新型T4 DNA连接酶(400 U/µL)|Novel T4 DNA Ligase

发表于2024年11月20日由上海金畔生物科技有限公司

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff^® Novel T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建库过程中DNA片段和接头连接的单酶产品，该产品已经过高通量测

序验证，质量优异。本酶具有高效的连接能力，兼容各类样本，对于复杂结构核酸片段的连接更显优势，比如华大平台的Bubble接头，均可得到优异的测序质量。

产品组分

组分编号	组分名称	规格
组分编号	组分名称	10298ES40	10298ES42	10298ES08
10298-A	Hieff^® Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)	100 µL	1 mL	5 mL
10298-B	10 × T4 DNA Ligase Buffer	250 μL	2×1.25 mL	10×1.25 mL

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

单位定义

在20 μL的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反应30 min时，催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

注意事项

1）Buffer在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）本产品仅作科研用途！

使用方法

目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，涡旋瞬离后置于20℃，反应15 min即可。

表1 Adapter Ligation体系

名称	体积（μL）
dA-tailed DNA	60
10 × T4 DNA Ligase Buffer	10
50% PEG 6000	10*
DNA Adapter	X**
Hieff^® Novel T4 DNA Ligase	1-5***
ddH₂O	To 100

【注】：*试剂盒内未提供50% PEG 6000，需自行准备。

**接头用量参考表2。

***Hieff^®Novel T4 DNA Ligase用量可根据需要添加1-5 μL。

Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表2列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。

表2 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度

Input DNA	Adapter : Input DNA摩尔比	Input DNA	Adapter : Input DNA摩尔比
1 μg	10:1	50 ng	100:1
500 ng	20:1	25 ng	200:1
250 ng	40:1	1 ng	200:1
100 ng	100:1	500 pg	400:1

【注】：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]。

【接头添加计算举例】：当Input DNA为100 ng，Input DNA长度为300 bp时，接头应该添加多少？

第一步，计算Input DNA摩尔数。公式：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]；

Input DNA摩尔数（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；

第二步，计算接头添加摩尔数。根据表2查询接头添加比例；

根据表2，查得Input DNA 100 ng时接头添加比例100:1，则接头添加摩尔数=100×0.5 pmol=50 pmol；

第三步，计算接头添加体积。接头浓度=15 μmol/L（如使用其他接头，浓度需要依据其他接头浓度参数）；

接头添加体积=接头添加摩尔数（50 pmol）÷接头浓度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）

综上，接头可添加3.4 μL。（注：接头最大加入体积不超过5 μL）

HB220621

Hieff^® Novel T4 DNA Ligase是一款可用于NGS建库过程中DNA片段和接头连接的单酶产品，该产品已经过高通量测

产品组分

组分编号	组分名称	规格
组分编号	组分名称	10298ES40	10298ES42	10298ES08
10298-A	Hieff^® Novel T4 DNA Ligase (400 U/µL)	100 µL	1 mL	5 mL
10298-B	10 × T4 DNA Ligase Buffer	250 μL	2×1.25 mL	10×1.25 mL

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

单位定义

在20 μL的连接反应体系中，6 μg的λDNA-Hind Ⅲ分解物在16℃下反应30 min时，催化50%以上的DNA片段发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

注意事项

1）Buffer在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

3）本产品仅作科研用途！

使用方法

目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，涡旋瞬离后置于20℃，反应15 min即可。

表1 Adapter Ligation体系

名称	体积（μL）
dA-tailed DNA	60
10 × T4 DNA Ligase Buffer	10
50% PEG 6000	10*
DNA Adapter	X**
Hieff^® Novel T4 DNA Ligase	1-5***
ddH₂O	To 100

【注】：*试剂盒内未提供50% PEG 6000，需自行准备。

**接头用量参考表2。

***Hieff^®Novel T4 DNA Ligase用量可根据需要添加1-5 μL。

Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表2列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。

表2 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度

Input DNA	Adapter : Input DNA摩尔比	Input DNA	Adapter : Input DNA摩尔比
1 μg	10:1	50 ng	100:1
500 ng	20:1	25 ng	200:1
250 ng	40:1	1 ng	200:1
100 ng	100:1	500 pg	400:1

【注】：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]。

【接头添加计算举例】：当Input DNA为100 ng，Input DNA长度为300 bp时，接头应该添加多少？

第一步，计算Input DNA摩尔数。公式：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]；

Input DNA摩尔数（pmol）=100 ÷（0.66×300）=0.5 pmol；

第二步，计算接头添加摩尔数。根据表2查询接头添加比例；

根据表2，查得Input DNA 100 ng时接头添加比例100:1，则接头添加摩尔数=100×0.5 pmol=50 pmol；

第三步，计算接头添加体积。接头浓度=15 μmol/L（如使用其他接头，浓度需要依据其他接头浓度参数）；

接头添加体积=接头添加摩尔数（50 pmol）÷接头浓度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）

综上，接头可添加3.4 μL。（注：接头最大加入体积不超过5 μL）

HB220621

Q：10298、10299和10301的区别是什么？

A：10298灵敏度更高，尤其适用于cfDNA样本的建库；10299酶连接效率高，宿主大肠杆菌残留低，尤其适合病原检测、NIPT检测等；10301是一款通用型的快速连接酶，广泛适用于分子克隆和NGS建库等。

Q：10298、10299能否用于分子克隆？

A：可以的，将酶稀释到常规用于克隆的T4连接酶浓度，再按说明书操作。可直接用里面的buffer稀释。

新型T4 DNA连接酶(400 U/µL)|Novel T4 DNA Ligase

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Stratec 粪便DNA提取试剂盒 1038111200

发表于2024年11月20日由上海金畔生物科技有限公司

世界*实验材料供应商 Stratec 上海金畔生物为其中国代理， Stratec 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， Stratec 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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STRATEC是的OEM合作伙伴，全自动化分析仪系统，实验室数据管理软件，以及用于分子诊断（MDX）样品制备和稳定的解决方案的世界。
对于超过30年，STRATEC已经在体外诊断（IVD）和生命科学产业玩家的可靠伙伴。凭借其技术和经验STRATEC的深度广度可以提供围绕仪器仪表，软件开发和样品制备的创新技术和科学的解决方案。

STRATEC分子是STRATEC商业提供用于核酸样品收集，稳定和纯化的创新解决方案。

公司成立于1992年的自主开发和研究设施，STRATEC分子已经成为其在开发和商业化产品，为临床诊断和生命科学研究的手动和自动应用专业技术享誉。

STRATEC分子的开发和制造设施位于校园柏林布赫，德国。
信息服务和产品也可以通过任何STRATEC集团位置的获得。

产品名称：Stool Collection Tubes with Stool DNA Stabilizer

中文名称：粪便DNA提取试剂盒

品牌：Stratec

产地：德国

货号：1038111200

规格：50 tubes

保存温度：15-30°C

作用：从粪便样品中提取高纯度的基因组DNA菌等微生物、以及一些未消化食物样品的DNA。由于粪便中存在大量抑制因子，常规的DNA纯化方式不能有效地去除这些杂质，导致下游实验的失败，如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用了简便的硅胶柱纯化方式和*的溶液系统，能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的抑制因子，并能地回收粪便中的基因组DNA。一次可处理0.05-0.2g样品，纯化的DNA可直接用PCR等实验。

Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

发表于2024年11月18日由上海金畔生物科技有限公司

Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

产品详情

货号	规格	价格
78DC10002-500U	500U	￥140.00
78DC10002-500U×5	500U×5	￥560.00
78DC10002-2500U×4	2500U×4	￥1820.00
78DC10002-2500U×10	2500U×10	￥3150.00

PCR系列

产品描述

Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA，可直接用于TA克隆。

产品应用

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

运输与保存

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

jembio T4 DNA聚合酶说明书

发表于2024年11月18日由上海金畔生物科技有限公司

jembio T4 DNA聚合酶说明书

T4 DNA聚合酶

来源：大肠杆菌噬菌体T4

描述：

• 表现出 5'->3' 聚合酶和 3'->5' 核酸外切酶活性 (1, 2)。

• 将标记的核苷酸添加到 DNA 片段的凹陷 3' 末端。

• 聚合酶需要单链DNA 模板和引物。

• 核酸外切酶比在 DNA 聚合酶 I 中发现的更强，对单链 DNA 的活性比对双链 DNA 的活性更高。

• 超纯重组酶。

• 核酸外切酶活性可用于从双链 DNA 的 3' 端去除一个或几个核苷酸。

• 酶适用于：o 去除 3' 悬垂以形成钝端 (3,4)o 5' 填充物以形成钝端 (3,4)o 使用置换合成进行探针标记 (3,4)o 单链缺失亚克隆 (5)o 定点诱变中的第二链合成 (6) 单位定义：1 单位是在 37oC 下 30 分钟内催化 10 nmole 总核苷酸掺入酸不溶性产物中的酶量。

储存条件：储存于 –20oC。储存缓冲液：20 mM 磷酸钾 (pH 6.5)、5 mM 二硫苏糖醇和 50% (v/v) 甘油。

检测条件：67 mM Tris-HCl（pH 8.8，22oC）、6.7 mM MgCl2、10 mM 二硫苏糖醇、16.6 mM 硫酸铵、6.7 µM EDTA、20 µg 牛血清白蛋白、45 µg 活化小牛胸腺 DNA3 mM 3 mM C0 和 0。、dGTP、dTTP 和 [a-32P]dATP。在 100 µl 反应体积中，在 37oC 下孵育 30 分钟 (1)。质量控制：测试所有制剂的污染核酸内切酶活性。

参考：

1. Goulian, M.、Lucas, ZJ 和 Kornberg, A. (1968) J. Biol。化学 243, 627-638。

2. Lehman, IR (1981) 酶 14, 51-65。

3. Tabor, S. 和 Struhl, K (1989) 在 Current Protocols in Molecular Biology (Ausubel, FM, et al., eds) pp. 3.5.10-3.5.12, John Wiley&Sons, New York。

4. Sambrook, J.、Fritsch, EF 和 Maniatis, T. (1989) 分子克隆：实验室手册，第二版，第 5.44-5.47 页，冷泉港。

5. Dale, R., McClure, B. 和 Houchins, J., (1985) Plasmid 13, 31-40。

6. Kunkel, TA, Roberts, JD 和 Zakour, RA (1987) Methods Enzymol.154, 367-382。

T4 DNA 聚合酶是嗜中性聚合酶，表现出非常强的 3'->5' 核酸外切酶活性。

DNA双端Barcode环化试剂盒|Dual Barcode Fast-Pace™ DNA Cyclization Kit

发表于2024年11月17日由上海金畔生物科技有限公司

DNA双端Barcode环化试剂盒|Dual Barcode Fast-Pace™ DNA Cyclization Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS^® Dual Barcode Fast-Pace DNA Cyclization Kit for MGI^®是针对 MGI^®高通量测序平台专门开发设计的单链环化试剂盒。本产品采用高质量的酶和经优化后的 Buffer 组成，显著提高反应效率，使整个环化消化流程在 30 min 内完成。本试剂盒适用于所有连接华大标准的双标签 PCR 接头文库扩增产物，除建库试剂本身的限制外，本环化试剂盒不限 MGI^®测序平台。

产品组分

组分编号与名称		13340ES08	13340ES16	13340ES96
13340-A	DB Splint Oligo	48μL	96 μL	576 μL
13340-B	Splint Buffer	120μL	240 μL	2×720 μL
13340–C	Ligase	40μL	80 μL	480 μL
13340–D	Digestion Buffer	64μL	128 μL	768 μL
13340–E	Digestion Enzyme	16μL	32 μL	192 μL

运输与保存方法

冰袋运输。

所有组分-20°C保存，有效期1年。

注意事项

一、关于操作

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。

3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。

4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。

5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

6. 定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。

7. 本产品仅作科研用途！

二、样本要求及处理

2.1样本量要求

1. 本试剂盒推荐的Input DNA量为1 pmol；若PCR产物不足，最低可降至0.5 pmol投入量。

2. 若有特殊的环化投入量需求，则按照文库制备试剂盒的要求投入所需的 Input DNA 量。

3. 不同片段大小DNA 1 pmol 分子对应不同的质量，可根据公式 1 计算或参考表1选择所需的 Input DNA量：

公式 1 PCR 产物摩尔数与质量间的换算

1 pmol PCR 产物对应的质量 (ng)=DNA 主片段大小 (bp)×0.66

表1 不同片段大小PCR产物1pmol对应产量

插入片段大小（bp）	PCR产物主片段大小（bp）	1 pmol对应产量（ng）
150	300	198
200	350	231
250	400	264
300	450	297

2.2 样本混样要求

1. Input DNA可以是单个样本，也可以是多个带有不同Barcodes的样本的混合物。

2. 对样本进行混合时需满足Barcodes混合的要求，可参考表华大双标签 PCR 接头试剂盒说明书选择合适的Barcodes进行混合。

3. 混合的样本总量推荐为1 pmol，若每个样本所需数据量相同，则等量混合，每个样本所需的质量按照公式2进行计算：

公式 2 混合样本中单个样本所需质量的计算

单个样本所需的质量(ng)=1 pmol Input DNA对应的质量（ng）/混合的样本个数 N

4. 单个样本或混合后样本用于环化时，体积应为34 μL，若不足则用 ddH₂O补充至34 μL。

三、关于磁珠纯化（Bead-based Clean Up）

1. 磁珠使用前应先平衡至室温，否则会导致纯化得率下降。

2. 磁珠每次使用前都应充分振荡混匀或使用移液器上下吹打充分混匀。

3. 磁珠漂洗使用的80%乙醇应现用现配，否则将影响回收效率。

4. 产物洗脱前应将磁珠置于室温干燥。干燥不充分容易造成无水乙醇残留影响后续反应；过分干燥又会导致磁珠开裂进而降低纯化得率。通常情况下，室温干燥约5 min。

5. 单链环产物纯化保存，可使用TE Buffer洗脱，产物可于-20°C可保存1个月。

四、关于文库质检（Library Quality Analysis）

1. 单链环产物纯化后推荐使用 Qubit^®ssDNA Assay Kit 单链DNA荧光染料试剂对纯化后产物进行定量。
2. 针对华大智造高通量测序平台，单链环产物纯化后产量应≥80 fmol（足够2次上机测序）。
3. 可根据公式3计算或参考表2。

公式 3 单链环摩尔数与质量间的换算
80 fmol单链环对应的质量(ng)=0.08×DNA 主片段大小(bp)×0.33

表2 不同PCR产物片段大小对应80fmol单链环产量

插入片段大小（bp）	PCR产物主片段大小（bp）	80 fmol对应产量（ng）
150	300	7.92
200	350	9.24
250	400	10.56
300	450	11.88

使用方法

一、自备材料

1. 纯化磁珠：Cat#12601，Hieff NGS^®DNA Selection Beads或Cat#A63880，AMPure XP Beads或其他等效产品。

2. 文库质控：Cat # Q10212, Thermo fisher Qubit^®ssDNA Assay Kit。

3. 其他材料：无水乙醇、灭菌超纯水、TE Buffer（10 mM Tris-HCl，pH 8.0-8.5+0.1 mM EDTA）、低吸附EP管、PCR管、磁力架、PCR仪等。

二、操作流程

DNA双端Barcode环化试剂盒|Dual Barcode Fast-Pace™ DNA Cyclization Kit

图1 单链环化文库构建流程

三、操作步骤

3.1 变性

1. 根据文库长度，取1 pmol 至0.2 ml PCR管中，用ddH₂O补充至34 μL。

2. 将表3中试剂解冻后，颠倒混匀并置于冰上备用。

3. 于冰上配制表3反应体系。

表3 DNA变性体系

名称	体积（μL）
单个或混合好的双链文库	34
DB Splint Oligo	6
Total	40

4. 混匀后，在PCR仪上进行98℃变性3 min，之后立即置于冰上，冰浴2 min 后瞬时离心。

3.2 单链环化

1. 将表4中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。

2. 于冰上配制表4反应体系。

表4 单链环化体系

名称	体积（μL）
上一步反应物	40
Splint Buffer	15
Ligase	5
Total	60

3.使用移液器轻轻吹打或低速振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。

4.将PCR管置于PCR仪上，按照表5所示摄制反应程序，进行单链环化反应。

表5单链环化反应程序

温度	时间
热盖105°C	OFF
37°C	15min
4°C	Hold

3.3 酶切消化

1. 将表6中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。

2. 于冰上配制表6所示反应体系。

表6 酶切消化体系

名称	体积（μL）
上一步反应物	60
Digestion Buffer	8
Digestion Enzyme	2
Total	70

3. 使用移液器轻轻吹打或低速振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将PCR管置于PCR仪上，按照表7的条件进行反应：

表7 酶切消化反应程序

温度	时间
热盖105°C	OFF
37°C	10 min
4°C	Hold

5. 反应结束后，瞬时离心，立即进行纯化。

3.4 消化产物纯化

该步骤使用磁珠对3.3步骤的产物进行纯化。

1. 准备工作：将Hieff NGS^® DNA Selection Beads或 Beckman AMPure XP Beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2. 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

3. 吸取120 μL Hieff NGS^® DNA Selection Beads至消化产物中，涡旋或吹打混匀，室温孵育10min。

4. 将PCR管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约2 min），小心移除上清。

5. 保持PCR管始终置于磁力架中，加入200μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 sec后，小心移除上清。

6. 重复步骤5，总计漂洗两次。

7. 保持PCR管始终置于磁力架中，开盖空气干燥磁珠至刚刚出现龟裂。

8. 将PCR管从磁力架中取出，加入22 μL TE Buffer，涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打至充分混匀，室温静置10 min。

9. 短暂离心，将 PCR 管始终置于磁力架中静置，待溶液澄清后（约 2min），将上清小心移至新 PCR 管中。

★停止点：环化纯化产物，可置于-20℃储存一个月。

3.5 消化产物质控

使用Qubit^®ssDNA Assay Kit荧光试剂对酶切消化产物进行定量，具体请参见注意事项四。

HB210803

产品组分

组分编号与名称		13340ES08	13340ES16	13340ES96
13340-A	DB Splint Oligo	48μL	96 μL	576 μL
13340-B	Splint Buffer	120μL	240 μL	2×720 μL
13340–C	Ligase	40μL	80 μL	480 μL
13340–D	Digestion Buffer	64μL	128 μL	768 μL
13340–E	Digestion Enzyme	16μL	32 μL	192 μL

运输与保存方法

冰袋运输。

所有组分-20°C保存，有效期1年。

注意事项

一、关于操作

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。

3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。

4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。

5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

6. 定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。

7. 本产品仅作科研用途！

二、样本要求及处理

2.1样本量要求

1. 本试剂盒推荐的Input DNA量为1 pmol；若PCR产物不足，最低可降至0.5 pmol投入量。

2. 若有特殊的环化投入量需求，则按照文库制备试剂盒的要求投入所需的 Input DNA 量。

3. 不同片段大小DNA 1 pmol 分子对应不同的质量，可根据公式 1 计算或参考表1选择所需的 Input DNA量：

公式 1 PCR 产物摩尔数与质量间的换算

1 pmol PCR 产物对应的质量 (ng)=DNA 主片段大小 (bp)×0.66

表1 不同片段大小PCR产物1pmol对应产量

插入片段大小（bp）	PCR产物主片段大小（bp）	1 pmol对应产量（ng）
150	300	198
200	350	231
250	400	264
300	450	297

2.2 样本混样要求

1. Input DNA可以是单个样本，也可以是多个带有不同Barcodes的样本的混合物。

2. 对样本进行混合时需满足Barcodes混合的要求，可参考表华大双标签 PCR 接头试剂盒说明书选择合适的Barcodes进行混合。

3. 混合的样本总量推荐为1 pmol，若每个样本所需数据量相同，则等量混合，每个样本所需的质量按照公式2进行计算：

公式 2 混合样本中单个样本所需质量的计算

单个样本所需的质量(ng)=1 pmol Input DNA对应的质量（ng）/混合的样本个数 N

4. 单个样本或混合后样本用于环化时，体积应为34 μL，若不足则用 ddH₂O补充至34 μL。

三、关于磁珠纯化（Bead-based Clean Up）

1. 磁珠使用前应先平衡至室温，否则会导致纯化得率下降。

2. 磁珠每次使用前都应充分振荡混匀或使用移液器上下吹打充分混匀。

3. 磁珠漂洗使用的80%乙醇应现用现配，否则将影响回收效率。

5. 单链环产物纯化保存，可使用TE Buffer洗脱，产物可于-20°C可保存1个月。

四、关于文库质检（Library Quality Analysis）

公式 3 单链环摩尔数与质量间的换算
80 fmol单链环对应的质量(ng)=0.08×DNA 主片段大小(bp)×0.33

表2 不同PCR产物片段大小对应80fmol单链环产量

插入片段大小（bp）	PCR产物主片段大小（bp）	80 fmol对应产量（ng）
150	300	7.92
200	350	9.24
250	400	10.56
300	450	11.88

使用方法

一、自备材料

1. 纯化磁珠：Cat#12601，Hieff NGS^®DNA Selection Beads或Cat#A63880，AMPure XP Beads或其他等效产品。

2. 文库质控：Cat # Q10212, Thermo fisher Qubit^®ssDNA Assay Kit。

3. 其他材料：无水乙醇、灭菌超纯水、TE Buffer（10 mM Tris-HCl，pH 8.0-8.5+0.1 mM EDTA）、低吸附EP管、PCR管、磁力架、PCR仪等。

二、操作流程

DNA双端Barcode环化试剂盒|Dual Barcode Fast-Pace™ DNA Cyclization Kit

图1 单链环化文库构建流程

三、操作步骤

3.1 变性

1. 根据文库长度，取1 pmol 至0.2 ml PCR管中，用ddH₂O补充至34 μL。

2. 将表3中试剂解冻后，颠倒混匀并置于冰上备用。

3. 于冰上配制表3反应体系。

表3 DNA变性体系

名称	体积（μL）
单个或混合好的双链文库	34
DB Splint Oligo	6
Total	40

4. 混匀后，在PCR仪上进行98℃变性3 min，之后立即置于冰上，冰浴2 min 后瞬时离心。

3.2 单链环化

1. 将表4中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。

2. 于冰上配制表4反应体系。

表4 单链环化体系

名称	体积（μL）
上一步反应物	40
Splint Buffer	15
Ligase	5
Total	60

3.使用移液器轻轻吹打或低速振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。

4.将PCR管置于PCR仪上，按照表5所示摄制反应程序，进行单链环化反应。

表5单链环化反应程序

温度	时间
热盖105°C	OFF
37°C	15min
4°C	Hold

3.3 酶切消化

1. 将表6中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。

2. 于冰上配制表6所示反应体系。

表6 酶切消化体系

名称	体积（μL）
上一步反应物	60
Digestion Buffer	8
Digestion Enzyme	2
Total	70

3. 使用移液器轻轻吹打或低速振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将PCR管置于PCR仪上，按照表7的条件进行反应：

表7 酶切消化反应程序

温度	时间
热盖105°C	OFF
37°C	10 min
4°C	Hold

5. 反应结束后，瞬时离心，立即进行纯化。

3.4 消化产物纯化

该步骤使用磁珠对3.3步骤的产物进行纯化。

1. 准备工作：将Hieff NGS^® DNA Selection Beads或 Beckman AMPure XP Beads由冰箱中取出，室温平衡至少30 min。配制80%乙醇。

2. 涡旋振荡或充分颠倒磁珠以保证充分混匀。

3. 吸取120 μL Hieff NGS^® DNA Selection Beads至消化产物中，涡旋或吹打混匀，室温孵育10min。

4. 将PCR管短暂离心并置于磁力架中分离磁珠和液体，待溶液澄清后（约2 min），小心移除上清。

5. 保持PCR管始终置于磁力架中，加入200μL新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，室温孵育30 sec后，小心移除上清。

6. 重复步骤5，总计漂洗两次。

7. 保持PCR管始终置于磁力架中，开盖空气干燥磁珠至刚刚出现龟裂。

8. 将PCR管从磁力架中取出，加入22 μL TE Buffer，涡旋振荡或使用移液器轻轻吹打至充分混匀，室温静置10 min。

9. 短暂离心，将 PCR 管始终置于磁力架中静置，待溶液澄清后（约 2min），将上清小心移至新 PCR 管中。

★停止点：环化纯化产物，可置于-20℃储存一个月。

3.5 消化产物质控

使用Qubit^®ssDNA Assay Kit荧光试剂对酶切消化产物进行定量，具体请参见注意事项四。

HB210803

DNA双端Barcode环化试剂盒|Dual Barcode Fast-Pace™ DNA Cyclization Kit

暂无内容

大肠杆菌DNA连接酶缓冲液|10×E.coli DNA ligase Buffer

发表于2024年11月16日由上海金畔生物科技有限公司

大肠杆菌DNA连接酶缓冲液|10×E.coli DNA ligase Buffer

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

E.coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5'-PO4末端与3'-OH末端形成磷酸二酯键本酶，可以催化突出末端DNA之间的连接。

10× E.coli DNA ligase Buffer可适用于所有需要E.coli DNA ligase催化的反应，确保酶的最佳活性。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	15822ES03	15822ES08	15822ES50
15822	10× E.coli DNA ligase Buffer	1 mL	5 mL	50 mL

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃储存，有效期2年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

HB220713

E.coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5'-PO4末端与3'-OH末端形成磷酸二酯键本酶，可以催化突出末端DNA之间的连接。

10× E.coli DNA ligase Buffer可适用于所有需要E.coli DNA ligase催化的反应，确保酶的最佳活性。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	15822ES03	15822ES08	15822ES50
15822	10× E.coli DNA ligase Buffer	1 mL	5 mL	50 mL

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃储存，有效期2年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

HB220713

大肠杆菌DNA连接酶缓冲液|10×E.coli DNA ligase Buffer

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DNA文库构建专用引物试剂盒(MGI) DNA Library Prep Primer Mix

发表于2024年11月16日由上海金畔生物科技有限公司

DNA文库构建专用引物试剂盒(MGI) DNA Library Prep Primer Mix

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff NGS^®DNA Lib Prep Primer Mix for MGI^®是MGI高通量测序平台DNA文库构建专用引物试剂盒，需搭配Hieff NGS^® Ultima Pro DNA Library Prep Kit（Cat#12197）和Hieff NGS^® OnePot Pro DNA Library Prep Kit（Cat#12195）以及Complete Adapter for MGI^®使用（Cat#13360-13362或其他等效产品）。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

产品组分

产品编号	产品名称	产品规格
产品编号	产品名称	8 T	24T	96 T
12191	DNA Lib Prep Primer Mix for MGI^®	40 μL	120 μL	480 μL

运输与保存方法

冰袋运输。

所有组分-20°C保存，有效期1年。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。

3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。

4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。

5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；使用专用的移液器等设备；并定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%次氯酸钠或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。

7.本产品仅用作科研用途！

使用方法

按照建库说明书中文库扩增体系配制反应体系（如下表），反应程序按照建库说明书中程序进行设置。

名称	体积（μL）
Canace^®Pro Amplification Mix	25
DNA Lib Prep Primer Mix for MGI^®	5
Adapter Ligated DNA	20

HB230203

产品组分

产品编号	产品名称	产品规格
产品编号	产品名称	8 T	24T	96 T
12191	DNA Lib Prep Primer Mix for MGI^®	40 μL	120 μL	480 μL

运输与保存方法

冰袋运输。

所有组分-20°C保存，有效期1年。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。

3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。

4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。

5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

7.本产品仅用作科研用途！

使用方法

按照建库说明书中文库扩增体系配制反应体系（如下表），反应程序按照建库说明书中程序进行设置。

名称	体积（μL）
Canace^®Pro Amplification Mix	25
DNA Lib Prep Primer Mix for MGI^®	5
Adapter Ligated DNA	20

HB230203

DNA文库构建专用引物试剂盒(MGI) DNA Library Prep Primer Mix

暂无内容

病态和DNA碎片精子耗竭纳米颗粒简介

发表于2024年11月15日由上海金畔生物科技有限公司

CLEMENTE ASSOCIATES 病态和DNA碎片精子耗竭纳米颗粒简介

病态和DNA碎片

精子去除纳米颗粒

纳米晶体形成了覆盖糖蛋白的超顺磁性粒子。在细胞质内精子注射（ICSI）和体外受精（IVF）之前，这些颗粒在去除病态/DNA片段精子方面非常有效。

应用

接受ICSI或IVF的DFI高的男性因素。

接受IUI的DFI高的男性因素。

可归因于男性因素的反复流产。

早期妊娠丢失归因于男性因素。

根据磁性纳米粒子选择精子的最新研究，与单独使用密度梯度离心（DGC）相比，治疗组的高质量胚胎百分比、妊娠率和植入率明显更高。

粒子特性

颗粒形状不规则，表面积扩大。

与流式细胞术、PCR和F.I.S.H.兼容。

快速磁响应。

有效的大小，在显微镜下可见，从而避免对活细胞的非特异性结合。

保存在叠氮化纳中，以达到最大灭菌效果（可选）。

粒子优势

易用性；对于清洗过的精子细胞，可能不需要额外的处理步骤DGC。

温和分离，将细胞损伤和核酸剪切的风险降低。

不需要磁性柱。

不预处理颗粒或精子样本。

无需特殊试剂。

体积处理能力从微升到升。

血液DNA提取试剂盒|MolPure® Blood DNA Kit

发表于2024年11月15日由上海金畔生物科技有限公司

血液DNA提取试剂盒|MolPure® Blood DNA Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure^® Blood DNA Kit适用于哺乳动物、禽类、鸟类、两栖类等血液样品中DNA的提取。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如PCR、分子克隆和酶切反应等。

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	18730ES08 (5 T)	18730ES50 (50 T)	18730ES70 (200 T)
Part I	18730-A	Proteinase K (20 mg/mL)	100 μL	1 mL	1×4 mL
Part II	18730-B	MolPure^® DNA Column B2	5个	50个	200个
	18730-C	2 mL Collection Tube B2	5个	50个	200个
	18730-D	AC Buffer B2	500 μL	5 mL	20 mL
	18730-E	DB Buffer B2	1 mL	10 mL	40 mL
	18730-F	BD Buffer B2	1.5 mL	15 mL	60 mL
	18730-G	PL Buffer B2	2.5 mL	25 mL	100 mL
	18730-H	Wash Buffer*	1.5 mL	13 mL	50 mL
	18730-I	Elution Buffer	1 mL	10 mL	20 mL

运输与保存方法

Part I组分常温运输，4℃避光保存，有效期12个月。

Part II组分常温运输，常温保存，有效期12个月。

注意事项

1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季等室温为低温环境时），可37℃温浴复溶至溶液澄清，避免影响使用效果。

3. 去蛋白液PL含有刺激性物质，为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

相关产品

产品名称	货号	规格
MolPure^® Blood RNA Kit 血液RNA提取试剂盒^HOT	19241ES50	50 T
MolPure^® Cell/Tissue miRNA Kit 细胞/组织miRNA提取试剂盒^HOT	19331ES50	50 T
MolPure^® Serum/Plasma miRNA Kit 血清/血浆miRNA提取试剂盒^HOT	19332ES50	50 T
Hieff NGS^® OnePot II DNA Library Prep Kit for Illumina^HOT	12204ES08	8 libraries
	12204ES24	24 libraries
	12204ES96	96 libraries
Hieff Clone^® 一步法快速克隆试剂盒^HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^® 多片段一步法快速克隆试剂盒^HOT	10912ES10	10 T
Hieff Canace^® Gold 高保真DNA聚合酶^HOT	10148ES60	100 U
	10148ES76	500 U
	10148ES80	1000 U
2×Hieff Canace^® Gold 高保真酶预混液^HOT	10149ES03	1 mL
2×Hieff Canace^® Gold 高保真酶预混液^HOT	10149ES08	5 mL

HB210824

Q：提取的 DNA 存在降解

A：（1）样本采集与保存降解：

1.应尽可能选择新鲜的样本；

2.样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准；

3.样品保存时要尽可能的避免反复冻融；

（2）样本前处理不当：

1.选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理；

2.前处理结束后在样本解冻前添加裂解液；

（3）样本裂解：

1.需对样本进行充分裂解；

2.正确添加所需试剂种类及使用量，样本量增加时裂解液也需成倍增加；

（4）样品保存：

对得到的 DNA 产物进行分装保存，避免反复冻融且保存时间不易太久。

Q：提取的 DNA 产量低

A：（1）样本采集与保存：

1.事先了解提取样本中 DNA 含量水平；

2.样本保存时要尽可能的避免反复冻融，保存时间不宜太久；

3.样本投入量适量，不宜过多或过少；

（2）样本前处理和裂解：

选择合适的前处理及裂解方式（比如延长裂解和沉淀DNA 的时间等），避免堵柱，并尽可能的将样本中的DNA 完全释放出来

（3）提取纯化：

1.使用沉淀法提取DNA 时，可以 1/10 体积的醋酸钠（pH5.2）有助于 DNA 沉淀；

2.在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出时，用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量困难；

3.洗脱buffer 中无水乙醇添加量不准确，按照说明书正确添加无水乙醇；

4.添加洗脱液前过度干燥吸附柱：开盖时间不宜超过 5min，否则易造成 DNA 洗脱

5.洗脱液问题：请使用Elution Buffer 洗脱；若用 ddH2O 或其他洗脱液时，确认其

PH 值在 7.0-8.5 之间；

6.洗脱不充分：使用柱式试剂盒对 DNA 产物洗脱的时候，预热洗脱液并滴加在膜中央位置，尽可能的覆盖整个吸附膜，增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。

Q：提取的 DNA 纯度低，影响下游实验结果

A：样本投入量不要太多；样本应进行充分裂解：不同污染；

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	18730ES08 (5 T)	18730ES50 (50 T)	18730ES70 (200 T)
Part I	18730-A	Proteinase K (20 mg/mL)	100 μL	1 mL	1×4 mL
Part II	18730-B	MolPure^® DNA Column B2	5个	50个	200个
	18730-C	2 mL Collection Tube B2	5个	50个	200个
	18730-D	AC Buffer B2	500 μL	5 mL	20 mL
	18730-E	DB Buffer B2	1 mL	10 mL	40 mL
	18730-F	BD Buffer B2	1.5 mL	15 mL	60 mL
	18730-G	PL Buffer B2	2.5 mL	25 mL	100 mL
	18730-H	Wash Buffer*	1.5 mL	13 mL	50 mL
	18730-I	Elution Buffer	1 mL	10 mL	20 mL

运输与保存方法

Part I组分常温运输，4℃避光保存，有效期12个月。

Part II组分常温运输，常温保存，有效期12个月。

注意事项

3. 去蛋白液PL含有刺激性物质，为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

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HB210824

Q：提取的 DNA 存在降解

A：（1）样本采集与保存降解：

1.应尽可能选择新鲜的样本；

2.样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准；

3.样品保存时要尽可能的避免反复冻融；

（2）样本前处理不当：

1.选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理；

2.前处理结束后在样本解冻前添加裂解液；

（3）样本裂解：

1.需对样本进行充分裂解；

2.正确添加所需试剂种类及使用量，样本量增加时裂解液也需成倍增加；

（4）样品保存：

对得到的 DNA 产物进行分装保存，避免反复冻融且保存时间不易太久。

Q：提取的 DNA 产量低

A：（1）样本采集与保存：

1.事先了解提取样本中 DNA 含量水平；

2.样本保存时要尽可能的避免反复冻融，保存时间不宜太久；

3.样本投入量适量，不宜过多或过少；

（2）样本前处理和裂解：

选择合适的前处理及裂解方式（比如延长裂解和沉淀DNA 的时间等），避免堵柱，并尽可能的将样本中的DNA 完全释放出来

（3）提取纯化：

1.使用沉淀法提取DNA 时，可以 1/10 体积的醋酸钠（pH5.2）有助于 DNA 沉淀；

2.在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出时，用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量困难；

3.洗脱buffer 中无水乙醇添加量不准确，按照说明书正确添加无水乙醇；

4.添加洗脱液前过度干燥吸附柱：开盖时间不宜超过 5min，否则易造成 DNA 洗脱

5.洗脱液问题：请使用Elution Buffer 洗脱；若用 ddH2O 或其他洗脱液时，确认其

PH 值在 7.0-8.5 之间；

Q：提取的 DNA 纯度低，影响下游实验结果

A：样本投入量不要太多；样本应进行充分裂解：不同污染；

暂无内容

Cod Uracil-DNA Glycosylase 说明书

发表于2024年11月14日由上海金畔生物科技有限公司

世界*实验材料供应商arcticzymes上海金畔生物为其中国代理，arcticzymes 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， arcticzymes 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

arcticzymes 中国代理，arcticzymes 上海代理，arcticzymes北京代理，arcticzymes 广东代理，arcticzymes 江苏代理 arcticzymes 湖北代理, arcticzymes 天津, arcticzymes 黑龙江代理, arcticzymes内蒙古代理, arcticzymes 吉林代理, arcticzymes 福建代理, arcticzymes 江苏代理, arcticzymes 浙江代理, arcticzymes 四川代理,

ArcticZymes将利用其在北极海洋中的生物勘探活动，成为分子研究和诊断新型冷适应酶商业化的。

ArcticZymes AS有悠久的历史可追溯到20世纪80年代末。经营理念是利用挪威北部渔业的副产品。在20世纪90年代中期， Biotec Pharmacon 收购了生产虾碱性磷酸酶的技术，并建立了生产分子级酶的部门。2009年6月，Biotec Pharmacon创建了ArcticZymes，该公司是96％的子公司。

ArcticZymes的产品在分子研究和诊断领域牢固扎根; 作为我们商业合作伙伴套件中的独立酶和*成分。我们与OEM合作伙伴和个人研究人员建立了牢固的关系，其战略意图是扩大我们的酶组合和每个*产品的应用。

Cod Uracil-DNA Glycosylase

鳕鱼尿嘧啶DNA糖基化酶

货号	规格	浓度
70500-201	100 U	1U/µl
70500-202	1000 U	1U/µl
70500-151	50 kU	1U/µl
70500-150	50 kU	50U/µl
70500-160	200 kU	50U/µl
70510-105	Glycerol-free 5 kU	40-60U/µl
70510-150	Glycerol-free 50 kU	40-60U/µl

描述

Cod Uracil-DNA Glycosylase (Cod UNG) from Atlantic Cod is the only commercially available UNG enzyme that is compley and irreversibly inactivated by moderate heat treatment. The enzyme is produced in a recombinant E. coli (ung-) strain that contains a modified Cod UNG gene.

Cod UNG的主要优点

热不稳定
在55°C*不可逆地灭活
使用Cod UNG可以在RT-PCR中进行污染控制
不会使PCR产物PCR后降解。这使PCR产物的下游使用成为可能
高纯度的酶，测试没有污染的核酸酶

PCR结转预防

日本Sanplatec官网代理商

三博特日本ATTO电泳槽日本东洋advantec滤纸中国代理商

标签归档：dna

新型T4 DNA连接酶(400 U/µL)|Novel T4 DNA Ligase

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