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genebridges A001说明书

发表于由

 

gene bridges全国代理商- 上海金畔生物genebridges A001说明书

PGK-GB2-NEO

€299.00 *

 

描述

 

设计PGK-gb2-neo模板以允许在原核和真核细胞中选择新霉素/卡那霉素。

PGK-gb2-neo模板编码新霉素/卡那霉素抗性基因，该基因结合了原核启动子（gb2）在大肠杆菌中表达卡那霉素抗性用真核启动子（PGK）在哺乳动物细胞中表达新霉素抗性。原核启动子gb2是Em7启动子的略微修饰形式。它比通常使用的Tn5启动子介导更高的转录效率。小鼠磷酸葡萄糖激酶基因（PGK）的启动子用作真核启动子。合成的多腺苷酸化信号终止卡那霉素/新霉素表达。使用提供的PCR模板，可以容易地产生侧翼为任何限制性位点的PGK-gb2-neo盒，以将盒克隆到所选择的载体中。可以通过在PCR引物中添加相应的序列来引入限制性位点。模板可以容易地用于产生由单个Red / ET重组步骤介导的靶向构建体。

PGK-gb2-neo模板不是线性的，而是基于质粒的（大小为3,377bp）。由于其R6K起源，它不能在大多数大肠杆菌菌株中复制。因此PCR产物可以直接用于下游应用而无需任何进一步纯化。使用每个反应1μl作为模板，可以进行至少20次PCR反应。

内容

  • PCR模板（50 ng /μl，20μl）

  • 手册

序列

PGK-GB2-NEO

启动子 neo R   终止子 

GCGGCCGCATT CTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCAT GCGCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCTCGC ACACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCT TCGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCT CGCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAG ATGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAAT AGCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGG GGGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGA GGCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTT CCTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGG CATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATC GGCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGG CTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGT TCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGG TGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACG GGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGC TGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGC CGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCG GCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTC GGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCT CGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGAT CTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCC GCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGA CATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGAC CGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCT ATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCG ACCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTA TTTTCATGATCTGTGTGTTGGTTTTTTTTTGCGGCGCG CTCGAG

genebridges

发表于由

genebridges

简要描述：Gene Bridges GmbH, founded 2000 as a spin-off of the European Molecular Biology Laboratories （EMBL）, commercialises the patented Red/ET Recombination technology. In May

详细介绍

产品咨询

世界*实验材料供应商 Gene Bridges GmbH 上海金畔生物为其中国代理， Gene Bridges GmbH 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为优质的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， Gene Bridges GmbH 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Gene Bridges是一家依托欧洲分子生物技术实验室(EMBL)，成立于2000年6月的高科技生物科技公司，该公司拥有的技术Red/ET基因重组技术可实现DNA任意位点的克隆/亚克隆，以及精准的克隆出如BACs或大肠杆菌染色体的超长NDA分子，已经为多个制药企业、生物技术公司及科研院所提供大量的基因克隆及超过500个已结题的DNA修饰项目。

Gene Bridges公司的专业团队拥有娴熟的技术人员及深悉分子及微生物技术、小鼠基因组学、转基因技术、生物化学、代谢工程及工业化的资深科学家。力求为生命科学研究领域及产业化提供优质的真核/原核基因重组、表达产品与服务。

Gene Bridges公司主要产品：

一、Red/ET试剂盒：该系列产品包括：

（1）Quick & Easy BAC（细菌人工染色体）修饰试剂盒，用于所有类型的BCA基因修饰。

（2）Counter Selection BAC Modification Kit：使用counter-selection cassette用于高级的BAC及细菌染色体的修饰。

（3）BAC Subcloning Kit

用于BAC质粒DNA段的亚克隆。

（4）Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – FRT

用于简便快速的FRT位点整合入大的质粒载体的任意需要位点（适用于转基因小鼠的模型制作）

（5）Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – loxP

用于简便快速的loxP位点整合入大的质粒载体的任意需要位点（适用于转基因小鼠的模型制作）

（6）Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit

用于E. coli染色体上基因的快速敲出或修饰。

（7）E. coli strain GB05-dir

用于直接克隆E. coli的linear plus linear 同源重组。

（8）E. coli strain GB08-red

用于基因重组E. coli 的 linear plus circular同源重组。

二、Red/ET重组的筛选盒（selection cassettes）该系列产品包括：

（1）PGK-gb2-neo：原核/真核生物+新霉素筛选盒

（2）FRT-PGK-gb2-neo-FRT：原核/真核生物+新霉素+ FRT位点筛选盒

（3）loxP-PGK-gb2-neo-loxP：原核/真核生物+新霉素+loxP 位点筛选盒

（4）FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP：原核/真核生物+新霉素+ FRT位点+下游loxP 位点筛选盒

（5）loxP-FRT-PGK-gb2-neo-FRT：原核/真核生物+新霉素+ FRT位点+上游loxP 位点筛选盒

（6）FRT-gb2-cm-FRT：原核生物+氯霉素+ FRT位点筛选盒

（7）loxP-gb2-cm-loxP：原核生物+氯霉素+ loxP位点筛选盒

（8）FRT-gb2-amp-FRT：原核生物+氨苄青霉素+ FRT位点筛选盒

（9）loxP-gb2-amp-loxP：原核生物+氨苄青霉素+ loxP位点筛选盒

（10）FRT-PGK-gb2-hygro-FRT：原核/真核生物+潮霉素+ FRT位点筛选盒

（11）loxP-PGK-gb2-hygro-loxP：原核/真核生物+潮霉素+ loxP位点筛选盒

（12）iCre-FRT-neo-FRT：原核/真核生物+改良密码子的Cre (iCre) +新霉素+ 前后FRT位点筛选盒

（13）iCreERT2-FRT-neo-FRT：原核/真核生物+配体诱导的Cre (iCre)+ 前后FRT位点筛选盒T

三、重组的表达质粒：该系列产品有多款表达性质粒，包括：

（1）707-FLPe, tet：抗四环素的Flp表达质粒（仅用于E. coli）

（2）707-FLPe, cm：抗氯霉素的Flp表达质粒（仅用于E. coli）（3）707-FLPe, amp：抗氨苄青霉素的Flp表达质粒（仅用于E. coli）（4）710-FLPe, km：抗卡那霉素的Flp表达质粒（仅用于E. coli）

（5）705-Cre, cm：抗氯霉素的Cre表达质粒（仅用于E. coli）

（6）706-Cre, tet：抗四环素的Cre表达质粒（仅用于E. coli）（7）704-Cre,amp：抗氨苄青霉素的Cre表达质粒（仅用于E. coli）

（8）pCAGGS-FLPe (科研/工业化)：增强的真核生物FLP表达质粒（适用于37°C）

（9）pCAGGS-FLPo：真核生物FLP重组酶表达质粒，其重组酶密码子配对被改良以促进其在哺乳动物细胞内表达。（工业化生产需Fred Hutchinson肿瘤研究中心批准）

（10）pCAGGS-Cre：真核生物Cre表达质粒

（11）pCAGGS-Dre：真核生物Dre重组酶表达质粒。（工业化生产需Stowers医学研究所批准）

（12）pSC101-BAD-Cre： Arabinose诱导原核生物Cre重组酶表达质粒。

（13）pSC101-BAD-Dre ：Arabinose诱导原核生物Dre重组酶表达质粒。（工业化生产需Stowers医学研究所批准）

（14）pSC101-BAD-FLPe：Arabinose诱导原核生物FLP重组酶表达质粒。

部分产品报价：

货号 品名 包装 价格 品牌
K004 Quick & Easy Red/ET Conditional Knock Out Kit – FRT （need license to buy） Kit 16146 genebridges
K005 Quick & Easy Red/ET Conditional Knock Out Kit – loxP （need license to buy） Kit 16146 genebridges
K006 Quick & Easy Red/ET E. coli Gene Deletion Kit （need license to buy） Kit 13806
A008 Red/ET Ampicillin Selection Cassette, FRT-flanked （FRT-amp-FRT） 50ng/ul,20ul 6435
A009 Red/ET Ampicillin Selection Cassette, loxP flanked （loxP-amp-loxP） 50ng/ul,20ul 6435
K003 Red/ET BAC Subcloning Kit （need license to buy） Kit 14040
A006 Red/ET Chloramphenicol Selection Cassette, FRT-flanked （FRT-cm-FRT） 50ng/ul,20ul 6435
A007 Red/ET Chloramphenicol Selection Cassette, loxP-flanked （loxP-cm-loxP） 50ng/ul,20ul 6435
K002 Red/ET Counter Selection BAC Modification Kit （need license to buy） Kit 18486
A112 Red/ET Cre Expression Plasmid:705-Cre, cm-selection 0.2ug/ul,20ul 6435
A113 Red/ET Cre Expression Plasmid:706-Cre, tet-selection 0.2ug/ul,20ul 6435
A201 Red/ET Enhanced Eukaryotic FLP Expression Plasmid: pCAGGS-FLPe （Academic price, requires MTA） 0.2ug/ul,20ul 8775
A202 Red/ET Enhanced Eukaryotic FLP Expression Plasmid: pCAGGS-FLPe （Industry price, requires MTA） 0.2ug/ul,20ul 76050
A104 Red/ET Enhanced Flp Expression Plasmid:707-FLPe, tet-selection 0.2ug/ul,20ul 6435
A105 Red/ET Enhanced Flp Expression Plasmid:708-FLPe, cm-selection 0.2ug/ul,20ul 6435
A010 Red/ET Hygromycin Selection Cassette, FRT-flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （FRT-PGK-gb2-hygro-FRT） 50ng/ul,20ul 6435
A011 Red/ET Hygromycin Selection Cassette, loxP-flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （loxP-PGK-gb2-hygro-loxP） 50ng/ul,20ul 6435
A005 Red/ET Neomycin Selection Cassette plus loxP site 2nd version, FRT flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （loxP-FRT-PGK-gb2-neo-FRT） 50ng/ul,20ul 6435
A004 Red/ET Neomycin Selection Cassette plus loxP site, FRT flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP） 50ng/ul,20ul 6435
A002 Red/ET Neomycin Selection Cassette, FRT-flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （FRT-PGK-gb2-neo-FRT） 50ng/ul,20ul 6435
A003 Red/ET Neomycin Selection Cassette, loxP-flanked, Prokaryotic and Eukaryotic （loxP-PGK-gb2-neo-loxP） 50ng/ul,20ul 6435
A001 Red/ET Neomycin Selection Cassette, Prokaryotic and Eukaryotic （PGK-gb2-neo） 50ng/ul,20ul 6435
K001 Red/ET Quick & Easy BAC Modification Kit （need license to buy） Kit 15687

 

 

上海金畔生物科技有限公司

genebridges K002说明书

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genebridges K002说明书

 

计数器选择BAC修改套件

对于使用反选择盒的BAC修饰，也用于细菌染色体

  • ID：K002

 

 

Counter Selection BAC Modification Kit

计数器选择BAC修改套件

 

特征

  • 快速BAC修改（2-3周）

  • 高红/ ET重组效率

  • 方便地去除Red / ET质粒

  • 效率远高于pSacB-neo系统

应用

  • 片段交换

  • 标记插入和删除，不留选择标记或任何不需要的序列

  • 引入短序列，例如点突变，loxP位点，限制性位点等。

  • 也可用于细菌染色体修饰和常见的ColE1起源质粒

 

描述

 

这是基于链霉素选择的反选择盒pRpsL-neo的新版本。该试剂盒设计用于通过使用反选择盒在2-3周内修饰任何类型的细菌人工染色体（BAC）。包括的反选择盒pRpsL-neo基于链霉素选择，其显示出比pSacB-neo或类似系统高得多的效率。该试剂盒还可用于细菌染色体和常见的ColE1起源质粒。该试剂盒结合了高Red / ET效率以及重组后方便去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

内容

  • 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET。通过用该质粒转化，可以使任何大肠杆菌菌株Red / ET熟练

  • BAC宿主大肠杆菌菌株DH10B已携带Red / ET质粒

  • pRpsL-新霉素模板用于您自己的实验

  • 在150kb BAC中引入点突变的阳性对照

  • 详细的方案，质粒描述，图谱和序列

 

Sequences

rpsL-kanR/neoR selection cassette

promoter  rpsL  kanR/neoR 

GGCCTGGTGATGATGGCGGGATCGTTGTATATTTCTTGACACCTTTTCGGCATCG CCCTAAAATTCGGCGTCCTCATATTGTGTGAGGACGTTTTATTACGTGTTTACGA AGCAAAAGCTAAAACCAGGAGCTATTTAATGGCAACAGTTAACCAGCTGGTACGC AAACCACGTGCTCGCAAAGTTGCGAAAAGCAACGTGCCTGCGCTGGAAGCATGCC CGCAAAAACGTGGCGTATGTACTCGTGTATATACTACCACTCCTAAAAAACCGAA CTCCGCGCTGCGTAAAGTATGCCGTGTTCGTCTGACTAACGGTTTCGAAGTGACT TCCTACATCGGTGGTGAAGGTCACAACCTGCAGGAGCACTCCGTGATCCTGATCC GTGGCGGTCGTGTTAAAGACCTCCCGGGTGTTCGTTACCACACCGTACGTGGTGC GCTTGACTGCTCCGGCGTTAAAGACCGTAAGCAGGCTCGTTCCAAGTATGGCGTG AAGCGTCCTAAGGCTTAAGGAGGACAATCATGATTGAACAAGATGGATTGCACGC AGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGCTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAG ACAATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTTCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGG TTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGTGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGC AGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGGGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGAC GTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCTGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGG ATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCCGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGC AATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGGCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCG AAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCGGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGG ATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTCGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCT CAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATCTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGC TTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCGCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCC GGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGACATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGC TGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACCGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCC GCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGA

 

 

genebridges K006说明书

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genebridges K006说明书

 

Quick & Easy E.coli Gene Deletion Kit

快速简便的大肠杆菌基因删除试剂盒

用于快速敲除或修饰大肠杆菌染色体上的基因。

 

特征

  • Red / ET的忠实重组
  • 快速准确
  • 可能有多个淘汰赛
  • 方便地去除重组质粒

应用领域

  • 该试剂盒旨在在不到一周的时间内敲除或改变大肠杆菌染色体上的基因

大肠杆菌染色体上基因的靶向破坏

1.转化用表达质粒pRedET转化将被修饰
的大肠杆菌菌株。

2. Red / ET重组
Red / ET表达是通过添加L-阿拉伯糖和温度变化来诱导的。含有50 bp同源臂的FRT-PGK-gb2-neo-FRT盒被转化。Red / ET介导的重组通过插入盒带破坏了靶基因座。

3.可选：去除选择标记
Flp介导的切除，仅留下一个FRT部位。（另请参见我们的FRT选择盒和Flp表达质粒和菌株）。

描述

Red / ET重组使碱基对可以准确，特异性和忠实的方式交换遗传信息。试剂盒随附有FRT侧翼的卡那霉素抗性标记盒，可用于替换大肠杆菌染色体上的基因。Red / ET重组可替代大肠杆菌染色体上长达30kb的片段。如果需要，使用FRT侧翼抗性盒替代靶基因可以随后通过FLP重组酶步骤去除选择标记。FLP表达质粒可以从Gene Bridges购买。通过重复插入试剂盒附带的功能盒或与Gene Bridges提供的其他功能盒组合，可以产生多个基因敲除。重组过程由于pRedET表达质粒的优化设计而受到严格控制。重组蛋白的基因在诱导型启动子的控制下，质粒带有温度敏感的复制起点，可在重组后方便地去除质粒。

内容

  • 两个Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET（tet）和pRedET（amp）。通过用这些质粒转化，可以使任何大肠杆菌菌株变成Red / ET熟练的。
  • FRT位于卡那霉素抗性模板的侧面（FRT-PGK-gb2-neo-FRT），可用于您自己的实验。
  • 替代大肠杆菌染色体上甘露糖转运蛋白（manX）基因的阳性对照。
  • 详细的协议，质粒，图谱和序列的描述。

顺序

FRT-PGK-gb2-neo-FRT

AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATT CTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGA GAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTGGTTTTTGTGTGCGGCGCG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTC CTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA

 

genebridges A104说明书

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genebridges A104说明书

重组酶表达质粒

707-FLPe，tet

具有四环素抗性标记的Flp表达质粒仅用于大肠杆菌

  • ID：A104

 

707-FLPe，tet

描述

 

FLPe表达质粒能够在大肠杆菌中进行FLP介导的定点重组，并在30℃下以低拷贝数繁殖。所述FLPE基因由λR启动子驱动，并且下热不稳定子cI857阻遏物控制。从30℃升温至37℃的温度导致瞬时FLPe重组酶表达。由于表达质粒由于其pSC101复制起点而不再在37℃复制，因此它们终会丢失。与野生型FLP蛋白相比，FLPe具有改善的热稳定性并且在37-40℃显示出增强的重组酶活性。

内容

  • 表达质粒编码FLPe重组酶，四环素抗性（200 ng/μl，20μl）

  • 手册

可用的FLPe表达质粒

名称 货号 阻力标记 推荐药物浓缩。
707-FLPE A104 四环素 3μg/ ml
708-FLPE A105 氯霉素 15μg/ ml
709-FLPE A106 氨苄西林 50μg/ ml
710-FLPE A107 卡那霉素 15μg/ ml

genebridges K001说明书

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genebridges K001说明书

Quick & Easy BAC Modification Kit

 

快速简便的BAC修改套件

  • ID: K001

特征

  • 快速可靠地克隆大DNA分子

  • 在选择的位置进行的DNA修饰

  • 独立于限制网站

  • 没有尺寸限制

应用

  • 简单的BAC修饰，如插入选择标记，删除带有选择标记基因的片段，插入功能片段和选择标记基因

  • 该试剂盒也可用于细菌染色体修饰

 

 

描述

该试剂盒旨在通过革命性的Red / ET重组技术对BAC进行修饰 – 这是一种强大的工具，可在2周内将修饰（如插入和缺失）引入任何类型的BAC。

红/ ET重组使用体内重组和校对活动来小化构建体中不需要的突变。套件中包含了修改BAC所需的所有必要内容以及执行控制实验所需的所有材料，旨在让您熟悉这种新技术。另外，转化任何大肠杆菌的载体提供了用于应用Red / ET重组的感受态菌株的菌株。pSC101-BAD-gbaAtet带有四环素抗性盒。该盒含有温度敏感的复制起点（ori），只能在30°C繁殖 – 在37°C时质粒会丢失。这允许在不再需要质粒时简单地去除质粒。为了引入突变（即选择盒，如该试剂盒中包含的新霉素抗性盒），首先必须将同源序列引入选择盒。这可以通过简单的PCR反应来完成。这些短的同源序列（每个50nt）可以根据您的实验需要自由选择。只需选择要修饰的位置，并使用Red / ET重组技术将选择盒直接插入所需的核苷酸。然后需要用诱导的Red / ET重组系统在细菌中电穿孔PCR产物。在成功进行Red / ET重组后，可以使用常规DNA微量制备方法回收修饰的DNA。

内容

  • pSC101-BAD-gbaA（tet）是基于Red / ET表达质粒的pSC101 ori（温度敏感起源）的衍生物

  • 携带pSC101-BAD-gbaA（tet）的BAC宿主

  • 用于修饰150kb BAC的阳性对照实验（携带pSC101-BAD-gbaA的宿主中的BAC克隆，用于在BAC骨架中缺失的新PCR产物，在宿主中作为阳性重组体的BAC-neo克隆）

  • 方案，质粒描述，寡核苷酸图谱和序列

 

Sequences

Tn5-kanR/neoR selection cassette

Tn5-promoter  kanR/neoR

TGGACAGCAAGCGAACCGGAATTGCCAGCTGGGGCGCCCTCTGGTAAGGTTGGGA AGCCCTGCAAAGTAAACTGGATGGCTTTCTTGCCGCCAAGGATCTGATGGCGCAG GGGATCAAGATCTGATCAAGAGACAGGATGAGGATCGTTTCGCATGATTGAACAA GATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGCTATTCGGCTATG ACTGGGCACAACAGACAATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTTCCGGCTGTCAGC GCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGTGCCCTGAATGAA CTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGGGCGTTCCTTGCG CAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCTGCTATTGGGCGA AGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCCGAGAAAGTATCC ATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGGCTACCTGCCCAT TCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCGGATGGAAGCCGG TCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTCGCGCCAGCCGAA CTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATCTCGTCGTGACCC ATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCGCTTTTCTGGATT CATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGACATAGCGTTGGCT ACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACCGCTTCCTCGTGC TTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTATCGCCTTCTTGA

CGAGTTCTTCTGACTCGAG

 

 

货号 品名 规格 价格
K001 * Quick & Easy BAC Modification Kit Kit 13900
K002 * Counter Selection BAC Modification Kit Kit 16400
K003 * BAC Subcloning Kit Kit 13900
K004 * Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – FRT Kit 13900
K005 * Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – loxP Kit 13900
K006 *Quick & Easy E.Coli Gene Deletion Kit Kit 13900
K008 *Direct-cloning-proficient E.coli  strain GB05-dir Kit 12400
K009 *Recombineering-proficient E.coli  strain GB08-red Kit 12400
A001 Pro- and Eukaryotic Neomycin Selection Cassette (PGK-gb2-neo) 50ng/ 5980
A002 FRT flanked, Pro and Euk. Neomycin Select. Cassette (FRT-PGK-gb2-neo-FRT) 50ng/ 5980
A003 loxP flanked, Pro and Euk. Neomycin Select. Cassette (loxP-PGK-gb2-neo-loxP) 50ng/ 5980
A004 FRT flanked, Pro and Euk. Neomycin Select. Cassette plus loxP site(FRT-PGK-gb2-neo-FRT-loxP) 50ng/ 5980
A005 FRT flanked, Pro and Euk. Neomycin Select. Cassette plus loxP site 2nd version (loxP-FRT-PGK-gb2-neo-FRT) 50ng/ 5980
A006 FRT flanked Chloramphenicol Select. Cassette (FRT-cm-FRT) 50ng/ 5980
A007 loxP flanked Chloramphenicol Select. Cassette (loxP-cm-loxP) 50ng/ 5980
A008 FRT flanked Ampicillin Select. Cassette (FRT-amp-FRT) 50ng/ 5980
A009 loxP flanked Ampicillin Select. Cassette (loxP-amp-loxP) 50ng/ 5980
A010 FRT flanked, Pro and Euk. Hygromycin Select. Cassette (FRT-PGK-gb2-hygro-FRT) 50ng/ 5980
A011 loxP flanked, Pro and Euk. Hygromycin Select. Cassette (loxP-PGK-gb2-hygro-loxP) 50ng/ 5980
A012 iCre-FRT-neo-FRT (codon improved Cre(iCre) with attached FRT flanked, Pro- and Eukaryotic Neomycin selection cassette 50ng/ 6500
A013 iCreERT2-FRT-neo-FRT (ligand-inducible iCre with attached FRT flanked, Pro- and Eukaryotic Neomycin Selection cassette) 50ng/ 6500
A104 Enhanced Flp Expression Plasmid:707-FLPe; tet 0.2ug/ 5980
A105 Enhanced Flp Expression Plasmid:708-FLPe;cm 0.2ug/ 5980
A106 Enhanced Flp Expression Plasmid:709-FLPe;amp 0.2ug/ 5980
A107 Enhanced Flp Expression Plasmid:710-FLPe;km 0.2ug/ 5980
A112 Cre Expression Plasmid:705-Cre;cm 0.2ug/ 5980
A113 Cre Expression Plasmid:706-Cre;tet 0.2ug/ 5980
A114 Cre Expression Plasmid:704-Cre;amp 0.2ug/ 5980
A201 Enhanced Eukaryotic FLP Expression Plasmid: pCAGGS-FLPe (Academia) 0.2ug/ 7500
A203 Eukaryotic FLPo Recombinase Expression Plasmid: pCAGGS-FLPo (Academia)* 0.2ug/ 7500
A204 Eukaryotic Cre Recombinase Expression Plasmid: pCAGGS-Cre (Academia)* 0.2ug/ 7500
A205 Eukaryotic Der Recombinase Expression Plasmid: CAGGS-Dre(Academia)* 0.2ug/ 7500
A301 Arabinose-inducible Prokaryotic Cre Recombinase Expression Plasmid: pSC101-BAD-Cre 0.2ug/ 5980
A302 Arabinose-inducible Prokaryotic Dre Recombinase Expression Plasmid: pSC101-BAD-Dre* 0.2ug/ 5980
A303 Arabinose-inducible Prokaryotic FLPe Recombinase Expression Plasmid: pSC101-BAD-FLPe (tet) 0.2ug/ 5980

 

 

 

 

 

 

 

 

genebridges K004 说明书

发表于由

世界*实验材料供应商 Gene Bridges上海金畔生物为其中国代理， Gene Bridges在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， Gene Bridges就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

Gene Bridges中国代理, Gene Bridges上海代理， Gene Bridges北京代理，Gene Bridges广东代理， Gene Bridges江苏代理Gene Bridges湖北代理,Gene Bridges天津,Gene Bridges黑龙江代理,Gene Bridges内蒙古代理,Gene Bridges吉林代理,Gene Bridges福建代理, Gene Bridges江苏代理, Gene Bridges浙江代理, Gene Bridges四川代理,

 

Gene Bridges是一家依托欧洲分子生物技术实验室(EMBL)，成立于2000年6月的高科技生物科技公司，该公司拥有的技术Red/ET基因重组技术可实现DNA任意位点的克隆/亚克隆，以及的克隆出如BACs或大肠杆菌染色体的超长NDA分子，已经为多个制药企业、生物技术公司及科研院所提供大量的基因克隆及超过500个已结题的DNA修饰项目。

Gene Bridges公司的专业团队拥有娴熟的技术人员及深悉分子及微生物技术、小鼠基因组学、转基因技术、生物化学、代谢工程及工业化的资深科学家。力求为生命科学研究领域及产业化提供的真核/原核基因重组、表达产品与服务。

 

Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – FRT

货号：K004

 

描述

包括的FRT-PGK-gb2-neo-FRT盒被设计成允许在原核和真核细胞中新霉素/卡那霉素的选择。它将用于在大肠杆菌中表达卡那霉素抗性的原核启动子（gb2）与用于在哺乳动物细胞中表达新霉素抗性的真核启动子（PGK）结合。包含的pCI-FLPe表达质粒编码改进的FLP重组酶，其在37℃的温度（大肠杆菌的*生长温度）下与野生型FLP酶相比显示出高达4至10倍的重组活性）和40℃（小鼠体温）。该试剂盒也可用于细菌人造染色体上。高红/ ET效率加上重组后红/ ET重组蛋白表达质粒pRedET的方便去除。

内容

  • 红/ ET重组蛋白表达质粒pRed / ET。任何大肠杆菌菌株都可以通过用该质粒转化来制备为红/精

  • FRT-PGK-gb2-neo-FRT模板用于您自己的实验

  • 用于增强FLP重组酶pCI-FLPe的表达质粒

  • 在18 kb高拷贝质粒中引入FRT位点的阳性对照

  • 详细的方案，质粒的描述，地图和序列

特征

该试剂盒旨在将FRT位点整合到任何预定位置的载体质粒中，而无需在2-4周内使用限制酶

应用

为了快速和简单地将FRT位点快速整合到任何预期位置的大载体质粒中，例如用于产生转基因小鼠模型

 

genebridges 部分产品目录

发表于由

Gene Bridges是一家依托欧洲分子生物技术实验室(EMBL)，成立于2000年6月的高科技生物科技公司，该公司拥有的技术Red/ET基因重组技术可实现DNA任意位点的克隆/亚克隆，以及精准的克隆出如BACs或大肠杆菌染色体的超长NDA分子，已经为多个制药企业、生物技术公司及科研院所提供大量的基因克隆及超过500个已结题的DNA修饰项目。

Gene Bridges公司的专业团队拥有娴熟的技术人员及深悉分子及微生物技术、小鼠基因组学、转基因技术、生物化学、代谢工程及工业化的资深科学家。力求为生命科学研究领域及产业化提供优质的真核/原核基因重组、表达产品与服务。

genebridges 部分产品目录

Red/ET kits

Quick & Easy BAC Modification Kit

For all types of BAC modifications

  • ID: K001
  • €695.00*
  •  

Counter Selection BAC Modification Kit

For advanced BAC modification using a counter-selection cassette, also for bacterial chromosomes

  • ID: K002
  • €820.00*
  •  
  •  

BAC Subcloning Kit

For subcloning of DNA fragments from BACs and cosmids

  • ID: K003
  • €695.00*
  •  

Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – FRT

For fast and simple integration of FRT-sites into large vector plasmids at any intended position (for generation of transgenic mouse models)

  • ID: K004
  • €695.00*
  •  

Quick & Easy Conditional Knock Out Kit – loxP

For fast and simple integration of loxP-sites into large vector plasmids at any intended position (for generation of transgenic mouse models)

  • ID: K005
  • €695.00*
  • Manual (PDF)
  •  

Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit

For fast knockouts or modifications of genes on the E. coli chromosome

  • ID: K006
  • €695.00*
  • Manual (PDF)
  •  

E. coli strain GB05-dir

Direct cloning-proficient E. coli strain for linear plus linear homologous recombination

  • ID: K008
  • €620.00*
  • Manual (PDF)

E. coli strain GB08-red

Recombineering-proficient E. coli strain for linear plus circular homologous recombination

  • ID: K009
  • €620.00*
  • Manual (PDF)
  •  

genebridges代理

发表于由

 

 

genebridges代理

 

上海金畔生物genebridges常卖产品列表：

 

                                                       

货号 品名 规格 品牌
K001 * Quick & Easy BAC Modification Kit Kit genebridges
K005 Quick & Easy Conditional Knock Out Kit kit genebridges
K009 E coli strain GB08-red genebridges
k006 Quick & Easy E coli Gene Deletion Kit Kit genebridges
K003 BAC Subcloning Kit Kit genebridges
K002 Counter Selection BAC Modification Kit Kit genebridges

 

 

 

genebridges  K003 BAC Subcloning Kit大量现货

现货genebridges K003说明书

发表于由

Gene Bridges拥有Red / ET重组的专有权利，并被允许颁发该技术的许可证并提供重组服务。任何其他学术或商业组织均无权提供重组服务。

 

与Red / ET重组可在任何选定位置克隆，亚克隆和修饰DNA。它可以改造任何大小的DNA分子，包括很大的分子，例如BAC或大肠杆菌染色体。

 

Red / ET重组增加了CRISPR / Cas9扩展基因组研究的能力。作为欧盟资助的项目AgedBrainSYSBIO的一部分，我们开发了一种新的策略来使大型基因组区域人性化。通过将CRISPR / Cas9与Red / ET重组相结合，我们成功地将一个33 kb的人类片段敲入了小鼠ApoE基因座。阅读我们  近发布的作品  以获取更多详细信息。

 

4路重组（4WR）提供了一种新的快速且简化的方法，可在单个体内重组步骤中从多达四个DNA片段（例如PCR产物）组装质粒。4WR是Gene Bridges广受欢迎的直接克隆型大肠杆菌菌株GB05-dir（目录号K008）的新应用。

 

上海金畔生物现货genebridges K003说明书

BAC Subcloning Kit

BAC亚克隆试剂盒

特征

  • 无需限制位点

  • 多可克隆20 kb的片段

  • 高红色/ ET效率

  • 重组后可方便地去除Red / ET重组蛋白表达质粒pRedET。

应用

  • 将碱基对从BAC的DNA片段亚克隆到高拷贝质粒主链中

描述

可以包含大插入片段的大肠杆菌载体，例如细菌人工染色体（BAC），为功能基因组学提供了多个优势。它们可以携带足够的DNA，在单个分子中包含大多数真核基因，包括所有顺式作用调控元件，以及许多真核基因簇，原核调节子和许多完整的病毒基因组。然而，常规的克隆方法依赖于限制酶的使用和体外纯化步骤，这排除了大分子的工程改造。因此，直到近，这种分子的用途才受到限制。

BAC亚克隆试剂盒旨在通过Red / ET重组从任何类型的细菌人工染色体（BAC）有效地将高达20 kb的大DNA片段亚克隆到质粒载体中。

Red / ET重组（重组）是一种允许对任何大小的DNA分子进行工程改造的方法，包括非常大的分子，例如BAC或大肠杆菌染色体。它依赖于在体内同源重组的大肠杆菌，并允许范围广泛的具有DNA分子修饰在任何选定的位置上。

内容

  • Red / ET重组蛋白表达质粒pRed / ET，通过此质粒转化，可将任何大肠杆菌菌株制成Red / ET精通

  • 带有ColE1复制起点和氨苄青霉素抗性基因的线性载体将用于亚克隆实验

  • 阳性对照，可将来自对照BAC的15 kb片段亚克隆到试剂盒随附的载体中

  • 详细的协议，质粒，图谱和序列的描述

 

序列

ColE1小向量

 

放大器R ColE1 ORI

 

GCTCTCCTGAGTAGGACAAATCCGCCGGGAGCGGATTTGAACGTTGCGAAGCAAC GGCCCGGAGGGTGGCGGGCAGGACGCCCGCCATAAACTGCCAGGCATCAAATTAA GCAGAAGGCCATCCTGACGGATGGCCTTTTTGCGTTTCTACAAACTCTTTTGTTT ATTTTTCTAATACATCAGAGAGATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGACATAGATAATGAGTATTCAACATTTCCGTGTCG CCCTTATTCCCTTTTTTGCGGCATTTTGCCTTCCTGTTTTTGCTCACCCAGAAAC GCTGGTGAAAGTAAAAGATGCTGAAGATCAGTTGGGTGCACGAGTGGGTTACATC GAACTGGATCTCAACAGCGGTAAGATCCTTGAGAGTTTTCGCCCCGAAGAACGTT TTCCAATGATGAGCACTTTTAAAGTTCTGCTATGTGGCGCGGTATTATCCCGTGT TGACGCCGGGCAAGAGCAACTCGGTCGCCGCATACACTATTCTCAGAATGACTTG GTTGAGTACTCACCAGTCACAGAAAAGCATCTTACGGATGGCATGACAGTAAGAG AATTATGCAGTGCTGCCATAACCATGAGTGATAACACTGCGGCCAACTTACTTCT GACAACGATCGGAGGACCGAAGGAGCTAACCGCTTTTTTGCACAACATGGGGGAT CATGTAACTCGCCTTGATCGTTGGGAACCGGAGCTGAATGAAGCCATACCAAACG ACGAGCGTGACACCACGATGCCTGTAGCAATGGCAACAACGTTGCGCAAACTATT AACTGGCGAACTACTTACTCTAGCTTCCCGGCAACAATTAATAGACTGGATGGAG GCGGATAAAGTTGCAGGACCACTTCTGCGCTCGGCCCTTCCGGCTGGCTGGTTTA TTGCTGATAAATCTGGAGCCGGTGAGCGTGGGTCTCGCGGTATCATTGCAGCACT GGGGCCAGATGGTAAGCCCTCCCGTATCGTAGTTATCTACACGACGGGGAGTCAGGCAACTATGGATGAACGAAATAGACAGATCGCTGAGATAGGTGCCTCACTGATTA AGCATTGGTAACTGTCAGACCAAGTTTACTCATATATACTTTAGATTGATTTACG CGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGAC CGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTT CTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAG GGTTCCGATTTAGTGCTTTACGGCACCTCGACCCCAAAAAACTTGATTTGGGTGA TGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTG GAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTTGAACAACACTCAACC CTATCTCGGGCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTG GTTAAAAAATGAGCTGATTTAACAAAAATTTAACGCGAATTTTAACAAAATATTA ACGTTTACAATTTAAAAGGATCTAGGTGAAGATCCTTTTTGATAATCTCATGACC AAAATCCCTTAACGTGAGTTTTCGTTCCACTGAGCGTCAGACCCCGTAGAAAAGA TCAAAGGATCTTCTTGAGATCCTTTTTTTCTGCGCGTAATCTGCTGCTTGCAAAC AAAAAAACCACCGCTACCAGCGGTGGTTTGTTTGCCGGATCAAGAGCTACCAACT CTTTTTCCGAAGGTAACTGGCTTCAGCAGAGCGCAGATACCAAATACTGTCCTTC TAGTGTAGCCGTAGTTAGGCCACCACTTCAAGAACTCTGTAGCACCGCCTACATA CCTCGCTCTGCTAATCCTGTTACCAGTGGCTGCTGCCAGTGGCGATAAGTCGTGT CTTACCGGGTTGGACTCAAGACGATAGTTACCGGATAAGGCGCAGCGGTCGGGCT GAACGGGGGGTTCGTGCACACAGCCCAGCTTGGAGCGAACGACCTACACCGAACT GAGATACCTACAGCGTGAGCTATGAGAAAGCGCCACGCTTCCCGAAGGGAGAAAG GCGGACAGGTATCCGGTAAGCGGCAGGGTCGGAACAGGAGAGCGCACGAGGGAGC TTCCAGGGGGAAACGCCTGGTATCTTTATAGTCCTGTCGGGTTTCGCCACCTCTG ACTTGAGCGTCGATTTTTGTGATGCTCGTCAGGGGGGCGGAGCCTATGGAAAAAC GCCAGCAACGCGGCCTTTTTACGGTTCCTGGCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTCACA TGTTCTTTCCTGCGTTATCCCCTGATTCTGTGGATAACCGTATTACCGCCTTTGA GTGAGCTGATACCGCTCGCCGCAGCCGAACGACCGAGCGCAGCGAGTCAGTGAGC GAGGAAGCGGAAGAGCGCCTGATGCGGTATTTTCTCCTTACGCATCTGTGCGGTA TTTCACACCGCATAGGGTCATGGCTGCGCCCCGACACCCGCCAACACCCGCTGAC GCGCCCTGACGGGCTTGTCTGCTCCCGGCATCCGCTTACAGACAAGCTGT