• 预涂层 96 孔微孔板

• 标准

• 标准稀释缓冲液

• 洗涤缓冲液

• 检测试剂A

• 检测试剂B

• 稀释剂 A

• 稀释剂 B

• TMB基板

• 停止解决方案

• 封板机

• 37°C 培养箱

• 多通道和单通道移液器和无菌移液器吸头

• 喷瓶或自动微孔板清洗机

• 1.5 毫升试管

• 蒸馏水

• 吸水滤纸

• 100 毫升和 1 升量筒

• 酶标仪（波长：450 nm）

• ELISA 摇床

• 1) 标准品：用推荐体积的标准稀释缓冲液配制标准品，制成标准溶液。然后按照协议中的说明，使用标准稀释缓冲液对标准溶液进行系列稀释。

• 2) 洗涤缓冲液：按照方案中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。

• 3) 检测试剂制备：计算所需工作溶液的总体积。分别用稀释剂 A 和稀释剂 B 以 1:100 稀释检测试剂 A 和检测试剂 B。

• 1) 设置标准、测试样品和对照孔。

• 2) 将 50 µl 稀释的标准品分装到标准孔中。

• 3) 将 50 µl 标准稀释缓冲液分装到对照（零）孔中。

• 4) 将 50 µl 稀释样品分装到样品孔中。

• 5) 立即将 50 µl 检测试剂 A 分装到每个孔中。在 37 °C 下孵育 1 小时。

• 6) 洗涤 3 次。

• 7) 将 100 µl 检测试剂 B 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 30 分钟。

• 8)洗涤5次。

• 9) 将 90 µl TMB Substrate 分装到每个孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分钟。

• 10) 分装 50 µl 终止液。

• 11) 在 450 nm 处测量 OD。

• 使用前将套件组件和样品平衡至室温 (18 – 25 °C)。建议为每个测试绘制标准曲线。

• 1. 在预涂板上分别设置标准孔、测试样品孔和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议至少测量每个标准和样品一式两份。

• 2. 将 50 µL 每种标准品、质控品和样品加入相应的孔中。

• 3. 取下盖子并丢弃液体。

• 4. 立即分装 50 µl 检测试剂 A 工作溶液。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 1 小时。

• 5. 取下盖子并丢弃溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤板 3 次。

• 6. 每孔加入 100 µL 检测试剂 B 工作溶液，密封并在 37°C 下孵育 30 分钟。

• 7. 弃去溶液并用洗涤缓冲液洗涤板 5 次，如上一步所述。

• 8. 将 90 µl TMB Substrate 分装到每个孔中。用盖子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。

• 9. 每孔加入 50 µL 终止液。立即在 450 nm 处读取。

范围和灵敏度可能会发生变化。请联系我们获取最新的产品信息。为了获得准确的结果，样品浓度必须稀释至试剂盒的中间范围。如果您需要特定范围，请提前联系我们或在您的订单评论中写下您的要求。

请注意，我们的 ELISA 和 CLIA 试剂盒针对天然样品而非重组蛋白的检测进行了优化。我们无法保证检测到重组蛋白，因为它们可能具有与天然蛋白不同的序列或三级结构。