DAF-FM DA (NO荧光探针)
产品编号: S0019M
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DAF-FM DA (NO荧光探针)(S0019M)
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价格: ¥ 2998.00
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| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| S0019M | DAF-FM DA (NO荧光探针) | >500次 | 2998.00元 |
DAF-FM DA即3-Amino,4-aminomethyl-2′,7′-difluorescein, diacetate，也称DAF-FM diacetate或4-Amino, 5-aminomethyl-2′, 7′- difluorescein, diacetate。DAF-FM DA是最新一代用于一氧化氮定量检测的荧光探针，比以前比较常用的一氧化氮荧光检测探针DAF-2 diacetate有多方面的改进。首先，DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比，最后和一氧化氮反应形成的荧光产物受pH值的影响小，在pH值大于5.5时不受pH值的影响。其次，DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比，前者产生的荧光更加稳定，不容易淬灭，这样更加便于检测。另外，DAF-FM DA和DAF-2 diacetate相比，前者对一氧化氮的检测灵敏度更高，相同条件下检测灵敏度可以提高接近2倍，最低检测浓度可以达到3nM。
DAF-FM DA可以穿过细胞膜(cell-permeable)，进入细胞后可以被细胞内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM 。DAF-FM本身仅有很弱的荧光，但在和一氧化氮反应后可以产生强烈荧光，激发波长为495nm，发射波长为515nm。DAF-FM DA检测一氧化氮的机制可以参考上图。任何可以检测fluorescein的仪器，包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。右图为DAF-FM在不同浓度一氧化氮存在时的发射荧光扫描图谱(fluorescence emission spectra)。
DAF-FM DA的分子量为496.4，分子式为C25H18F2N2O7，HPLC分析纯度大于98%。
本DAF-FM DA为溶解于DMSO的淡黄色溶液，浓度为5mM。
本荧光探针适合于检测细胞内的一氧化氮水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常S包装至少可以检测100个样品，M包装至少可以检测500个样品。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0019S-1 | DAF-FM DA (NO荧光探针) 5mM | 20µl |
| S0019S-2 | DAF-FM DA稀释液 | 50ml |
| － | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0019M-1 | DAF-FM DA (NO荧光探针) 5mM | 100µl |
| S0019M-2 | DAF-FM DA稀释液 | 250ml |
| － | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，DAF-FM DA需避光保存，一年有效。
注意事项：
BSA和酚红(phenol red)对本荧光探针的检测有干扰，需避免。
第一次使用时请分装成小包装后-20℃保存，以避免反复冻融。
荧光探针应随用随配。配制好的探针工作液应立即使用，不能以后再用。
DAF-FM DA在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1.装载探针
对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞，先装载探针，后用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞，先用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞，后装载探针。
原位装载探针：本方法仅适用于贴壁培养细胞。按照1:1000比例，用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA，使终浓度为5微摩尔/升。去除细胞培养液，加入适当体积稀释好的DAF-FM DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜，通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DAF-FM DA的体积为1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。
收集细胞后装载探针：按照1:1000比例，用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA，使终浓度为5微摩尔/升。细胞收集后，用稀释好的DAF-FM DA重悬细胞，细胞浓度为一百万至二千万/毫升，37℃细胞培养箱内孵育20分钟。上述操作可以在离心管内进行。每隔3-5分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。直接用适当的阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞，或把细胞等分成若干份后再刺激细胞。
2.检测
对于原位装载探针的样品可以用激光共聚焦显微镜直接观察(用普通的荧光显微镜观察效果相对较差)，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。对于收集细胞后装载探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，用激光共聚焦显微镜直接观察也可以。
3.参数设置
使用495nm激发波长，515nm发射波长，实时、逐时间点或单时间点检测刺激前后荧光的强弱。DAF-FM和一氧化氮反应产物的荧光光谱和fluorescein非常相似，可以用检测fluorescein的参数设置进行检测，用检测FITC的参数设置进行检测也可以。
4.其它说明
上述推荐的DAF-FM DA的工作浓度为5微摩尔/升，对于某些细胞，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000的比例稀释DAF-FM DA，使装载探针时DAF-FM DA的浓度为1-2.5微摩尔/升。相反，如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可以把DAF-FM DA的工作浓度为调整为10微摩尔/升，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整。
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1.装载探针
对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞，先装载探针，后用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞，先用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞，后装载探针。
原位装载探针：本方法仅适用于贴壁培养细胞。按照1:1000比例，用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA，使终浓度为5微摩尔/升。去除细胞培养液，加入适当体积稀释好的DAF-FM DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜，通常对于六孔板的一个孔加入稀释好的DAF-FM DA的体积为1毫升。37℃细胞培养箱内孵育20分钟。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。
收集细胞后装载探针：按照1:1000比例，用本试剂盒提供的DAF-FM DA稀释液稀释DAF-FM DA，使终浓度为5微摩尔/升。细胞收集后，用稀释好的DAF-FM DA重悬细胞，细胞浓度为一百万至二千万/毫升，37℃细胞培养箱内孵育20分钟。上述操作可以在离心管内进行。每隔3-5分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。用PBS(pH7.4)洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-FM DA。直接用适当的阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞，或把细胞等分成若干份后再刺激细胞。
2.检测
对于原位装载探针的样品可以用激光共聚焦显微镜直接观察(用普通的荧光显微镜观察效果相对较差)，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。对于收集细胞后装载探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，用激光共聚焦显微镜直接观察也可以。
3.参数设置
使用495nm激发波长，515nm发射波长，实时、逐时间点或单时间点检测刺激前后荧光的强弱。DAF-FM和一氧化氮反应产物的荧光光谱和fluorescein非常相似，可以用检测fluorescein的参数设置进行检测，用检测FITC的参数设置进行检测也可以。
4.其它说明
上述推荐的DAF-FM DA的工作浓度为5微摩尔/升，对于某些细胞，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000的比例稀释DAF-FM DA，使装载探针时DAF-FM DA的浓度为1-2.5微摩尔/升。相反，如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可以把DAF-FM DA的工作浓度为调整为10微摩尔/升，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在15-60分钟内适当进行调整。
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Synthose Inc.是一家位于加拿大多伦多北部的研发实验室和小规模生产设备，专门为化学，生物化学，生物能源和治疗研究领域有效合成已建立的新型化合物。
我们是一个碳水化合物合成专家小组，迅速获得世界范围内对zui艰难的碳水化合物和糖缀合物项目的创新工艺开发和资源性问题解决的认可。
通过现成的产品，定制分子开发和研究合作伙伴关系，我们推动研发。
我们的实验室于2006年成立为LC Scientific Inc.，并于2017年更名为Synthose Inc.，以更好地反映我们对碳水化合物合成的关注。
3-Deoxy-5,6-O-isopropylidene-D-arabino-hexonic acid, γ-lactone
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3-脱氧-5,6- O-异亚丙基d阿拉伯 – hexono -1,4-内酯
货号：DA538
规格：100mg、250mg、500mg、1g
| 分子式 | C9H14O5 |
|---|---|
| 分子量 | 202.20 |
| CAS编号 | 110995-49-8 |
| 化学纯度 | 闵。98％[1H-NMR] |
| 出现 | 白色结晶固体 |
| 熔点 | 79-81℃ |
IRMM ERM-DA474/IFCC 说明书
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IRMM（欧洲标准局）产品涉及钢铁、石化、食品、环境各个领域。包含：
（1）各类金属、塑料、土壤、淤泥、油料、染料等标准物质。
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（4）工业材料标准物质：矿石、硅、合金等
（5）物理性质测定标准物质：导电性、熔点、PH测定标准物质等
Product information
| CRM code | ERM-DA474/IFCC |
| Description on the invoice | HUMAN SERUM” |
| Sales unit | vial |
| Net mass | 1.1 |
| Gross mass | 6 |
| Mass unit | Gram (g) |
| Storage temperature | -70 °C |
| Transport comment | Material is always shipped on dry ice |
| Transport comment Material on JCTLM list of “Reference materials of higher order” |
上海金畔生物科技有限公司
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