使用Hieff NGS® Tagment Index Kit for Multi-CUT&Tag构建的DNA文库结构如下：

Index 2 (i5)

5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACIIIIIIITCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-NNNNNN-CTGTCTCTTATACACATCTCCGAGCCCACGAGACIIIIIIIIATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

Index 1 (i7)

IIIIIII: Index 2 (i5), 7 bases；IIIIIIII: Index 1 (i7), 8 bases；-NNNNNN-: 插入序列。

本试剂盒中共提供包含i5通用引物以及24种i7 Index Primer，用于高通量测序时区分不同样品。Index Primer序列如下表所示：

名称	序列
i5 Universal Primer	5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACA -3'
T7XX	5'-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[IIIIIIII]GTCTCGTGGGCTCGG-3'

注：IIIIIIII表示8 bp Index序列，测序前根据测序平台在Sample Sheet中输入所使用的Index对应序列。

注意事项

本产品仅作科研用途。
兔抗靶向文库和鼠抗靶向文库的i5 Index序列不一致，请根据对应的测序平台以及测序试剂进行序列填写，若实验时，添加了两种抗体，测序时，i5端需要将两种序列都填上。
不同Index之间注意防止串扰。
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230508

Multi-CUT&Tag文库构建标签引物试剂盒(Hieff NGS® Tagment Index Kit)

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手动多道移液器TopPette Multi-channel

发表于2024年6月15日由上海金畔生物科技有限公司

手动多道移液器TopPette Multi-channel

手动多道移液器TopPette Multi-channel，主要特点：
各种量程的8道和12道移液器适用于标准96 孔板；
移液器下半部分可360度旋转，方便移液；
每道管嘴都配有独立活塞装置，方便维修保养；
管嘴连件采用复合材料制成，密封性能优异；
与大多数品牌管嘴兼容。

手动多道移液器TopPette Multi-channel

TopPette Multi-channel
•各种量程的8道和12道移液器适用于标准96孔板；

• 管嘴推出器可同时推出多道吸嘴，高效省力；

• 移液器下半部可360度旋转，方便移液；

• 每道管嘴连件都有独立的活塞装置，维修保养便捷；

• 特别的管嘴连件设计，易于观察吸嘴的密封状况。

手动多道移液器TopPette Multi-channel

技术规格：

量程	增量	测量体积（μl）	允许大系统误差（不准确度）		允许大随机误差（不精确度）
			%	μl	%	μl
0.5-10μl	0.1μl	10	1.50%	0.15	1.50%	0.15
		5	2.50%	0.125	2.50%	0.125
		1	4.00%	0.04	4.00%	0.04
5-50μl	0.5μl	50	1.00%	0.5	0.50%	0.25
		25	1.50%	0.375	1.00%	0.25
		5	3.00%	0.15	2.00%	0.1
50-300μl	5μl	300	0.70%	2.1	0.25%	0.75
		150	1.00%	1.5	0.50%	0.75
		50	1.50%	0.75	0.80%	0.4
量程	增量	测量体积（μl）	允许大系统误差（不准确度）		允许大随机误差（不精确度）
			%	μl	%	μl
0.5-10μl	0.1μl	10	1.50%	0.15	1.50%	0.15
		5	2.50%	0.125	2.50%	0.125
		1	4.00%	0.04	4.00%	0.04
5-50μl	0.5μl	50	1.00%	0.5	0.50%	0.25
		25	1.50%	0.375	1.00%	0.25
		5	3.00%	0.15	2.00%	0.1
50-300μl	5μl	300	0.70%	2.1	0.25%	0.75
		150	1.00%	1.5	0.50%	0.75
		50	1.50%	0.75	0.80%	0.4
量程	增量	测量体积（μl）	允许大系统误差（不准确度）		允许大随机误差（不精确度）
			%	μl	%	μl
5μl	–	5μl	1.3%	0.065	1.2%	0.06
10μl	–	10μl	0.8%	0.08	0.8%	0.08
20μl	–	20μl	0.6%	0.12	0.5%	0.1
25μl	–	25μl	0.5%	0.125	0.3%	0.075
50μl	–	50μl	0.5%	0.25	0.3%	0.15
100μl	–	100μl	0.5%	0.5	0.3%	0.3
200μl	–	200μl	0.4%	0.8	0.2%	0.4
250μl	—	250μl	0.4%	1.0	0.2%	0.5
500μl	–	500μl	0.3%	1.5	0.2%	1.0
1000μl	–	1000μl	0.3%	3.0	0.2%	2.0
2000μl	–	2000μl	0.3%	6.0	0.15%	3.0
5000μl	–	5000μl	0.3%	15	0.15%	7.5

订货信息：

TopPette手动8道可调式移液器

产品编号	量程
7010103004	0.5-10μl
7010103006	5-50μl
7010103012	50-300μl

TopPette手动12道可调式移液器

产品编号	量程
7010104004	0.5-10μl
7010104006	5-50μl
7010104012	50-300μl

手动多道移液器TopPette Multi-channel

qa-bio Endo F Multi-Kit说明书

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

Endo F Multi-Kit将在天然和变性条件下将N-连接的聚糖脱糖基化。每种酶对N-连接的聚糖释放具有不同的特异性。可以选择组合使用这三种酶以*去除糖蛋白或肽上存在的所有N-连接的聚糖，或者独立使用每种酶，从而确定存在的N-聚糖的类型。

qa-bio Endo F Multi-Kit说明书

KE-EFX3

产品描述

推荐使用Endo F Multi-kit对由于在蛋白质的三维结构中的聚糖位置而在非变性条件下对PNgase F裂解具有抗性的天然蛋白质进行去糖基化处理，因为已知这些酶对蛋白质构象的敏感性较低。

每一种酶的具有不同的N-连接的聚糖的特异性：
内切糖苷酶F1断裂这样的高甘露糖和某些杂合型N-聚糖
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖（以40X减小的速率）
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖

应用：
–抗PNGase F切割的天然蛋白质的去糖基化–
聚糖类型的测定（高甘露糖，双触角，三/四臂触角）
–脱糖基化时通常会沉淀的脱糖基化蛋白
– X射线晶体学

这三种酶在寡糖的核心中的两个GlcNAc残基之间裂解天冬酰胺连接的（N-连接的）寡糖，生成截短的糖分子，其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上，增强了蛋白质的溶解性。相反，PNGase F可以完整清除寡糖。

使用说明

1.向Eppendorf管中加入多达200μg糖蛋白。用去离子水将最终体积调整为34μl。
2.加入10μlEndo F2 / F3 5x反应缓冲液，250 mM乙酸钠pH 4.5。如果单独使用Endo F1酶，请使用Endo F1缓冲液，250 mM磷酸钠pH 5.5。
4.将2.0μl每种酶添加到反应中。在37°C下孵育3小时。
通过SDS-PAGE监控切割。

日本Sanplatec官网代理商

三博特日本ATTO电泳槽日本东洋advantec滤纸中国代理商

标签归档：multi

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