Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

 

注意事项

1转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3使用RNA酶污染的耗材与试剂

42-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

5初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

6本产品仅作科研用途!

 

操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。

2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.81.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min

3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4)室温静置孵育20 min

3. mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

4. 37℃5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。

 

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养容器

表面积

每孔体积

mRNA转染

培养基体积

稀释液体积

mRNA

试剂体积

96-well

0.3 cm2

100 μL

2×5 μL

0.2 μg

0.2-0.4 μL

24-well

2 cm2

500 μL

2×10 μL

0.4 μg

0.8-1.6 μL

12-well

4 cm2

1 mL

2×20 μL

0.8 μg

1.6-3.2 μL

6-well

10 cm2

2 mL

2×50 μL

1 μg

2-4 μL

60-mm

20 cm2

5 mL

2×100 μL

4 μg

8-16 μL

10-cm

60 cm2

15 mL

2×300 μL

12 μg

24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考,mRNA转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

Q:40809主要成分是PEI吗?

A:不是,是类似LNP的组分

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

暂无内容

 

Hieff Trans® mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染阳离子多聚物转染试剂,对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

 

注意事项

1转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3使用RNA酶污染的耗材与试剂

42-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

5初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

6本产品仅作科研用途!

 

操作流程(以24孔板为例,其他培养板加样体积请参考表一)

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA转染试剂复合物:

1)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.4 μg mRNA,轻轻混匀。

2)对于每孔细胞,使用10 μL无血清培养基(如OPTI-MEM培养基)稀释0.81.6 μL转染试剂,轻轻混匀,室温孵育5 min

3)将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4)室温静置孵育20 min

3. mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

4. 37℃5% CO2培养箱培养24-96 h,直至进行基因表达分析。

 

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养容器

表面积

每孔体积

mRNA转染

培养基体积

稀释液体积

mRNA

试剂体积

96-well

0.3 cm2

100 μL

2×5 μL

0.2 μg

0.2-0.4 μL

24-well

2 cm2

500 μL

2×10 μL

0.4 μg

0.8-1.6 μL

12-well

4 cm2

1 mL

2×20 μL

0.8 μg

1.6-3.2 μL

6-well

10 cm2

2 mL

2×50 μL

1 μg

2-4 μL

60-mm

20 cm2

5 mL

2×100 μL

4 μg

8-16 μL

10-cm

60 cm2

15 mL

2×300 μL

12 μg

24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考,mRNA转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

Q:40809主要成分是PEI吗?

A:不是,是类似LNP的组分

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

暂无内容

ADS Biotec ——核酸(MRNA)纯化*

 

 

ADS Biotec ——核酸(MRNA)纯化*

 

 

 

 

色谱柱订购信息
产品描述 货号 规格 应用
RNASepPrep Column RNA
99
3810 7.8 x 50 mm RNA分子的分离纯化及质量 控制
RNASepSemiPrep Column RPC
99
2110 21.2 x 100 mm 用于中间放大的RNA纯化 RNASep
SemiPrep II Column RPC
99
3015 30.0 x 150 mm 大规模放大的RNA纯化
DNASepColumn DNA
99
3510 4.6 x 50 mm 高分辨率ds/ssRNA与DNA分
高分辨率RNA分析

缓冲液订购信息
产品描述 货号 规格 应用
Triethylammonium Acetate Buffer A(0.1 M TEAA in water)
553421 4 x 2.5 L  Phase for Nucleic Acid
Analysis
Triethylammonium Acetate Buffer A(0.1 M TEAA in water)
553421
L4 4 x 4 L
Triethylammonium Acetate
Buffer B (0.1 M TEAA in 25 % Acetonitrile)
553422 4 x 2.5L  Phase for Nucleic Acid
Analysis
Triethylammonium Acetate Buffer B (0.1 M TEAA in 25 % Acetonitrile)
553422
L4 4 x 4 L
HPLC Column Wash Solution D
(75 % acetonitrile)
553423 4 x 2.5 L
HPLC Column Wash Solution D
(75 % acetonitrile)
553423
L4 4 x 4 L

 

对标竞品
货号 品名 对标货号 对标品牌 品名 规格
SP5890 2 M TEAA Solution
(6*200ml )
400613 Invitrogen 三乙胺乙酸 (TEAA)
2.0 M
200ml
69372
250ML
sigma Triethylammoniu
m acetate (TEAA)
(0.981.02 M 250 mL/瓶
1800

 

 

 

TriLink Genome Editing mRNA 现货

上海金畔生物科技正规代理Trilink产品,zui近市场出现Trilink的假货,为了您的实验安全请选择正牌代理。 :

 

 

TriLink BioTechnologies——高品质常规/特殊核苷酸产品
TriLink BioTechnologies公司是世界的核酸修饰技术领域的,成立于1996年,总部设在San Diego,California。TriLink公司致力于高品质核酸修饰产品的研发和生产,提供包括核苷酸、常规及核苷三磷酸特殊修饰的寡核苷酸定制(oligonucleotides),m RNA合成,CleanAmp?PCR产品,phosphoramidites和其他小分子在内的众多产品。近二十年来,TriLink一直是诊断和OEM市场核酸产品供应的行业,产品应用于基因治疗,核苷类化疗,寡核苷酸治疗和诊断领域。此外,TriLink还可提供特殊核苷酸、m RNA定制,合同研究服务和ISO/ QSR标准的cGMP生产设施。TriLink完善的产品及研发服务解决方案有助于推动药物发现和生物医学研究。

经过18年的发展, TriLink已经成为高品质RNA合成领域的,为广大科研工作者提供的mRNA及长链RNA(长可达几个Kb),并且定制修饰。同时我们也提供成品mRNA产品,包括报告基因及 mRNA表达因子。

Genome Editing mRNA

Plasmids and viral vectors have traditionally been used in genome editing to express the required proteins inside cells or an organism. However, editing DNA carries a risk. Double stranded DNA breaks catalyze insertion of DNA at the cut site. At some substantial frequency, the protein expression vectors can integrate, which can lead to continuous expression of the nuclease or a previously silent sequence.

Now mRNA is being used in genome editing to transiently express the required proteins. With no risk of insertional mutagenesis, it is a powerful tool. Additionally synthetic mRNA, which mimics fully processed, capped and polyadenylated mRNA, can be produced in large quantities by in vitro transcription and modified to reduce innate immune stimulation.

产品如下:

货号 品名 规格 价格 品牌
Genome Editing mRNA  
L-7206 CleanCap™ Cas9 mRNA (modified) 20 µgrams  2550 TriLink BioTechnologies
L-7206 CleanCap™ Cas9 mRNA (modified) 100 µgrams 6035 TriLink BioTechnologies
L-7206 CleanCap™ Cas9 mRNA (modified) 1 mg 31875 TriLink BioTechnologies
L-7206 CleanCap™ Cas9 mRNA (modified) 5 mg (5 x 1 mg)  114750 TriLink BioTechnologies
L-7211 CleanCap™ Cre mRNA (5moU) 5moU 询价 TriLink BioTechnologies
L-7207 CleanCap™ Cas9 Nickase mRNA (5moU) 20 µgrams  2550 TriLink BioTechnologies
L-7207 CleanCap™ Cas9 Nickase mRNA (5moU) 100 µgrams 6035 TriLink BioTechnologies
L-7207 CleanCap™ Cas9 Nickase mRNA (5moU) 1 mg 31875 TriLink BioTechnologies
L-7207 CleanCap™ Cas9 Nickase mRNA (5moU) 5 mg (5 x 1 mg)  114750 TriLink BioTechnologies
L-7606 CleanCap™ Cas9 mRNA 20 µgrams  2125 TriLink BioTechnologies
L-7606 CleanCap™ Cas9 mRNA 100 µgrams 5015 TriLink BioTechnologies
L-7606 CleanCap™ Cas9 mRNA 1 mg 26775 TriLink BioTechnologies
L-7606 CleanCap™ Cas9 mRNA 5 mg (5 x 1 mg)  96050 TriLink BioTechnologies

 

Zinc-finger Nuclease mRNA (ZFN mRNA)

Zinc-finger nucleases (ZFNs) were the first widely applicable site specific genome editing tools. Recently, several studies have shown that ZFNs can have off-target effects at non-targeted chromosomal sites that are similar in sequence to the intended target site. For this reason, there is a move to transient ZFN expression using mRNA based vectors. TriLink’s custom mRNA transcription service includes ZFN mRNA. Request a quote today!

L-7206
CleanCap™ Cas9 mRNA (modified)
CleanCap™ CRISPR Associated Protein 9 mRNA (U-modified) 

mRNA Length: 4,521 nucleotides

Concentration: 1.0 mg/mL

Buffer: 1 mM Sodium Citrate, pH 6.4

Identity & Purity:

Agarose Gel Mobility; Pass

Concentration ± 5%; Pass

Product Insert
SDS

Cas9 mRNA expresses a version of the Streptococcus pyogenes SF370 Cas9 protein (CRISPR Associated Protein 9). Cas9 functions as part of the CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) genome editing system. In the CRISPR system, an RNA guide sequence targets the site of interest and the Cas9 protein is employed to perform double stranded DNA cleavage.

Cas9 mRNA encodes the Cas9 protein with an N and C terminal nuclear localization signal (NLS). The incorporation of two NLS signals within the mRNA increases the frequency of delivery to the nucleus, thus increasing the rate of DNA cleavage. Additionally, a C terminal HA epitope tag aids detection, isolation, and purification of the Cas9 protein.

This mRNA is capped using CleanCap™, TriLink's proprietary co-transciptional capping method, which results in the naturally occuring Cap 1 structure with high capping efficiency. It is polyadenylated, substituted with a modified uridine and optimized for mammalian systems. It mimics a fully processed mature mRNA.

Certificate(s) of Analysis

TD-OA02A

T1-CHZ01A-1 

L-7206 is a replacement product for L-6125 and L-6129. 

Not for resale without express written permission. Not for use in humans. No license under any patent or patent pending is granted or implied by the purchase of any TriLink product. TriLink does not warrant that the use or sale of the products delivered hereunder will not infringe the claims of any United States or other patents or patents pending covering the use of the product alone or in combination with other products or in the operation of any process. All and any use of TriLink product is the purchaser’s sole responsibility.

 

CleanCap™ Cre mRNA (5moU)
CleanCap™ NLS-Cre Recombinase mRNA (5-methoxyuridine) 

Contact us today to preorder! 

Catalog Number: L-7211 

mRNA Length: 1,437 nucleotides

Concentration: 1.0 mg/mL

Buffer: 1 mM Sodium Citrate, pH 6.4

Identity & Purity:

Agarose Gel Mobility; Pass

Concentration ± 5%; Pass

Product Insert
SDS

NLS-Cre Recombinase mRNA is a capped and polyadenylated messenger RNA encoding Cre recombinase fused to a nuclear localization sequence (NLS). Cre recombinase is a tyrosine recombinase that catalyzes recombination between two loxP sites.

This mRNA is capped using CleanCap™, TriLink's proprietary co-transciptional capping method, which results in the naturally occuring Cap 1 structure with high capping efficiency. It is polyadenylated, modified with 5-methoxyuridine and optimized for mammalian systems. It mimics a fully processed mature mRNA.

L-7211 is a replacement for L-6108.

Not for resale without express written permission. Not for use in humans. No license under any patent or patent pending is granted or implied by the purchase of any TriLink product. TriLink does not warrant that the use or sale of the products delivered hereunder will not infringe the claims of any United States or other patents or patents pending covering the use of the product alone or in combination with other products or in the operation of any process. All and any use of TriLink product is the purchaser’s sole responsibility.

L-7606
CleanCap™ Cas9 mRNA
CleanCap™ CRISPR Associated Protein 9 mRNA 

mRNA Length: 4,521 nucleotides

Concentration: 1.0 mg/mL

Buffer: 1 mM Sodium Citrate, pH 6.4

Identity & Purity:

Agarose Gel Mobility; Pass

Concentration ± 5%; Pass

Product Insert
SDS

Cas9 mRNA expresses a version of the Streptococcus pyogenes SF370 Cas9 protein (CRISPR Associated Protein 9). Cas9 functions as part of the CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) genome editing system. In the CRISPR system, an RNA guide sequence targets the site of interest and the Cas9 protein is employed to perform double stranded DNA cleavage.

Cas9 mRNA encodes the Cas9 protein with an N and C terminal nuclear localization signal (NLS). The incorporation of two NLS signals within the mRNA increases the frequency of delivery to the nucleus, thus increasing the rate of DNA cleavage. Additionally, a C terminal HA epitope tag aids detection, isolation, and purification of the Cas9 protein. 

This mRNA is capped using CleanCap™, TriLink's proprietary co-transciptional capping method, which results in the naturally occuring Cap 1 structure with high capping efficiency. It is polyadenylated, and optimized for mammalian systems. It mimics a fully processed mature mRNA.

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

卵清蛋白 (Ovalbumin,以下简称OVA)是免疫学和生物化学研究的重要参考蛋白。OVA是鸡蛋清中的主要蛋白成分,是一种大而复杂的糖蛋白,能够引起机体适度的免疫性。因此,OVA被作为抗原广泛用于免疫实验中。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

OVA -mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

1590个核苷酸

浓度

1 mg/ml

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1.到货后,立即将样品储存于80℃

2.首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3.样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

HB221209

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

 

卵清蛋白 (Ovalbumin,以下简称OVA)是免疫学和生物化学研究的重要参考蛋白。OVA是鸡蛋清中的主要蛋白成分,是一种大而复杂的糖蛋白,能够引起机体适度的免疫性。因此,OVA被作为抗原广泛用于免疫实验中。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

OVA -mRNA(3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

1590个核苷酸

浓度

1 mg/ml

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1.到货后,立即将样品储存于80℃

2.首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3.样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

HB221209

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

OVA-mRNA 卵清蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Firefly Luciferase mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)转染到细胞后,可在细胞表达萤火虫光素酶(luciferase)蛋白,该蛋白最初是从萤火虫Photinus pyralis中分离出来的。萤火虫光素酶是一种常用的生物发光(bioluminescence)报告分子,常用于基因调控、细胞活力测定、ATP水平分析和体内成像等研究。荧光素酶可以ATP和氧存在的条件下催化底物荧光素(luciferin) 氧化oxyluciferin,在 luciferin 氧化的过程中,会发出生物荧光( bioluminescence)。然后可以通过化学发光仪( luminometer)或液闪测定仪560 nm波长处测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP 修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

Firefly Luciferase-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

2048 bp

浓度

1 mg/mL

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

产品用途

1、转染试剂筛选;

2、适用于mRNA递送,定位,翻译等;

3、适用于基因表达,细胞活性和体内成像等分析。

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1、到货后,立即将样品储存于-80℃

2、首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3、样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

相关产品

产品名称

货号

T7 High Yield RNA Synthesis Kit

10623ES

Cap1-GAG m7(3'OMeG) (5') ppp(5')(2'OMeA) pG (100mM)

10677ES

mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade

10614ES

mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade

10612ES

Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade

10611ES

HB221103

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

暂无内容

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

暂无内容

 

Firefly Luciferase mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)转染到细胞后,可在细胞表达萤火虫光素酶(luciferase)蛋白,该蛋白最初是从萤火虫Photinus pyralis中分离出来的。萤火虫光素酶是一种常用的生物发光(bioluminescence)报告分子,常用于基因调控、细胞活力测定、ATP水平分析和体内成像等研究。荧光素酶可以ATP和氧存在的条件下催化底物荧光素(luciferin) 氧化oxyluciferin,在 luciferin 氧化的过程中,会发出生物荧光( bioluminescence)。然后可以通过化学发光仪( luminometer)或液闪测定仪560 nm波长处测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光。荧光素和荧光素酶这一生物发光体系,可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP 修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

Firefly Luciferase-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

2048 bp

浓度

1 mg/mL

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

产品用途

1、转染试剂筛选;

2、适用于mRNA递送,定位,翻译等;

3、适用于基因表达,细胞活性和体内成像等分析。

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1、到货后,立即将样品储存于-80℃

2、首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3、样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

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产品名称

货号

T7 High Yield RNA Synthesis Kit

10623ES

Cap1-GAG m7(3'OMeG) (5') ppp(5')(2'OMeA) pG (100mM)

10677ES

mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade

10614ES

mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade

10612ES

Deoxyribonuclease I (DNase I) GMP-grade

10611ES

HB221103

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

暂无内容

萤火虫萤光素酶mRNA(Firefly Luciferase-mRNA)3-O-Me-GAG/N1-Me-Pseudo UTP

暂无内容

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit是翌圣生物自主研发的专门用于纯化mRNA的磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从10 ng4 μg完整度良好的总RNA进行分离纯化。

 

产品组分

产品组分

组分名称

12603ES24

12603ES96

12603-A

mRNA Capture Beads

1.2 mL

4.8 mL

12603-B

Beads Binding Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-C

Beads Wash Buffer

15 mL

60 mL

12603-D

Tris Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-E

Nuclease-free water

1 mL

4 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!

 

注意事项

1.磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2.操作过程要严格保证无RNase和核酸污染。

3.本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4.想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

6.本产品仅用作科研用途! 

 

使用方法

自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管。

 

操作流程

 

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit 

1 mRNA纯化试剂盒操作流程

 

操作步骤

3.1 实验前准备

mRNA Capture Beads2-8℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

3.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water10 ng4 μg总RNA稀释至50 μL冰上放置备用 

3.3 mRNA与磁珠的结合

颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入50 μL RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

② 将磁珠与RNA的混合物置于PCR仪中,65℃5 min255 min25hold,完成RNA与捕获磁珠的结合

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,小心移除上清

3.4 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠用移液器反复吹打6次以彻底混匀

② 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

重复上一步骤,共洗涤两次。

3.5 mRNA样本第一轮洗脱

将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

将样品放置于PCR仪中,80℃2 min25℃holdmRNA洗脱下来。

3.6 mRNA与磁珠的再次结合 

① 将样品从PCR仪中取出,加入50 μL Beads Binding Buffer,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

3.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠用移液器反复吹打6次彻底混匀,将样品重新放回至磁力架中室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

3.8 mRNA样本终洗脱

方案一用于逆转录反应。

将样品从磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free water重悬磁珠,用移液器吹打6次以彻底混匀将样品置于PCR仪中80℃,2 min后,立即置于磁力架上室温静置5 min待溶液澄清后,小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。

方案二用于RNA文库的构建。

可根据相关试剂盒说明书加入相应体积的Frag/Primer Buffer,进行文库构建。

【注】:样品可置于冰上继续进行NGS文库构建或其他分析应用(建议立即进行后续反应),也可以置于-80℃保存。

 

HB220218

 

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

暂无内容

[1]Han T, Xu D, Zhu J, Li J, Liu L, Deng Y. Identification of a robust signature for clinical outcomes and immunotherapy response in gastric cancer: based on N6-methyladenosine related long noncoding RNAs. Cancer Cell Int. 2021;21(1):432. Published 2021 Aug 16. doi:10.1186/s12935-021-02146-w(IF:6.429)

[2]Wang S, Fan X, Zhu J, et al. The differentiation of colorectal cancer is closely relevant to m6A modification. Biochem Biophys Res Commun. 2021;546:65-73. doi:10.1016/j.bbrc.2021.02.001(IF:3.322)

产品描述

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit是翌圣生物自主研发的专门用于纯化mRNA的磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从10 ng4 μg完整度良好的总RNA进行分离纯化。

 

产品组分

产品组分

组分名称

12603ES24

12603ES96

12603-A

mRNA Capture Beads

1.2 mL

4.8 mL

12603-B

Beads Binding Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-C

Beads Wash Buffer

15 mL

60 mL

12603-D

Tris Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-E

Nuclease-free water

1 mL

4 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!

 

注意事项

1.磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2.操作过程要严格保证无RNase和核酸污染。

3.本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4.想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作

6.本产品仅用作科研用途! 

 

使用方法

自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管。

 

操作流程

 

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit 

1 mRNA纯化试剂盒操作流程

 

操作步骤

3.1 实验前准备

mRNA Capture Beads2-8℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

3.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water10 ng4 μg总RNA稀释至50 μL冰上放置备用 

3.3 mRNA与磁珠的结合

颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入50 μL RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

② 将磁珠与RNA的混合物置于PCR仪中,65℃5 min255 min25hold,完成RNA与捕获磁珠的结合

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,小心移除上清

3.4 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠用移液器反复吹打6次以彻底混匀

② 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

重复上一步骤,共洗涤两次。

3.5 mRNA样本第一轮洗脱

将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

将样品放置于PCR仪中,80℃2 min25℃holdmRNA洗脱下来。

3.6 mRNA与磁珠的再次结合 

① 将样品从PCR仪中取出,加入50 μL Beads Binding Buffer,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

3.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠用移液器反复吹打6次彻底混匀,将样品重新放回至磁力架中室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

3.8 mRNA样本终洗脱

方案一用于逆转录反应。

将样品从磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free water重悬磁珠,用移液器吹打6次以彻底混匀将样品置于PCR仪中80℃,2 min后,立即置于磁力架上室温静置5 min待溶液澄清后,小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。

方案二用于RNA文库的构建。

可根据相关试剂盒说明书加入相应体积的Frag/Primer Buffer,进行文库构建。

【注】:样品可置于冰上继续进行NGS文库构建或其他分析应用(建议立即进行后续反应),也可以置于-80℃保存。

 

HB220218

 

mRNA纯化试剂盒 纯化mRNA的磁珠试剂盒|Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

暂无内容

[1]Han T, Xu D, Zhu J, Li J, Liu L, Deng Y. Identification of a robust signature for clinical outcomes and immunotherapy response in gastric cancer: based on N6-methyladenosine related long noncoding RNAs. Cancer Cell Int. 2021;21(1):432. Published 2021 Aug 16. doi:10.1186/s12935-021-02146-w(IF:6.429)

[2]Wang S, Fan X, Zhu J, et al. The differentiation of colorectal cancer is closely relevant to m6A modification. Biochem Biophys Res Commun. 2021;546:65-73. doi:10.1016/j.bbrc.2021.02.001(IF:3.322)

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

mRNA Cap 2氧甲基转移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA,从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率,因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

 

产品性质

英文名(English Name)

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

来源(Source)

重组E.coli

浓度(Concertation)

50000 Units/mL

纯度(Purity)

≥99%(SDS-PAGE)

比活(Specific Activity)

≥1.6×105 U/mg

储存缓冲液(Storage Buffer)

20 mM Tris-HCl pH8.0,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,100 mM NaCl,50%(v/v)甘油,0.1%(v/v)Trion X-100

活性单位定义(Unit Definition)

一单位(U)定义为:在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。推荐分装冻存,避免反复冻融。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

10616ES84

10616ES92

10616ES97

10616-A

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)

40 μL

200 μL

1 mL

10616-B

10×Capping Reaction Buffer

80 μL

400 μL

2 mL

 

使用方法

1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL;

2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min,反应后冰上放置 5 min;

3、按下表(1)配置反应体系(适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应);

4、37℃条件下孵育1 h(对与目的片段长度小于200 nt RNA,可将孵育时间增加到2 h);

1:20μL反应体系配置

组分名称

体积

Denatured Capped RNA

16 μL

10×Capping Reaction Buffer

2 μL

SAM (4 mM)

1 μL

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)

1 μL

 

注意事项

1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子;

3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂,可将时间延长至10 min;

4、本产品仅作科研用途! 

HB220224

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

暂无内容

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

暂无内容

mRNA Cap 2氧甲基转移酶(mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA,从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率,因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

 

产品性质

英文名(English Name)

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

来源(Source)

重组E.coli

浓度(Concertation)

50000 Units/mL

纯度(Purity)

≥99%(SDS-PAGE)

比活(Specific Activity)

≥1.6×105 U/mg

储存缓冲液(Storage Buffer)

20 mM Tris-HCl pH8.0,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,100 mM NaCl,50%(v/v)甘油,0.1%(v/v)Trion X-100

活性单位定义(Unit Definition)

一单位(U)定义为:在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。

 

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。推荐分装冻存,避免反复冻融。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

10616ES84

10616ES92

10616ES97

10616-A

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)

40 μL

200 μL

1 mL

10616-B

10×Capping Reaction Buffer

80 μL

400 μL

2 mL

 

使用方法

1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL;

2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min,反应后冰上放置 5 min;

3、按下表(1)配置反应体系(适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应);

4、37℃条件下孵育1 h(对与目的片段长度小于200 nt RNA,可将孵育时间增加到2 h);

1:20μL反应体系配置

组分名称

体积

Denatured Capped RNA

16 μL

10×Capping Reaction Buffer

2 μL

SAM (4 mM)

1 μL

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)

1 μL

 

注意事项

1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子;

3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂,可将时间延长至10 min;

4、本产品仅作科研用途! 

HB220224

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

暂无内容

mRNA Cap2氧甲基转移酶 重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

暂无内容

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

eGFP-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) 转染到细胞后,可在细胞表达出增强型绿色荧光eGFP)蛋白,该野生型蛋白GFP最初1962年被Osamu Shimomura水母(Aequrea victoria发现GFP具有独特的发光特性,不依赖任何辅因子或底物,只需分子氧因此,常将GFP和目的蛋白的基因融合表达,用以监测目的蛋白表达或定位。但GFP在应用中存在一些明显缺陷,为了改进这些缺陷,分子生物学家开发出GFP的变体,称为eGFP,与GFP的二级结构相同。重要的是,eGFP的密码子序列优化后更适合在哺乳动物细胞内表达。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP 修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

eGFP-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

1181个核苷酸

浓度

1 mg/ml

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1.到货后,立即将样品储存于-40℃以下;

2.首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3.样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

HB221221

 

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

 

eGFP-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP) 转染到细胞后,可在细胞表达出增强型绿色荧光eGFP)蛋白,该野生型蛋白GFP最初1962年被Osamu Shimomura水母(Aequrea victoria发现GFP具有独特的发光特性,不依赖任何辅因子或底物,只需分子氧因此,常将GFP和目的蛋白的基因融合表达,用以监测目的蛋白表达或定位。但GFP在应用中存在一些明显缺陷,为了改进这些缺陷,分子生物学家开发出GFP的变体,称为eGFP,与GFP的二级结构相同。重要的是,eGFP的密码子序列优化后更适合在哺乳动物细胞内表达。

该产品已经是5’端加帽,3’端加poly(A)经过N1-Me-Pseudo UTP 修饰的mRNA,可以模拟真核生物中加工成熟的mRNA。使用3-O-Me-GAG以共转录的方式对mRNA进行加帽,形成了Cap 1结构,增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸N1-Me-Pseudo UTP的添加可以减少先天免疫刺激,增加mRNA的稳定性。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。

 

产品信息

产品名称

eGFP-mRNA (3-O-Me-GAG, N1-Me-Pseudo UTP)

长度

1181个核苷酸

浓度

1 mg/ml

储存缓冲液

1 mM柠檬酸钠

 

运输和保存方法

干冰运输。80℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1.到货后,立即将样品储存于-40℃以下;

2.首次使用时,注意佩戴一次性手套,将样品置于冰上溶解,使用不含RNase的试剂和耗材,避免接触污染;

3.样品首次溶解后,可轻柔离心后进行分装,避免反复冻融。

 

HB221221

 

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

eGFP-mRNA eGFP蛋白mRNA基因(3-O-Me-GAG,N1-Me-Pseudo UTP)

暂无内容

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit V2是专门用于纯化mRNA的升级版磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从10 ng-4 μg完整度良好的总RNA中进行分离纯化。

 

组分信息

产品组分

组分名称

12629ES08

12629ES24

12629ES96

12629ES97

12629-A

mRNA Capture Beads 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-B

Beads Binding Buffer 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-C

Beads Wash Buffer 2.0

5 mL

15 mL

60 mL

60 mL

12629-D

Tris Buffer 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-E

Nuclease-free water

1 mL

1 mL

4 mL

4 mL

 

储存条件

2~8℃保存,有效期1年。

 

使用说明

自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管PCR仪等

操作流程

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

操作步骤

1.1 实验前准备

mRNA Capture Beads 2.02~8℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

1.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water将10 ng-4 μg总RNA稀释至50 μL,冰上放置备用。

1.3 mRNA与磁珠的结合

① 颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入至50 μL 总RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

② 将磁珠与RNA的混合物置于PCR仪中,65℃,5 min;25℃,5 min;25℃,hold,完成RNA与捕获磁珠的结合。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,小心移除上清。

1.4 样本的洗涤

① 将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

③ 重复上一步骤,共洗涤两次。

1.5 mRNA样本第一轮洗脱

① 将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 将样品放置于PCR仪中,80℃,2 min;25℃,hold,将mRNA洗脱下来。

1.6 mRNA与磁珠的再次结合

① 将样品从PCR仪中取出,加入50 μL Beads Binding Buffer 2.0,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

1.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次彻底混匀,将样品重新放回至磁力架中,室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】:最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

根据后续实验流程选择处理方式:

a. 若纯化产物用于逆转录反应,将样品从磁力架上取出,加入10.5 μL Nuclease-free water,用移液器吹打6次充分混匀,80℃ 2 min,立即置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心吸取8.5 μL上清至一个新的Nuclease-free PCR管中。

b. 若纯化产物用于RNA文库构建,如Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit 双模式RNA建库试剂盒(兼容Illumina和MGI)(Cat #12308或12310),按照说明书加入相应体积的Frag/Prime Buffer,进行文库构建。

 

注意事项

1.磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2.操作过程要严格保证无RNase和核酸污染。

3.本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4.想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

6.本产品仅用作科研用途!

 

Ver.CN20230824

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

暂无内容

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

暂无内容

 

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit V2是专门用于纯化mRNA的升级版磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从10 ng-4 μg完整度良好的总RNA中进行分离纯化。

 

组分信息

产品组分

组分名称

12629ES08

12629ES24

12629ES96

12629ES97

12629-A

mRNA Capture Beads 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-B

Beads Binding Buffer 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-C

Beads Wash Buffer 2.0

5 mL

15 mL

60 mL

60 mL

12629-D

Tris Buffer 2.0

400 μL

1.2 mL

4.8 mL

5.5 mL

12629-E

Nuclease-free water

1 mL

1 mL

4 mL

4 mL

 

储存条件

2~8℃保存,有效期1年。

 

使用说明

自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管PCR仪等

操作流程

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

操作步骤

1.1 实验前准备

mRNA Capture Beads 2.02~8℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

1.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water将10 ng-4 μg总RNA稀释至50 μL,冰上放置备用。

1.3 mRNA与磁珠的结合

① 颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入至50 μL 总RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

② 将磁珠与RNA的混合物置于PCR仪中,65℃,5 min;25℃,5 min;25℃,hold,完成RNA与捕获磁珠的结合。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,小心移除上清。

1.4 样本的洗涤

① 将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

③ 重复上一步骤,共洗涤两次。

1.5 mRNA样本第一轮洗脱

① 将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 将样品放置于PCR仪中,80℃,2 min;25℃,hold,将mRNA洗脱下来。

1.6 mRNA与磁珠的再次结合

① 将样品从PCR仪中取出,加入50 μL Beads Binding Buffer 2.0,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

② 室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

1.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer 2.0重悬磁珠,用移液器反复吹打6次彻底混匀,将样品重新放回至磁力架中,室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】:最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

根据后续实验流程选择处理方式:

a. 若纯化产物用于逆转录反应,将样品从磁力架上取出,加入10.5 μL Nuclease-free water,用移液器吹打6次充分混匀,80℃ 2 min,立即置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心吸取8.5 μL上清至一个新的Nuclease-free PCR管中。

b. 若纯化产物用于RNA文库构建,如Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit 双模式RNA建库试剂盒(兼容Illumina和MGI)(Cat #12308或12310),按照说明书加入相应体积的Frag/Prime Buffer,进行文库构建。

 

注意事项

1.磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2.操作过程要严格保证无RNase和核酸污染。

3.本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4.想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

6.本产品仅用作科研用途!

 

Ver.CN20230824

Hieff NGS® mRNA纯化磁珠试剂盒(V2升级版) mRNA Isolation Master Kit V2

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Baseclick由巴斯夫风险投资公司和LMU慕尼黑于2008年成立,此后为的公司,实验室和科研机构提供了用于生命科学和点击试剂的高质量产品。我们位于德国慕尼黑附近。

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储存于2-8°C

保质期:
12个月

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