ALSTEM是一家位于湾区的早期生物技术公司，拥有快速扩展的产品和服务组合，为生物制药和学术机构提供服务。受到加利福尼亚干细胞研究承诺的启发，ALSTEM于2012年由具有iPS细胞重编程和基因组编辑技术专业知识的科学家创立。
hTERT Cell Immortalization Kit: #CILV02
hTERT细胞永生化试剂盒：＃CILV02
描述
*，原代细胞仅在培养中经历预定的和有限数量的细胞分裂。在有限的群体倍增（其数量因物种，细胞类型和培养条件而异）之后，原代细胞进入一种状态，即所谓的复制衰老，它们不再分裂。为了超越衰老，存在几种使培养中的哺乳动物细胞永生化的方法。近发现的细胞永生化方法是通过端粒酶逆转录酶蛋白（TERT）的表达。它对受端粒长度影响大的细胞特别有用，包括许多人类细胞类型。这种蛋白质通常在大多数体细胞中沉默。当外源引入hTERT时，这些细胞能够通过维持足够的端粒长度来避免复制性衰老。
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产品名称 |
hTERT细胞永生化试剂盒 |
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目录 ＃ |
CILV02 |
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尺寸 |
5 x20μl |
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运输 |
干冰 |
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储存和稳定性 |
储存在-80°C（稳定长达6个月）。 |
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质量控制 |
包装的慢病毒构建体作为冷冻的VSV-G假型病毒颗粒提供。通过Clontech的Lenti-X qRT-PCR滴定试剂盒（Cat。＃631235）测量慢病毒的滴度。每批细胞永生化试剂盒在成纤维细胞中进行功能测试。 |
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限制使用 |
仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。 |
- 概观
用含有hTERT的重组慢病毒感染细胞，用嘌呤霉素筛选产生自己的永生化细胞
- 程序
- 将靶细胞以1-2×10 5个细胞/孔的密度铺在6孔板的一个孔中。
- 第二天，将浓缩的重组慢病毒在37℃水浴中解冻，并在解冻时立即将其从浴中取出。
- 在4μlTransPlus试剂（ALSTEM，目录号V050）存在下，用4-20μl/孔上清液感染6孔板中的靶细胞。
注意：TransPlus试剂是一种聚阳离子，可中和电荷相互作用，从而增加假病毒衣壳与细胞膜之间的结合。 - 第二天，去除病毒上清液并将适当的*生长培养基加入细胞中并在37℃下孵育。
- 孵育72小时后，将细胞继代培养到2×100mm培养皿中并加入适量的嘌呤霉素以稳定细胞系产生。
- 选择后10-15天，挑选克隆进行扩增，筛选阳性克隆。
注意：解冻后，我们建议不要将上清液再次冷冻以备将来使用，因为病毒滴度会显着下降
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货号 |
品名 |
规格 |
品牌 |
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VB100 |
ViralBoost |
1毫升 |
alstembio |
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VC100 |
慢病毒沉淀解决方案 |
100毫升/ 250毫升/ 500毫升 |
alstembio |
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V020 |
TransPlus™病毒转导增强剂 |
100μl/500μl |
alstembio |
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CILV02 |
hTERT细胞永生化试剂盒 |
5 x20μl |
alstembio |
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