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biogenes Ecoli 360 HCP酶联免疫吸附试剂盒

发表于由

biogenes Ecoli 360 HCP酶联免疫吸附试剂盒

 

E.COLI | 360-HCP ELISA W3110 STARTER SET

酶免疫测定法测定大肠杆菌  W3110细胞中的HCP 。

起动装置为客户提供了所有必要的组件，可以快速，轻松地为特定过程选择合适的套件类型（B或D）。

入门套件包括四个完整的即用型套件：

1x B型，1x C型

每种套件类型包含：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准大肠杆菌-HCP
  • 抗体结合物
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

 

预期用途
提供的Ecoli 360 HCP酶联免疫吸附测定试剂盒是一种夹心酶联免疫吸附测定法，将以微测试板形式进行。
本试验用于大肠杆菌宿主Ecoli-HCP的体外定量测定。
细胞蛋白）重组生产过程中的相关样品
各自的Ecoli细胞系。
该试剂盒包含执行HCP酶联免疫吸附试验所需的所有试剂。
测定范围包括2 ng/ml到100 ng/ml的Ecoli HCP的初步工作范围

所需但不随套件提供的材料和设备
•超纯水（至少双蒸馏质量），用于稀释洗涤缓冲液（10x）
•吸水纸巾，用于去除微试板清洗后的残留液体。
•用于制备标准、控制和样品的合适反应管
•适合洗涤缓冲液的容器
•适用于有效多通道移液的试剂库
•培养过程中覆盖微型测试板的盖子
•轨道微测试板振动筛（约500转/分）和涡流混合器
•微型测试板清洗机（也可以手动清洗）
•精密移液管（体积可调，从10微升到5000微升），带有合适的
•多通道移液管（100μl），带有合适的
•用于在450 nm（参考波长620）下测量光密度的微型板阅读器-
690牛米）
4度的储存
所有提供的试剂（1到8）应在2-10°C下冷藏，并在到期日期前使用。
 

测试原理
Ecoli 360 HCP酶联免疫吸附试验是基于96孔微试板的夹心酶免疫分析。
（1X8F条格式）。可能含有Ecoli-HCP杂质的样品在微型测试板中培养。
预先涂有多克隆山羊Ecoli-HCP特异性捕获抗体和
不同Ecoli-HCP标准浓度孵育后校准曲线及平板
去除未结合成分的洗涤步骤，一种特定的生物素结合Ecoli-HCP特异性
加入检测抗体，进一步洗涤后，结合检测抗体依次与酶结合物（链霉亲和素结合过氧化物酶）作为示踪剂反应。
洗涤步骤，以四甲基联苯胺（TMB）为酶底物进行显色反应。
产生蓝色。在底物培养时间结束时，反应被加入硫酸，将蓝色变为黄色，测量光密度。
在450 nm（参考波长620-690 nm）波长下进行光度测量。
井内密度与井内Ecoli-HCP浓度成正比。
根据相应的Ecoli-HCP计算未知样品的浓度。
校准曲线。

 

 

BioGenes ECOLI 360 HCP ELISA试剂盒

发表于由

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BioGenes是定制免疫测定和抗体开发的服务提供商，致力于质量和服务。

BioGenes成立于1992年，总部位于德国柏林，是一家*的合作伙伴，为40个国家的600多家客户提供服务。该公司与制药，生物技术公司，CMO和体外诊断公司保持着长期合作关系。

BioGenes为生物制品的质量控制提供高度定制的解决方案，从药物发现和药物开发到生物制品的生产，以及用于诊断目的。



该公司专注于复杂的定制单克隆，多克隆和抗*型抗体开发，并在高灵敏度和强大的ELISAs和宿主细胞蛋白（HCP）检测的开发，优化，预验证和生产方面拥有良好的记录。

此外，BioGenes还提供增强型通用360-HCP ELISA试剂盒，并为客户提供全面的分析服务。

CHO|360-HCP ELISA Kits and Components

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒和组件

CHO | 360-HCP ELISA是增强的通用宿主细胞蛋白（HCP）测定。它被设计为覆盖更广泛的中国仓鼠卵巢（CHO）宿主细胞蛋白（HCP），而不是其他商业上可获得的通用HCP测定。

CHO | 360-HCP ELISA基于*的分析设计，采用单独制备的HCP抗原和来自两个物种的抗体：

  • 抗原由从CHO-K1和CHO-S的模拟发酵获得的总和分级的HCP制备
  • 通过免疫山羊（试剂盒类型A，B）和兔子（试剂盒类型C，D）产生特异性抗体

该方法产生四种不同的HCP ELISA试剂盒，它们共同制备增强的通用CHO | 360-HCP试验。 

根据相应的ICH-指南ICH Q2（R1）（“分析程序的验证：文本和方法”），在BioGenes中对CHO | 360-HCP ELISA方法进行鉴定，由于该方法的性质作为生物测定，略有偏差。

在1D和2D分析中，通过覆盖≥80％的CHO | 360-HCP抗原分布证明了所有四种抗体制剂（A至D）的高特异性。对于每个CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D），在测定工作范围内的三个加标样品中，在接受标准100±30％的加标抗原内估计满意的回收率。CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D）的高灵敏度，由验证参数LOD，LOQ和工作范围描述，如下所示：

  • LOD：0.5 – 1.0 ng / mL
  • LOQ：2 – 3 ng / mL
  • 工作范围：2 – 100 ng / mL

 

类型

种类

HCP

A型

山羊

总HCP

B型

山羊

分级HCP

C型

兔子

总HCP

D型

兔子

分级HCP

 

 

Ecoli|360 HCP ELISA ELISA Kit for the Determination of Ecoli-HCP in process-derived Samples

ECOLI 360 HCP ELISA试剂盒测定加工样品中的大肠杆菌-HCP

1个预定用途

 

提供的Ecoli 360 HCP ELISA试剂盒是一种夹心ELISA，将以微测试板的形式进行。该方法适用于大肠杆菌-hcp的体外定量测定。 (ST细胞蛋白)在与过程相关的样品的重组生产过程中进行了相应的大肠杆菌细胞系。这个试剂盒包含了所有必要的试剂来执行HCP ELISA。测定法 涵盖的初步工作范围为2纳克/毫升至100纳克/毫升的大肠杆菌-HCP。

 

2.工具包中提供的试剂和材料

3所需但未提供工具包的材料和设备

 

·用于稀释洗涤缓冲液(10倍)的超纯水(至少双蒸馏质量)

 

·微测试板清洗后去除残余液体的吸水性纸巾

 

适用于制备标准、控制和样品的反应管

 

适用于洗涤缓冲器的容器

 

·适用于多通道有效管道输送的试剂库

 

·在孵化过程中覆盖微测试板的盖子

 

·轨道微测试板振动筛(约500转/分)和旋涡混合器

 

·微型平板垫圈(可交替进行手动清洗)

 

·精密吸管(体积可调，从10升至5000升)，有适当的针尖

 

·多通道吸管(100升)，有适当的针尖

 

·在450 nm(参考波长620-690 nm)测量光密度的微型平板阅读器

 

4.试剂的储存

 

所有供应的试剂(1至8)应冷藏在2-10°C，并应在过期前使用。

 

5试验原理

 

Ecoli 360 HCP ELISA是基于96孔微测试板(1x8F条格式)的夹心酶联免疫分析法。可能含有大肠杆菌-hcp杂质的样品在微测试板井中孵化。 预包被多克隆山羊大肠杆菌-HCP特异性捕获抗体，并配以不同大肠杆菌-HCP标准浓度的校准曲线。孵化后洗盘子 在去除未结合组分的步骤中，添加一种特异性生物素结合的大肠杆菌-HCP特异性检测器抗体。经进一步洗涤后，结合检测器抗体又与Th反应。 E酶结合物(链霉亲和素-共轭过氧化物酶)作为示踪剂。在后一步洗涤后，以四甲基联苯胺(TMB)为酶底物进行显色反应，得到a b。 颜色。在底物孵育时间结束时，通过加入硫酸，将蓝色转化为黄色，并测量光密度，使反应停止。 波长450 nm(参考波长620~690 nm)。井内光密度与井内大肠杆菌-HCP浓度成正比.大肠杆菌-HCP浓度的测定 现在的样品可以根据相应的大肠杆菌-HCP校准曲线进行计算.

 

警告及预防措施

 

-该试剂盒只供体外研究之用，只供合资格的人员使用。

 

-在开始化验前，仔细阅读说明书。

 

-批号及有效期。不要混合不同批次的试剂。不要使用过期试剂。

 

-遵守实验室的良好做法和安全准则。必要时戴上实验室外套、一次性手套和防护眼镜。

 

-试剂盒的某些试剂含有Proclin 300作为防腐剂。这些试剂可能会引起眼睛和皮肤的刺激，应该小心处理。如与眼睛或皮肤接触，立即冲洗。 有水。

 

-储存受光保护的基板溶液。

 

-停止溶液由0.5摩尔硫酸组成。这种试剂具有腐蚀性，可能会引起眼睛和皮肤的刺激。应该小心处理。如与眼睛或皮肤接触，请冲洗i。 和水混合在一起。

 

-剩余的试剂盒试剂和准备好的溶液必须按照国家要求的安全准则和条例作为潜在危险废物处理。

 

7样品的处理和贮存过程中HCP的稳定性还没有被研究过。因此，样品应冷藏(2°-10°C)或冷冻(等于或 -20°C以下)取决于样品中重组产品的温度要求。一般来说，应避免重复冻结/解冻样品。

 

8试剂制备

 

8.1冲洗缓冲液(1x)的制备，在使用前用超纯水稀释洗涤缓冲液10x(2)1：10(例如100 mL 10 x浓缩液和900 mL超纯水)。洗涤缓冲器(1x)i 在室温下是稳定的，可在一天内使用两周。

 

8.2本试剂盒中提供的HCP标准是从大肠杆菌BL 21或W 3110细胞裂解物中制备的。种姓蛋白质浓度 R标准按Bradford蛋白法进行调整。大肠杆菌360 hcp ELISA的标准浓度应立即从试剂盒的大肠杆菌hcp标准(4)中制备。 在做化验之前。

 

8 ELISA标准(S1至S8)在测定缓冲液(3)范围内(约2 ng/mL~100 ng/mL大肠杆菌-HCP)按以下稀释方案制备。标准应b e只在准备日使用。

 

 

8.3检测器抗体工作液(1x)的制备用检测缓冲液(3)稀释检测器抗体100 x溶液(5)1：100。对于一个微试板，100 x精矿中的120升是毫升。 Xed用12 mL分析缓冲液。本工作解决方案只应在编写之日使用。

 

8.4酶共轭工作液(1x)的制备，用测定缓冲液(3)稀释酶共轭物100 x溶液(6)1：100。对于一个微试板，100 x精矿中有120升是混合的。 d用12 mL分析缓冲液。本工作解决方案只应在编写之日使用。

 

9样品制备，如有聚集物，应通过离心除去，以确保适当的分析性能。一般情况下，所有的样品工作稀释剂只适用于 准备的日子。样品应在测定前用分析缓冲液(3)稀释。低稀释度为1：2。宜样品稀释度必须由用户确定。 对于每种样品类型，视HCP含量而定，并考虑到检测工作范围。

 

10检测程序

 

所有ELISA步骤均在室温(18-26°C)下进行.

 

允许所有材料和试剂的试剂盒在使用前达到室温。

 

在达到室温之前，不要打开预涂的微测试板(1)的箔袋。检测中未使用的剩余平板条应用干燥剂重新包装到袋中。丙 把袋子紧紧地丢在冰箱里。

 

在所有孵化步骤中，盘子应盖上一个盖子(不提供试剂盒)，以防止溶液蒸发和污染。

 

与标准和样本一起孵化：

 

用100毫升/水井的大肠杆菌HCP标准和检测标准以及稀释的样品填充盘子，用连续摇床孵育2小时。标准、化验控制和样品应 至少要用复制件进行分析。推荐三份。

 

洗涤:

 

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。 折纸。

 

与检测器抗体孵育：

 

用100毫升/井的检测器抗体工作液(1倍)灌入平板，用持续摇动法孵育1.5小时。

 

洗涤:

 

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。 折纸。

 

酶结合物孵育：

 

用100微升/井的酶共轭工作液(1x)灌满盘子，用连续摇动培养20分钟。

 

洗涤:

 

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。 折纸。

 

与底物溶液孵育并停止：

 

加入100升/孔的底物溶液(7)，用连续摇床孵育15分钟。如果15分钟后显色过低，则底物孵育时间可延长至 30分钟通过在板中直接添加100升/井的停止溶液(8)来停止显色反应，从而产生黄色产品。

 

量度:

 

用多通道微板阅读器测量450 nm(OD 450)处的光密度，并给出测定的原始数据。推荐的参考波长为620~690 nm。

11 计算( calculation的名词复数 )

 

为了产生标准曲线和计算测定对照和样品，平均每个标准的相应复制OD 450值。生成一条标准曲线。 合适的软件，适采用四参数或五参数方程的非线性回归模式.根据校准曲线计算的未知样品的浓度必须乘以。 用样品的稀释系数进行ED。

 

12 ELISA性能特征

 

12.1由于纯化于固定化大肠杆菌-hcp上的多克隆抗体(山羊)的特异性，大肠杆菌-hcp酶联免疫吸附试验被认为是对大肠杆菌-hcp，evd特异的。 分别进行1D和2D-Westernblot分析。

 

12.2分析灵敏度检测限(LOD)为低的大肠杆菌-HCP浓度，可与试验空白区分开来，测定限为0.1~0.5ng/mL。这，这个，那，那个 检测限是通过计算HCP浓度来确定的，该浓度对应于高于测定空白平均OD 450的三个标准差的OD 450值。

 

12.3工作范围大肠杆菌-HCP-ELISA的工作范围为2~100 ng/mL。

 

13 发现并修理故障，解决纷争

 

下面列出了分析效果不足的可能原因(解释)。A.整个盘子没有反应

 

·省略孵化步骤或试剂·错误地使用试剂

 

*ELISA组分/试剂准备不足。

 

*ELISA组分/试剂的储存或准备不足

 

·试剂在使用前不得达到室温

 

·测量光密度的波长不当。C.对整个平板的高反应性和/或检测背景。

 

·不适当的洗涤步骤

 

*ELISA组分/试剂的储存或准备不足

 

·试剂的过度孵育，例如在停止前先用底物溶液孵育，结果不准确(复制的CV太高)

 

·不适当的洗涤步骤

 

*标准、样品和化验对照样品混合不足

 

不适当的样品制备(样品中的碎片或聚集物通过增加不性而干扰检测性能，应通过离心去除)。

 

货号

品名

欧元价

IP 103

CHO|360-HCP ELISA Kit Type C

495

IP 104

CHO|360-HCP ELISA Kit Type D

495

IP 111

Anti-CHO antibody Type A

450

IP 112

Anti-CHO antibody Type B

450

IP 113

Anti-CHO antibody Type C

450

IP 114

Anti-CHO antibody Type D

450

IP 120

CHO|360-HCP Standard

1200

IP 130

CHO|360-HCP Assay Buffer

150

IP 102

CHO|360-HCP ELISA Kit Type B

495

IP 101

CHO|360-HCP ELISA Kit Type A

495

CHO | 360-HCP ELISA启动子套装  IP 001

€1,485.00

 *酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。
起动装置为客户提供了所有必要的组件，可以快速，轻松地为特定过程选择合适的套件类型（A，B，C或D）

入门套件包括四个完整的即用型套件：

1x A型，1x B型，1x C型，1x D型

每种套件类型包含：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体结合物
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒A型   IP 101

€495.00

 *

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物A型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒B型  IP 102

€495.00

 *

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物B型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒C型IP 103

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物C型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

 

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

 

 

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒D型 IP 104

 

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物D型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

 

 

 

 

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