CMV-GFP-Luc-Puro Lentivirus

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产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

 

作为分子、基因表达的分析检测的新型方法活体成像技术,主要是利用Firefly Luciferase和fluorescent proteins (GFP/RFP)的分子活体成像技术来精确追踪动物体内的移植细胞。CMV-GFP-Luc-Puro慢病毒同时携带ZsGreen1和萤火虫荧光素酶(luciferase)两种标记蛋白,其中ZsGreen1绿色荧光可用于转染效率的直观检测,Luciferase生物荧光则可用于活体成像检测。

 

质粒图谱

 

CMV-GFP-Luc-Puro Lentivirus

 

保存方法

 

-80℃保存,有效期6个月,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度。

 

注意事项

 

1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1 h以上后弃去。

4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)本产品仅作研究用途!

 

Ver.CN20240104

 

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作为分子、基因表达的分析检测的新型方法活体成像技术,主要是利用Firefly Luciferase和fluorescent proteins (GFP/RFP)的分子活体成像技术来精确追踪动物体内的移植细胞。CMV-GFP-Luc-Puro慢病毒同时携带ZsGreen1和萤火虫荧光素酶(luciferase)两种标记蛋白,其中ZsGreen1绿色荧光可用于转染效率的直观检测,Luciferase生物荧光则可用于活体成像检测。

 

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-80℃保存,有效期6个月,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度。

 

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1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1 h以上后弃去。

4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)本产品仅作研究用途!

 

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作为分子、基因表达的分析检测的新型方法活体成像技术,主要是利用Firefly Luciferase和fluorescent proteins (GFP/RFP)的分子活体成像技术来精确追踪动物体内的移植细胞。CMV-GFP-Luc 慢病毒同时携带GFP和luciferase两种标记蛋白,其中ZsGreen1绿色荧光蛋白可用于转染效率的直观检测,Luciferase生物荧光则可用于活体成像检测。

 

质粒图谱

 

CMV-GFP-Luc Lentivirus

 

保存方法

 

-80℃保存,有效期6个月,如保存时间过长,使用前请重新检测病毒滴度。

 

注意事项

 

1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1 h以上后弃去。

4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
6)本产品仅作研究用途!

 

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1)病毒操作时最好使用生物安全柜,如使用普通超净工作台操作病毒,请不要打开风机。

2)病毒操作时请穿实验服,带口罩和乳胶手套。

3)操作病毒时必须特别小心,不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染,立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1 h以上后弃去。

4)用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤:拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前,用70%乙醇清理实验台。

5)病毒操作完成后,用肥皂清洗双手。
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pTracer CMV2载体说明书

 

pTracer CMV2

型号 载体名称 出品公司 载体用途
VPI0016 pTracer CMV2 Invitrogen 哺乳动物表达载体
产品参数: 

Mammalian Selection:Zeocin
Marker:GFP

载体抗性: 
氨苄青霉素(Ampicillin)
载体描述: 

这是一个双表达框载体,CMV启动子后有MCS供插入外源基因,hEF1α启动子调控Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion的表达,可以做到既有荧光蛋白来做转染指示,且荧光基因表达和外源基因表达又不会互相干扰,而且Zeocin也可以用来做稳定性细胞筛选。另外,由于EM-7启动子的存在,Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion在E.coli中也可以表达,可以用来做原核荧光定位。

Three pTracer™ mammalian expression vectors are available that express GFP fused to the selectable marker Zeocin™ . Each vector uses a different set of promoters to express the gene of interest and the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion.

All three pTracer™ vectors have the following features:

  • Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion for selection in mammalian cell lines
  • BGH polyA signal and transcription termination sequences to enhance mRNA stability

The pTracer™-SV40 vector offers:

  • SV40 promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • CMV promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • SV40 origin for episomal replication and simple vector rescue in cell lines expressing the SV40 large T antigen

The pTracer™-CMV2 vector offers:

  • CMV promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • EF-1α promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • Ampicillin resistance gene for selection in E. coli

The pTracer™-EF vectors offer:

  • EF-1α promoter for high-level constitutive expression of your gene of interest
  • CMV promoter for high-level constitutive expression of the Cycle 3 GFP-Zeocin™ fusion
  • C-terminal V5 epitope tag for simple detection of recombinant fusion proteins with an Anti-V5 Antibody
  • C-terminal 6xHis tag for rapid purification on nickel-chelating resin and simple detection with an Anti-His(C-term) Antibody
  • Multiple cloning site supplied in three reading frames to simplify cloning in frame with the C-terminal tag
质粒图谱: 

thenativeantigen CMV-PENT-50说明书

thenativeantigen CMV-PENT-50说明书

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物,由 gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A 蛋白组成,在哺乳动物 HEK293 细胞中产生,纯度高于 95%。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。


SKU:CMV-PENT-50 

类:抗原和抗体, CMV 抗原 

标签:巨细胞病毒 gH 五聚体


SDS-PAGE:考马斯染色的 SDS-PAGE,显示巨细胞病毒 gH 五聚体复合物。

直接ELISA:板用1000ng、100ng、10ng或1ng NRP-2包被并用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 进行探测,然后在室温下封闭 1 小时。在室温下,用每孔 500 µg 的 NRP-2、gH 五聚体或 gB huFc-tag 对板进行探测 2 小时。对于一抗,绵羊抗 gH 五聚体血清以 1:2,000 使用,小鼠抗 His-tag 抗体以 1:1,200 使用(对于 ZIKV-NS1),gB 不使用一抗。二抗 STAR88P 用于 gH 五聚体,浓度为 1:2,000;STAR147P 用于通过 Fc-tag 以 1:2,000 检测 gB huFc-tag,Biorad 105300 用于以 1:2,000 检测 ZIKV-NS1。所有二次孵育均在室温下进行 45 分钟。使用 TMB 膜底物 (KPL) 进行检测 40 分钟。使用 1M HCl 终止反应。测定证实 NRP-2 与 gH 五聚体特异性结合,但不与 gB 或 ZIKV NS1 结合。



巨细胞病毒GH五聚体复合物

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物包含五种病毒蛋白(gH、gL、UL128、UL130 和 UL131A)。该复合物已在 ELISA 中显示与我们的重组NRP-2蛋白结合。

 

产品详情 – 巨细胞病毒 gH 五聚体复合物

  • 重组人巨细胞病毒五聚体蛋白复合物(菌株 VR1814),由蛋白 UL75 (gH)、UL115 (gL)、UL128、UL130 和 UL131A 组成。

  • gH 蛋白含有一个 C 末端的 His 标签,并在 HEK293 细胞中重组产生。

  • 在 Dulbecco 的 PBS 中呈现,0.2µm 过滤器已灭菌。

  • 在 ELISA 中纯化的蛋白质与 NRP-2 受体结合。

  • NCBI 登录代码:ACZ79986。

 

背景

hCMV 可导致免疫受损个体(如移植受者和 HIV 患者)的严重发病/死亡,而先天性 hCMV 感染可导致出生缺陷。

五聚体复合物在所有野生型 hCMV 毒株上均有表达,但在 AD169 等实验室毒株中明显缺失。弗里德等人)。这严重限制了疫苗的开发。受体介导的病毒进入内皮细胞需要功能性的 gH 五聚体复合物,而这种复合物是感染个体中抗病毒抗体的主要靶标之一。NAC 的新型重组 hCMV gH 复合物将是实现必要的基础和应用研究的关键。此外,gH 复合物有望为新一代体外诊断检测提供基础。

类似天然的五聚体复合物在人体细胞中产生,以确保所有蛋白质都正确折叠并具有其天然糖基化模式。通过质谱确认纯化复合物中所有五种蛋白质的存在。五聚体复合物以即用型液体形式提供,提供 100ug 和 1mg 小瓶大小,有机会批量购买。

NAC 在其 CMV 系列中提供另外两种抗原:一种天然高纯度抗原,对 IgG 和 IgM 均表现出高亲和力,是抗体捕获测定的理想选择,另一种更适合作为血清学对照的标准裂解物。

巨细胞病毒 gH 五聚体复合物作为目录项目出售,仅用于研究用途和体外诊断测定/试剂盒,因此无需事先与 NAC 达成协议。如果产品旨在用作药物或作为生产药物的手段(包括用作免疫原和用于临床试验),则必须事先与 NAC 签订合同协议。

 

参考

  • 弗里德等人。(2013)。Proc Natl Acad Sci 美国 A.110(51)。