CM-DiI活细胞示踪剂 DiI衍生物|Celltracker CM-DiI
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
产品描述
CM-Dil为DiI的一种衍生物，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞，适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性，可用以追踪多次传代细胞的运动特性。其有着强而稳定的红色荧光（Ex/Em=553/570 nm），与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性，适合做多重指标染色。CM-Dil可自由穿透质膜进入细胞，从而产生不具有膜渗透性的反应产物。经过几次传代此染料还可完好的维持在活细胞内，染料随着细胞分裂传入子代细胞内，但不会进入相邻细胞。至少在72小时内保持荧光信号（一般可传3~6代）。工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。
与Dil相比，CM-Dil水溶性更好一些，便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备；CM-Dil携带的CM基团（即氯甲基替代基团）能与多肽及蛋白上的巯基反应从而使该分子在醛类物质中保持稳定。与其他膜染料如DiI和PKH26不同，一些细胞经CM-Dil染色后，可在后续的固定，透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记，因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化，荧光原位杂交或者电镜观察的实验。
研究证实，CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
产品性质
|
同义名（Synonym） |
3H-Indolium,5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride/ |
|
CAS号（CAS NO.） |
180854-97-1 |
|
分子式（Molecular Formula） |
C68H105Cl2N3O |
|
分子量（Molecular Weight） |
1051.5 |
|
外观（Appearance） |
红色固体 |
|
Ex/Em |
553 nm/570 nm |
|
推荐滤光器（Optical Filters） |
XF23-Omega, 31002-Chroma |
|
结构式（Structure） |
|
运输与保存方法
室温运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期一年。
注意事项
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 染色液制备
1）配置DMF，DMSO或EtOH 储存液：储存液用DMF、DMSO或EtOH配制浓度1-2 mM。
注：未使用的储存液保存在-20℃，分装保存，避免反复冻融。
2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或D-PBS）稀释储存液，配制浓度为1～2 μM的工作液。
注：最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。
2. 细胞标记（悬浮细胞）
1）在标记前根据实验要求按照上述方法配制好工作液；
2）建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育≤5 min，再于4℃孵育15 min（低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性）。
【注】：细胞的染色时间依细胞类型的不同差异很大，一般细胞建议染色小于5 min；但有的细胞染色可能染色时间需要延长到20 min-1 h，最佳染色时间需要优化。
3）标记完成后，用PBS清洗细胞，并用新鲜培养基重悬细胞。
注：对于贴壁细胞，可直接就贴壁状态的细胞进行荧光标记，相较于消化处理后的细胞具有更高的活力。
2. 染色后处理
1）CM-DiI染色后的细胞直接用3.7% 甲醛（溶于PBS），于37℃固定10 min；
2）室温条件PBS清洗2次，每次5 min；
3）于-20℃中，用丙酮透化处理10 min；
4）室温条件PBS清洗2次，每次5 min；并根据自身的实验要求以及细胞类型，进行后续的实验如石蜡包埋–免疫组化分析，电镜分析等。有报道提到，经CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v) Triton X-100的透化作用；从绵羊淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞，经甲醛固定，石蜡包埋，切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇，以及脱水后仍能维持荧光；
HB221116
产品描述
CM-Dil为DiI的一种衍生物，通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞，适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性，可用以追踪多次传代细胞的运动特性。其有着强而稳定的红色荧光（Ex/Em=553/570 nm），与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性，适合做多重指标染色。CM-Dil可自由穿透质膜进入细胞，从而产生不具有膜渗透性的反应产物。经过几次传代此染料还可完好的维持在活细胞内，染料随着细胞分裂传入子代细胞内，但不会进入相邻细胞。至少在72小时内保持荧光信号（一般可传3~6代）。工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。
与Dil相比，CM-Dil水溶性更好一些，便于悬浮细胞和固定细胞染色溶液的制备；CM-Dil携带的CM基团（即氯甲基替代基团）能与多肽及蛋白上的巯基反应从而使该分子在醛类物质中保持稳定。与其他膜染料如DiI和PKH26不同，一些细胞经CM-Dil染色后，可在后续的固定，透化和石蜡包埋处理中维持稳定的标记，因此特别适用于同时做细胞膜标记以及后续的免疫组化，荧光原位杂交或者电镜观察的实验。
研究证实，CM-DiI标记后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上，标记细胞形态良好，能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况；或将标记的细胞注入体内，可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。
产品性质
|
同义名（Synonym） |
3H-Indolium,5-[[[4-(chloromethyl)benzoyl]amino]methyl]-2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl-1-octadecyl-, chloride/ |
|
CAS号（CAS NO.） |
180854-97-1 |
|
分子式（Molecular Formula） |
C68H105Cl2N3O |
|
分子量（Molecular Weight） |
1051.5 |
|
外观（Appearance） |
红色固体 |
|
Ex/Em |
553 nm/570 nm |
|
推荐滤光器（Optical Filters） |
XF23-Omega, 31002-Chroma |
|
结构式（Structure） |
|
运输与保存方法
室温运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期一年。
注意事项
1）荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 染色液制备
1）配置DMF，DMSO或EtOH 储存液：储存液用DMF、DMSO或EtOH配制浓度1-2 mM。
注：未使用的储存液保存在-20℃，分装保存，避免反复冻融。
2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或D-PBS）稀释储存液，配制浓度为1～2 μM的工作液。
注：最佳的工作液浓度请根据不同细胞和自身的实验体系来调整。
2. 细胞标记（悬浮细胞）
1）在标记前根据实验要求按照上述方法配制好工作液；
2）建议待标记细胞在染色工作液中于37℃孵育≤5 min，再于4℃孵育15 min（低温孵育可降低细胞对染料的内吞作用，有助于染料对质膜的标记，并且降低染料定位细胞质囊泡的可能性）。
【注】：细胞的染色时间依细胞类型的不同差异很大，一般细胞建议染色小于5 min；但有的细胞染色可能染色时间需要延长到20 min-1 h，最佳染色时间需要优化。
3）标记完成后，用PBS清洗细胞，并用新鲜培养基重悬细胞。
注：对于贴壁细胞，可直接就贴壁状态的细胞进行荧光标记，相较于消化处理后的细胞具有更高的活力。
2. 染色后处理
1）CM-DiI染色后的细胞直接用3.7% 甲醛（溶于PBS），于37℃固定10 min；
2）室温条件PBS清洗2次，每次5 min；
3）于-20℃中，用丙酮透化处理10 min；
4）室温条件PBS清洗2次，每次5 min；并根据自身的实验要求以及细胞类型，进行后续的实验如石蜡包埋–免疫组化分析，电镜分析等。有报道提到，经CM-DiI染色后的大鼠嗜铬细胞瘤细胞可兼容2%(w/v)多聚甲醛和0.2%(w/v) Triton X-100的透化作用；从绵羊淋巴细胞内再次纯化的CM-DiI标记细胞，经甲醛固定，石蜡包埋，切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇，以及脱水后仍能维持荧光；
HB221116
Q：这些探针染细胞，有没有细胞特异性？会不会 293 细胞不好染， MSC 好染？
A：由于这些染料是亲脂性染料，是通过插入到脂质膜中进而被激光激发观察，对于动植物细胞没有特异性。
Q：这些探针荧光探针装载完多久后观察？
A：为减少各种可能的误差，尽量缩短探针装载后到仪器测定所用的时间(刺激时间除外)。
Q：这些探针染色细胞后，对细胞有毒性吗？
A：荧光探针类产品对活细胞都会有一定的毒性，因此建议在染色处理完成后应尽快完成检测和观察。
Q：为什么染色后发现荧光颜色较浅，应怎么操作进行改进？
A：可以尝试增加染色的时间和浓度。
Q：要看几个小时过程中活细胞的形态变化，应该怎么选？
A：通常使用亲脂性花青染料，如 DiI，DiO，DiD 或 DiR。
[1] Yao C, Zhang R, Tang J, Yang D. Rolling circle amplification (RCA)-based DNA hydrogel. Nat Protoc. 2021;16(12):5460-5483. doi:10.1038/s41596-021-00621-2(IF:13.491)
[2] Wang D, Zhang L, Hu A, et al. Loss of 4.1N in epithelial ovarian cancer results in EMT and matrix-detached cell death resistance. Protein Cell. 2021;12(2):107-127. doi:10.1007/s13238-020-00723-9(IF:10.164)
[3] Xu H, Liao C, Liang S, Ye BC. A Novel Peptide-Equipped Exosomes Platform for Delivery of Antisense Oligonucleotides. ACS Appl Mater Interfaces. 2021;13(9):10760-10767. doi:10.1021/acsami.1c00016(IF:9.229)
[4] Li D, Zhou T, She Q, et al. Circulating Exosomal miR-493-3p Affects Melanocyte Survival and Function by Regulating Epidermal Dopamine Concentration in Segmental Vitiligo [published online ahead of print, 2022 Jun 9]. J Invest Dermatol. 2022;S0022-202X(22)01529-9. doi:10.1016/j.jid.2022.05.1086(IF:8.551)
[5] Mu J, Li L, Wu J, et al. Hypoxia-stimulated mesenchymal stem cell-derived exosomes loaded by adhesive hydrogel for effective angiogenic treatment of spinal cord injury. Biomater Sci. 2022;10(7):1803-1811. Published 2022 Mar 29. doi:10.1039/d1bm01722e(IF:6.843)
[6] Mu J, Wu J, Cao J, et al. Rapid and effective treatment of traumatic spinal cord injury using stem cell derived exosomes. Asian J Pharm Sci. 2021;16(6):806-815. doi:10.1016/j.ajps.2021.10.002(IF:6.598)
[7] Bao J, Zhao Y, Xu J, Guo Y. Design and construction of IR780- and EGCG-based and mitochondrial targeting nanoparticles and their application in tumor chemo-phototherapy. J Mater Chem B. 2021;9(48):9932-9945. Published 2021 Dec 15. doi:10.1039/d1tb01899j(IF:6.331)
[8] Li Y, Ma J, Song Z, et al. The Antitumor Activity and Mechanism of a Natural Diterpenoid From Casearia graveolens. Front Oncol. 2021;11:688195. Published 2021 Jun 25. doi:10.3389/fonc.2021.688195(IF:6.244)
[9] Li Y, Ma J, Song Z, et al. The Antitumor Activity and Mechanism of a Natural Diterpenoid From Casearia graveolens. Front Oncol. 2021;11:688195. Published 2021 Jun 25. doi:10.3389/fonc.2021.688195(IF:6.244)
[10] Huang T, Fan Q, Wang Y, et al. Schwann Cell-Derived CCL2 Promotes the Perineural Invasion of Cervical Cancer. Front Oncol. 2020;10:19. Published 2020 Jan 29. doi:10.3389/fonc.2020.00019(IF:6.244)
[11] Yang D, Liu A, Zhang Y, et al. Essential Role of CRIM1 on Endometrial Receptivity in Goat. Int J Mol Sci. 2021;22(10):5323. Published 2021 May 18. doi:10.3390/ijms22105323(IF:5.924)
[12] Wei J, Zhu K, Chen Z, et al. Triple-color fluorescence co-localization of PD-L1-overexpressing cancer exosomes. Mikrochim Acta. 2022;189(5):182. Published 2022 Apr 8. doi:10.1007/s00604-022-05278-6(IF:5.833)
[13] Yuan K, Lai C, Wei L, et al. The Effect of Vascular Endothelial Growth Factor on Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell Engraftment in Rat Fibrotic Liver upon Transplantation. Stem Cells Int. 2019;2019:5310202. Published 2019 Dec 4. doi:10.1155/2019/5310202(IF:5.443)
[14] Zhao Y, Zhang X, Li Y, et al. A natural xanthone suppresses lung cancer growth and metastasis by targeting STAT3 and FAK signaling pathways. Phytomedicine. 2022;102:154118. doi:10.1016/j.phymed.2022.154118(IF:5.340)
[15] Yan J, Wang WB, Fan YJ, et al. Cyclic Stretch Induces Vascular Smooth Muscle Cells to Secrete Connective Tissue Growth Factor and Promote Endothelial Progenitor Cell Differentiation and Angiogenesis. Front Cell Dev Biol. 2020;8:606989. Published 2020 Dec 9. doi:10.3389/fcell.2020.606989(IF:5.186)
[16] Cheng X, Li W, Zhao R, et al. The role of hippocampal niche exosomes in rat hippocampal neurogenesis after fimbria-fornix transection. J Biol Chem. 2021;296:100188. doi:10.1074/jbc.RA120.015561(IF:5.157)
[17] Cai X, Shi Y, Dai Y, Wang F, Chen X, Li X. Baicalin clears inflammation by enhancing macrophage efferocytosis via inhibition of RhoA/ROCK signaling pathway and regulating macrophage polarization. Int Immunopharmacol. 2022;105:108532. doi:10.1016/j.intimp.2022.108532(IF:4.932)
[18] Yan J, Bao H, Fan YJ, Jiang ZL, Qi YX, Han Y. Platelet-derived microvesicles promote endothelial progenitor cell proliferation in intimal injury by delivering TGF-β1. FEBS J. 2020;287(23):5196-5217. doi:10.1111/febs.15293(IF:4.392)
[19] Cao HH, Liu DY, Lai YC, et al. Inhibition of the STAT3 Signaling Pathway Contributes to the Anti-Melanoma Activities of Shikonin. Front Pharmacol. 2020;11:748. Published 2020 May 27. doi:10.3389/fphar.2020.00748(IF:4.225)
[20] Liu JS, Huo CY, Cao HH, et al. Aloperine induces apoptosis and G2/M cell cycle arrest in hepatocellular carcinoma cells through the PI3K/Akt signaling pathway [published correction appears in Phytomedicine. 2021 Nov;92:153731]. Phytomedicine. 2019;61:152843. doi:10.1016/j.phymed.2019.152843(IF:4.180)
[21] Zhou SW, Quan JY, Li ZW, et al. Bufadienolides from the Eggs of the Toad Bufo bufo gargarizans and Their Antimelanoma Activities. J Nat Prod. 2021;84(5):1425-1433. doi:10.1021/acs.jnatprod.0c00840(IF:4.050)
[22] Yang D, Liu A, Wu Y, et al. BCL2L15 Depletion Inhibits Endometrial Receptivity via the STAT1 Signaling Pathway. Genes (Basel). 2020;11(7):816. Published 2020 Jul 17. doi:10.3390/genes11070816(IF:3.759)
[23] Lu ZB, Liu SH, Ou JY, et al. Forsythoside A inhibits adhesion and migration of monocytes to type II alveolar epithelial cells in lipopolysaccharide-induced acute lung injury through upregulating miR-124 [published correction appears in Toxicol Appl Pharmacol. 2020 Dec 15;409:115328]. Toxicol Appl Pharmacol. 2020;407:115252. doi:10.1016/j.taap.2020.115252(IF:3.347)
[24] Lu Q, Wang X, Zhu J, Fei X, Chen H, Li C. Hypoxic Tumor-Derived Exosomal Circ0048117 Facilitates M2 Macrophage Polarization Acting as miR-140 Sponge in Esophageal Squamous Cell Carcinoma. Onco Targets Ther. 2020;13:11883-11897. Published 2020 Nov 18. doi:10.2147/OTT.S284192(IF:3.337)
[25] Liu G, Liao C, Chen X, et al. Identification and Characterization of Skeletal Muscle Stem Cells from Human Orbicularis Oculi Muscle. Tissue Eng Part C Methods. 2018;24(8):486-493. doi:10.1089/ten.TEC.2018.0048(IF:3.056)
[26] Zhao L, Shu Q, Sun H, et al. 1'H-Indole-3'-Carbonyl-Thiazole-4-Carboxylic Acid Methyl Ester Blocked Human Glioma Cell Invasion via Aryl Hydrocarbon Receptor's Regulation of Cytoskeletal Contraction. Biomed Res Int. 2020;2020:2616930. Published 2020 Oct 3. doi:10.1155/2020/2616930(IF:2.276)
[27] Sun M, Liu S, Gao J, et al. Cyclin G2 Is Involved in the Proliferation of Placental Trophoblast Cells and Their Interactions with Endothelial Cells. Med Sci Monit. 2020;26:e926414. Published 2020 Sep 17. doi:10.12659/MSM.926414(IF:1.918)