interchim FT-664790说明书
pNPP溶液(ELISA用AP底物)
描述
Uptima pNPP底物是用于检测碱性磷酸酶(AP)的显色底物,产生黄色可溶性副产物。经典用于ELISA技术。该处方针对较长的有效期和良好的批间重现性进行了优化。在含有高纯度和稳定剂的对硝基苯基磷酸盐(pNPP)混合物的*小瓶中对其进行调节。与碱性磷酸酶结合物反应后,产生深黄色,可在405 nm处读取。Uptima提供了需要准确和灵敏结果的优化处方。该底物不适用于免疫化学或蛋白免疫印迹法(要求Uptima提供合适的替代底物)。
产品编号: UP664790,200 mL UP664791,500 mL UP664792,1 L
灵敏度 Uptima pNPP底物非常敏感,产生的背景非常低。
在大多数应用中,Uptima pNPP通常优于其他可用的AP底物,并且通常与过氧化物酶相似的显色检测系统。
稳定性 底物在 + 4 ℃下可稳定储存30个月以上。
储存条件 + 4 ℃下避光储存。(L)
pNPP底物对某些储存和使用条件敏感:
1. 避免直接光暴露或接触污染物质。
2. 请勿直接从瓶中移取:首先将所需溶液装入洁净容器中
3. 请勿将瓶子打开 过长
4. 采用冷冻凝胶包运输。请勿冷冻。
建议方案
Uptima pNPP为即用型。只需让所需量达到室温即可。
1. 可根据您的标准方案进行ELISA试验。*清洗微孔板,以除去未结合的碱性磷酸酶标记探针(抗体、凝集素、核苷酸……)。冲洗不充分可能导致背景不理想。Uptima建议在PBST(NaCl 150 mM、磷酸盐20 mM、Tween20®0.1%,pH 7.5)中清洗4次。
2. 向各微孔板小孔中加入150µl pNPP底物。缓慢搅拌以混匀。在 + 37 ℃下避光孵育30分钟。立即显色。
注:Uptima pNPP溶液为即用型。请勿稀释。
可根据检测系统调整每孔体积和孵育持续时间。
如果染色过快或过强,应稀释一抗或二抗,或将染色时间缩短至15 min。不建议稀释pNPP底物
3. 在405 nm处直接读取吸光度,或在停止步骤(第4点)后读取,以获得更准确的结果。请勿比较停止和未停止时获得的值。
4. 反应终止(可选):在每个孔中加入100µl终止液(1 MNaOH)。颜色保持黄色,但不波动,允许在2小时或更长时间内在405 nm处读数。
相关试剂
· 其他AP底物-显色 其他HRP底物-显色pNPP粉末(UP89562 C)、片剂(#UP89562F、UP73250)和试剂盒(BP708) TMB溶液(UP664780)
AP-蓝色[490-650 nm](CB0131)和AP-红色[450-550 nm](CB0141) DAB片剂732310
· 其他AP底物-荧光 FDP粉末和试剂盒(HT079) ADHP(39423A,试剂盒HS6241)
· 其他AP底物-化学发光 VisGlo AP底物(BV3021,BV3031)UptiLight ECL(UP996190,(BM4961,58372A)
· 请参阅我们的BioScience目录,了解AP标记的二抗(第A324页)和链霉亲和素(A350)、缓冲液和饱和剂(A365)