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D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

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D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格（元）

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐

40902ES01

100 mg

1000.00

40902ES02

500 mg

2600.00

40902ES03

1 g

3996.00

40902ES08

5×1 g

14898.00

40902ES09

5 g

14898.00

 

产品简介

 

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素（游离酸），D-荧光素盐（钠盐和钾盐）。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO；后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品信息

 

货号

40902ES01 / 40902ES02 / 40902ES03 / 40902ES08 / 40902ES09

规格

100 mg / 500 mg / 1 g / 5×1 g / 5g

中文名称

D-荧光素钾盐

英文别名称

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt

CAS号

115144-35-9

分子式

C11H7N2O3S2 K

分子量

318.42 g/mol

外观

淡黄色粉末

溶解性

易溶于水（60 mg/mL）

纯度（HPLC）

≥99%

 

组分信息

 

组分名称

40902ES01

40902ES02

40902ES03

40902ES08

40902ES09

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐

100 mg

500 mg

1 g

5×1 g

5g

 

储存条件

 

-25~-15℃干燥避光储存，有效期1年。

 

使用说明

 

1. 体外生物发光检测

1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30 mg/mL的储存液 (100-200×) ，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度。

3）去除细胞培养基。

4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10 min，然后进行图像分析。

 

2. 活体成像分析

1）用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液，混匀。

2）用0.2 µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

3）腹腔注射（i.p.），按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。

4）注射入体内10-15 min（待光信号达到最强稳定平台期）后进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

 

1. 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）仅仅是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid。

2. 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

3. 如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。

4. 本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间长达1年。

5. 在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7. 本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20231103

Q：荧光虫荧光素（ Firefly Luciferin）、甲虫荧光素（ Beetle Luciferin）和 D-Luciferin 有区别吗？

A：无区别。三者仅仅是不同公司在命名上的差异，均是化合物 (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2

-thiazoline-4-carboxylic acid

Q：该系列产品主要用于哪些应用？

A：除用于活体成像外，荧光素类产品还用于荧光素酶参与的其他应用中，如 体外报告基因检测、微生物/病毒监测、焦磷酸测序等

Q：荧光素钠颜料和 D-荧光素钠盐的区别？

A：荧光素钠颜料：可用于细胞通透性检测，通过检测 OD490 处吸光度值测定 颜料的通透性。 D-荧光素钠盐：用于活体成像和报告基因系统，通过冷发光模块检测，不 需要激发光激发。

Q：荧光素钾盐、钠盐、自由酸区别？

A：三者的区别主要在于： 1）溶解性：盐形式易溶于水，其中钾盐溶解度为 60mg/ml，钠盐溶解度为 100mg/ml。自由酸不易溶于水，可用碳酸氢钠溶液弱碱调节溶解，其 在甲醇中的溶解度为10mg/ml，DMSO 中溶解度为 50mg/ml。 2）毒性方面：盐形式在使用过程中较方便，尤其是在体内成像实验中， 因其能够溶解在水中，反应毒性也会更小些（荧光素是一种由苯丙噻唑和 噻唑羧酸基团组成的低分子量有机化合物，有低毒性）。3）使用效果：无明显差异。在体内实验研究中，选用钾盐使用率较高。

Q：荧光素的纯度对实验有成影响吗？

A：有影响。99%以上的纯度较好。对于 99%纯度的荧光素，有 1%的固体杂质。若是这 1 g 的杂质溶 解在 25ml 的缓冲液中（该稀释比例是进行活体成像实验的标准稀释方法），此时杂质的浓度为 0.4 g/L。假 设杂质的分子量为 1000 g/mol,那么杂质的物质的量浓度为 400 μM，该浓度可能会抑制细胞内某些酶的作 用，并且有可能降低实验效果或对动物产生伤害。

Q：产品稳定性如何？

A：粉末避光保存于-20 或-70℃，有效期至少 1 年。

Q：活体成像底物作用原理？

A：D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物。其作用 机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当 荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。2、天然腔肠素（Coelenterazine native）是海肾荧光素酶（Rluc）和 Gaussia 荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物。

Q：推荐仪器？多功能酶标仪能用吗？

A：推荐仪器：1、具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器：如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统，德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。2、多功能酶标仪：需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块（注： 不能用荧光显微镜。）

Q：荧光素是能进入细胞膜吗？

A：荧光素是小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障

Q：尾静脉注射和腹腔注射哪个好？

A：都可以的。腹腔注射扩散较慢，持续发光长；静脉注射，扩散快，但发光持续时间很短。

Q：100mg可以注射几只小鼠？

A：腹腔注射（i.p.），按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，20g的C57小鼠为例，每只小鼠检测一次的用量：150 mg/kg×20g=3mg，100mg÷3mg=33只。仅供参考，具体的用量以试剂为准，未加损耗情况。

Q：D-荧光素钾盐，对动物有毒副作用吗？

A：一般情况下，D-荧光素钠盐不会对动物产生毒副作用。

Q：荧光素钾盐，分解率是多少？

A：没有该信息。

 

 

 

 

 

Q：底物的激发波长和发射波长？

A：化学发光，无需激发波长。萤火虫荧光素检测波长是 560nm。海肾荧光素 检测波长是 465 nm。

Q：底物可以进入活细胞中吗？

A：可以通过血脑屏障，胎盘屏障和血液测试屏障，也可以进入活细胞。

Q：荧光素类注射方式和用量？

A：下面建议浓度来源于文献：1）注射方式：可通过腹腔注射或尾静脉注射 2）注射量：科学的方法是根据动力学曲线评估注射剂量。建立最初尝试注射剂量 为：150mg 底物/kg 小鼠体重。因此，购买量可按照上述方法计算：若 10 只小鼠，22 -25g，则需要底物 33 –37.5mg 。

Q：荧光素的发光特性如何？

A：荧光素腹腔注射老鼠后约 3 min 后，能够表达荧光素酶的细胞开始发光，10 min 后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约 10 – 15 min 后开始衰减，可在注射后 10 -15 min 内检测。仅供参考，建议预实验建立荧光素酶 动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期

Q：活体成像实验，无效果的原因？

A：成功进行活体成像实验需要以下条件：目的组织或细胞表达荧光素酶基因；荧光素底物注射成功； 依赖于发光部位的组织厚度。若实验不成功，可从上述因素查找，荧光素酶基因是否表达，荧光素底物是否未正确注射，及发光部位较深等

Q：荧光素钾（钠）盐溶液如何配制？必须用不含钙离子和镁离 子的 DPBS 溶解吗？

A：1、下面建议浓度来源于文献：

1）储备液（体外实验用） 浓度 100mM，约相当于 30mg/mL。用无菌蒸馏水溶解。 建议：现配现用，若无条件，可分装保存。 长期保存可能会导致信号衰 减。

2）1×工作液（体外实验用） 浓度 0.5mM，约相当于 150ug/mL。用预热的培养基稀释储存液至 1×。建议：现配现用，若多余，则舍弃。不建议再次使用。

3）15mg/mL 储存液（动物实验用）不含钙离子和镁离子的 DPBS 溶解（因为一方面，钙镁离子通常对胰酶活 性有影响；另外一方面在活体成像实验时，Mg2+是催化荧光素底物氧化的 重要因素，而Ca2+是和腔肠素底物氧化有关的离子），混匀。0.22μM 滤器 过滤除菌。 建议：现配现用，长期保存可能会导致信号衰减。

2、除了 DPBS 外，还可以用其他缓冲液溶解荧光素底物，如生理盐水 Nacl 等。原则上避免溶液中的阳离子对实验造成影响。可参考相关文献操作。

[1] Gu Y, Wang Y, He L, et al. Circular RNA circIPO11 drives self-renewal of liver cancer initiating cells via Hedgehog signaling. Mol Cancer. 2021;20(1):132. Published 2021 Oct 14. doi:10.1186/s12943-021-01435-2(IF:27.401)
[2] Huang K, Liang Q, Zhou Y, et al. A Novel Allosteric Inhibitor of Phosphoglycerate Mutase 1 Suppresses Growth and Metastasis of Non-Small-Cell Lung Cancer [published correction appears in Cell Metab. 2021 Jan 5;33(1):223]. Cell Metab. 2019;30(6):1107-1119.e8. doi:10.1016/j.cmet.2019.09.014(IF:22.415)
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[7] Huang X, Qiu M, Wang T, et al. Carrier-free multifunctional nanomedicine for intraperitoneal disseminated ovarian cancer therapy. J Nanobiotechnology. 2022;20(1):93. Published 2022 Feb 22. doi:10.1186/s12951-022-01300-4(IF:10.435)
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产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格（元）

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐

40902ES01

100 mg

1000.00

40902ES02

500 mg

2600.00

40902ES03

1 g

3996.00

40902ES08

5×1 g

14898.00

40902ES09

5 g

14898.00

 

产品简介

 

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

D-荧光素钾盐(D-Luciferin,Potassium Salt) D-虫荧光素钾盐

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素（游离酸），D-荧光素盐（钠盐和钾盐）。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO；后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品信息

 

货号

40902ES01 / 40902ES02 / 40902ES03 / 40902ES08 / 40902ES09

规格

100 mg / 500 mg / 1 g / 5×1 g / 5g

中文名称

D-荧光素钾盐

英文别名称

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt

CAS号

115144-35-9

分子式

C11H7N2O3S2 K

分子量

318.42 g/mol

外观

淡黄色粉末

溶解性

易溶于水（60 mg/mL）

纯度（HPLC）

≥99%

 

组分信息

 

组分名称

40902ES01

40902ES02

40902ES03

40902ES08

40902ES09

D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐

100 mg

500 mg

1 g

5×1 g

5g

 

储存条件

 

-25~-15℃干燥避光储存，有效期1年。

 

使用说明

 

1. 体外生物发光检测

1）用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成30 mg/mL的储存液 (100-200×) ，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

2）用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度。

3）去除细胞培养基。

4）待图像分析前，向细胞内添加荧光素工作液，37℃孵育5-10 min，然后进行图像分析。

 

2. 活体成像分析

1）用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液，混匀。

2）用0.2 µm滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。

3）腹腔注射（i.p.），按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。

4）注射入体内10-15 min（待光信号达到最强稳定平台期）后进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

 

1. 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）仅仅是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid。

2. 注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

3. 如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。

4. 本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件，可对储存液充入氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间长达1年。

5. 在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

7. 本产品仅作科研用途！

 

Ver.CN20231103

Q：荧光虫荧光素（ Firefly Luciferin）、甲虫荧光素（ Beetle Luciferin）和 D-Luciferin 有区别吗？

A：无区别。三者仅仅是不同公司在命名上的差异，均是化合物 (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2

-thiazoline-4-carboxylic acid

Q：该系列产品主要用于哪些应用？

A：除用于活体成像外，荧光素类产品还用于荧光素酶参与的其他应用中，如 体外报告基因检测、微生物/病毒监测、焦磷酸测序等

Q：荧光素钠颜料和 D-荧光素钠盐的区别？

A：荧光素钠颜料：可用于细胞通透性检测，通过检测 OD490 处吸光度值测定 颜料的通透性。 D-荧光素钠盐：用于活体成像和报告基因系统，通过冷发光模块检测，不 需要激发光激发。

Q：荧光素钾盐、钠盐、自由酸区别？

A：三者的区别主要在于： 1）溶解性：盐形式易溶于水，其中钾盐溶解度为 60mg/ml，钠盐溶解度为 100mg/ml。自由酸不易溶于水，可用碳酸氢钠溶液弱碱调节溶解，其 在甲醇中的溶解度为10mg/ml，DMSO 中溶解度为 50mg/ml。 2）毒性方面：盐形式在使用过程中较方便，尤其是在体内成像实验中， 因其能够溶解在水中，反应毒性也会更小些（荧光素是一种由苯丙噻唑和 噻唑羧酸基团组成的低分子量有机化合物，有低毒性）。3）使用效果：无明显差异。在体内实验研究中，选用钾盐使用率较高。

Q：荧光素的纯度对实验有成影响吗？

A：有影响。99%以上的纯度较好。对于 99%纯度的荧光素，有 1%的固体杂质。若是这 1 g 的杂质溶 解在 25ml 的缓冲液中（该稀释比例是进行活体成像实验的标准稀释方法），此时杂质的浓度为 0.4 g/L。假 设杂质的分子量为 1000 g/mol,那么杂质的物质的量浓度为 400 μM，该浓度可能会抑制细胞内某些酶的作 用，并且有可能降低实验效果或对动物产生伤害。

Q：产品稳定性如何？

A：粉末避光保存于-20 或-70℃，有效期至少 1 年。

Q：活体成像底物作用原理？

A：D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物。其作用 机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当 荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。2、天然腔肠素（Coelenterazine native）是海肾荧光素酶（Rluc）和 Gaussia 荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物。

Q：推荐仪器？多功能酶标仪能用吗？

A：推荐仪器：1、具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器：如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统，德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。2、多功能酶标仪：需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块（注： 不能用荧光显微镜。）

Q：荧光素是能进入细胞膜吗？

A：荧光素是小分子，水溶性和脂溶性都非常好，很容易穿透细胞膜和血脑屏障

Q：尾静脉注射和腹腔注射哪个好？

A：都可以的。腹腔注射扩散较慢，持续发光长；静脉注射，扩散快，但发光持续时间很短。

Q：100mg可以注射几只小鼠？

A：腹腔注射（i.p.），按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射，20g的C57小鼠为例，每只小鼠检测一次的用量：150 mg/kg×20g=3mg，100mg÷3mg=33只。仅供参考，具体的用量以试剂为准，未加损耗情况。

Q：D-荧光素钾盐，对动物有毒副作用吗？

A：一般情况下，D-荧光素钠盐不会对动物产生毒副作用。

Q：荧光素钾盐，分解率是多少？

A：没有该信息。

 

 

 

 

 

Q：底物的激发波长和发射波长？

A：化学发光，无需激发波长。萤火虫荧光素检测波长是 560nm。海肾荧光素 检测波长是 465 nm。

Q：底物可以进入活细胞中吗？

A：可以通过血脑屏障，胎盘屏障和血液测试屏障，也可以进入活细胞。

Q：荧光素类注射方式和用量？

A：下面建议浓度来源于文献：1）注射方式：可通过腹腔注射或尾静脉注射 2）注射量：科学的方法是根据动力学曲线评估注射剂量。建立最初尝试注射剂量 为：150mg 底物/kg 小鼠体重。因此，购买量可按照上述方法计算：若 10 只小鼠，22 -25g，则需要底物 33 –37.5mg 。

Q：荧光素的发光特性如何？

A：荧光素腹腔注射老鼠后约 3 min 后，能够表达荧光素酶的细胞开始发光，10 min 后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约 10 – 15 min 后开始衰减，可在注射后 10 -15 min 内检测。仅供参考，建议预实验建立荧光素酶 动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期

Q：活体成像实验，无效果的原因？

A：成功进行活体成像实验需要以下条件：目的组织或细胞表达荧光素酶基因；荧光素底物注射成功； 依赖于发光部位的组织厚度。若实验不成功，可从上述因素查找，荧光素酶基因是否表达，荧光素底物是否未正确注射，及发光部位较深等

Q：荧光素钾（钠）盐溶液如何配制？必须用不含钙离子和镁离 子的 DPBS 溶解吗？

A：1、下面建议浓度来源于文献：

1）储备液（体外实验用） 浓度 100mM，约相当于 30mg/mL。用无菌蒸馏水溶解。 建议：现配现用，若无条件，可分装保存。 长期保存可能会导致信号衰 减。

2）1×工作液（体外实验用） 浓度 0.5mM，约相当于 150ug/mL。用预热的培养基稀释储存液至 1×。建议：现配现用，若多余，则舍弃。不建议再次使用。

3）15mg/mL 储存液（动物实验用）不含钙离子和镁离子的 DPBS 溶解（因为一方面，钙镁离子通常对胰酶活 性有影响；另外一方面在活体成像实验时，Mg2+是催化荧光素底物氧化的 重要因素，而Ca2+是和腔肠素底物氧化有关的离子），混匀。0.22μM 滤器 过滤除菌。 建议：现配现用，长期保存可能会导致信号衰减。

2、除了 DPBS 外，还可以用其他缓冲液溶解荧光素底物，如生理盐水 Nacl 等。原则上避免溶液中的阳离子对实验造成影响。可参考相关文献操作。

[1] Gu Y, Wang Y, He L, et al. Circular RNA circIPO11 drives self-renewal of liver cancer initiating cells via Hedgehog signaling. Mol Cancer. 2021;20(1):132. Published 2021 Oct 14. doi:10.1186/s12943-021-01435-2(IF:27.401)
[2] Huang K, Liang Q, Zhou Y, et al. A Novel Allosteric Inhibitor of Phosphoglycerate Mutase 1 Suppresses Growth and Metastasis of Non-Small-Cell Lung Cancer [published correction appears in Cell Metab. 2021 Jan 5;33(1):223]. Cell Metab. 2019;30(6):1107-1119.e8. doi:10.1016/j.cmet.2019.09.014(IF:22.415)
[3] Dong X, Cheng R, Zhu S, et al. A Heterojunction Structured WO2.9-WSe2 Nanoradiosensitizer Increases Local Tumor Ablation and Checkpoint Blockade Immunotherapy upon Low Radiation Dose. ACS Nano. 2020;14(5):5400-5416. doi:10.1021/acsnano.9b08962(IF:14.588)
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[5] Hu J, Su H, Cao H, et al. AUXIN RESPONSE FACTOR7 integrates gibberellin and auxin signaling via interactions between DELLA and AUX/IAA proteins to regulate cambial activity in poplar. Plant Cell. 2022;34(7):2688-2707. doi:10.1093/plcell/koac107(IF:11.277)
[6] Qi P, Huang M, Hu X, et al. A Ralstonia solanacearum effector targets TGA transcription factors to subvert salicylic acid signaling. Plant Cell. 2022;34(5):1666-1683. doi:10.1093/plcell/koac015(IF:11.277)
[7] Huang X, Qiu M, Wang T, et al. Carrier-free multifunctional nanomedicine for intraperitoneal disseminated ovarian cancer therapy. J Nanobiotechnology. 2022;20(1):93. Published 2022 Feb 22. doi:10.1186/s12951-022-01300-4(IF:10.435)
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[23] Kong Y, Feng Z, Chen A, et al. The Natural Flavonoid Galangin Elicits Apoptosis, Pyroptosis, and Autophagy in Glioblastoma. Front Oncol. 2019;9:942. Published 2019 Sep 27. doi:10.3389/fonc.2019.00942(IF:4.137)
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D-荧光素钠盐 荧光素酶底物|D-Luciferin,Sodium Salt

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D-荧光素钠盐 荧光素酶底物|D-Luciferin,Sodium Salt

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-荧光素钠盐 荧光素酶底物|D-Luciferin,Sodium Salt

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）

D-荧光素钠盐；

英文别名（English synonym）

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

CAS号（CAS NO.）

103404-75-7

分子式（Formula）

NaC11H7N2O3S2 · H2O

分子量（Molecular weight）

302.3 g/mol

外观（Appearance）

淡黄色粉末

溶解性（Solubility）

溶于水（高达100 mg/ml）

纯度（Purity）（HPLC）

≥95.0%

 

运输和保存方法

室温运输。-20℃干燥避光保存，有效期2年。

 

使用方法

1．体外生物发光检测
1） 用蒸馏水溶解D-荧光素钠盐，配制成30mg/ml的储存液（200×）。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。
2） 用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150µg/ml）。
3） 去除培养细胞的培养基。
4） 待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。

2．  活体成像分析
1） 用无菌的PBS（w/o Mg2+）或者DPBS（w/o Mg2+）配制D-荧光素钠盐工作液（15mg/ml），0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。

2） 注射量取决于注射方式，具体如下：

注射方式

剂量

静脉注射（25-27gauge针头）

按10µl/g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

腹腔注射（25-27gauge针头）

按10µl /g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射（27gauge针头）

50µl，浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射（pipette）

50µl，浓度为3mg/ml荧光素工作液

3） 注射入体内10-20 min（待光信号达到最强稳定平台期），再进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

1) 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。
2) 本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。
3) 注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220915

 

Q：荧光虫荧光素（ Firefly Luciferin）、甲虫荧光素（ Beetle Luciferin）和 D-Luciferin 有区别吗？

A：无区别。三者仅仅是不同公司在命名上的差异，均是化合物 (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2

-thiazoline-4-carboxylic acid

Q：该系列产品主要用于哪些应用？

A：除用于活体成像外，荧光素类产品还用于荧光素酶参与的其他应用中，如 体外报告基因检测、微生物/病毒监测、焦磷酸测序等

Q：荧光素钠颜料和 D-荧光素钠盐的区别？

A：荧光素钠颜料：可用于细胞通透性检测，通过检测 OD490 处吸光度值测定 颜料的通透性。 D-

荧光素钠盐：用于活体成像和报告基因系统，通过冷发光模块检测，不 需要激发光激发。

Q：荧光素钾盐、钠盐、自由酸区别？

A：三者的区别主要在于： 1）溶解性：盐形式易溶于水，其中钾盐溶解度为 60mg/ml，钠盐溶解度为 100mg/ml。自由酸不易溶于水，可用碳酸氢钠溶液弱碱调节溶解，其 在甲醇中的溶解度为10mg/ml，DMSO 中溶解度为 50mg/ml。 2）毒性方面：盐形式在使用过程中较方便，尤其是在体内成像实验中， 因其能够溶解在水中，反应毒性也会更小些（荧光素是一种由苯丙噻唑和 噻唑羧酸基团组成的低分子量有机化合物，有低毒性）。3）使用效果：无明显差异。在体内实验研究中，选用钾盐使用率较高。

Q：荧光素的纯度对实验有成影响吗？

A：有影响。99%以上的纯度较好。对于 99%纯度的荧光素，有 1%的固体杂质。若是这 1 g 的杂质溶解在25ml 的缓冲液中（该稀释比例是进行活体成像实验的标准稀释方法），此时杂质的浓度为 0.4 g/L。假 设杂质的分子量为 1000 g/mol,那么杂质的物质的量浓度为 400 μM，该浓度可能会抑制细胞内某些酶的作 用，并且有可能降低实验效果或对动物产生伤害。

Q：产品稳定性如何？

A：粉末避光保存于-20 或-70℃，有效期至少 1 年。

 

Q：活体成像底物作用原理？

A：D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物。其作用机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。2、天然腔肠素（Coelenterazine native）是海肾荧光素酶（Rluc）和 Gaussia 荧光素酶（Gluc） 等多种荧光素酶的作用底物。

Q：推荐仪器？多功能酶标仪能用吗？

A：推荐仪器：1、具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器：如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统，德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。2、多功能酶标仪：需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块（注： 不能用荧光显微镜。）

Q：底物的激发波长和发射波长？

A：化学发光，无需激发波长。萤火虫荧光素发射波长是 560nm。海肾荧光素发射波长是 465 nm。

Q：底物可以进入活细胞中吗？

A：可以通过血脑屏障，胎盘屏障和血液测试屏障，也可以进入活细胞。

Q：荧光素类注射方式和用量？

A：下面建议浓度来源于文献：1）注射方式：可通过腹腔注射或尾静脉注射 2）注射量：科学的方法是根据动力学曲线评估注射剂量。建立最初尝试注射剂量为：150mg 底物/kg 小鼠体重。因此，购买量可按照上述方法计算：若 10 只小鼠，22 –25g，则需要底物 33 –37.5mg 。

Q：荧光素的发光特性如何？

A：荧光素腹腔注射老鼠后约 3 min 后，能够表达荧光素酶的细胞开始发光，10 min 后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约 10 – 15 min 后开始衰减，可在注射后 10 -15 min 内检测。仅供参考，建议预实验建立荧光素酶 动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期

Q：活体成像实验，无效果的原因？

A：成功进行活体成像实验需要以下条件：目的组织或细胞表达荧光素酶基因；荧光素底物注射成功； 依赖于发光部位的组织厚度。若实验不成功，可从上述因素查找，荧光素酶基因是否表达，荧光素底物是否未正确注射，及发光部位较深等

Q：荧光素钾（钠）盐溶液如何配制？必须用不含钙离子和镁离 子的 DPBS 溶解吗？

A：1、下面建议浓度来源于文献：

1）储备液（体外实验用） 浓度 100mM，约相当于 30mg/mL。用无菌蒸馏水溶解。 建议：现配现用，若无条件，可分装保存。 长期保存可能会导致信号衰 减。

2）1×工作液（体外实验用） 浓度 0.5mM，约相当于 150ug/mL。用预热的培养基稀释储存液至 1×。建议：现配现用，若多余，则舍弃。不建议再次使用。

3）15mg/mL 储存液（动物实验用）不含钙离子和镁离子的 DPBS 溶解（因为一方面，钙镁离子通常对胰酶活 性有影响；另外一方面在活体成像实验时，Mg2+是催化荧光素底物氧化的 重要因素，而Ca2+是和腔肠素底物氧化有关的离子），混匀。0.22μM 滤器 过滤除菌。 建议：现配现用，长期保存可能会导致信号衰减。

  1. 除了 DPBS 外，还可以用其他缓冲液溶解荧光素底物，如生理盐水 Nacl 等。原则上避免溶液中的阳离子对实验造成影响。可参考相关文献操作。

Q：D-荧光素钠盐，对动物有毒副作用吗？

A：一般情况下，D-荧光素钠盐不会对动物产生毒副作用。

Q：荧光素钠盐，分解率是多少？

A：没有该信息。

 

 

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产品描述

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

D-荧光素钠盐 荧光素酶底物|D-Luciferin,Sodium Salt

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）

D-荧光素钠盐；

英文别名（English synonym）

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

CAS号（CAS NO.）

103404-75-7

分子式（Formula）

NaC11H7N2O3S2 · H2O

分子量（Molecular weight）

302.3 g/mol

外观（Appearance）

淡黄色粉末

溶解性（Solubility）

溶于水（高达100 mg/ml）

纯度（Purity）（HPLC）

≥95.0%

 

运输和保存方法

室温运输。-20℃干燥避光保存，有效期2年。

 

使用方法

1．体外生物发光检测
1） 用蒸馏水溶解D-荧光素钠盐，配制成30mg/ml的储存液（200×）。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。
2） 用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150µg/ml）。
3） 去除培养细胞的培养基。
4） 待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析。

2．  活体成像分析
1） 用无菌的PBS（w/o Mg2+）或者DPBS（w/o Mg2+）配制D-荧光素钠盐工作液（15mg/ml），0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。

2） 注射量取决于注射方式，具体如下：

注射方式

剂量

静脉注射（25-27gauge针头）

按10µl/g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

腹腔注射（25-27gauge针头）

按10µl /g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液

肌肉注射（27gauge针头）

50µl，浓度为1-2mg/ml荧光素工作液

鼻内注射（pipette）

50µl，浓度为3mg/ml荧光素工作液

3） 注射入体内10-20 min（待光信号达到最强稳定平台期），再进行成像分析。

注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

1) 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。
2) 本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。
3) 注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220915

 

Q：荧光虫荧光素（ Firefly Luciferin）、甲虫荧光素（ Beetle Luciferin）和 D-Luciferin 有区别吗？

A：无区别。三者仅仅是不同公司在命名上的差异，均是化合物 (S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2

-thiazoline-4-carboxylic acid

Q：该系列产品主要用于哪些应用？

A：除用于活体成像外，荧光素类产品还用于荧光素酶参与的其他应用中，如 体外报告基因检测、微生物/病毒监测、焦磷酸测序等

Q：荧光素钠颜料和 D-荧光素钠盐的区别？

A：荧光素钠颜料：可用于细胞通透性检测，通过检测 OD490 处吸光度值测定 颜料的通透性。 D-

荧光素钠盐：用于活体成像和报告基因系统，通过冷发光模块检测，不 需要激发光激发。

Q：荧光素钾盐、钠盐、自由酸区别？

A：三者的区别主要在于： 1）溶解性：盐形式易溶于水，其中钾盐溶解度为 60mg/ml，钠盐溶解度为 100mg/ml。自由酸不易溶于水，可用碳酸氢钠溶液弱碱调节溶解，其 在甲醇中的溶解度为10mg/ml，DMSO 中溶解度为 50mg/ml。 2）毒性方面：盐形式在使用过程中较方便，尤其是在体内成像实验中， 因其能够溶解在水中，反应毒性也会更小些（荧光素是一种由苯丙噻唑和 噻唑羧酸基团组成的低分子量有机化合物，有低毒性）。3）使用效果：无明显差异。在体内实验研究中，选用钾盐使用率较高。

Q：荧光素的纯度对实验有成影响吗？

A：有影响。99%以上的纯度较好。对于 99%纯度的荧光素，有 1%的固体杂质。若是这 1 g 的杂质溶解在25ml 的缓冲液中（该稀释比例是进行活体成像实验的标准稀释方法），此时杂质的浓度为 0.4 g/L。假 设杂质的分子量为 1000 g/mol,那么杂质的物质的量浓度为 400 μM，该浓度可能会抑制细胞内某些酶的作 用，并且有可能降低实验效果或对动物产生伤害。

Q：产品稳定性如何？

A：粉末避光保存于-20 或-70℃，有效期至少 1 年。

 

Q：活体成像底物作用原理？

A：D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物。其作用机制是在 ATP 和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。2、天然腔肠素（Coelenterazine native）是海肾荧光素酶（Rluc）和 Gaussia 荧光素酶（Gluc） 等多种荧光素酶的作用底物。

Q：推荐仪器？多功能酶标仪能用吗？

A：推荐仪器：1、具有生物化学发光检测模块。荧光素产生的光可以被光度计或闪烁计数器检测。常见的活体成像仪器：如 IVIS® Lumina 小动物活体成像系统，德国 Bruker 公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小动物活体成像仪。2、多功能酶标仪：需要和仪器厂家确认是否具体生物化学发光检测模块（注： 不能用荧光显微镜。）

Q：底物的激发波长和发射波长？

A：化学发光，无需激发波长。萤火虫荧光素发射波长是 560nm。海肾荧光素发射波长是 465 nm。

Q：底物可以进入活细胞中吗？

A：可以通过血脑屏障，胎盘屏障和血液测试屏障，也可以进入活细胞。

Q：荧光素类注射方式和用量？

A：下面建议浓度来源于文献：1）注射方式：可通过腹腔注射或尾静脉注射 2）注射量：科学的方法是根据动力学曲线评估注射剂量。建立最初尝试注射剂量为：150mg 底物/kg 小鼠体重。因此，购买量可按照上述方法计算：若 10 只小鼠，22 –25g，则需要底物 33 –37.5mg 。

Q：荧光素的发光特性如何？

A：荧光素腹腔注射老鼠后约 3 min 后，能够表达荧光素酶的细胞开始发光，10 min 后强度达到稳定的最高点，在最高点持续约 10 – 15 min 后开始衰减，可在注射后 10 -15 min 内检测。仅供参考，建议预实验建立荧光素酶 动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期

Q：活体成像实验，无效果的原因？

A：成功进行活体成像实验需要以下条件：目的组织或细胞表达荧光素酶基因；荧光素底物注射成功； 依赖于发光部位的组织厚度。若实验不成功，可从上述因素查找，荧光素酶基因是否表达，荧光素底物是否未正确注射，及发光部位较深等

Q：荧光素钾（钠）盐溶液如何配制？必须用不含钙离子和镁离 子的 DPBS 溶解吗？

A：1、下面建议浓度来源于文献：

1）储备液（体外实验用） 浓度 100mM，约相当于 30mg/mL。用无菌蒸馏水溶解。 建议：现配现用，若无条件，可分装保存。 长期保存可能会导致信号衰 减。

2）1×工作液（体外实验用） 浓度 0.5mM，约相当于 150ug/mL。用预热的培养基稀释储存液至 1×。建议：现配现用，若多余，则舍弃。不建议再次使用。

3）15mg/mL 储存液（动物实验用）不含钙离子和镁离子的 DPBS 溶解（因为一方面，钙镁离子通常对胰酶活 性有影响；另外一方面在活体成像实验时，Mg2+是催化荧光素底物氧化的 重要因素，而Ca2+是和腔肠素底物氧化有关的离子），混匀。0.22μM 滤器 过滤除菌。 建议：现配现用，长期保存可能会导致信号衰减。

  1. 除了 DPBS 外，还可以用其他缓冲液溶解荧光素底物，如生理盐水 Nacl 等。原则上避免溶液中的阳离子对实验造成影响。可参考相关文献操作。

Q：D-荧光素钠盐，对动物有毒副作用吗？

A：一般情况下，D-荧光素钠盐不会对动物产生毒副作用。

Q：荧光素钠盐，分解率是多少？

A：没有该信息。

 

 

[1] Guo Y, Guo Y, Chen C, et al. Circ3823 contributes to growth, metastasis and angiogenesis of colorectal cancer: involvement of miR-30c-5p/TCF7 axis. Mol Cancer. 2021;20(1):93. Published 2021 Jun 25. doi:10.1186/s12943-021-01372-0(IF:27.401)
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[15] Geng Y, Duan H, Xu L, et al. BMP-2 and VEGF-A modRNAs in collagen scaffold synergistically drive bone repair through osteogenic and angiogenic pathways. Commun Biol. 2021;4(1):82. Published 2021 Jan 19. doi:10.1038/s42003-020-01606-9(IF:6.268)
[16] Qiu J , Peng P , Xin M , et al. ZBTB20-mediated titanium particle-induced peri-implant osteolysis by promoting macrophage inflammatory responses. Biomater Sci. 2020;8(11):3147-3163. doi:10.1039/d0bm00147c(IF:6.183)
[17] Zhou C, Wang G, Jing W, Tan X, Guo H. Anticancer Properties and Mechanisms of Singly-Protonated Dehydronorcantharidin Silver Coordination Polymer in a Bladder Cancer Model. Front Pharmacol. 2021;12:618668. Published 2021 Feb 23. doi:10.3389/fphar.2021.618668(IF:5.811)
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[22] Chen G, Fan XY, Zheng XP, Jin YL, Liu Y, Liu SC. Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells ameliorate insulin resistance via PTEN-mediated crosstalk between the PI3K/Akt and Erk/MAPKs signaling pathways in the skeletal muscles of db/db mice. Stem Cell Res Ther. 2020;11(1):401. Published 2020 Sep 16. doi:10.1186/s13287-020-01865-7(IF:5.116)
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D-萤火虫荧光素游离酸 荧光素酶底物|D-Luciferin Firefly,Free Acid

发表于由

D-萤火虫荧光素游离酸 荧光素酶底物|D-Luciferin Firefly,Free Acid

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

 D-萤火虫荧光素游离酸 荧光素酶底物|D-Luciferin Firefly,Free Acid 

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析、报告基因分析、高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）

D-萤火虫荧光素游离酸；

英文别名（English synonym）

S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid

CAS号（CAS NO.）

2591-17-5

分子式（Formula）

C11H8N2O3S2

分子量（Molecular weight）

280.33 g/mol

外观（Appearance）

类白色至浅黄色粉末

溶解性（Solubility）

本品难溶于水，可加入稀碱促进其溶解。

纯度（Purity）（HPLC）

≥95%

 

运输和保存方法

冰袋运输；-20℃干燥避光保存；有效期一年。

 

使用方法

1 体外生物发光检测

1）用稀碱（如NaOH，KOH溶液）溶解D-荧光素，游离酸，配制成30 mg/mL的储存液（200×），并调整pH至7.4。混匀

 

后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。

【注】：如果有沉淀发生则需要调整pH至更高直至完全溶解。之后可以重新用酸性溶液来中和，调整至pH7.4。

2）用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150 µg/mL）。

3）去除培养细胞的培养基直至无残留。

4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。

2 活体成像分析

1）用稀碱（如NaOH，KOH溶液）配制D-荧光素工作液（15 mg/mL），并调节pH至7.4，0.2µm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。

2）注射量取决于注射方式，具体如下：

注射方式

剂量

静脉注射（25-27gauge 针头）

按 10 µL/g 体重浓度，加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

腹腔注射（25-27gauge 针头）

按 10 µL/g 体重浓度，加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

肌肉注射（27gauge 针头）

50 µL，浓度为1-2 mg/mL 荧光素工作液

鼻内注射（pipette）

50 µL，浓度为3 mg/mL 荧光素工作液

3）注射入体内10-20 min（待光信号达到最强稳定平台期），再进行成像分析。

【注】：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

1）本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-

carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。

2）本品保存和操作的过程中都要避光。另外储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长，长达1年。

3）注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

 

HB220209

 

Q: 怎么配置这个无菌的可注射动物体内且 ph=7.4 的稀碱？

A: 过滤，。

 

[1] Ji C, Zhao M, Wang C, et al. Biocompatible Tantalum Nanoparticles as Radiosensitizers for Enhancing Therapy Efficacy in Primary Tumor and Metastatic Sentinel Lymph Nodes [published online ahead of print, 2022 Jun 6]. ACS Nano. 2022;10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z, Tian W, Ye Y, et al. Hsp90 induces Acsl4-dependent glioma ferroptosis via dephosphorylating Ser637 at Drp1. Cell Death Dis. 2022;13(6):548. Published 2022 Jun 13. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Zhang L, Sun Y, Zhang XX, et al. Comparison of CD146 +/- mesenchymal stem cells in improving premature ovarian failure. Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):267. Published 2022 Jun 21. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ, He W, Wang XB, et al. DNMT1-maintained hypermethylation of Krüppel-like factor 5 involves in the progression of clear cell renal cell carcinoma. Cell Death Dis. 2017;8(7):e2952. Published 2017 Jul 27. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P, Wu L, Cao M, et al. Identification of MBW Complex Components Implicated in the Biosynthesis of Flavonoids in Woodland Strawberry. Front Plant Sci. 2021;12:774943. Published 2021 Nov 8. doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] Bai S, Tao R, Yin L, et al. Two B-box proteins, PpBBX18 and PpBBX21, antagonistically regulate anthocyanin biosynthesis via competitive association with Pyrus pyrifolia ELONGATED HYPOCOTYL 5 in the peel of pear fruit. Plant J. 2019;100(6):1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX, Wu TT, Ding CH, Zhou PC, Chen ZZ, Gou JY. SAHH and SAMS form a methyl donor complex with CCoAOMT7 for methylation of phenolic compounds. Biochem Biophys Res Commun. 2019;520(1):122-127. doi:10.1016/j.bbrc.2019.09.101(IF:2.705)

产品描述

D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

 D-萤火虫荧光素游离酸 荧光素酶底物|D-Luciferin Firefly,Free Acid 

D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析、报告基因分析、高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。

 

产品性质

中文别名（Chinese synonym）

D-萤火虫荧光素游离酸；

英文别名（English synonym）

S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid

CAS号（CAS NO.）

2591-17-5

分子式（Formula）

C11H8N2O3S2

分子量（Molecular weight）

280.33 g/mol

外观（Appearance）

类白色至浅黄色粉末

溶解性（Solubility）

本品难溶于水，可加入稀碱促进其溶解。

纯度（Purity）（HPLC）

≥95%

 

运输和保存方法

冰袋运输；-20℃干燥避光保存；有效期一年。

 

使用方法

1 体外生物发光检测

1）用稀碱（如NaOH，KOH溶液）溶解D-荧光素，游离酸，配制成30 mg/mL的储存液（200×），并调整pH至7.4。混匀

 

后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。

【注】：如果有沉淀发生则需要调整pH至更高直至完全溶解。之后可以重新用酸性溶液来中和，调整至pH7.4。

2）用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150 µg/mL）。

3）去除培养细胞的培养基直至无残留。

4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。

2 活体成像分析

1）用稀碱（如NaOH，KOH溶液）配制D-荧光素工作液（15 mg/mL），并调节pH至7.4，0.2µm 滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。

2）注射量取决于注射方式，具体如下：

注射方式

剂量

静脉注射（25-27gauge 针头）

按 10 µL/g 体重浓度，加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

腹腔注射（25-27gauge 针头）

按 10 µL/g 体重浓度，加入相应体积的 15 mg/mL 荧光素工作液

肌肉注射（27gauge 针头）

50 µL，浓度为1-2 mg/mL 荧光素工作液

鼻内注射（pipette）

50 µL，浓度为3 mg/mL 荧光素工作液

3）注射入体内10-20 min（待光信号达到最强稳定平台期），再进行成像分析。

【注】：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项

1）本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-

carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。

2）本品保存和操作的过程中都要避光。另外储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长，长达1年。

3）注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

 

HB220209

 

Q: 怎么配置这个无菌的可注射动物体内且 ph=7.4 的稀碱？

A: 过滤，。

 

[1] Ji C, Zhao M, Wang C, et al. Biocompatible Tantalum Nanoparticles as Radiosensitizers for Enhancing Therapy Efficacy in Primary Tumor and Metastatic Sentinel Lymph Nodes [published online ahead of print, 2022 Jun 6]. ACS Nano. 2022;10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z, Tian W, Ye Y, et al. Hsp90 induces Acsl4-dependent glioma ferroptosis via dephosphorylating Ser637 at Drp1. Cell Death Dis. 2022;13(6):548. Published 2022 Jun 13. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Zhang L, Sun Y, Zhang XX, et al. Comparison of CD146 +/- mesenchymal stem cells in improving premature ovarian failure. Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):267. Published 2022 Jun 21. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ, He W, Wang XB, et al. DNMT1-maintained hypermethylation of Krüppel-like factor 5 involves in the progression of clear cell renal cell carcinoma. Cell Death Dis. 2017;8(7):e2952. Published 2017 Jul 27. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P, Wu L, Cao M, et al. Identification of MBW Complex Components Implicated in the Biosynthesis of Flavonoids in Woodland Strawberry. Front Plant Sci. 2021;12:774943. Published 2021 Nov 8. doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] Bai S, Tao R, Yin L, et al. Two B-box proteins, PpBBX18 and PpBBX21, antagonistically regulate anthocyanin biosynthesis via competitive association with Pyrus pyrifolia ELONGATED HYPOCOTYL 5 in the peel of pear fruit. Plant J. 2019;100(6):1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX, Wu TT, Ding CH, Zhou PC, Chen ZZ, Gou JY. SAHH and SAMS form a methyl donor complex with CCoAOMT7 for methylation of phenolic compounds. Biochem Biophys Res Commun. 2019;520(1):122-127. doi:10.1016/j.bbrc.2019.09.101(IF:2.705)

registech D-荧光素钾盐（D-luciferin potassium salt）

发表于由

registech D-荧光素钾盐（D-luciferin potassium salt）

简要描述：registech D-荧光素钾盐（D-luciferin potassium salt）订购信息

详细介绍

产品咨询

 registech, D-荧光素钾,D-luciferin potassium,registech代理，registech产品，registech中国，registech中国代理，registech荧光素钾盐代理

 

D-荧光素钾（D-luciferin potassium）

Description/产品描述
D-Luciferin 作为荧光素酶的底物，存在于多种发光生物体中。在ATP和荧光素酶的催化作用下，Luciferin被氧化，产生蓝绿色的光（560nm），当底物过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关。编码荧光素酶的Luc基因是植物、细菌、哺乳动物细胞的常用报告基因。由于没有背景干扰，因此可以很容易地检测出低至 0.02 pg水平的荧光素酶。

Quality / 质量

  1. 高纯度（>99%）
  2. 每批产品均经过发光效率检测
  3. 生物工程合成，生物安全性高
  4. 专业手性化合物合成，GMP工厂生产，含量高，背景干扰低

Storage / 贮存 
-20℃保存，4℃运输 

Application / 应用
1.In vitro分析 
2.In vivo分析（活体成像）
3.高灵敏度ATP分析

Protocol for In vivo analysis / 活体成像分析方法 
1．用DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配置D-luciferin工作液（15mg/mL）* ，0.2 um滤膜无菌过滤。 
2．注射量：10μL/g的体重，如10 g重小鼠，注射100μL储备液（1.5 mg Luciferin）。 
3．腹腔注射 （i.p.） 10-15分钟后，上机进行图像分析。

Protocol for In vitro analysis / 体外分析方法 
1. 用无菌水配置200×储备液（30mg/ml）*，立即使用，或-20℃保存。
2. 用预热好的*培养基1∶200稀释Luciferin储备液，配置工作液（150μg/mL）。 
3. 去除培养细胞的培养基。 
4. 进行图像分析前，向细胞中添加1×的Luciferin工作液，进行图像分析**。

* ：溶解D-luciferin时要*。 
**：在图像分析前，将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。 

Brand/品牌 
SYNCHEM

Order / 订购

Product Size Regis  Price
D-Luciferin Potassium Salt 100 mg 1-360221-200 901
D-Luciferin Potassium Salt 1 g 1-360222-200 4913
D-Luciferin Potassium Salt 10 x 100 mg 1-360223-200 5083
D-Luciferin Potassium Salt 10 g 1-360224-200 44030
D-Luciferin Potassium Salt 10 x 1 g 1-360225-200 44030
D-Luciferin Potassium Salt 4 x 25 mg 1-360226-200 1105

 

Luciferin potassium salt 说明书

发表于由

Luciferin potassium salt (D-荧光素钾盐)说明书

产品货号

货号

规格

价格

78LUCA1001-25mg

25mg

￥130.00

78LUCA1001-100mg

100mg

￥700.00

78LUCA1001-1g

1g

￥2,500.00

78LUCA1001-10×1g

10×1g

￥22,000.00

 

保存与运输条件

冰袋运输，-20℃避光保存，有效期1年。

产品简介

D-荧光素是zui流行和多功能的生物发光底物。萤火虫荧光素酶/荧光素生物发光系统存在于萤火虫（Photinus pyralis）和其他几种甲虫中。荧光素酶通过二氧杂环丁酮中间体氧化ATP活化的荧光素。萤火虫荧光素酶通过荧光素的ATP依赖性氧化产生光。来自该反应的560nm化学发光在数秒内达到峰值，当荧光素和ATP过量存在时，光输出与荧光素酶活性成比例。萤火虫荧光素酶长期以来与抗体结合，并在荧光素作为检测底物的免疫测定中用作标记物。与HRP和碱性磷酸酶相比，荧光素酶对化学修饰的耐受性较差。该酶的一个特别优点是除了其高灵敏度之外，在哺乳动物组织中存在低内源荧光素酶活性。荧光素酶的另一个重要用途是卫生监测领域。荧光素酶/荧光素系统可用于检测污染，因为存在于所有生物体中的ATP需要产生发光。这种ATP生物发光的主要应用是通过测试食品加工厂中的表面来确定质量，以确定是否存在设备或产品的污染。

操作方法

以下方案是钾盐和钠盐制备的一个例子，它可以适用于大多数细胞类型和体内动物用途。

1.用于体外生物发光图像测定的实施方案

1.1在无菌水中制备100mM（100-200X）荧光素原液。混合均匀。立即使用，或单独使用等分试样，并储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

1.2在预热的组织培养基中制备0.5-1mM D-荧光素的工作溶液。

1.3从培养细胞中分离培养基。

1.4将荧光素工作溶液加入细胞中，并在成像前将细胞在37°C孵育5-10分钟。

2.用于体内生物发光图像测定的实施方案

2.1在DPBS中制备15mg / mL荧光素储备溶液，不含Mg2+和Ca2+。 混合均匀。

2.2过滤器通过0.2μm过滤器过滤灭菌溶液。立即使用，或单独使用等分试样，并储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

2.3在动物体重150mg / kg（或10μL/ g荧光素储备溶液）成像qian10-15分钟腹膜内（i.p.）注射荧光素。

注意：应对每种动物模型进行荧光素的动力学研究，以确定峰值信号时间。

3.荧光素报告分析分子测定的实施方案

3.1在无菌水中制备100mM荧光素储备溶液。 立即使用，或单独使用等分试样，并储存在-20°C，避免冻融循环，避免暴露在光线下。

3.2制备1mM D-荧光素的工作溶液，其中含有3mM ATP，1mM DTT和15mM MgSO 4的25mM tricine缓冲液，pH7.8。

3.3将5-10μl细胞裂解液移入微孔板中。使用不含裂解液的裂解试剂或缓冲液作为空白。

3.4根据制造商的说明，使用荧光素工作溶液的普利光度计。

3.5注入200μl荧光素工作溶液，无延迟，10秒积分时间。

注意事项

D-荧光素钾盐溶于无菌水和缓冲液，溶解度可高达25mg/mL。一般使用浓度为3-15 mg/mL。溶液的pH值、溶液中的氧气和保存时间对其保存过程中的稳定性非常重要。当溶液的pH<6.5（发生水解作用）或>7.5（发生消旋化作用，D型转化为L型）的情况下，D-荧光素钾盐相对不稳定。如果溶液中存在少量的氧气，将加速D-荧光素钾的降解速度。储备溶液可以在不含ATP的水中制备，并在-20°C下避光储存。必须用适当的碱中和游离酸溶解。

D-荧光素可与任何现有的文献或ATP分析系统一起使用。

如果检测ATP，请戴上手套并使用无ATP容器，尽量减少所有可能的ATP污染源。仅使用无菌无ATP水和试剂。使用高压灭菌水进行所有试剂制备。