ComplementTech C3 (concentrated)说明书

ComplementTech成立于 2005 年，前身是Advanced Research 技术公司，ART公司成立于1993年，是一家有着20多年补体研发和生产经验的生物制品公司，为用户提供zui高质量的补体类产品及其它生物试剂产品。ComplementTech公司领导均是有数十年在科研机构从事补体领域研究的科学家，确保了公司产品的地位和优越品质。ComplementTech 致力于通过就补体试剂在补体领域以及其他相关科学领域的应用中的使用提供技术建议和专业知识来推进医学研究。

名称：C3蛋白浓缩           C3 Protein Concentrated           

目录号：      A113c

提供的大小：          1000微克/瓶

浓度：           5.0 mg / mL （见实际浓度分析证书）

形式：                          冷冻液体

活性：                      与正常人血清标准相比> 70％（见分析证书）。

纯度： 通过SDS-PAGE> 95％                       

缓冲液：                        10mM磷酸钠，145mM NaCl，pH7.2

灭绝 科夫。        阿 _280 纳米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量：     185,000Da（2链）

防腐剂：              无，0.22μm过滤

存储：                      -70 ^Ò C或以下。  避免冻结/解冻（每次解冻> 10％的活性损失）。

资源：                       正常 人血清（通过认证测试显示为阴性

对于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及针对HCV，HIV-1和HIV-II的抗体）。

预防措施：               使用正常的预防措施处理人体血液制品。

产地：                        制造在美国。

一般描述

浓缩C3主要是因为血清中C3的正常浓度高（约1.2mg / ml），因此重构耗竭血清需要高浓度的该补体蛋白。  天然人C3是含有两个二硫键连接的链的天然糖基化（〜2.7％）多肽。  C3对补体激活的所有三种途径的激活至关重要（Law，SKA和Reid，KBM（1995））。  每个途径的启动产生与目标表面结合的蛋白水解酶复合物（C3转化酶）。  这些酶切割C3中的肽键释放过敏毒素 C3a并激活C3b。  在短时间内（〜60μs），这种新生C3b能够与目标表面上的羟基反应并共价偶联。  碳水化合物是的目标，但蛋白质羟基和氨基也会发生反应。  用C3b标记目标表面的过程称为调理作用。  新生C3b中的反应性位点是硫酯（Tack BJ等（1980）; Pangburn MK和Müller-Eberhard HJ（1980）），C3b通过共价酯键连接到靶上（如果形成酰胺键，则形成C3b与氨基连接）。  补体激活过程中激活的大多数C3不会附着在表面上，因为它的硫酯与水反应形成液相C3b，液相C3b由因子H和I迅速失活而形成iC3b。  表面结合的C3b在所有三种途径中都是必需的，以有效激活C5和形成裂解靶细胞膜的C5b-9复合物。  表面结合的C3b及其分解产物iC3b和C3d被淋巴和吞噬细胞上的许多受体识别，所述淋巴和吞噬细胞使用C3b 配体刺激抗原呈递至适应性免疫系统的细胞。  终的结果是目标特异性B细胞和T细胞种群的扩大。

物理特性和结构

分子量：  185,000道尔顿，由两个二硫键连接组成。  α链是110,000道尔顿（含有C3a和C3d结构域），β链是75,000道尔顿。  α和β链通过单个二硫键连接。C3   的等电位约为。5.9

在C3转化酶切割C3后，从α链的N端释放C3a（77个氨基酸片段，9083Da），并且C3b（176,000Da）共价连接至活化剂表面。  已经描述了C3和C3b的晶体衍生的结构（Gros，P。（2008）），并且这些显示C3a-C3b肽键断裂后在C3的C3b部分发生大的构象变化。 

            天然C3和C4在血浆中循环，分子内 硫酯键连接C3d或C4d结构域中的甘氨酸和谷氨酰胺残基。  这些硫酯键容易受到胺（例如氨，甲胺，羟胺和肼）的亲核攻击，所有这些都被用于使血清中的补体失活。 

            CAS号码：  80295-41-6

MDL编号：  MFCD00130836       

功能

            C3对于有效补体活化和随后将抗原递呈至适应性免疫系统的细胞是*的（Lambris，JD（1988））。  识别目标后，补体被三条补体途径之一激活，酶（C3转化酶）在靶表面形成。  这些酶（C4b ，C2a 或C3b，Bb）在α链的精氨酸 77释放过敏毒素 C3a并将C3b沉积在靶表面上后切割C3 。  虽然有一个非常薄弱的C3旁路系统，通过经典和凝集素途径（C4b ，C2a可以以C3b，C4b，C2a的大约1/2000的比率以约1/2000的比率激活C5而不具有C3b），C3b对于有效的C5激活是必需的（Rawal N.和Pangburn MK（2003））。

            纯化的C4对冻融极其敏感，在每个冻融循环中冻结/融化损失5-10％的活性。  这也是中间温度如-20敏感^ö C.   的时间越长其保持在中间温度越活性丧失。  在-20几个小时^Ø C能*灭活它，即使它仍然*冻结。

测定

            补充激活需要C3。  因此，C3功能的典型测定使用缺乏C3的系统中的细胞裂解终点，除了来自被测定的来源。  有三种基本测定。  1）抗体致敏的绵羊红细胞（EA）可用于使用贫C3的人血清的CH50型分析。  该测定的灵敏度约为50ng C3。  2）EA和纯化组分C1，C4和C2可用于制备利用C3进行有效C5激活和裂解的EAC142细胞（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。   该测定的灵敏度约为5ng C3。  3）可以使用替代性途径测定法，其在5mM MgEGTA存在下使用兔红细胞和贫C3人血清。  该测定的灵敏度约为200ng C3。

体内

            血清浓度为1.0至1.5mg / mL，平均1.2mg / mL，这使得C3成为血液中丰富的补体蛋白。  它代表约。血液中总蛋白的2.5％，不包括白蛋白和免疫球蛋白，是血浆中蛋白质的〜8％。  合成的主要部位是肝，但是C3也可以在巨噬细胞，嗜中性粒细胞， 星形胶质细胞以及身体许多组织中的内皮和上皮细胞中产生。

规

            C3的生物合成在IL-1，IL-6，TNF-α和LPS合成C3的大多数细胞中上调。嗜中性粒细胞被 IL-1和IFN-γ 下调   

遗传学

            人类染色体定位19p13.3-p13.2。小鼠染色体定位染色体17和大鼠染色体9.登录号K02765（人）和K02782（小鼠）。人类基因组结构：该基因跨越41kb和41个外显子      

不足之处

             完整的人C3缺陷很少见，但已发现一些病例。重要的是，患有这种疾病的成年人虽然因免疫力受损而存在高风险，但未必是致命的。  一个充分表征的2岁儿童缺陷的病例表明，该缺陷与复发性化脓性感染，树突细胞分化受损，获得B细胞记忆能力受损和调节性T细胞发育不足有关。  疫苗接种仅产生小的短期抗体应答（Ghannam A等，（2008））。  其他人类病例和许多动物实验模型支持这些结论（Singer，L等人，（1994））。  这些免疫系统缺陷与C3缺陷的关联强烈支持C3在先天性和适应性免疫应答中的主要作用。

            C3的缺乏还导致不能调理细菌，导致吞噬作用降低，不能释放C3a并且严重降低产生C和C5b的能力，这损害了终端补体复合物C5b-9的生成。 

疾病

            The deposition of C3, that is, the attachment of C3b to microorganisms or host tissues is the hallmark of complement activation at inflammatory sites.  Many diseases exhibit histochemically identifiable C3b deposits as part of their pathology, or at least as markers of pathology (Law, S.K.A. and Reid, K.B.M. (1995); Ross, G.D. (1986)).  These diseases include ischemia/reperfusion events such as heart attacks and strokes and bacterial, viral, parasitic and fungal infections.  Antibody-mediated autoimmune diseases such as systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and autoimmune hemolytic anemia are characterized by C3b deposition on tissues.   Even when the antibody response is not directed at the host complement can be 存款。  补体的主要功能是帮助巨噬细胞吞噬系统清除循环免疫复合物。  高水平的复合物可能压倒该系统，导致补体和免疫复合物在组织和肾中沉积，导致肾小球肾炎，致密沉积疾病和关节炎。  增加或减少补体活性的C3变体与诸如年龄相关性黄斑变性的疾病有关。  C3沉积物还在疾病中表现出信号补体激活，例如阵发性夜间血红蛋白尿，遗传性溶血性尿毒症综合征，移植排斥和炎性皮肤病如血管性水肿。

注意事项/毒性/危险

            这种蛋白质的来源是人血清，因此必须使用适合处理任何血源性产品的预防措施，尽管来源通过认证测试显示HBsAg，HTLV-I / II，STS阴性，HCV抗体，HIV-1和HIV-II。

            危险代码：B            WGK德国 3

            MSDS可根据要求提供。