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胶原酶 I II III IV四个型之间区别及用法

消化法中常使用的酶有3种:胰蛋白酶、胶原酶I以及透明质酸酶,透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用; 胶原酶作用较缓和,能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞,对细胞损伤小,以胶原I为主。

胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂.胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶中由于产品的活力和纯度不同,对细胞的消化能力也不同,胰蛋白酶对细胞的作用,取决于细胞类型、酶的活力、配制的浓度、消化的温度、无机盐离子、pH以及消化时间的长短等. 胰蛋白酶作用较强,容易造成平滑肌细胞损坏;
胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用.适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害.该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培养液配制,即操作简便又可提高细胞成活率,zui终浓度200u/mL  此酶消化作用缓和,无需机械振荡,但胶原酶价格较高,大量使用将增加实验成本,所以选择价廉物美的胶原酶是关键,所以不光要看重量还要看每MG的活性单位.

 

胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。

胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。 胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为zui终浓度200U/ml。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。

中文名称: I型胶原酶、II型胶原酶、IV型胶原酶、V型胶原酶

英文名称:Collagenase I、Collagenase II、Collagenase IV、Collagenase V

CAS号: 9001-12-1

规格:100mg, 1g ,5

产地:Worthington sigma  invitrogen

外观: 棕色或棕褐色结晶状冻干粉;

保存:-20°C

胶原酶配制方法和胰蛋白酶的配制方法一致,只是要注意标签中的活性单位,zui终配制 成为200u/mL就可以了.,

胰蛋白酶的配制、过滤除菌与分装过程

准备样品:干粉,PBS缓冲液,离心管两个、冻存管20个、盒子一个、枪头1盒、灭菌器、注射器。

准备工作:将离心管、冻存管装载盒子中高温高压灭菌。

配制:

1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度0.25%用电子天平准确称取粉剂50mg溶入离心管PBS(PH到7.2左右)液中。搅拌混匀,置于4℃内12小时。

2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。

3.分装:将除菌之后的胰蛋白酶用移液枪分装至

 

 

 

 

A: Collagenase I(胶原酶I型) :  主要用于上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的分离。

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货号

品名

包装

价格

品牌

LS004194

Collagenase I(胶原酶I型)

100 mg

476

Worthington

LS004196

Collagenase I(胶原酶I型)

1 gm

2464

Worthington

LS004197

Collagenase I(胶原酶I型)

5 gm

10360

Worthington

17100-017

Collagenase I(胶原酶I型)

1g

3025

invitrogen

C0130-100MG

Collagenase I(胶原酶I型)

100mg

526.5

sigma

C0130-500MG

Collagenase I(胶原酶I型)

500MG

1473.03

sigma

C0130-1G

Collagenase I(胶原酶I型)

1G

2208.96

sigma

C0130-5G

Collagenase I(胶原酶I型)

5G

6113.25

sigma

 

 

B: Collagenase II(胶原酶II型) : 适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细胞的分离。

 

订货信息

 

货号

品名

包装

价格

品牌

LS004177

Collagenase II(胶原酶II型)

5 gm

10360

Worthington

LS004176

Collagenase II(胶原酶II型)

1 gm

2464

Worthington

LS004174

Collagenase II(胶原酶II型)

100 mg

476

Worthington

17101-015

Collagenase II(胶原酶II型)

1g

3025

invitrogen

C6885-25MG

Collagenase II(胶原酶II型)

25MG

508.95

sigma

C6885-100MG

Collagenase II(胶原酶II型)

100mg

778.05

sigma

C6885-500MG

Collagenase II(胶原酶II型)

500MG

1,980.81

sigma

C6885-1G

Collagenase II(胶原酶II型)

1G

2,971.80

sigma

C6885-5G

Collagenase II(胶原酶II型)

5G

7,926.75

sigma

 

 

C: Collagenase III(胶原酶 III型) 对哺乳动物的组织有广谱的消化作用

 

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货号

品名

包装

价格

品牌

LS004182

Collagenase III(胶原酶 III型)

1 gm

2464

Worthington

LS004183

Collagenase III(胶原酶III型)

5 gm

10360

Worthington

LS004180

Collagenase III(胶原酶III型)

100 mg

476

Worthington

 

 

D: Collagenase IV(胶原酶IV型):胶原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织, 对哺乳动物的组织有广谱的消化作用

订货信息

 

货号

品名

包装

价格

品牌

17104-019

Collagenase IV(胶原酶IV型)

1g

3025

invitrogen

C5138-25MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

25MG

452.79

sigma

C5138-100MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

100mg

772.20

sigma

C5138-500MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

500MG

2,530.71

sigma

C5138-1G

Collagenase IV(胶原酶IV型)

1G

4,095.00

sigma

C5138-5G

Collagenase IV(胶原酶IV型)

5G

15,420.60

sigma

LS004189

Collagenase IV(胶原酶V型)

5 gm

10360

Worthington

LS004188

Collagenase IV(胶原酶V型)

1 gm

2464

Worthington

LS004186

Collagenase IV(胶原酶V型)

100 mg

476

Worthington

 

E: Collagenase V(胶原酶V型): 胶原酶Ⅴ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,结缔组织分离。

 

货号

品名

包装

价格

品牌

LS005283

Collagenase V(胶原酶V型)

5 gm

12460

Worthington

LS005282

Collagenase V(胶原酶V型)

1 gm

2968

Worthington

LS005280

Collagenase V(胶原酶V型)

100 mg

588

Worthington

C9263-25MG

Collagenase V(胶原酶V型)

25MG

469.17

sigma

C9263-100MG

Collagenase V(胶原酶V型)

100mg

625.95

sigma

C9263-500MG

Collagenase V(胶原酶V型)

500MG

1,814.67

sigma

C9263-1G

Collagenase V(胶原酶V型)

1G

2,845.44

sigma

C9263-5G

Collagenase V(胶原酶V型)

5G

5,686.20

sigma

 

我们公司zui大优势是强大的采购,

1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,

2: 货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,

3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免

4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证100%产品都有价格优势,

5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大 交大 复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药 ,fisher等500多家公司

6:我们还是santa,Advanced Biotechnologies Inc;Athens Research & Technology, bangs, BBInternational, crystalchem, dianova, FD Neurotechnologies, Inc. FormuMax Scientific, Inc; Genebridege; Glycotope Biotechnology GmbH; iduron; Innovative Research of America Ludger  neuroprobe; omicronbio; Polysciences; prospecbi; QA-BIO;quickzyme;RESEARCH DIETS, INC;sterlitech;sysy;TriLink BioTechnologies, Inc;worthington-biochem;zyagen;……几十家国外公司代理
7:我们还从事invitrogen,qiagen; abcam ;sigma;neb; roche;merck; rnd; BD; GE; pierce; BioLegend….等*批发

 

吉尔氏III型苏木精染色法

 

吉尔氏III型苏木精染色法

Gill’s III Hematoxylin Stain Procedure 

statlab HXGHE3LT

货号:HXGHE3PT  项目:HXGHE3LT
加仑项目#:HXGHE3GAL 5加仑项目#:HXGHE35CB
控制幻灯片项目#所需组件(不包括在内)
三色CST025P鉴别液70%试剂酒精
骨骼肌CSS0725P发蓝液曙红Y或水性曙红Y
平滑肌CSS0425

 

 

 

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Ⅲ型胶原蛋白,是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白,与I型胶原蛋白比例为4比1。Ⅲ型胶原蛋白较细小,存在于表皮层和真皮层之间,称之为“婴儿胶原蛋白”,在婴儿时期含量高达80%,是维持皮肤弹性的重要蛋白质。微胶原层主要由Ⅲ型胶原蛋白构成,是指位于表皮层与真皮层之间的组织结构,是撑起表皮的关键,也是肌肤塌陷的第一步。人体无法通过自身合成产生Ⅲ型胶原蛋白。

本公司生产的重组人III型胶原蛋白片段通过基因重组技术,在大肠杆菌中发酵表达,经过多种分离纯化方法得到,高纯度、低内毒素的类人III型胶原蛋白。

 

性能参数

表达宿主

E.coli

分子量

约为10 kDa

纯度

> 90%SDS-PAGE检测

内毒素

< 1.0 EU/μg

保存缓冲液

20 mM Tris.Cl, 100 mM Nacl, pH8.0

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期3年。

一般应避免反复冻融,建议将蛋白分装成小份保存。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver. CN20240219

 

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

 

Ⅲ型胶原蛋白,是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白,与I型胶原蛋白比例为4比1。Ⅲ型胶原蛋白较细小,存在于表皮层和真皮层之间,称之为“婴儿胶原蛋白”,在婴儿时期含量高达80%,是维持皮肤弹性的重要蛋白质。微胶原层主要由Ⅲ型胶原蛋白构成,是指位于表皮层与真皮层之间的组织结构,是撑起表皮的关键,也是肌肤塌陷的第一步。人体无法通过自身合成产生Ⅲ型胶原蛋白。

本公司生产的重组人III型胶原蛋白片段通过基因重组技术,在大肠杆菌中发酵表达,经过多种分离纯化方法得到,高纯度、低内毒素的类人III型胶原蛋白。

 

性能参数

表达宿主

E.coli

分子量

约为10 kDa

纯度

> 90%SDS-PAGE检测

内毒素

< 1.0 EU/μg

保存缓冲液

20 mM Tris.Cl, 100 mM Nacl, pH8.0

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期3年。

一般应避免反复冻融,建议将蛋白分装成小份保存。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver. CN20240219

 

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Exonuclease III是一种核酸外切酶,该酶作用于双链DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特

性可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端),此时Exonuclease III将仅消化一条链。

Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。

 

产品信息

货号

14525ES90 / 14525ES96

规格

5,000 U / 25,000 U

 

组分信息

组分编号

组分名称

14525ES90

14525ES96

14525-A

Exonuclease III (100 U/μL)

50 μL

5×50 μL

14525-B

10× Exo III Buffer

500 μL

500 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

酶切反应操作步骤

1. 于冰上配置如下反应体系

组分

使用量

DNA

~ 5 μg

10× Exo III Buffer

5 μL

Exonuclease III (100 U/μL)

0.5 μL

Nuclease-Free Water

to 50 μL

2. 37℃孵育30 min。

3. 加入终浓度为11 mM的EDTA终止反应或70℃孵育30 min使Exonuclease III失活

4. 琼脂糖电泳检测双链DNA酶切结果。

 

注意事项

1. Exonuclease III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以

进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或 5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅用作科研用途。

Ver.CN20231212

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

 

Exonuclease III是一种核酸外切酶,该酶作用于双链DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特

性可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端),此时Exonuclease III将仅消化一条链。

Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。

 

产品信息

货号

14525ES90 / 14525ES96

规格

5,000 U / 25,000 U

 

组分信息

组分编号

组分名称

14525ES90

14525ES96

14525-A

Exonuclease III (100 U/μL)

50 μL

5×50 μL

14525-B

10× Exo III Buffer

500 μL

500 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

酶切反应操作步骤

1. 于冰上配置如下反应体系

组分

使用量

DNA

~ 5 μg

10× Exo III Buffer

5 μL

Exonuclease III (100 U/μL)

0.5 μL

Nuclease-Free Water

to 50 μL

2. 37℃孵育30 min。

3. 加入终浓度为11 mM的EDTA终止反应或70℃孵育30 min使Exonuclease III失活

4. 琼脂糖电泳检测双链DNA酶切结果。

 

注意事项

1. Exonuclease III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以

进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或 5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅用作科研用途。

Ver.CN20231212

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

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第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

advancedbiomatrix III型胶原蛋白溶液说明书

advancedbiomatrix III型胶原蛋白溶液说明书

III型胶原蛋白

溶液,1 毫克/毫升(人)

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步骤工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,在 0.01 N HCl,pH 2 中含有 10 mg,浓度约为 1 mg/ml。

advancedbiomatrix 5021

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步骤工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,在 0.01 N HCl,pH 2 中含有 10 mg,浓度约为 1 mg/ml。III 型胶原蛋白产品采用用户友好的包装,以供使用和储存。这种 III 型胶原蛋白产品经过无菌过滤,作为即用型溶液提供。

III型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初是作为原胶原蛋白生产的,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,原胶原分子被细胞修饰。酶通过添加蛋白质链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的赖氨酸和脯氨酸,然后与细胞外的其他分子交联。III 型原胶原分子从细胞中释放出来,并被酶加工,将分子两端的小片段剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作基质支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

 
参数、测试和方法 III 型胶原蛋白 #5021
杀菌方式 过滤
形式 解决方案
包装尺寸 10 毫克(~10 毫升)
储存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

胶原蛋白浓度 – 双缩脲

0.7-1.25 毫克/毫升
酸碱度 1.8-2.5

偶然代理 – 通过 RPR

人体来源经检测,乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒 1 呈阴性。

电泳图谱 – 考马斯蓝

特征
无菌 – USP 修改 没有增长
内毒素 (LAL) < 10.0 EU/mL
渗透压 (mOsmo H2O/kg) < 35
细胞附着测定 经过
来源 人胎盘

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Phosphosolutions公司Anti-Adenylate Cyclase III-NEW产品代理


Phosphosolutions公司Anti-Adenylate Cyclase III-NEW产品代理

简要描述:公司概况

背景
基因工程– Phosphosolutions是*代可以完整描绘人体的遗传物质序列的企业。
蛋白质体学项目:Phosphosolutions是第二代试图将所有体内蛋白质表达出来的企业。
PhosphoSolutions公司—第三步我们将超越蛋白质体学 进而 专注于磷蛋白质。

详细介绍

产品咨询

 our focus 专业特色

PhosphoSolutions公司专注于蛋白质组学中的一个(10-20%)含量的小部分磷蛋白质。磷蛋白是监管控制组蛋白质的关键,这一部分是被称为phosphosome蛋白质。磷蛋白被认为是在神经系统疾病如老年痴呆症和癌症方面的关键元素,实质上,phosphosome是蛋白质组学作物的精华。

 

公司目标

简明概述:我们要成为世界上的磷蛋白组的提供者。

方案#1, 特异性磷抗体:首先我们要准备磷蛋白组。在激活或磷酸化状态下磷蛋白组是蛋白质识别研究中的*关键工具。

 

Antibodies 抗体

特异性磷抗体:Detection and quantitation of changes in the state of phosphorylation of specific proteins is of great utility in the quest to establish the function of a given protein and the consequences of its reversible phosphorylation. Two methods commonly used to measure protein phosphorylation and dephosphorylation in cell preparations employ prelabeling with 32Pi or back phosphorylation. These methods continue to be very effective and have advantages for many test systems, but they do have several practical and theoretical limitations (Nestler and Greengard, 1984). Based in large part on the successful use of short synthetic peptides to produce epitope-targeted antibodies (Lerner, 1982;Sutcliffe et al., 1983), an immunochemical approach became an attractive alternative for detecting changes in the state of phosphorylation of specific proteins at a specific site. The use of phosphorylation state-specific antibodies takes advantage of the sensitivity and selectivity afforded by immunochemical methodology, combined with relatively simple preparation and potentially broad applications.

The first report of phosphorylation-dependent antibodies appeared in 1981, when polyclonal antibodies that could detect phosphotyrosine-containing proteins were produced by immunization with benzyl phosphonate conjugated to keyhole limpet hemocyanin (KLH) (Ross et al., 1981). Shortly thereafter, Nairn and colleagues reported the production of serum antibodies that distinguished between the phospho- and dephospho-forms of G-substrate, a protein localized to cerebellar Purkinje cells and phosphorylated by cGMP-dependent protein kinase (Nairn et al., 1982). A synthetic heptapeptide, Arg-Lys-Asp-Thr-Pro-Ala-Leu, corresponding to a repeated sequence surrounding two phosphorylated threonyl residues in the intact protein, served as antigen. Rabbit antisera against a peptide-KLH conjugate were specific for the dephospho-form of G-substrate. Phospho-specific antibodies were prepared by immunization of rabbits with the purified phosphoprotein, phosphorylated in vitro to a stoichiometry of 2 mol/mol with cGMP-dependent protein kinase. Despite this initial success, other attempts in our laboratory to produce phospho-specific polyclonal antisera by immunization with the phospho-form of intact proteins were not very successful, probably because of two significant factors. First, many phosphorylated proteins are believed to undergo rapid dephosphorylation during immunization, regardless of the route of injection, leading to the loss of the desired phospho-epitope. Second, holoproteins generally contain multiple immunogenic epitopes; this decreases the probability that colonal dominance for a phospho-specific epitope will be obtained.

Taking a more direct approach utilizing phosphorylated and unphosphorylated forms of synthetic phosphopeptides, we developed a general protocol for the production of phosphorylation state-specific antibodies for substrates with established site(s) of phosphorylation (Czernik et al., 1991)). In early stages of our development of this methodology, phosphopeptides were routinely prepared by enzymatic phosphorylation (Czernik et al., 1991). Although this approach remains perfectly valid today, the preparation of synthetic phosphopeptides using Fmoc derivatives of phosphoamino acids has become the state-of-the-art (Czernik et al., 1995;Czernik et al., 1996). Likewise, we have examined the use of both polyclonal and monoclonal techniques for antibody production. Given the high success rate that we and others have obtained with the polyclonal technique, it has become the method of choice, because it is an easier and less costly method for the average laboratory. However, when appropriate, this approach can be readily adapted for monoclonal antibody production.

参考文献

1. Czernik AJ, Girault J-A, Nairn AC, Chen J, Snyder G, Kebabian J, Greengard P (1991) Production of phosphorylation state-specific antibodies. Methods Enzymol 201: 264-283.

2. Czernik AJ, Mathers J, Mische SM (1997) Phosphorylation state-specific antibodies. Neuromethods: Regulatory Protein Modification: Techniques & Protocols 30: 219-250.

3. Czernik AJ, Mathers J, Tsou K, Greengard P, Mische SM (1995) Phosphorylation state-specific antibodies: preparation and applications. Neuroprotocols 6: 56-61.

4. Lerner, R. A. Tapping the immunological repertoire to produce antibodies of predetermined specificity. Nature 299, 593-596. 1982.

5. Nairn AC, Detre JA, Casnellie JE, Greengard P (1982) Serum antibodies that distinguish between the phospho- and dephospho-forms of a phosphoprotein. Nature (Lond ) 299: 734-736.

6. Nestler, E. J. and Greengard, P. Protein Phosphorylation in the Nervous System. Nestler and Greengard. Protein Phosphorylation in the Nervous System. [8], 255-299. 1984. New York, Wiley. 

8. Sutcliffe JG, Shinnick TM, Green N, Lerner RA (1983) Antibodies that react with predetermined sites on proteins. Science 219: 660-666.

主营产品清单如下:

Item: Anti-Adenylate Cyclase III-NEW!
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Sub-Category:  
SKU/Catalog Number: 85-AC3
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SKU Price Formulation Applications Amount Qty
85-AC3 $325.00 affinity purified polyclonal antibody WB, IF 100 ul

 

advancedbiomatrix III型胶原蛋白说明书

advancedbiomatrix III型胶原蛋白说明书

III型胶原蛋白

溶液,1 mg/ml(人)

目录 #5021

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,含 10 mg,浓度约为 1 mg/ml,溶于 0.01 N HCl,pH 2。

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,含 10 mg,浓度约为 1 mg/ml,溶于 0.01 N HCl,pH 2。III 型胶原蛋白产品以用户友好型包装提供,便于使用和储存。这种 III 型胶原蛋白产品经过无菌过滤,并以即用型溶液的形式提供。

III 型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初以原胶原蛋白的形式产生,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,前胶原分子被细胞修饰。酶通过添加链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的氨基酸赖氨酸和脯氨酸,然后交联到细胞外的其他分子。III 型前胶原分子从细胞中释放出来,并由酶加工,这些酶将小片段从分子的任一端剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原蛋白分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作底物支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

参数、测试和方法 III 型胶原蛋白 #5021
灭菌方法 过滤
形式 解决方案
包装尺寸 10 毫克(~10 毫升)
贮存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

胶原蛋白浓度 – 双缩脲

0.7-1.25 毫克/毫升
酸碱度 1.8-2.5

不定因素 – RPR

人源已经过测试,发现乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒-1 呈阴性。

电泳图案 – 考马斯蓝

特征
无菌 – USP 修改 没有增长
内毒素 (LAL) < 10.0 欧/毫升
渗透压 (mOsmo H2O/kg) < 35
细胞附着试验 经过
来源 人胎盘

III型胶原蛋白

粉末,非无菌(人)

目录 #5019

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以 10 mg 非无菌粉末的形式提供。

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以非无菌粉末形式提供。III 型胶原蛋白产品以易于使用的包装提供,以供使用和储存。

III 型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初以原胶原蛋白的形式产生,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,前胶原分子被细胞修饰。酶通过添加链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的氨基酸赖氨酸和脯氨酸,然后交联到细胞外的其他分子。III 型前胶原分子从细胞中释放出来,并由酶加工,这些酶将小片段从分子的任一端剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原蛋白分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作底物支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

参数、测试和方法 III型胶原蛋白粉#5019
形式 粉末
包装尺寸 10毫克
贮存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

不定因素 – RPR

人源已经过测试,发现乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒-1 呈阴性。

电泳图案 – 考马斯蓝

特征
内毒素 (LAL) < 10.0 欧/毫升
来源 人胎盘

 

 

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

品牌 其他品牌

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA,是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

产品简述:

分子杂交炉是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验。

产品特点

1、微电脑控制器提供精确的温度控制。

2、升温速度快

3、管式旋转

4、杂交管易装卸

5、内部使用防腐蚀、镜面不锈钢材料制造

6、双层玻璃门设计,有效防止辐射

7、底部可带摇动基座,一机多用

8、比振荡水浴污染机会少

9、密封性高

技术参数:

型号 LF-I LF-III LF-IIIA
恒温范围 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃
控温精度 ±0.5℃ ±0.5℃ ±0.5℃
温度均匀性误差 ±0.03℃ ±0.03℃ ±0.03℃
温度显示分辨率 01℃ 01℃ 01℃
温度平衡时间 <20 min <20 min <20 min
旋转速度 6.5±0.5r/min 固定 5-20r/min 转速可调 6-25r/min 转速可调
连续工作时间 24小时 24小时 24小时
杂交管容纳数 6个 6个 6个
底部摇动基座
频   率 0-33 Hz 0-33 Hz
振   幅 0-1 mm 0-1 mm
外部尺寸 450*390*370 mm 450*390*400 mm 440*480*430 mm
内部尺寸 340*220*210 mm 340*220*220 mm 340*220*220 mm
随机杂交管 35*240 mm 35*240 mm 35*240 mm
可选配杂交管 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm
显示方式 数显 液晶显示

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002ES

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003ES

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509ES

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004ES

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012ES

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230ES

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214ES

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208ES

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162ES

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234ES

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206ES

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231ES

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225ES

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220ES

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011ES

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221ES

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

60235ES

用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

 

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

 

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HB220705

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

暂无内容

[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

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4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

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2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

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[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)