interchim FT-664790说明书

 

 

interchim FT-664790说明书

pNPP溶液(ELISA用AP底物)

描述

Uptima pNPP底物是用于检测碱性磷酸酶(AP)的显色底物,产生黄色可溶性副产物。经典用于ELISA技术。该处方针对较长的有效期和良好的批间重现性进行了优化。在含有高纯度和稳定剂的对硝基苯基磷酸盐(pNPP)混合物的*小瓶中对其进行调节。与碱性磷酸酶结合物反应后,产生深黄色,可在405 nm处读取。Uptima提供了需要准确和灵敏结果的优化处方。该底物不适用于免疫化学或蛋白免疫印迹法(要求Uptima提供合适的替代底物)。

 

 

产品编号: UP664790,200 mL UP664791,500 mL UP664792,1 L

 

灵敏度 Uptima pNPP底物非常敏感,产生的背景非常低。

在大多数应用中,Uptima pNPP通常优于其他可用的AP底物,并且通常与过氧化物酶相似的显色检测系统。

 

稳定性 底物在 + 4 ℃下可稳定储存30个月以上。

 

储存条件 + 4 ℃下避光储存。(L)

pNPP底物对某些储存和使用条件敏感:

1. 避免直接光暴露或接触污染物质。

2. 请勿直接从瓶中移取:首先将所需溶液装入洁净容器中

3. 请勿将瓶子打开  过长

4. 采用冷冻凝胶包运输。请勿冷冻。

 

 

建议方案

Uptima pNPP为即用型。只需让所需量达到室温即可。

 

1. 可根据您的标准方案进行ELISA试验。*清洗微孔板,以除去未结合的碱性磷酸酶标记探针(抗体、凝集素、核苷酸……)。冲洗不充分可能导致背景不理想。Uptima建议在PBST(NaCl 150 mM、磷酸盐20 mM、Tween20®0.1%,pH 7.5)中清洗4次。

2. 向各微孔板小孔中加入150µl pNPP底物。缓慢搅拌以混匀。在 + 37 ℃下避光孵育30分钟。立即显色。

注:Uptima pNPP溶液为即用型。请勿稀释。

可根据检测系统调整每孔体积和孵育持续时间。

如果染色过快或过强,应稀释一抗或二抗,或将染色时间缩短至15 min。不建议稀释pNPP底物

3. 在405 nm处直接读取吸光度,或在停止步骤(第4点)后读取,以获得更准确的结果。请勿比较停止和未停止时获得的值。

4. 反应终止(可选):在每个孔中加入100µl终止液(1 MNaOH)。颜色保持黄色,但不波动,允许在2小时或更长时间内在405 nm处读数。

 

相关试剂

· 其他AP底物-显色 其他HRP底物-显色pNPP粉末(UP89562 C)、片剂(#UP89562F、UP73250)和试剂盒(BP708) TMB溶液(UP664780)

AP-蓝色[490-650 nm](CB0131)和AP-红色[450-550 nm](CB0141) DAB片剂732310

· 其他AP底物-荧光 FDP粉末和试剂盒(HT079) ADHP(39423A,试剂盒HS6241)

· 其他AP底物-化学发光 VisGlo AP底物(BV3021,BV3031)UptiLight ECL(UP996190,(BM4961,58372A)

· 请参阅我们的BioScience目录,了解AP标记的二抗(第A324页)和链霉亲和素(A350)、缓冲液和饱和剂(A365)

Advanced ChemTech FT2161 说明书

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Advanced ChemTech属于CreoSalus公司,是多肽合成用树脂和组合化学的制造商。除此还供应基础树脂,合成树脂和预加载的树脂。

Fmoc-N-甲基氨基酸

Ñ 一 -甲基氨基酸残基在其由合成通过N-甲基化合成的微生物蛋白质经常发现。这些微生物化合物通常是有趣的药理学活性。值得注意的例子是环孢菌素,Beauvericin,Enniatin和Dactinomycin。

 

使用N a – 甲基氨基酸的提示

  1. Ñ 一 -甲基带来了对下一个氨基酸,这需要用于实现更好的耦合结果羧基的活化耦合额外空间位阻。HATU / HOAt或PyBrOP将是与 Nα – 乙基化氨基酸偶联的更好选择。
  2. 氯醌试验可能无法有效地监测偶联效应,因为只有一周的颜色可以观察到N-甲基氨基,而溴酚蓝测试将除了含有His的肽之外进行工作。
  3. N-甲基化的胺基团可能使下一个氨基酸的Fmoc基团脱保护,这可能使偶联反应迟缓。耦合前的N-甲硅烷基化有助于克服这个问题。
  4.  diketopiperazine的形成和再酰化对于N-甲基化的酸可能更成问题,因此应采用用于抑制 diketopiperazine形成和再吸收的试剂和条件。但是,应该避免HOBt,因为它也会抑制耦合率。
  5. 对于含有N-甲基氨基酸残基的肽的裂解,应该考虑N-甲基化肽键更酸不稳定,温和条件或用TFA处理的时间有限。

Fmoc-N-Me-Thr(tBu)-OH

 

货号:  FT2161

规格:1g

CAS#:  117106-20-4

MolecularWeight:  411.49 g/mole

Formula:  C24H29NO5