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第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

advancedbiomatrix III型胶原蛋白溶液说明书

advancedbiomatrix III型胶原蛋白溶液说明书

III型胶原蛋白

溶液,1 毫克/毫升(人)

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步骤工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,在 0.01 N HCl,pH 2 中含有 10 mg,浓度约为 1 mg/ml。

advancedbiomatrix 5021

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步骤工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,在 0.01 N HCl,pH 2 中含有 10 mg,浓度约为 1 mg/ml。III 型胶原蛋白产品采用用户友好的包装,以供使用和储存。这种 III 型胶原蛋白产品经过无菌过滤,作为即用型溶液提供。

III型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初是作为原胶原蛋白生产的,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,原胶原分子被细胞修饰。酶通过添加蛋白质链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的赖氨酸和脯氨酸,然后与细胞外的其他分子交联。III 型原胶原分子从细胞中释放出来,并被酶加工,将分子两端的小片段剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作基质支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

 
参数、测试和方法 III 型胶原蛋白 #5021
杀菌方式 过滤
形式 解决方案
包装尺寸 10 毫克(~10 毫升)
储存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

胶原蛋白浓度 – 双缩脲

0.7-1.25 毫克/毫升
酸碱度 1.8-2.5

偶然代理 – 通过 RPR

人体来源经检测,乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒 1 呈阴性。

电泳图谱 – 考马斯蓝

特征
无菌 – USP 修改 没有增长
内毒素 (LAL) < 10.0 EU/mL
渗透压 (mOsmo H2O/kg) < 35
细胞附着测定 经过
来源 人胎盘

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Phosphosolutions公司Anti-Adenylate Cyclase III-NEW产品代理


Phosphosolutions公司Anti-Adenylate Cyclase III-NEW产品代理

简要描述:公司概况

背景
基因工程– Phosphosolutions是*代可以完整描绘人体的遗传物质序列的企业。
蛋白质体学项目:Phosphosolutions是第二代试图将所有体内蛋白质表达出来的企业。
PhosphoSolutions公司—第三步我们将超越蛋白质体学 进而 专注于磷蛋白质。

详细介绍

产品咨询

 our focus 专业特色

PhosphoSolutions公司专注于蛋白质组学中的一个(10-20%)含量的小部分磷蛋白质。磷蛋白是监管控制组蛋白质的关键,这一部分是被称为phosphosome蛋白质。磷蛋白被认为是在神经系统疾病如老年痴呆症和癌症方面的关键元素,实质上,phosphosome是蛋白质组学作物的精华。

 

公司目标

简明概述:我们要成为世界上的磷蛋白组的提供者。

方案#1, 特异性磷抗体:首先我们要准备磷蛋白组。在激活或磷酸化状态下磷蛋白组是蛋白质识别研究中的*关键工具。

 

Antibodies 抗体

特异性磷抗体:Detection and quantitation of changes in the state of phosphorylation of specific proteins is of great utility in the quest to establish the function of a given protein and the consequences of its reversible phosphorylation. Two methods commonly used to measure protein phosphorylation and dephosphorylation in cell preparations employ prelabeling with 32Pi or back phosphorylation. These methods continue to be very effective and have advantages for many test systems, but they do have several practical and theoretical limitations (Nestler and Greengard, 1984). Based in large part on the successful use of short synthetic peptides to produce epitope-targeted antibodies (Lerner, 1982;Sutcliffe et al., 1983), an immunochemical approach became an attractive alternative for detecting changes in the state of phosphorylation of specific proteins at a specific site. The use of phosphorylation state-specific antibodies takes advantage of the sensitivity and selectivity afforded by immunochemical methodology, combined with relatively simple preparation and potentially broad applications.

The first report of phosphorylation-dependent antibodies appeared in 1981, when polyclonal antibodies that could detect phosphotyrosine-containing proteins were produced by immunization with benzyl phosphonate conjugated to keyhole limpet hemocyanin (KLH) (Ross et al., 1981). Shortly thereafter, Nairn and colleagues reported the production of serum antibodies that distinguished between the phospho- and dephospho-forms of G-substrate, a protein localized to cerebellar Purkinje cells and phosphorylated by cGMP-dependent protein kinase (Nairn et al., 1982). A synthetic heptapeptide, Arg-Lys-Asp-Thr-Pro-Ala-Leu, corresponding to a repeated sequence surrounding two phosphorylated threonyl residues in the intact protein, served as antigen. Rabbit antisera against a peptide-KLH conjugate were specific for the dephospho-form of G-substrate. Phospho-specific antibodies were prepared by immunization of rabbits with the purified phosphoprotein, phosphorylated in vitro to a stoichiometry of 2 mol/mol with cGMP-dependent protein kinase. Despite this initial success, other attempts in our laboratory to produce phospho-specific polyclonal antisera by immunization with the phospho-form of intact proteins were not very successful, probably because of two significant factors. First, many phosphorylated proteins are believed to undergo rapid dephosphorylation during immunization, regardless of the route of injection, leading to the loss of the desired phospho-epitope. Second, holoproteins generally contain multiple immunogenic epitopes; this decreases the probability that colonal dominance for a phospho-specific epitope will be obtained.

Taking a more direct approach utilizing phosphorylated and unphosphorylated forms of synthetic phosphopeptides, we developed a general protocol for the production of phosphorylation state-specific antibodies for substrates with established site(s) of phosphorylation (Czernik et al., 1991)). In early stages of our development of this methodology, phosphopeptides were routinely prepared by enzymatic phosphorylation (Czernik et al., 1991). Although this approach remains perfectly valid today, the preparation of synthetic phosphopeptides using Fmoc derivatives of phosphoamino acids has become the state-of-the-art (Czernik et al., 1995;Czernik et al., 1996). Likewise, we have examined the use of both polyclonal and monoclonal techniques for antibody production. Given the high success rate that we and others have obtained with the polyclonal technique, it has become the method of choice, because it is an easier and less costly method for the average laboratory. However, when appropriate, this approach can be readily adapted for monoclonal antibody production.

参考文献

1. Czernik AJ, Girault J-A, Nairn AC, Chen J, Snyder G, Kebabian J, Greengard P (1991) Production of phosphorylation state-specific antibodies. Methods Enzymol 201: 264-283.

2. Czernik AJ, Mathers J, Mische SM (1997) Phosphorylation state-specific antibodies. Neuromethods: Regulatory Protein Modification: Techniques & Protocols 30: 219-250.

3. Czernik AJ, Mathers J, Tsou K, Greengard P, Mische SM (1995) Phosphorylation state-specific antibodies: preparation and applications. Neuroprotocols 6: 56-61.

4. Lerner, R. A. Tapping the immunological repertoire to produce antibodies of predetermined specificity. Nature 299, 593-596. 1982.

5. Nairn AC, Detre JA, Casnellie JE, Greengard P (1982) Serum antibodies that distinguish between the phospho- and dephospho-forms of a phosphoprotein. Nature (Lond ) 299: 734-736.

6. Nestler, E. J. and Greengard, P. Protein Phosphorylation in the Nervous System. Nestler and Greengard. Protein Phosphorylation in the Nervous System. [8], 255-299. 1984. New York, Wiley. 

8. Sutcliffe JG, Shinnick TM, Green N, Lerner RA (1983) Antibodies that react with predetermined sites on proteins. Science 219: 660-666.

主营产品清单如下:

Item: Anti-Adenylate Cyclase III-NEW!
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Sub-Category:  
SKU/Catalog Number: 85-AC3
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SKU Price Formulation Applications Amount Qty
85-AC3 $325.00 affinity purified polyclonal antibody WB, IF 100 ul

 

advancedbiomatrix III型胶原蛋白说明书

advancedbiomatrix III型胶原蛋白说明书

III型胶原蛋白

溶液,1 mg/ml(人)

目录 #5021

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,含 10 mg,浓度约为 1 mg/ml,溶于 0.01 N HCl,pH 2。

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以无菌溶液形式提供,含 10 mg,浓度约为 1 mg/ml,溶于 0.01 N HCl,pH 2。III 型胶原蛋白产品以用户友好型包装提供,便于使用和储存。这种 III 型胶原蛋白产品经过无菌过滤,并以即用型溶液的形式提供。

III 型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初以原胶原蛋白的形式产生,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,前胶原分子被细胞修饰。酶通过添加链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的氨基酸赖氨酸和脯氨酸,然后交联到细胞外的其他分子。III 型前胶原分子从细胞中释放出来,并由酶加工,这些酶将小片段从分子的任一端剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原蛋白分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作底物支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

参数、测试和方法 III 型胶原蛋白 #5021
灭菌方法 过滤
形式 解决方案
包装尺寸 10 毫克(~10 毫升)
贮存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

胶原蛋白浓度 – 双缩脲

0.7-1.25 毫克/毫升
酸碱度 1.8-2.5

不定因素 – RPR

人源已经过测试,发现乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒-1 呈阴性。

电泳图案 – 考马斯蓝

特征
无菌 – USP 修改 没有增长
内毒素 (LAL) < 10.0 欧/毫升
渗透压 (mOsmo H2O/kg) < 35
细胞附着试验 经过
来源 人胎盘

III型胶原蛋白

粉末,非无菌(人)

目录 #5019

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以 10 mg 非无菌粉末的形式提供。

产品描述

 

这种 III 型胶原蛋白产品是从人类胎盘中分离出来的,并使用多步工艺进行纯化,其中大约 85% 的 III 型胶原蛋白与其余部分由 I 型胶原蛋白组成。该产品以非无菌粉末形式提供。III 型胶原蛋白产品以易于使用的包装提供,以供使用和储存。

III 型胶原蛋白为结缔组织提供结构和强度,存在于身体的许多地方,尤其是皮肤、肺、肠壁和血管壁。胶原蛋白 III 最初以原胶原蛋白的形式产生,这是一种由三个 pro-alpha1(III) 链组成的蛋白质,这些链形成三股绳状分子。合成后,前胶原分子被细胞修饰。酶通过添加链形成稳定分子所必需的化学基团来修饰蛋白质链中的氨基酸赖氨酸和脯氨酸,然后交联到细胞外的其他分子。III 型前胶原分子从细胞中释放出来,并由酶加工,这些酶将小片段从分子的任一端剪下,形成成熟的胶原蛋白。成熟的胶原蛋白分子组装成原纤维。

III 型胶原蛋白通常用作组织培养表面的薄涂层或作为对照。具体说明可在使用说明中找到。该产品通常在体外用作底物支架,以增强细胞附着、粘附和增殖。III 型胶原蛋白可用于培养多种细胞类型。

参数、测试和方法 III型胶原蛋白粉#5019
形式 粉末
包装尺寸 10毫克
贮存温度 2-10°C
保质期 自收到之日起至少 6 个月

不定因素 – RPR

人源已经过测试,发现乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒和免疫缺陷病毒-1 呈阴性。

电泳图案 – 考马斯蓝

特征
内毒素 (LAL) < 10.0 欧/毫升
来源 人胎盘

 

 

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

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分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA,是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

产品简述:

分子杂交炉是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验。

产品特点

1、微电脑控制器提供精确的温度控制。

2、升温速度快

3、管式旋转

4、杂交管易装卸

5、内部使用防腐蚀、镜面不锈钢材料制造

6、双层玻璃门设计,有效防止辐射

7、底部可带摇动基座,一机多用

8、比振荡水浴污染机会少

9、密封性高

技术参数:

型号 LF-I LF-III LF-IIIA
恒温范围 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃
控温精度 ±0.5℃ ±0.5℃ ±0.5℃
温度均匀性误差 ±0.03℃ ±0.03℃ ±0.03℃
温度显示分辨率 01℃ 01℃ 01℃
温度平衡时间 <20 min <20 min <20 min
旋转速度 6.5±0.5r/min 固定 5-20r/min 转速可调 6-25r/min 转速可调
连续工作时间 24小时 24小时 24小时
杂交管容纳数 6个 6个 6个
底部摇动基座
频   率 0-33 Hz 0-33 Hz
振   幅 0-1 mm 0-1 mm
外部尺寸 450*390*370 mm 450*390*400 mm 440*480*430 mm
内部尺寸 340*220*210 mm 340*220*220 mm 340*220*220 mm
随机杂交管 35*240 mm 35*240 mm 35*240 mm
可选配杂交管 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm
显示方式 数显 液晶显示

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002ES

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003ES

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509ES

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004ES

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012ES

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230ES

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214ES

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208ES

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162ES

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234ES

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206ES

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231ES

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225ES

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220ES

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011ES

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221ES

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

60235ES

用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

 

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

 

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Collagenase III 胶原酶III型

100 mg

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Collagenase IV胶原酶IV型

100 mg

40511ES60

Collagenase V胶原酶V型

100 mg

 

HB220705

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

暂无内容

[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

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41002ES

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

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41003ES

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

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40509ES

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

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抑制幼苗生长。

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41012ES

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

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特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214ES

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208ES

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162ES

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234ES

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206ES

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231ES

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225ES

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220ES

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011ES

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221ES

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

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用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

 

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

 

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100 mg

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100 mg

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100 mg

 

HB220705

 

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暂无内容

[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair®  III Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的新一代逆转录酶,与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®  III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kbcDNA

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11302ES12

(10000 U)

11302ES75

(5*10000 U)

11302

Hifair®  III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

50 μL

250 μL

产品应用

全长cDNA文库构建;终点法PCR;实时定量PCR等。

活性定义

Poly(A) .Oligo(dT)为模板引物,在37℃10 min内,将1 nmoldTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期6个月。

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解;

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

第一链cDNA合成操作步骤

1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。)

组分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 ng/μL)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 10 pg -5 μgmRNA:10 pg-500 ng

65℃加热5 min,迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后加入下表中的逆转录反应液,并用移液器轻轻吹打混匀。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

13 μL

5×Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

1 μL

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

3. 逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】

1)当使用Random Primers时,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18Gene Specific Primers,此步可省略;

2)逆转录温度:推荐使用55℃;对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃

3) 可将逆转录时间延长到45-60min,有助于提高产量

485℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。

逆转录产物可立即用于后续PCRqPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

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产品名称

货号

规格

dNTP Mix (10 mM each)

10124ES76

500 μL

10124ES80

1 mL

Bst II DNA polymerase

12908ES60

1600 U

12908ES97

8000 U

12908ES98

40000 U

Murine RNase inhibitor (40 U/μL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES05

2 KU

10603ES10

10 KU

10603ES20

100 KU

10603ES60

200 KU

 

HB210923

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

Hifair®  III Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的新一代逆转录酶,与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®  III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kbcDNA

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11302ES12

(10000 U)

11302ES75

(5*10000 U)

11302

Hifair®  III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

50 μL

250 μL

产品应用

全长cDNA文库构建;终点法PCR;实时定量PCR等。

活性定义

Poly(A) .Oligo(dT)为模板引物,在37℃10 min内,将1 nmoldTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期6个月。

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解;

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

第一链cDNA合成操作步骤

1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。)

组分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 ng/μL)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 10 pg -5 μgmRNA:10 pg-500 ng

65℃加热5 min,迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后加入下表中的逆转录反应液,并用移液器轻轻吹打混匀。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

13 μL

5×Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

1 μL

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

3. 逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】

1)当使用Random Primers时,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18Gene Specific Primers,此步可省略;

2)逆转录温度:推荐使用55℃;对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃

3) 可将逆转录时间延长到45-60min,有助于提高产量

485℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。

逆转录产物可立即用于后续PCRqPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

相关产品

产品名称

货号

规格

dNTP Mix (10 mM each)

10124ES76

500 μL

10124ES80

1 mL

Bst II DNA polymerase

12908ES60

1600 U

12908ES97

8000 U

12908ES98

40000 U

Murine RNase inhibitor (40 U/μL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES05

2 KU

10603ES10

10 KU

10603ES20

100 KU

10603ES60

200 KU

 

HB210923

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

Titan III 醋酸纤维薄膜


Titan III 醋酸纤维薄膜

简要描述:Titan III 醋酸纤维薄膜,Titan III Cellulose Acetate Membranes

详细介绍

产品咨询

 

Titan III 醋酸纤维薄膜

 

Titan III 醋酸纤维薄膜是适用于常规临床分离的研究程序的所有电泳Titan III 醋酸纤维薄膜的分辨率优于其他纤维素醋酸薄膜,由于其凝胶结构既润可以滑开口,起到缓冲作用因此,可以减少馏分分离的速度,改善分辨率Titan III一直以来被各大实验室做为特定的电泳分析优化工具

 

Titan III  ,醋酸纤维薄膜,Titan III 醋酸纤维薄膜,Titan III 醋酸纤维薄膜代理,Titan III Cellulose Acetate Membranes,Titan III ,Cellulose Acetate Membranes,helena Titan III,helena醋酸纤维薄膜

Titan III Cellulose Acetate Membranes

Plate Type Cat. No. Size Package
Titan III 3013 76 x 25 mm 25/box
See Serum Proteins 3023 60 x 76 mm 25/box
  3024 94 x 76 mm 25/box
  3033 76 x 76 mm 100/box
       
Titan III-H 3021 94 x 76 mm 25/box
See Hemoglobins 3022 60 x 76 mm 25/box
       
Titan III Lipo 3900 60 x 76 mm 25/box

 

BHC-III苏洁*

BHC-III苏洁*

品牌

BHC-III苏洁*具有全封闭、全负压和全排放的特点。的空气经两道过滤后全排放到实验室系统的排风系统集中处理。符合YY0569标准和美国NSF/ANSI49标准中的三级生物安全柜的要求。

现货,!

BHC-III苏洁*

产品简述:
 
BHC-III苏洁*是用于微生物学,生物医学,生物安全实验室和其它实验室的生物安全防护隔离设备。它采用了的空气净化技术和负压箱体设计,实现了对环境,人员和样品的保护,可以防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散;对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护,是实验室生物安全一级防护屏障中基本的安全防护设备。采用支架式结构,支架与箱体可分离,便于搬运和就位。

产品特点: 
◎符合YY0569标准和美国NSF/ANSI49标准中的三级生物安全柜的要求。 
◎0%气体循环,适用于挥发性有毒、放射性物质的样品。 
◎具有全封闭、全负压和全排放的特点。的空气经两道过滤后全排放到实验室系统的排风系统集中处理。 
◎符合人体工学原理的10°倾斜角设计,操作感受更佳。 
◎工作区内部为整体优质不锈钢板制成,便于清洁、消毒和灭菌。 
◎全封闭式加强型安全玻璃前窗,用严格的物理方法通过隔离手套进行柜内操作。 
◎安全柜右侧设有传递窗,内有紫外线杀菌灯,使产品在传递窗中就可杀菌。 
◎空气经高质量的ULPA超高效过滤器,针对>0.12微米颗粒具有99.999%的截流效率,双重过滤后外排,确保产品样品、实验室工作人员以及实验室环境的安全防护。 
◎内外隔离阀门,适合内部的灭菌处理。 
◎柜体外部采用抗菌涂层,可抑制细菌在表面的滋生。 
◎支架式的安全柜,支架与上箱体可以分离,便于搬运与就位。

型号及技术参数:

参数/型号 BHC-III
洁净等级 HEPA:ISO 5级(100级Class100)/ULPA:ISO 4级(10级Class 10)
过滤器级别/过滤效率 HEPA:≥99.995%,@0.3μm/ULPA:≥99.999%,@0.12μm
平均送风风速 0.35m/s
吸入口风速 0.6m/s
噪   音 58-65dB(A)
振动半峰值 ≤3μm
光照度 ≥300Lx
   
大功耗 0.6KW
内部压力 -125
电源 -220V,50Hz
重量 340 kg 380 kg
手套口数量 2只 4只
工作区尺寸 1000×600×600 mm 1300×600×600 mm
外形尺寸 1600×660×1980mm 1800×660×1980 mm
日光灯/紫外灯规格及数量 30①/30① 30×②
   
适用人数 单人 双人

BHC-III苏洁*

InGex TGIRT-III Enzyme 说明书

世界*实验材料供应商 InGex上海金畔生物为其中国代理, InGex在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, InGex就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

InGex中国代理InGex上海代理, InGex北京代理,InGex广东代理, InGex江苏代理InGex湖北代理,InGex天津,InGex黑龙江代理,InGex内蒙古代理,InGex吉林代理,InGex福建代理, InGex江苏代理, InGex浙江代理, InGex四川代理,

 

InGex.com是Ingex有限责任公司的所在地,也是TGIRT™-III独立酶和TGIRT™模板切换RNA-seq试剂盒的*销售商。

 

TGIRT™-III Enzyme

TGIRT™-III酶

*规格:

  •  10 Reactions (TGIRT10)
  •  50 Reactions (TGIRT50)
  •  5 x 50 µl (TGIRT5x50)
  •  10 x 50 µl (TGIRT10x50)

单位定义:

  • TGIRT的一个单元® -III逆转录酶(RT)活性是酶的使用聚在60℃下聚合1纳摩尔的dNTP的在1分钟(RA)所需要的量/寡(dT)42作为底物。

酶浓度:

  • 200单位/μl

酶储存缓冲液:

  • 20mM Tris-HCl(pH7.5),500mM KCl,1mM EDTA,1mM DTT,50%甘油

酶性质和新型活性:

  • 比逆转录病毒逆转录酶更高的热稳定性,持续性和保真度,允许从高度结构化或严格修饰的RNA进行全长的端到端cDNA合成。1
  • 新的端对端模板切换活动,其能够在逆转录过程中连接RNA-seq或PCR适配器,并且不再需要单独的RNA 3' – 衔接子连接步骤。1这种模板切换活动大大促进了链特异性RNA-seq文库的构建,其偏倚偏差小于使用随机六聚体引物的方法,或者使用RNA连接酶进行衔接连接。1,4,7,8
  • 退火引物有效的cDNA合成 将退火的引物应具有推测的T  > 60 ö下用在反应混合物中基板在室温下,通过加入dNTP的反应开始30分钟酶的建议预孵育。新应用的*条件应通过测试25至450 mM NaCl的盐浓度范围来确定。

酶的建议用途:

  1. 综合股特异性转录组分析。8
  2. 全细胞,外来体,血浆和其他无细胞RNA的RNA-seq。7,8
  3. miRNA和其他小型非编码RNA的分析。1,11,14
  4. 通过高通量测序鉴定RNA碱基修饰。4,5,12,13
  5. RIP-seq,HITS-CLIP,CRAC,​​核糖体分析。1,9
  6. 使用诸如SHAPE和DMS修饰之类的方法进行RNA结构映射。1,15
  7. 长cDNA的合成 1
  8. RT-qPCR的。1
  9. 用于表征RNA-蛋白质相互作用的irCLIP。9
  10. DMS-MaPseq用于全基因组或靶向RNA结构体内探测15
  11. FFPE肿瘤样本分析(咨询InGex)
  12. 通过TGIRT®模板切换的单链DNA-seq(参见InGex)

酶的优点:

  1. 综合转录组分析比传统方法更少的偏差。

    根据zui近的出版物,核糖核酸裂解的片段化通用人参考RNA样品的TGIRT-seq 概括了与非链特异性TruSeq v2相比较的人转录本和尖峰的相对丰度,优于链特异性Tru-Seq v3。TGIRT®-seq比TruSeq v3显着更强的链特异性,并消除TruSeq固有的随机六聚体启动的取样偏差。TGIRT®-seq显示更均匀的5'至3'基因覆盖,并识别比TruSeq更多的剪接点。TGIRT®-seq可以在与结构化小ncRNA(包括tRNA)相同的RNA序列中同时进行mRNA和mRNA的分析,这些tRNA基本上不存在于TruSeq数据集中。8

  2. 全细胞,外来体,血浆和其他细胞外RNA的RNA-seq。

    快速处理时间(通过PCR步骤对RNA-seq文库构建<5小时); 需要少量RNA(低ng范围); 全面的转录谱,包括mRNA和lncRNA以及小ncRNA,包括tRNAs,pre-miRNAs和其他结构化小ncRNA的全长读数; 较常规方法较少的偏差和较大的链特异性。7,8

  3. 比逆转录病毒RT更高的持续性和链置换活性。

    • 使用锚定寡核苷酸(dT)引物构建多聚腺苷酸化RNA的RNA-seq文库,具有比没有核糖核酸步骤的逆转录病毒RT更均匀的5'至3'覆盖率。1
    • 通过基于毛细管电泳的方法,如SHAPE或DMS结构图,通过显着的长度读取长度和比逆转录病毒RT更少的过早停止来实现RNA结构测绘1
    • 使得可以获得tRNA和其他小的ncRNA的全长的端到端cDNA,这些cDNA对于逆转录病毒RT是难治的。4-7
  4. 通过TGIRT®模板切换的RNA-seq文库构建,如miRNA分析,RIP-seq,HITS-CLIP,CRAC,​​核糖体分析等方法。

    快速处理时间(通过PCR步骤对RNA-seq文库构建<5小时); 需要少量RNA(低ng范围); 不需要RNA连接酶,通过在该过程中具有较少的步骤,偏倚较小并且更有效。

参考文献:

    1. Mohr,S.,Ghanem,E.,Smith,W.,Sheeter,D.,Qin,Y.,King,O.,Polioudakis,D.,Iyer,VR,Hunicke-Smith,S.Swamy, Kuersten,S.and Lambowitz,AM Thermostable group II intron reverse transcriptase fusion proteins and their use in cDNA synthesis and next generation RNA sequencing。RNA 19,958-970,2013。
    2. Collins,K。和Nilsen,T. Enzyme engineering through evolution:热稳定重组II内含子逆转录酶为RNA研究和生物技术提供了新的工具。RNA 19,1017-1018,2013。
    3. Enyeart,PJ,Mohr,G.,Ellington,AD和Lambowitz AM移动组II内含子及其逆转录酶的生物技术应用:基因靶向,RNA-seq和非编码RNA分析。 DNA 5:2,2014。
    4. Katibah,GE,Qin,Y.,Sidote,DJ,Yao,J.,Lambowitz,AM和Collins,K.Ban and adaptability RNA structure recognition by the human interferon-induced tetratricopeptide repeat protein IFIT5。PROC。国家科。科学院。科学。,USA,  111,12025-12030,2014。  
    5. Shen,PS,Park,J.,Qin,Y.,Li,X.,Parsawar,K.,Larson,MH,Cox,J.,Chen,Y.,Lambowitz,AM,Weissman,JS,Brandman,O. ,和Frost,A.Rqc2p和60S核糖体亚基介导新生链的mRNA非依赖性伸长。科学347,75-78,2015年。
    6. Zheng,G.,Qin,Q.,Clark,WC,Yi,C.,He,C.,and Lambowitz,AMand Pan,T.Efficient and quantitative high-throughput transfer RNA sequencing。Nature Methods,12,835-837,2015。
    7. Qin,Y。,Yao,J。,Wu,D。,Nottingham,R.,Mohr,S,Hunicke-Smith,S.,Lambowitz,AM,High-throughput sequencing of human plasma RNA by using thermostable group II intron reverse酶。RNA 22,111-128,2016。
    8. Nottingham,RM,Wu,DC,Qin,Y.,Yao,J.,Hunicke-Smith,S.,and Lambowitz,AM RNA-seq of human reference RNA samples using a thermostable group II intron reverse transcriptase。RNA,22,597-613,2016。
    9. Zarnegar,BJ,Flynn,RA,Shen,Y.,Do,BT,Chang,HY和Khavari,PA irCLIP platform for characterization of protein-RNA interactions。Nature Methods 13,489-492,2016。
    10. Haque,N.和Hogg,JR更容易,更好,更快,更强:改进的RNA-蛋白质相互作用研究的方法,Mol。Cell,2016 http //dx.doi.org/10.1016/j.molcel.2016.05.019
    11. Bazzini,AA,del Viso,F.,Moreno-Mateos,MA,Johnstone,TG,Vejnar,CE,Qin,Y.,Yao,J.,Khokha,MK和Giraldez,AJ Codon identity regulates mRNA stability and translation efficiency在产妇到合子过渡期间。EMBO J. 35,2087年至2103年,2016。
    12. Clark,WC,Evans,ME,Dominissini,D.,Zheng,G.and Pan,T.tRNA base methylation identification and quantification via high-throughput sequencing。RNA 22,1771年至1784年,2016。
    13. Liu et al。ALKBH介导的tRNA去甲基化调节翻译。细胞167, 816-828,2016年,
    14. Burke,JM,Kincaid,RP,Nottingham,RM,Lambowitz,AM和Sullivan,CS DUSP11对三磷酸化转录物的活性促进Argonaute与非病毒性病毒微小RNA的结合并调节细胞非编码RNA的稳态水平。基因与发育30,2076年至2092年,2016年
    15. Zubradt,M.,Gupta,P.,Persad,S.,Lambowitz,AM,Weissman,JS和Rouskin,S.DMS-MaPseq for genome-wide or targeted RNA structure probing in vivo。自然方法10.1038 / nmeth.4057,2016。

 

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货号  品名  规格  价格   品牌 
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TGIRT 5 x 50 TGIRT™-III Enzyme 5 x 50 ul 44115  InGex
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