k-assay KT-7519说明书

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Human Apoptosis InducingFactor (AIF) ELISA

诱导人凋亡
因子(AIF)ELISA
用于定量测定血清、血浆中的人类AIF,
组织匀浆和其他生物液体
货号:KT-7519

预期用途
该试剂盒是一种夹心酶免疫分析法,用于体外定量测定人体AIF
血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体。仅供研究使用。不适用于
诊断程序。

需要但未提供的材料
1.带450±10 nm滤光片的微孔板阅读器。
2.单通道或多通道移液管,具有高精度和一次性j端。
3.微量离心管。
4.去离子水或蒸馏水。
5.用于吸干微孔板的吸水纸。
6.洗涤液容器。
7.0.01 mol/L(或1×)磷酸盐缓冲盐水(PBS),pH值7.0-7.2。

 

kamiya KT-354 现货

世界*实验材料供应商 KAMIYA上海金畔生物为其中国代理, KAMIYA在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,KAMIYA就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

KAMIYA中国代理KAMIYA上海代理, KAMIYA北京代理,KAMIYA广东代理, KAMIYA江苏代理KAMIYA湖北代理,KAMIYA天津,KAMIYA黑龙江代理,KAMIYA内蒙古代理,KAMIYA吉林代理,KAMIYA福建代理, KAMIYA江苏代理,KAMIYA浙江代理, KAMIYA四川代理,

 

Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美国生命科学技术公司,总部位于美国加利福尼亚州。本公司致力于为生命科学研究和医药机构提供高质量的具有创新性的基础研究和诊断试剂。

公司的zui早的生命科学研究产品是用于信号转导研究用蛋白酶抑制剂staurosporine和K252a。1990年,KAMIYA*家在美国推出凋亡研究的重要抗体anti-Fas单克隆抗体。1997年推出了一个完整的临床诊断和研究用免疫检测产品线,生产基于免疫投射比浊法(immunoturbidimetric technology)的脂质测定、凝血、炎症、糖尿病、营养评估及血脂蛋白测定试剂及试剂盒。公司研发的K-ASSAY试剂无需搅拌、溶解和稀释样本等繁杂程序。

如今,KAMIYA供应的生命科学系列产品包括世界上zui大的ELISA试剂盒产品线,上万种人类的生物标志物分析的产品、酶抑制剂、单抗、多抗。产品广泛应用于细胞凋亡、多抗药性、氧化/ DNA损坏和修复、骨生物学、癌症、心脏健康、炎症、压力与应激、肥胖和糖尿病等研究领域。

zui近,KAMIYA又推出了创新性的基于K-ASSAY化学检测试剂的胰岛素、D-二聚体(D-Dimer),Factor XIII,纤维蛋白原降解产物(Plasma FDP),血清/尿液FPD及FDP-E(纤维蛋白原降解产物E片段)和总IgE等因子的检测试剂。

KAMIYA现在拥有zui全的血清蛋白免疫检测试剂产品线,为医院、医疗中心、临床实验室、临床参考实验室、研究所等众多机构提供专业的临床诊断和科研试剂产品。

Animal Biomarker / Preclinical Assay Kits

动物生物标志物/临床前检测试剂盒

 

Rat Microalbumin ELISA

货号: KT-354  规格:96 tests

描述

用于测量大鼠血清,血浆或尿液中的白蛋白。测定范围:6.25 – 400 ng / mL。包括校准器和控制。 

货号 品名 规格 品牌
KT-354 Rat Microalbumin ELISA 1 kit kamiya

kamiya KT-354 现货供应

 

 

epitopediagnostics KT-811说明书

epitopediagnostics KT-811说明书

人胃蛋白酶原I ELISA试剂盒

 

产品手册(.pdf)

描述

该ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒用于定量测定血清中人胃蛋白酶原I的水平。胃蛋白酶原I水平是确定分泌酸的胃粘膜功能状态的有用工具。

此胃蛋白酶原I ELISA试剂盒可用于体外诊断。

背景

胃蛋白酶原由具有375个氨基酸残基的单条多肽链组成,平均分子量为42 kDa。胃蛋白酶原I是在胃的Cheif细胞和粘液颈细胞上合成的,而胃蛋白酶原II也是由胃窦的透明粘液细胞等产生的。测定胃蛋白酶原I和II的临床应用可用于诊断严重的萎缩性胃炎和胃癌症。有人提出,测定血清胃蛋白酶原可作为“血清活检”,以预测萎缩性胃炎或浅表性胃炎的存在。

萎缩性胃炎:已发现血清胃蛋白酶原I含量低于20 ng / ml时对严重的萎缩性胃炎具有高度特异性。还观察到,在这种情况下,血清胃蛋白酶原I水平随着粘膜损伤严重程度的增加而下降。晚期胃萎缩性胃炎的血清胃蛋白酶原I水平的诊断敏感性和特异性分别约为92%和90%。另一方面,发现恶性贫血和萎缩性胃炎患者血清胃蛋白酶原I水平降低与胃蛋白酶原II水平正常或升高有关。因此,胃蛋白酶原I /胃蛋白酶原II的比例明显低于浅表性胃炎或正常残留粘膜的人。

胃癌:胃癌患者的血清胃蛋白酶原I水平低,发生率高三倍。其他研究得出的结论是,血清胃蛋白酶原I含量低可能会发现肠胃癌风险增加的人群。

十二指肠溃疡:血清胃蛋白酶原I水平低可排除十二指肠溃疡的诊断。尽管高胃蛋白酶原I水平在建立该诊断方面的临床应用较少,但高胃泌素血症和高血清素胃蛋白酶原I水平的结合强烈暗示了Zollinger-Ellison综合征的可能性。

相关套件

KT-811人胃蛋白酶原II ELISA试剂盒

 

规格

 

货号

目标:

物种

方法

每套测试

侦查

灵敏度/ LLOD

动态范围

总孵化时间

样品类型

样本量

贮存温度

 

KT-810

胃蛋白酶原I

人类

夹心ELISA

96次测试

比色法

0.1 ng /毫升

0-300 ng / mL

1小时20分钟

血清

25微升

2-8°摄氏度

 

KAMIYA KT-26867说明书

KAMIYA KT-26867说明书

 

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY

人蛋白零点,髓鞘 (MPZ) ELISA

用于定量测定组织匀浆、细胞培养上清液和其他生物体液中的人 MPZ

目录号编号KT-26867

仅供研究使用。不得用于诊断程序。

产品信息

人蛋白零点,髓鞘 (MPZ) ELISA

目录号编号KT-26867

 

Human Protein Zero, Myelin

(MPZ) ELISA

 

预期用途

该试剂盒是一种夹心酶免疫分析法,用于体外定量测定组织匀浆、细胞培养上清液和其他生物体液中的人 MPZ。仅供研究使用。不适用于  用于诊断程序。

 

组件

 

试剂

数量

预包被、即用型 96 孔板条板

1

校准品(冻干)

2

校准品稀释液

1 × 20 mL

检测试剂 A

1 × 120 µL

检测试剂 B

1 × 120 µL

试验稀释剂 A(2X 浓缩液)

1 × 6 mL

试验稀释剂 B(2X 浓缩液)

1 × 6 mL

TMB 底物

1 × 9 mL

终止液

1 × 6 mL

清洗缓冲液(30X 浓缩液)

1 × 20 mL

96 孔封板膜

4

需要但未提供的材料

  • 带有 450±10 nm 滤光片的酶标仪。
  • 精密单通道和多通道移液器和一次性吸头。
  • 用于稀释样品的 Eppendorf 管。
  • 去离子水或蒸馏水。
  • 吸水纸吸干微量滴定板。
  • 清洗液容器。

 

储存

所有试剂应根据小瓶上的标签进行保存。接收后,校准品、检测试剂 A、检测试剂 B 和 96 孔板条应储存在-20 ℃。未使用的试剂条应保存在密封袋中,并提供干燥剂,以尽量减少暴露于潮湿空气中。开封的检测试剂盒将在所示失效日期前保持稳定,前提是其按照上述规定储存。

 

原理

该试剂盒中提供的微量滴定板已用 MPZ 特异性抗体预包被。然后将校准品或样品加入到含有 MPZ 特异性生物素结合抗体制剂的适当微量滴定板孔中。然后,向每个微孔板小孔中加入与辣根过氧化物酶 (HRP) 结合的抗生物素蛋白并孵育。然后向各孔中加入 TMB 底物溶液。只有那些含有 MPZ、生物素偶联抗体和酶偶联抗生物素蛋白的孔才会出现颜色变化。

 

加入硫酸溶液终止酶-底物反应,并采用分光光度法在 450 nm±10 nm 波长处测定颜色变化。然后通过比较样品的 O.D. 值与校准曲线,测定样品中 MPZ 的浓度。

 

 

样本采集和储存

 

组织匀浆

组织匀浆的制备因组织类型而异。对于本试验,在冰冷 PBS (0.02 mol/L,pH 7.0-7.2) 中冲洗组织,以*除去过量血液,并在匀浆前称重。将组织制成小块,置于冰上,用玻璃匀浆器在 5-10 mL PBS 中匀浆化(Micro tissue Grinders 也工作)。用超声细胞破碎仪对所得混悬液进行超声处理或进行两次冻融循环以进一步破碎细胞膜。然后,将匀浆在 5,000 xg 下离心 5 min。立即除去上清液并进行试验,或等分并储存在≤-20 ℃ 下。

 

细胞培养上清液和其他生物体液

以 1,000 xg 离心样品 20 min。立即除去微粒并进行测定,或将样品等分试样储存在-20 ℃ 或-80 ℃ 下备用。避免反复冻融循环。

注:

1. 5 天内使用的样品可在 4 ℃ 下储存,否则样品必须在-20 ℃(≤1 个月)或-80 ℃(≤2 个月)下储存,以避免生物活性损失和污染。

  • 样本溶血会影响结果,因此溶血标本无法检出。
  • 进行分析时,将样品缓慢恢复至室温。

 

试剂制备

使用前,将所有试剂盒组分和样本置于室温 (18-25 ℃) 下。

 

校准品

用 0.1 mL 校准品稀释液复溶校准品,在室温下保持 10 min,轻轻振摇(不要起泡)。储备液中校准品的浓度为 10 ng/mL。请制备 7 支含 0.5 mL 校准品稀释液的试管,并根据下图制备双倍稀释系列。在下一次转移前,充分混合各试管。设置 7 个点的稀释校准品,如 10 ng/mL、5 ng/mL、2.5 ng/mL、1.25 ng/mL、0.625 ng/mL、0.312 ng/mL、0.156 ng/mL,后一个含有校准品稀释液的 EP 管作为空白 (0 ng/mL)。

 

 

 
 

 

 

 

1

2

3

4

5

6

7

8

ng/mL

10

5

2.5

1.25

0.625

0.312

0.156

0

 

试验稀释剂 A 和 B

用 6 mL 去离子水或蒸馏水稀释 6 mL 试验稀释剂 A 或 B 浓缩液 (2X),制备 12 mL 试验稀释剂 A 或 B。制备的工作稀释液不能冷冻。

 

检测试剂 A 和 B

使用前短暂旋转或离心储备检测试剂 A 和检测试剂 B。分别用工作试验稀释剂 A 或 B 稀释至工作浓度 (1:100)。

 

清洗溶液

用 580 mL 去离子水或蒸馏水稀释 20 mL 清洗液浓缩液 (30X),制备 600 mL 清洗液 (1X)。

 

TMB 底物

用无菌吸头吸取所需剂量的溶液,不得将残留溶液再次倒入小瓶中。

 

 
 

 

 

注:

1. 不允许在孔中直接进行连续稀释。

2. 在测定前 15 min 内制备校准品。请勿在 37 ℃ 下直接溶解试剂。

  • 请按照说明仔细复溶校准品或工作检测试剂 A 和 B,避免起泡并轻轻混合,直至晶体*溶解。为尽量减少移液引起的不精密度,应使用小体积并确保移液器经过校准。建议抽吸 10µL 以上,用于一次移液。

4. 复溶的校准品、检测试剂 A 和检测试剂 B 只能使用一次。

5. 如果在清洗溶液浓缩液 (30X) 中形成晶体,则加热至室温并轻轻混合,直至晶体*溶解。

6. 试剂配制用水或容器受污染会影响检测结果。

 

 

样品制备

  • Kamiya Biomedical Company 仅对试剂盒本身负责,不对检测过程中消耗的样本负责。用户应计算整个测试中可能使用的样本数量。请提前预留足够的样本。

 

2. 请在测定前预测浓度。如果这些值不在校准曲线范围内,则用户必须确定其特定实验的样本稀释度。

 

3. 如果手册中未指明样本,则需要进行初步实验以确定试剂盒的有效性。

 

4. 用化学裂解缓冲液制备的组织或细胞提取样品,由于某些化学物质的影响,可能会引起意想不到的 ELISA 结果。

 

  • 由于其他来源的抗原可能与我们试剂盒中使用的抗体不匹配(例如,抗体靶向构象表位而不是线性表位),我们的产品可能无法识别其他生产商的一些天然或重组蛋白。

 

6. 受细胞活性、细胞数量和取样时间等因素的影响,试剂盒可能无法检测细胞培养上清液样本。

 

7. 建议使用未经长期储存的新鲜样本进行试验。否则,这些样品可能发生蛋白质降解和变性,终导致错误的结果。

 

试验程序

  • 测定稀释校准品、空白和样本孔。校准品制备 7 孔,空白制备 1 孔。向适当孔中分别加入 100µL 校准品稀释液(读取试剂制备液)、空白和样本。用封板覆膜覆盖。在 37 ℃ 下孵育 2 小时。

 

2. 清除每个孔中的液体,不要清洗。

 

  • 向各孔中加入 100µL 检测试剂 A 工作溶液。用封板覆膜覆盖后,在 37 ℃ 下孵育 1 小时。

 

  • 吸取溶液,使用喷射瓶、多通道移液器、歧管分配器或自动清洗器用 350µL 1X 清洗液清洗每个孔,静置 1-2 min。通过将平板卡在吸水纸上,*去除所有孔中的剩余液体。重复 3 次。后一次洗涤后,通过抽吸或倾析去除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置平板,在吸水纸上吸干。

 

  • 向各孔中加入 100µL 检测试剂 B 工作溶液。用封板覆膜覆盖后,在 37 ℃ 下孵育 30 min。

 

6. 按照步骤 4 重复抽吸/清洗过程 5 次。

 

  • 向各孔中加入 90µL 底物溶液。用新的封板机盖住。在 37 ℃ 下孵育 15-25 min(不得超过 30 min)。避光保存。加入底物溶液后,液体将变为蓝色。

 

  • 向各孔中加入 50µL 终止液。加入终止液后,液体将变为黄色。轻敲微孔板一侧,混匀液体。如果颜色变化不均匀,轻敲平板以确保充分混合。

 

  • 除去任何一滴水和平板底部的指纹,并确认液体表面无气泡。然后,运行酶标仪,立即在 450 nm 处测定。

注:

  • 试验制备:保留适当数量的条带用于 1 次实验,并从微量滴定板中取出额外的条带。取出的试剂条应重新密封,并在-20 ℃ 下储存,直至试剂盒失效日期。
  • 样本或试剂添加:请使用新鲜制备的校准品。请小心地将样品加入孔中,并轻轻混合以避免起泡。尽可能不要接触孔壁。对于程序中的每个步骤,将试剂或样本添加到测定板的总分配时间不应超过 10 min。这将确保每个移液步骤的运行时间相等,不会中断。尽管不要求,但建议重复检测所有校准品和标本。为避免交叉污染,在每个校准品水平添加之间、样本添加之间和试剂添加之间更换移液器吸头。此外,每种试剂使用单独的储液器。
  • 孵育:为确保结果准确,孵育步骤期间必须适当粘附封板覆膜。在各孵育步骤之间,请勿使微孔长时间处于未覆盖状态。试剂加入微孔板条后,在检测过程中的任何时间都不要让板条变干。必须观察培养时间和温度。
  • 清洗:清洗程序至关重要。每个步骤*去除液体对于良好性能至关重要。后一次清洗后,通过抽吸或倾倒除去任何剩余的清洗液,并除去平板底部的水滴和指纹。清洗不充分将导致精密度较差和吸光度读数假性升高。
  • 反应时间的控制:观察加入 TMB 底物后颜色的变化(如 10 min 观察一次),如颜色过深,应提前加入终止液,避免反应过强而导致吸光度读数不准确。

6. TMB 底物容易被污染。请避光保存。

 

7. 小于 60% 的环境湿度可能会对终性能产生一些影响,因此,建议在该条件下使用湿化器。

 

结果计算

计算各校准品、质控品和样本重复两次读数的平均值,并减去平均零校准品光密度。在 log-log 图形纸上创建校准曲线,y 轴为 MPZ 浓度,x 轴为吸光度。通过校准品点绘制拟合直线,可通过回归分析确定。还建议使用一些 plot 软件。如果样本已被稀释,则从校准曲线中读取的浓度必须乘以稀释因子。

 

性能

检测范围

0.156–10 ng/mL。

用于 ELISA 的校准曲线浓度为 10 ng/mL、5 ng/mL、2.5 ng/mL、1.25 ng/mL、0.625 ng/mL、0.312 ng/mL、0.156 ng/mL。

 

灵敏度

人 MPZ 的小可检测剂量通常低于 0.052 ng/mL。本试验的灵敏度或检测下限 (LLD) 定义为可与零区分的低蛋白浓度。测定零校准品 20 次重复测定的平均 O.D. 值加上 3 个标准差。

 

特异性

该方法检测人 MPZ 具有较高的灵敏度和*的特异性。未观察到人 MPZ 和类似物之间存在显著的交叉反应性或干扰。

注:受当前技能和知识的限制,我们不可能完成人 MPZ 与所有类似物的交叉反应检测,因此交叉反应可能仍然存在。

 

分析方法总结

1. 准备所有试剂、样本和校准品;

2. 向每个孔中加入 100µL 校准品或样本。在 37 ℃ 下孵育 2 小时;

3. 加入 100µL 制备好的检测试剂 A。在 37 ℃ 下孵育 1 小时;

4. 抽吸并清洗 3 次;

5. 加入 100µL 制备好的检测试剂 B。在 37 ℃ 下孵育 30 min;

6. 抽吸并清洗 5 次;

7. 加入 90µL 底物溶液。在 37 ℃ 下孵育 15-25 min;

8. 加入 50µL 终止液。立即在 450 nm 处读数。

 

 

重要说明

1. 终的实验结果将与终端用户的操作技能和实验环境密切相关。请确保有足够的样本可用。

  • 不同批次的试剂盒在检测范围、灵敏度和显色时间上可能略有不同。请严格按照试剂盒随附说明书进行实验,同时使用我们网站的电子版(www.k-assay.com)仅供参考。

3. 请勿将一批试剂盒中的试剂混合或替换为另一批试剂盒。仅使用制造商提供的试剂。

4. 储存和孵育期间,所有试剂均应避免强光照射。所有试剂瓶盖应盖紧,防止微生物蒸发和污染。

 

  • 次开板时孔内可能有一些雾状物质。不会对终试验结果产生任何影响。在需要之前,请勿从储存袋中取出微量滴定板。
  • 试剂制备和上样过程中的错误操作,以及酶标仪参数设置不正确可能导致结果不正确。在 450±10 nm 波长下,带宽为 10 nm 或更低、光密度范围为 0-3 O.D. 或更高的酶标仪可用于吸光度测量。实验前请仔细阅读说明书并调整仪器。
  • 即使是同一个操作员也可能在两个独立的实验中得到不同的结果。为了获得更好的重现性结果,应控制试验中每个步骤的操作。此外,建议在各批次测定前进行初步实验。
  • 每个试剂盒均通过了严格的质量控制检测。然而,由于一些非预期的运输条件或不同的实验室设备,终端用户的结果可能与我们的内部数据不一致。不同批次试剂盒之间的批内方差也可能由上述因素引起。
  • 来自不同生产商的相同产品的试剂盒可能会产生不同的结果,因为我们尚未将我们的产品与其他生产商进行比较。
  • 建议与该试剂盒一起使用的终止液为酸性溶液。使用本材料时,请佩戴眼睛、手、面部和衣物。

 

 

 

仅供研究使用。不得用于诊断程序。

Kamiya KT-642 说明书


Kamiya  KT-642说明书

 

世界*实验材料供应商 KAMIYA上海金畔生物为其中国代理, KAMIYA在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,KAMIYA就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

KAMIYA中国代理, KAMIYA上海代理, KAMIYA北京代理,KAMIYA广东代理, KAMIYA江苏代理KAMIYA湖北代理,KAMIYA天津,KAMIYA黑龙江代理,KAMIYA内蒙古代理,KAMIYA吉林代理,KAMIYA福建代理, KAMIYA江苏代理,KAMIYA浙江代理, KAMIYA四川代理,

 

Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美国生命科学技术公司,总部位于美国加利福尼亚州。本公司致力于为生命科学研究和医药机构提供高质量的具有创新性的基础研究和诊断试剂。

公司的zui早的生命科学研究产品是用于信号转导研究用蛋白酶抑制剂星形孢菌素和K252a。1990年,KAMIYA*家在美国推出凋亡研究的重要抗体anti-Fas单克隆抗体。1997年推出了一个完整的临床诊断和研究用免疫检测产品线,生产基于免疫投射比浊法的脂质测定、凝血、炎症、糖尿病、营养评估及血脂蛋白测定试剂及试剂盒。公司研发的K-ASSAY试剂无需搅拌、溶解和稀释样本等繁杂程序。

如今,KAMIYA供应的生命科学系列产品包括世界上zui大的ELISA试剂盒产品线,上万种人类的生物标志物分析的产品、酶抑制剂、单抗、多抗。产品广泛应用于细胞凋亡、多抗药性、氧化/ DNA损坏和修复、骨生物学、癌症、心脏健康、炎症、压力与应激、肥胖和糖尿病等研究领域。

zui近,KAMIYA又推出了创新性的基于K-ASSAY化学检测试剂的胰岛素、D-二聚体(D-Dimer),Factor XIII,纤维蛋白原降解产物(Plasma FDP),血清/尿液FPD及FDP-E(纤维蛋白原降解产物E片段)和总IgE等因子的检测试剂。

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货号:KT-642

品名:Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA(高敏肌钙蛋白I ELISA试剂盒,猴子

 

应用:

用于定量测定猴血清或血浆中的心肌肌钙蛋白I(cTnI)

测定范围:

0.039 – 2.5 ng / mL

保存:

校准品保持冻干或低于-20°C保存,试剂盒其他成分4°C保存

试剂盒组成:

* 抗cTnI涂层微孔板(96孔)

* cTnI库存:冻干猴cTnI抗体

* cTnI稀释液(25ml)

* cTnI HRP结合物(11ml)

* 20x清洗溶液(50ml)

* TMB试剂(11ml):HRP底物溶液

* 终止液(11ml):1N HCl

 

产品介绍

肌钙蛋白是横纹肌收缩调节蛋白复合物。它由三个亚单位组成:肌钙蛋白I、T和C。I存在三种异构体;一在快骨骼肌,一个在慢肌骨骼肌,另一个在心肌。肌肉损伤或缺血后,肌钙蛋白被释放到血液中,肌钙蛋白的含量水平与组织损伤密切相关。心肌肌钙蛋白I(cTnI)序列与骨骼肌亚型明显不同,从而促进了cTnI特异性抗cTnI抗体的生成和免疫特异性的发展。由于cTnI在心脏中的特异性表达,它提供了一种特异的心脏损伤生物标记物。

 

 

工作原理

 

高敏猴肌钙蛋白I ELISA试剂盒使用两亲和纯化抗体,一种兔抗cTnI多克隆抗体用于将固相载体固定在微孔板上,另一种山羊抗cTnI肽特异性多克隆抗体与辣根过氧化物酶(HRP)结合,用于检测。样品(血清或血浆)和校准(200µL)被移进微孔板震荡孵化2h后,添加100ul稀释剂和100ulHRP共轭抗cTnI抗体到微孔板上,然后平板摇床孵化1h。在这个步骤中,cTnI被夹在固相和HRP结合的抗体之间。然后洗涤微孔板去除未结合的辣根过氧化物酶共轭抗体。添加HRP底物TMB 100µL,孵育20分钟,结果出现蓝色。加入100ul 1N HCl使发色终止,改变颜色为黄色,在450 nm处测量吸光度值。cTnI浓度与450 nm处吸光度值成正比,可由校准曲线得出。

 

 

校准品的制备

为制备至少两条校准曲线提供了足够的试剂。

1. 试剂盒组成平衡至室温后使用。

2. 加200 ul去离子水或蒸馏水使用储存的冻干血清cTnI复原。轻轻搅拌超过5min。

3. 添加7支聚丙烯管标签分别为2.5,1.25,0.625,0.312,0.156,0.078和0.039 ng/ml。

4. 在标记为2.5ng/ml的管中,移入983.06µL cTnI稀释剂,16.94µL cTnI库存产品轻    轻混合。即为2.5ng/ml的校准液。

5. 吸取0.50ml的cTnI稀释到标记1.25,0.625,0.312,0.156,0.078和0.039ng/ml    的管中。

6. 通过稀释和混合0.50ml 2.5ng/ml的校准液和0.50ml的稀释剂,即可配制得到        1.25ng/ml的校准液。同样通过连续稀释制备0.625,0.312,0.156,0.078,和      0.039ng/ml的校准液。

备注:复原后的cTnI库存产品应在使用后立即冻结。它在冷冻状态下保持稳定。-20°至    少1个月,-70°保存6个月。使用后的校准液丢弃。

 

检测操作过程

1. 将所需用的微孔板固定到支架是;

2. 取200ul 校准液和样品到合适的微孔板上;

3. 150 rpm摇床25°C孵化2h;

4. 使用洗板洗涤微孔板5次,每孔400ul洗涤液,整个过程应快速进行;

5. 用吸附纸或纸巾吸附微孔板,以除去所有残留的液体;

6. 每孔添加100ul cTnI稀释剂;

7. 添加100ul HRP共轭复合物到每个微孔中;

8. 150 rpm摇床25°C孵化1h;

9. 按步骤4和5清洗微孔板;

10. 吸取100ul TBM试剂到每个微孔中;

11. 150 rpm摇床25°C孵化20min;

12. 每个微孔中添加100ul 终止液终止反应;

13. 轻轻混合直到所有的蓝色变成黄色;

14. 在5min内读取溶液450nm处的吸光度值;

15. 如果吸光度值超过了校准品的zui高值,样品就适当稀释并重新测定。

 

标准曲线的绘制

 

cTnI (ng/mL)

吸光度值 (450 nm)

2.5

2.376

1.25

1.298

0.625

0.755

0.313

0.500

0.156

0.368

0.078

0.284

0.039

0.214

 

 

货号

品名

规格

目录价

品牌

KT-642

Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA

96 tests

9435

kamiya

 

产品链接:http://www.k-assay.com/cgi-bin/search.cgi?search=KT-642&table=&species=&int=&app=&language=english

 

 

 

 

kamiyabiomedical KT-12247说明书

kamiyabiomedical KT-12247说明书

Rat Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) ELISA

大鼠肌酸激酶同工酶(CKMB)ELISA
货号:KT-12247

预期用途
该试剂盒是一种用于大鼠CKMB体外定量测定的夹心酶免疫分析方法
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体。为了
仅供研究使用。

COMPONENTS

Reagents Quantity

Pre-coated, ready to use 96-well strip plate 1

Calibrator 2

Calibrator Diluent 1 × 20 mL

Detection Reagent A 1 × 120 μL

Detection Reagent B 1 × 120 μL

Assay Diluent A 1 × 12 mL

Assay Diluent B 1 × 12 mL

TMB Substrate 1 × 9 mL

Stop Solution 1 × 6 mL

Wash Buffer (30X concentrate) 1 × 20 mL

Plate sealer for 96 wells 4

需要但未提供的材料
一。带450±10纳米滤光片的微孔板阅读器。
2。单通道或多通道移液管,具有高精度和一次性。
3。微离心管。
4。去离子水或蒸馏水。
5。吸墨纸吸墨纸吸墨纸。
6。洗涤液容器。
7。0.01 mol/L(或1x)磷酸盐缓冲盐(PBS),pH值7.0-7.2。

储存
所有试剂应按小瓶上的标签保存。校准器,检测试剂A,
检测试剂B和96孔板条板在收到后应存放在-20℃下,其他试剂应存放在-20℃下
应为4°C。未使用的板条应保存在密封袋中,并提供干燥剂
尽量减少暴露在潮湿空气中。打开的测试包将保持稳定1个月,前提是它存储为
如上所述。

试验原理
本试剂盒中提供的微孔板已预涂有CKMB特异性抗体。然后将校准品或样品添加到适当的微孔板上,微孔板上有一种针对CKMB的生物素结合抗体。接着,将亲和素与辣根过氧化物酶(HRP)结合后,加入到每个微孔板中并孵育。加入TMB底物溶液后,只有含有CKMB、生物素结合抗体和酶结合亲和素的微孔才会出现颜色变化。加入硫酸溶液终止酶-底物反应,并测量颜色变化
在450 nm±10 nm波长下进行分光光度测定。然后通过比较样品的外径和校准曲线来确定样品中CKMB的浓度。
样品收集和储存
血清
使用血清分离管,使样品在室温下凝结2小时,或在4℃下凝结过夜,然后在约1000×g的条件下离心20分钟。立即对新制备的血清进行分析,或在-20℃或-80℃下将样品分批储存,以备日后使用。避免反复冻融
循环。

等离子体
用EDTA或肝素作为抗凝剂收集血浆。在收集后30分钟内,将样品在1000 x g、4°C下离心15分钟。立即取出血浆并进行分析,或在-20°C或-80°C下将样品分批储存,以备日后使用。避免重复冻融循环。
组织匀浆
组织匀浆的制备取决于组织类型。
一。组织在冰冻PBS中冲洗以*去除多余的血液,并在均质前称重。
2。将组织切成小块,在新鲜的裂解缓冲液(根据目标蛋白的亚细胞位置需要选择不同的裂解缓冲液)(w:v=1:20-1:50,例如在20-50毫克的组织样品中加入1毫升裂解缓冲液)中用玻璃均质机在冰上均质(微型组织研磨机也可以)。
三。所得悬浮液用超声波细胞破胶剂进行超声处理,直到溶液澄清。
四。然后,将匀浆在10000×g下离心5分钟,收集上清液,立即或等分测定,并在≤-20℃下保存。
细胞裂解物在按照以下说明进行分析之前,需要对细胞进行裂解。
一。贴壁细胞用冷PBS轻轻洗涤,用胰蛋白酶分离,1000×g离心5分钟(悬浮细胞可直接离心收集)。
2。在冷PBS中清洗细胞三次。
三。在浓度为107个/mL的新鲜溶解缓冲液中重新培养细胞,如有必要,可对细胞进行超声波处理,直至溶液澄清。
四。在1500 x g下,在4°C下离心10分钟,以去除细胞碎片。立即测定或等分,并储存在≤-20°C下。
细胞培养上清液和其他生物液体
在1000 x g下离心样品20分钟。收集上清液并立即进行分析,或在-20°C或-80°C下分批储存样品以备日后使用。避免重复冻融循环。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

猴高敏肌钙蛋白I ELISA试剂盒 KT-642

世界*实验材料供应商 KAMIYA上海金畔生物为其中国代理, KAMIYA在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,KAMIYA就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

KAMIYA中国代理, KAMIYA上海代理, KAMIYA北京代理,KAMIYA广东代理, KAMIYA江苏代理KAMIYA湖北代理,KAMIYA天津,KAMIYA黑龙江代理,KAMIYA内蒙古代理,KAMIYA吉林代理,KAMIYA福建代理, KAMIYA江苏代理,KAMIYA浙江代理, KAMIYA四川代理,

 

Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美国生命科学技术公司,总部位于美国加利福尼亚州。本公司致力于为生命科学研究和医药机构提供高质量的具有创新性的基础研究和诊断试剂。

公司的zui早的生命科学研究产品是用于信号转导研究用蛋白酶抑制剂星形孢菌素和K252a。1990年,KAMIYA*家在美国推出凋亡研究的重要抗体anti-Fas单克隆抗体。1997年推出了一个完整的临床诊断和研究用免疫检测产品线,生产基于免疫投射比浊法的脂质测定、凝血、炎症、糖尿病、营养评估及血脂蛋白测定试剂及试剂盒。公司研发的K-ASSAY试剂无需搅拌、溶解和稀释样本等繁杂程序。

如今,KAMIYA供应的生命科学系列产品包括世界上zui大的ELISA试剂盒产品线,上万种人类的生物标志物分析的产品、酶抑制剂、单抗、多抗。产品广泛应用于细胞凋亡、多抗药性、氧化/ DNA损坏和修复、骨生物学、癌症、心脏健康、炎症、压力与应激、肥胖和糖尿病等研究领域。

zui近,KAMIYA又推出了创新性的基于K-ASSAY化学检测试剂的胰岛素、D-二聚体(D-Dimer),Factor XIII,纤维蛋白原降解产物(Plasma FDP),血清/尿液FPD及FDP-E(纤维蛋白原降解产物E片段)和总IgE等因子的检测试剂。

KAMIYA现在拥有zui全的血清蛋白免疫检测试剂产品线,为医院、医疗中心、临床实验室、临床参考实验室、研究所等众多机构提供专业的临床诊断和科研试剂产品。

 

货号:KT-642

品名:Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA(高敏肌钙蛋白I ELISA试剂盒,猴子

 

 

应用:

用于定量测定猴血清或血浆中的心肌肌钙蛋白I(cTnI)

测定范围:

0.039 – 2.5 ng / mL

保存:

校准品保持冻干或低于-20°C保存,试剂盒其他成分4°C保存

试剂盒组成:

* 抗cTnI涂层微孔板(96孔)

* cTnI库存:冻干猴cTnI抗体

* cTnI稀释液(25ml)

* cTnI HRP结合物(11ml)

* 20x清洗溶液(50ml)

* TMB试剂(11ml):HRP底物溶液

* 终止液(11ml):1N HCl

 

产品介绍

肌钙蛋白是横纹肌收缩调节蛋白复合物。它由三个亚单位组成:肌钙蛋白I、T和C。I存在三种异构体;一在快骨骼肌,一个在慢肌骨骼肌,另一个在心肌。肌肉损伤或缺血后,肌钙蛋白被释放到血液中,肌钙蛋白的含量水平与组织损伤密切相关。心肌肌钙蛋白I(cTnI)序列与骨骼肌亚型明显不同,从而促进了cTnI特异性抗cTnI抗体的生成和免疫特异性的发展。由于cTnI在心脏中的特异性表达,它提供了一种特异的心脏损伤生物标记物。

 

 

工作原理  

 

高敏猴肌钙蛋白I ELISA试剂盒使用两亲和纯化抗体,一种兔抗cTnI多克隆抗体用于将固相载体固定在微孔板上,另一种山羊抗cTnI肽特异性多克隆抗体与辣根过氧化物酶(HRP)结合,用于检测。样品(血清或血浆)和校准(200µL)被移进微孔板震荡孵化2h后,添加100ul稀释剂和100ulHRP共轭抗cTnI抗体到微孔板上,然后平板摇床孵化1h。在这个步骤中,cTnI被夹在固相和HRP结合的抗体之间。然后洗涤微孔板去除未结合的辣根过氧化物酶共轭抗体。添加HRP底物TMB 100µL,孵育20分钟,结果出现蓝色。加入100ul 1N HCl使发色终止,改变颜色为黄色,在450 nm处测量吸光度值。cTnI浓度与450 nm处吸光度值成正比,可由校准曲线得出。

 

 

校准品的制备

为制备至少两条校准曲线提供了足够的试剂。

  • 试剂盒组成平衡至室温后使用。
  • 加200 ul去离子水或蒸馏水使用储存的冻干血清cTnI复原。轻轻搅拌超过5min。
  • 添加7支聚丙烯管标签分别为2.5,1.25,0.625,0.312,0.156,0.078和0.039 ng/ml。
  • 在标记为2.5ng/ml的管中,移入983.06µL cTnI稀释剂,16.94µL cTnI库存产品轻轻混合。即为2.5ng/ml的校准液。
  • 吸取0.50ml的cTnI稀释到标记1.25,0.625,0.312,0.156,0.078和0.039ng/ml的管中。
  • 通过稀释和混合0.50ml 2.5ng/ml的校准液和0.50ml的稀释剂,即可配制得到1.25ng/ml的校准液。同样通过连续稀释制备0.625,0.312,0.156,0.078,和0.039ng/ml的校准液。

备注:复原后的cTnI库存产品应在使用后立即冻结。它在冷冻状态下保持稳定。-20°至少1个月,-70°保存6个月。使用后的校准液丢弃。

 

检测操作过程

1. 将所需用的微孔板固定到支架是;

2. 取200ul 校准液和样品到合适的微孔板上;

3. 150 rpm摇床25°C孵化2h;

4. 使用洗板洗涤微孔板5次,每孔400ul洗涤液,整个过程应快速进行;

5. 用吸附纸或纸巾吸附微孔板,以除去所有残留的液体;

6. 每孔添加100ul cTnI稀释剂;

7. 添加100ul HRP共轭复合物到每个微孔中;

8. 150 rpm摇床25°C孵化1h;

9. 按步骤4和5清洗微孔板;

10. 吸取100ul TBM试剂到每个微孔中;

11. 150 rpm摇床25°C孵化20min;

12. 每个微孔中添加100ul 终止液终止反应;

13. 轻轻混合直到所有的蓝色变成黄色;

14. 在5min内读取溶液450nm处的吸光度值;

15. 如果吸光度值超过了校准品的zui高值,样品就适当稀释并重新测定。

 

标准曲线的绘制

 

cTnI (ng/mL)

吸光度值 (450 nm)

2.5

2.376

1.25

1.298

0.625

0.755

0.313

0.500

0.156

0.368

0.078

0.284

0.039

0.214

 

 

 

 

 

货号

品名

规格

目录价

品牌

KT-642

Monkey Cardiac Troponin-I, High Sensitive ELISA

96 tests

9435

kamiya

 

产品链接:http://www.k-assay.com/cgi-bin/search.cgi?search=KT-642&table=&species=&int=&app=&language=english

 

 

 

 

 

 

 

 

KAMIYA BIOMEDICAL KT-12247说明书

 

KAMIYA BIOMEDICAL KT-12247说明书

MATERIAL SAFETY DATA SHEET

Product: Rat Creatine Kinase MB Isoenzyme (CK-MB) ELISA

产品:大鼠肌酸激酶同工酶(CK-MB)酶联免疫吸附试验

猫。编号:KT-12247(96次试验)
组成:
试剂:试剂盒试剂不被认为是危险的。它们含有不到1%的危险化学品和不到0.1%的致癌化学品。抗体包被微孔:抗CK-MB抗体。
检测试剂A(120微升):检测抗体;50%甘油。
检测试剂B(120微升):HRP-亲和素;50%甘油。30倍洗涤缓冲液(20毫升):1%吐温-20,0.33%百里酚,30倍TBS。定标稀释液(20毫升):0.1%吐温-20,0.1%叠氮化纳。TMB底物(9ml):0.05%3,3',5,5'四甲基联苯胺。
停止溶液(6毫升):1摩尔/升硫酸。参考标准品(2瓶):重组蛋白,既不是由噬菌体产生的大肠杆菌产生。也不产生病毒的细胞,用防腐剂缓冲,冻干。2倍分析稀释剂A(6毫升):2倍TBS,含2%牛血清白蛋白和0.1%叠氮化纳。2X分析稀释剂B(6mL):2X TBS,含2%牛血清白蛋白和0.1%叠氮化纳。
健康危害数据:
紧急监视:无特殊危险。
HMIS等级:
健康:0可燃性:0反应性:0 NFPA等级:
健康:0可燃性:0反应性:0进入途径:避免摄入和吸入,避免接触皮肤和眼睛。
极限值(TLV)和来源:
数据不适用。据我们所知,本试剂盒中成分的化学、物理和毒理学特性尚未进行*的研究。
潜在的急性健康影响:可能引起急性皮肤、眼睛或肺部刺激。据我们所知,本试剂盒中成分的化学、物理和毒理学特性尚未进行*的研究。
易过敏的个体应特别注意蛋白质或其他生物来源的材料。

致癌作用数据:不适用
过度暴露的慢性影响:不适用蒸汽压(mm Hg):不适用
水溶性:易溶于水的液体。
紧急和急救程序:
急救人员应确保自我保护。吞咽:如果套件的任何部件被吞咽,请用水漱口
人是有教养的。就医。皮肤:如果厨房的任何成分接触皮肤,立即用肥皂和大量的
水量。
吸入:如果吸入了试剂盒的任何成分,请移到新鲜空气中。如果没有呼吸,进行心肺复苏并立即就医。眼睛:如果该套件的任何部件接触眼睛,用大量水冲洗至少15分钟。用手指分开眼睑,确保充分的冲洗。咨询医生。
火灾爆炸危险数据:
可燃性:在hiCK MB温度下可能是可燃的。
闪点:不适用
灭活介质:使用干化学物质。特殊防火措施:佩戴NIOSH/MSHA批准的自给式呼吸器和防护服。
异常火灾和爆炸危险:未知。
意外泄漏措施:使用适当的防护设备和
清理所有溢出物质的程序。根据适用法律收集和处理所有废物。
搬运和储存:
材料可能对空气敏感。建议脱水。校准器、检测试剂A、检测试剂B和96孔板在收到后应存放在-20C。
所有其他套件部件应存放在4C处。

 

 

 

 

 

kamiya KT-60204 说明书

世界*实验材料供应商 KAMIYA上海金畔生物为其中国代理, KAMIYA在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,KAMIYA就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

KAMIYA中国代理KAMIYA上海代理, KAMIYA北京代理,KAMIYA广东代理, KAMIYA江苏代理KAMIYA湖北代理,KAMIYA天津,KAMIYA黑龙江代理,KAMIYA内蒙古代理,KAMIYA吉林代理,KAMIYA福建代理, KAMIYA江苏代理,KAMIYA浙江代理, KAMIYA四川代理,

 

Kamiya Biomedical Company是一家1983年3月成立的美国生命科学技术公司,总部位于美国加利福尼亚州。本公司致力于为生命科学研究和医药机构提供高质量的具有创新性的基础研究和诊断试剂。

公司的zui早的生命科学研究产品是用于信号转导研究用蛋白酶抑制剂staurosporine和K252a。1990年,KAMIYA*家在美国推出凋亡研究的重要抗体anti-Fas单克隆抗体。1997年推出了一个完整的临床诊断和研究用免疫检测产品线,生产基于免疫投射比浊法(immunoturbidimetric technology)的脂质测定、凝血、炎症、糖尿病、营养评估及血脂蛋白测定试剂及试剂盒。公司研发的K-ASSAY试剂无需搅拌、溶解和稀释样本等繁杂程序。

如今,KAMIYA供应的生命科学系列产品包括世界上zui大的ELISA试剂盒产品线,上万种人类的生物标志物分析的产品、酶抑制剂、单抗、多抗。产品广泛应用于细胞凋亡、多抗药性、氧化/ DNA损坏和修复、骨生物学、癌症、心脏健康、炎症、压力与应激、肥胖和糖尿病等研究领域。

zui近,KAMIYA又推出了创新性的基于K-ASSAY化学检测试剂的胰岛素、D-二聚体(D-Dimer),Factor XIII,纤维蛋白原降解产物(Plasma FDP),血清/尿液FPD及FDP-E(纤维蛋白原降解产物E片段)和总IgE等因子的检测试剂。

KAMIYA现在拥有zui全的血清蛋白免疫检测试剂产品线,为医院、医疗中心、临床实验室、临床参考实验室、研究所等众多机构提供专业的临床诊断和科研试剂产品。

 

Animal Biomarker / Preclinical Assay Kits

动物生物标志物/临床前检测试剂盒

kamiya KT-60204 nterleukin 8 ELISA Kit (IL-8), Rat 96 tests

 

 

kamiyabiomedical KT-354现货

KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY由Kohji Kamiya于1983年3月在加利福尼亚州千橡市成立,并于1996年搬迁至华盛顿州西雅图。我们公司的目的是为生命科学和医学界提供高质量的创新实验室研究和诊断工具。 。 KAMIYA 是一家独立的美国公司,服务于市场。

公司'批产品是蛋白激酶抑制剂,星形孢菌素及其类似物K252a。Staurosporine于1977年由Satoshi Ohmura博士发现,他是2015年诺贝尔奖获得者。这是个商业上可获得的星形孢菌素。如今,staurosporine是生命科学研究领域受欢迎的研究工具之一。

如今,神谷 ' 生命科学产品线包括数以千计的人类和动物的生物标志物的检测与ELISA试剂盒在世界上大的选择之一临床前试验。 神谷继续提供各种其他生命科学研究产品,包括酶抑制剂和单克隆/多克隆抗体,用于多种领域,包括细胞凋亡,多药耐药,氧化/ DNA损伤和修复,骨生物学,癌症,心脏健康,炎症,压力,肥胖和糖尿病。

1997年,KAMIYA推出了全系列临床诊断和研究免疫测定产品,用于基于免疫比浊技术的脂质评估,凝血,炎症,糖尿病,营养评估和血清蛋白测量。在K-测定法 开发的试剂用于标准化学分析仪,不需要混合,溶解或稀释试剂或样品,具有特殊的价值。

近,KAMIYA推出了 用于胰岛素,D-二聚体,因子XIII,血浆FDP,血清/尿液FDP和总IgE测试的新型创新K-ASSAY化学分析仪试剂。

KAMIYA现在拥有美国任何公司广泛的液体血清蛋白免疫分析试剂产品系列。我们为先进的医院,医疗中心,临床实验室,临床参考实验室,研究机构,分销商和诊断仪器公司提供临床诊断试剂。

寻找KAMIYA BIOMEDICAL COMPANY继续为生命科学和医学界提供创新和先进的实验室研究和诊断工具

上海金畔生物kamiyabiomedical KT-354现货

大鼠微量白蛋白酶联免疫吸附试验
微量白蛋白的定量测定
在大鼠生物样品中
货号:KT-354

Rat Microalbumin ELISA 

微量白蛋白酶联免疫吸附试验大鼠
货号KT-354
预期用途
大鼠微量白蛋白酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种高灵敏度的双位点酶联免疫分析方法,用于大鼠生物样品中微量白蛋白的定量测定。仅供研究使用。
引言
白蛋白是一种多功能蛋白,通过血流动力学、转运和营养机制促进体内平衡。在所有哺乳动物和许多低等脊椎动物的血管内和血管外都发现了白蛋白。它是由肝脏合成的约67000道尔顿的分子。通常只有极少量的白蛋白逃过肾小球的再吸收,并被排泄到尿液中。许多隐匿性疾病可导致肾脏损害,这可能导致过量的血清蛋白,包括白蛋白,被肾脏和尿排出。
该ELISA可用于测定血清、组织提取物和其他生物流体中的白蛋白。
原则
双抗体夹心酶联免疫吸附试验的原理如图1所示。在本试验中,样品中的白蛋白与已吸附到聚苯乙烯微滴定孔表面的抗-alb抗体反应。清洗去除未结合蛋白后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗-Album抗体。这种HRP结合抗体与先前结合的白蛋白形成复合物。在另一洗涤步骤之后,通过添加显色底物3,3',5,5’-四甲基联苯胺(TMB)来分析与免疫吸附剂结合的酶。结合酶的数量与被测样品中白蛋白的浓度直接相关;因此,在450 nm处的吸收是对被测样品中白蛋白浓度的测量。这个
从校准器建立的校准曲线中插入试样中的白蛋白量,并对样品稀释进行校正。

图1.

1.固相结合抗白蛋白抗体

2.添加校准器和样品

3.形成白蛋白*抗白蛋白复合物

4.去除未结合的样本蛋白质

5.添加抗alb-hrp共轭物

5.抗ALB HRP*ALB*抗ALB形成的复合物

6.去除未结合的抗ALB HRP

7.添加TMB基板

8.测定结合酶活性

 

组件
1。稀释浓缩液
一瓶含有50毫升5倍浓缩稀释剂的缓冲液。
2。浓缩洗涤液
一瓶含有50毫升20倍浓缩洗涤液。
三。酶抗体结合浓缩物
一小瓶含有150微升100倍浓缩亲和力纯化的抗大鼠白蛋白抗体,该抗体与HRP在A中结合。
稳定缓冲器。
4。TMB基质溶液
一瓶含有12毫升TMB和过氧化氢的柠檬酸缓冲液,pH3.3。
5。停止解决方案
一瓶含有12毫升0.3米硫酸。
警告:避免接触皮肤。
6。微量滴定板
12个可拆卸的8个井条,位于井架框架内。用亲和力纯化的抗鼠白蛋白包被。
7。大鼠微量白蛋白校准器
一瓶含有冻干大鼠微量白蛋白校准器。
8。阳性对照
一瓶含有50升血清和0.1%Sodium azide。浓度见控制证书。
所需但未提供的材料
•用于制造和分配稀释液的精密移液管(2μl至200μl)
•试管
•微孔板清洗机/吸气机
•蒸馏水或去离子水
•微型板阅读器
•用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿
•计时器

 

注意事项
1。开始分析前仔细阅读说明。
2。此套件仅供研究使用。
三。为保证本产品的质量和可靠性,我们付出了很大的努力。但是,有可能
在这种情况下,由于干扰因素的高水平,可能会得到不寻常的结果。
4。防腐剂
阳性对照品含有0.1%Sodium azide。
5。不需要添加剂或防腐剂来保持样品的完整性。避免叠氮污染。
6。浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞抑制酶反应。
7。其他注意事项:
不要交换不同批次的套件组件。
请勿在到期日后使用套件组件。
防止试剂受到阳光直射。
不要用嘴吸液。
不要在使用试剂的地方吃、喝、吸烟或使用化妆品。
使用手套避免接触试剂。
停止溶液含有稀硫酸。可能刺激眼睛和皮肤。之后用水冲洗
联系。
试剂制备
1。稀释浓缩液
提供的稀释液是5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水按1:5稀释。

2。浓缩洗涤液
提供的洗涤液是20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水稀释1:20。水晶
当储存温度较低时,浓缩物中的形成并不少见。将浓缩液加热至
稀释前30-35°C可溶解晶体。
三。酶抗体结合浓缩物
通过添加10微升计算每一个滴定板试纸所需的工作共轭溶液量。
酶抗体与990微升1X稀释剂的结合物,用于测试每条测试条。混合均匀,但
轻轻地。避免起泡。
4。TMB基质溶液
可随时使用。
5。停止解决方案
可随时使用。
6。微量滴定板
可随时使用。打开微量滴定袋并从袋中取出盘子。移除所有
不用于分析,放回袋中,与干燥剂一起重新密封。
7。大鼠微量白蛋白校准器
向冻干大鼠微量白蛋白校准器中加入1.0毫升蒸馏水或去离子水,轻轻搅拌至
溶解。校准器现在的浓度为200.0μg/ml(重组校准器应为
如果打算将来使用,则应重新报价并冻结)。需要立即制备大鼠微量白蛋白校准器。
使用前(见下表)。在每一步之间充分混合。避免起泡。

8。阳性对照
浓度和推荐稀释度见控制证书。使用前,对阳性对照品进行短暂离心,使所有液体收集在小瓶底部。
储存和稳定性
1。成套工具
套件的到期日期在外标签上注明。建议的储存温度为4°C。注:大鼠微量白蛋白校准器和阳性对照品的长期储存建议见下文。
2。稀释剂
5x稀释液浓缩液在有效期内保持稳定。1X工作溶液自制备之日起至少稳定一周。两种溶液均应在4°C下储存。
三。洗涤液
20倍洗涤液浓缩液在到期前保持稳定。1X工作溶液自制备之日起至少稳定一周。两种溶液都可以在室温(RT,16-25°C)或4°C下储存。
4。酶抗体结合物
未稀释的抗-alb-hrp结合物应在4°C下储存,并在使用前立即稀释。工作共轭溶液在黑暗中储存时可稳定1小时。

 

5。TMB基质溶液
TMB基质溶液应在4°C下储存,并在到期前保持稳定。
6。停止解决方案
停止溶液应在4°C下储存,并在到期前保持稳定。
7。微量滴定板
抗鼠白蛋白涂层井在到期日前保持稳定,并应在4°C温度下储存在带干燥剂包装的密封箔袋中。
8。大鼠微量白蛋白校准器
冻干大鼠微量白蛋白校准器应在4°C下储存或冷冻,直到重组。重组校准器应重新标定并冷冻保存。避免多次冻融循环。工作校准液应在使用前立即制备,并稳定8小时。
9。阳性对照
对于超过7天的储存,应将其冷冻至到期日。在4°C温度下储存少于7天。避免多次冷冻/解冻循环。
不稳定迹象
如果测试正确,用校准溶液观察到的结果应在预期值的20%以内。
样本收集和处理
通过静脉穿刺和血分离后的血液,通过离心分离收集血液。
对于血浆样品,应将血液收集到装有抗凝剂的容器中,然后离心分离。应注意尽量减少溶血,过度溶血会影响您的结果。立即化验或等分样品,并将样品储存在-20°C。避免重复冷冻/解冻。
对于任何可能含有病原体的样本,必须注意防止接触开放性伤口。不需要添加剂或防腐剂来保持样品的完整性。避免叠氮污染。
分析方案
样品稀释
由于分析的高敏感性质,每个样品在用于正常分析前应稀释。1:500稀释适合于大多数尿样,而血清或血浆样品可能需要稀释1∶100万。对于在校准曲线范围之外产生结果的样品的定量,可能需要更小或更大的稀释度。如果不确定样品水平,则应使用一个或两个代表性样品进行连续稀释。
强烈建议运行整个板。
准备1:500稀释的样品,将2微升样品转移到998微升1X稀释剂中。这样可以稀释1:500。
对于血清或血浆样品,将血清或血浆中的2 L L转化为1X稀释液的1998 L。现在稀释度为1:1000。接下来,将2微升1:1000稀释液与1998微升1X稀释液混合。现在稀释1:1000000。在每个阶段*混合。

 

程序
1。使用前将所有试剂置于室温。
2。移液管100微升
校准器0(0.0 ng/ml)一式两份
校准器1(6.25 ng/ml)一式两份
校准器2(12.5 ng/ml)一式两份
校准器3(25 ng/ml)一式两份
校准器4(50 ng/ml)一式两份
校准器5(100 ng/ml)一式两份
校准器6(200 ng/ml)一式两份
校准器7(400 ng/ml)一式两份
三。用移液管将100微升稀释阳性对照品(一式两份)移入预先的孔中。

 

4。用移液管将100微升稀释样品(一式两份)移到预先的孔中。
5。将微量滴定板在22°C(RT)下培养30(30±2)分钟。孵育期间,将培养皿盖好并保持水平。
6。孵育后,吸入井内的物质。
7。用适当稀释的洗涤液将每口井注满并抽吸。重复三次,总共洗四次。如果是手动清洗:将稀释的清洗液*注入井内,倒置板,并将内容物倒入/摇出废物容器。然后,在吸水纸上用力打井,去除残留的洗涤液。重复三次,共洗四次。
8。用移液管将100微升适当稀释的酶抗体结合物移到每个孔中。在22°C(RT)下培养30(30)
±2)分钟。培养过程中,将培养皿盖在黑暗中并保持水平。
9。按照步骤6和7中所述清洗和吸干井。
10。用移液管将100微升TMB基质溶液移到每个孔中。
11。在室温下在黑暗中孵育10分钟。
12。10分钟后,向每个孔中添加100μl的停止溶液。
13。测定每孔含量450 nm时的吸光度。按照制造商的规格校准板读卡器。
终反应混合物的吸光度可在添加停止溶液后2小时内测量。然而,良好的实验室实践要求尽快进行测量。
结果
1。从每个样本的测试值中减去平均背景值。
2。利用为校准器观察到的结果构建校准曲线。虽然也可以使用二阶多项式(二次)或其他曲线拟合,但合适的曲线拟合是四参数物流曲线的拟合。
三。从校准曲线中插入测试样品值。校正样品稀释系数,使其达到原样品中微量白蛋白的浓度。
性能特点
根据良好的实验室实践,特定微量白蛋白的检测需要精心的质量控制。各实验室应采用常规的质量控制程序,以确定化验间和化验内的精密度和性能特征。
程序的限制
1。在*理解信息的情况下进行分析程序,将获得可靠和可重复的结果。
包含在包装说明书中,并遵守良好的实验室惯例。
2。影响分析性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品管的准确度、清洗技术、培养时间或温度。