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CHO|360-HCP ELISA KIT TYPE D说明书

发表于由

BioGenes 是定制免疫分析和抗体开发的服务提供商，对质量和服务有着坚定的承诺。

BioGenes 成立于 1992 年，总部位于德国柏林，是*的合作伙伴，为 40 个国家的 600 多家客户提供服务。该公司与制药、生物技术公司、CMO 和体外诊断公司保持着长期合作关系。

BioGenes 为生物产品的质量控制提供高度定制的解决方案，从药物发现和药物开发到生物制品的制造，以及用于诊断目的。



该公司专门从事复杂的定制单克隆、多克隆和抗*型抗体开发，并在开发、优化、预验证和生产高灵敏度和强大的 ELISA 和宿主细胞蛋白 (HCP) 检测方面拥有良好的记录。

此外，BioGenes 提供增强型通用 360-HCP ELISA 试剂盒，并为客户提供全面的分析服务。

 

 

biogenes CHO|360-HCP ELISA KIT TYPE D说明书

CHO|360-HCP ELISA 试剂盒 D 型

 

用于测定 CHO 细胞系中 HCP 的酶免疫测定法。

即用型套件包括：

  • 预涂层 96 孔微量测试板

  • 标准 CHO-HCP

  • D型抗体偶联物

  • 酶结合物

  • 洗涤缓冲液

  • 检测缓冲液

  • 底物缓冲液

  • 停止解决方案

 

 

 

 

Antagen CHO.hCD47说明书

发表于由

Antagen CHO.hCD47说明书

CHO.CD47

我们是同型分析套件的供应商！不到3分钟即可获得结果！

 

595.00 美元

表面在CHO细胞上表达人或鼠CD47

Surface expressed human or murine CD47 on CHO cells

 

CHO.hCD47

595.00 美元

CHO.mCD47

595.00 美元

 

 

标签：ADCC，antagen，CD47，基于细胞的测定，CHO，CTL，FACS，人，小鼠

 

我们是同型分析套件的供应商！不到3分钟即可获得结果！

在CHO细胞上表面表达人或鼠CD47可用于用FACS筛选抗CD47抗体，作为基于细胞的测定中的靶细胞，例如ADCC或CTL。CD47参与细胞粘附到细胞外基质时发生的细胞内钙浓度的增加。编码的蛋白质也是血小板反应蛋白的C末端细胞结合结构域的受体，并且它可能在膜转运和信号转导中起作用。该基因具有广泛的组织分布，并且在Rh红细胞上的表达降低。该CD47缺陷型小鼠有缺陷的宿主防御。CD47作为巨噬细胞的抑制信号。已经发现CD47在许多不同的肿瘤细胞中过表达。它是癌症治疗的潜在治疗靶点。在癌症治疗中使用抗CD47的I期临床试验已于2018年8月接近完成。

 

 

 

货号

品名

规格

品牌

ISO-M6-5

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-1 (5 tests)

5 tests

antagen

ISO-M6-10

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-1 (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-M6-20

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-1 (20 tests)

20 tests

antagen

ISO-M8a-5

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-2 (5 tests)

5 tests

antagen

ISO-M8a-10

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-2 (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-M8a-20

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-2 (20 tests)

20 tests

antagen

ISO-M8c-5

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-3 (5 tests)

5 tests

antagen

ISO-M8c-10

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-3 (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-M8c-20

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-3 (20 tests)

20 tests

antagen

ISO-M8ac-5

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-4 (5 tests)

5 tests

antagen

ISO-M8ac-10

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-4 (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-M8ac-20

Rapid Mouse Monoclonal Antibody Isotyping Kit-4 (20 tests)

20 tests

antagen

ISO-R8-5

Rapid Rat Monoclonal Antibody Isotyping Kit (5 tests)

5 tests

antagen

ISO-R8-10

Rapid Rat Monoclonal Antibody Isotyping Kit (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-R8-20

Rapid Rat Monoclonal Antibody Isotyping Kit (20 tests)

20 tests

antagen

ISO-HAM-10

Rapid Hamster Monoclonal Antibody Isotyping Kit (10 tests)

10 tests

antagen

ISO-HAM-20

Rapid Hamster Monoclonal Antibody Isotyping Kit (20 tests)

20 tests

antagen

ATG-LT-01-6

Lentivirus Titration XpressCard (6 tests)

6 tests

antagen

ATG-LT-01-10

Lentivirus Titration XpressCard (10 tests)

10 tests

antagen

ATG-LT-01-20

Lentivirus Titration XpressCard (20 tests)

20 tests

antagen

ATG-LT-01-50

Lentivirus Titration XpressCard (50 tests)

50 tests

antagen

ATG-LT-02-5

LentiTitre Cassette (5 cassettes)

5 tests

antagen

ATG-LT-02-10

LentiTitre Cassette (10 cassettes)

10 tests

antagen

ATG-fFN-10

Human Fetal Fibronectin XpressCard (10 tests)

10 tests

antagen

ATG-NGAL-10

Human Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin (NGAL) XpressCard (10 tests)

10 tests

antagen

ATG-IL-8-10

Rapid Human Interleukin-8 XpressCard (10 tests)

10 tests

antagen

ATG-IL-8-20

Rapid Human Interleukin-8 XpressCard (20 tests)

20 tests

antagen

ATG-IL-8-50

Rapid Human Interleukin-8 XpressCard (50 tests)

50 tests

antagen

RKL001

LARGE-TEST-TUBE ICEMAN-RACK

ea

antagen

RKS001

SMALL-TEST-TUBE ICEMAN-RACK

ea

antagen

RKP096

96-WELL-PCR-PLATE ICEMAN-RACK

96-WELL

antagen

RKP384

384-WELL-PCR-PLATE RACK

384-WELL

antagen

 

 

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多个品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发，欢迎合作。

 

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

发表于由

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的CHO残留DNA含量的试剂盒。

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测CHO细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒（Cat#18461ES/18462ES）配套使用。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

41301ES50（50T）

41301ES60（100T）

41301-A

CHO qPCR mix

1 mL

2 mL

41301-B

DNA Dilution Buffer

2×2 mL

4×2 mL

41301-C

CHO DNA Control（30 ng/μL）

25 μL

50 μL

【注】：本试剂盒不含ROX参比染料，若您目前使用的Real Time PCR扩增仪需要添加ROX参比染料，推荐您购买本公司的50× ROX Reference Dye（Cat#10200ES）。

 

运输和保存方法

1.所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期2年。

 2. 收到货后，请检查共3个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

 

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 加样和配液步骤尽量都在冰上操作。

3. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途。

 

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500；ABI Quant Studio 5；ABI Step OnePlus.

 

使用方法

一、CHO DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA稀释液将DNA定量参考品进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL、30 pg/μL、3 pg/μL、300 fg/μL、30 fg/μL、3 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的DNA 定量参考品和DNA稀释液置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为 3 ng/μL，①，②，③，④，⑤，⑥。

3. 在标记为3 ng/μL的1.5mL离心管中加入90 μL DNA 稀释液和10 μL DNA 定量参考品（30 ng/μL），即稀释为3 ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于-20℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。

4. 在 ①，②，③，④，⑤，⑥ 管中先分别加入90 μL DNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管

稀释比例

终浓度

①

10 μL 3 ng/μL+90 μL DNA 稀释液

300 pg/μL

②

10 μL ①+90 μL DNA 稀释液

30 pg/μL

③

10 μL ②+90 μL DNA 稀释液

3 pg/μL

④

10 μL ③+90 μL DNA 稀释液

300 fg/μL

⑤

10 μL ④+90 μL DNA 稀释液

30 fg/μL

⑥

10 μL ⑤+90 μL DNA 稀释液

3 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试3 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于-20℃。

3. 已融化未使用的 DNA 稀释液可保存于2-8 ℃ 7天，若长时间不用，请放置于-20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

二、样本加标回收质控QC的制备

根据需要设QC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的样本加标回收为例），具体操作如下：

  1. 取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10μL 溶液③，混匀，标记为加标回收QC。
  2. 加标回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收QC纯化液。

三、标准品回收质控QC的制备（可选）

根据需要设QC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的标准品回收为例），具体操作如下：

  1. 取100 μL 溶液③加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为标准品回收QC。
  2. 标准品回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备标准品回收QC纯化液。

四、阴性质控NCS的制备

根据实验设置阴性质控，具体操作如下：

  1. 取100 μL样本基质溶液（或DNA 稀释液）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为阴性质控NCS。
  2. 阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

五、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

  1. 无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。
  2. 每管或孔中的NTC样本为20 μL CHO qPCR Mix + 20 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

六、反应体系

组分

体积（μL）

CHO qPCR Mix

20

DNA template

20

总体积

40

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需的qPCR Mix总量：qPCR Mix =（反应孔数+2）×20 μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

2. 加样完成密封好管子后，请先低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。

下图为参考板位：

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

该示例是对CHO残留DNA qPCR法检测操作的展示，检测样本包括：1个无模板对照NTC、6个浓度梯度的DNA标准曲线、3个样本加标回收QC、3个待测样本、3个标准品回收QC（可选）、3个阴性质控NCS（1个即可）。建议每个样本做3个重复孔。

七、扩增程序参数设置（两步法）（以Bio-Rad公司CFX 96 qPCR仪、软件版本4.1.2433.1219为例）

  1. 创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。
  2. 创建1个检测探针，命名为“CHO-DNA”，选择“run setup”栏中的“select run type”下方的“user-define”，在“run setup”界面中开始程序、板位、通道的设置：

2.1 首先，在“protocol”下点击“Create New”开始设置PCR程序，设置好后点击“OK”，保存程序文件。

2.2 点击“Next”或者“plate”进入孔位设置界面，点击“create new”，在“Scan Mode”中可以选择“All Channels”或者“SYBR/FAM Only”选项。用鼠标勾选反应格，点击“select fluorophores”选项，勾选“FAM”后点击“OK”，在“sample type”选项下选择“unknow”（或其他样本类型），勾选“target name栏下的“load”右边的框，同时根据个人需求设置“target name”，也可不设置。根据个人需求在选项“Sample names”和“Biological Group”中输入样本名称和组别，也可不设置。点击“OK”保存好最后的结果文件。

2.3 点击“Next”或“Start run”，开始仪器运行。

  1. 扩增程序设置：设置反应体积40 μL。

循环步骤

温度（℃）

时间

循环数

预变性

95 ℃

5 min

1

变性

95 ℃

15 sec

40

退火/延伸（收集荧光）

60 ℃

30 sec

八、qPCR 结果分析

  1. 上机结束后，在程序的右上角点击“plate setup” 栏下的“view/edit plate”，选中标准品的反应格，在右侧的“sample type”栏下选择“standard”，设置好每个梯度的重复孔，在“loda concentration”下输入所做的浓度后按“enter”键确认，依次将标准品的梯度设置完成。
  2. 点击“OK”，返回到初始界面，即可读取标准曲线的R²、扩增效率（Eff%）、斜率（Slope）、截距（Intercept）等。正常的标曲：R²＞0.99；扩增效率在90%≤Eff%≤110%范围内；Slope在–3.4左右。
  3. 根据设置的样本名称和组别，读取无模板对照NTC、阴性质控NCS、待测样本和样本加标回收等的检测值，单位为fg/μL，后续可在检测报告中将单位换算成pg/μL或pg/mL。

HB221226

Q：我们CHO标准品用的是哪里的？

A：是我们内部自己抽提的CHO细胞的基因组DNA，每批次参考品采用中检院的国家标准品标定，结果如下：

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

翌圣E.coli的试剂盒的标准品分别从E.coli菌株中抽提的基因组DNA，有完整的溯源；抽提之后我们会用Qubit进行浓度检测；再根据这个浓度进行标准品的稀释，后续会用qPCR的方法与中检院购买的国家DNA进行标定，Yeasen DNA参考品与国家标准物质（同样会用Qubit的检测方法进行浓度复核）标曲基本无偏差（老师这边可以看一下下图我们做的对比结果）。

Q：细胞残留DNA的前提取有配套的机型么？如果用湖州申科的适配么？

A：我们目前有手动提取和自动提取两个版本，其中自动提取可以适配奥盛 Auto-Pure32A 全自动核酸提取仪及同类型仪器，后期也可以根据客户需要进行调整。我们的前处理试剂盒，可以适配我司的所有残留DNA检测试剂盒，申科的试剂盒原则上应该都可以适配。

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

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CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的CHO残留DNA含量的试剂盒。

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测CHO细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒（Cat#18461ES/18462ES）配套使用。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

41301ES50（50T）

41301ES60（100T）

41301-A

CHO qPCR mix

1 mL

2 mL

41301-B

DNA Dilution Buffer

2×2 mL

4×2 mL

41301-C

CHO DNA Control（30 ng/μL）

25 μL

50 μL

【注】：本试剂盒不含ROX参比染料，若您目前使用的Real Time PCR扩增仪需要添加ROX参比染料，推荐您购买本公司的50× ROX Reference Dye（Cat#10200ES）。

 

运输和保存方法

1.所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期2年。

 2. 收到货后，请检查共3个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

 

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 加样和配液步骤尽量都在冰上操作。

3. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途。

 

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500；ABI Quant Studio 5；ABI Step OnePlus.

 

使用方法

一、CHO DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA稀释液将DNA定量参考品进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL、30 pg/μL、3 pg/μL、300 fg/μL、30 fg/μL、3 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的DNA 定量参考品和DNA稀释液置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为 3 ng/μL，①，②，③，④，⑤，⑥。

3. 在标记为3 ng/μL的1.5mL离心管中加入90 μL DNA 稀释液和10 μL DNA 定量参考品（30 ng/μL），即稀释为3 ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于-20℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。

4. 在 ①，②，③，④，⑤，⑥ 管中先分别加入90 μL DNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管

稀释比例

终浓度

①

10 μL 3 ng/μL+90 μL DNA 稀释液

300 pg/μL

②

10 μL ①+90 μL DNA 稀释液

30 pg/μL

③

10 μL ②+90 μL DNA 稀释液

3 pg/μL

④

10 μL ③+90 μL DNA 稀释液

300 fg/μL

⑤

10 μL ④+90 μL DNA 稀释液

30 fg/μL

⑥

10 μL ⑤+90 μL DNA 稀释液

3 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试3 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于-20℃。

3. 已融化未使用的 DNA 稀释液可保存于2-8 ℃ 7天，若长时间不用，请放置于-20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

二、样本加标回收质控QC的制备

根据需要设QC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的样本加标回收为例），具体操作如下：

  1. 取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10μL 溶液③，混匀，标记为加标回收QC。
  2. 加标回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收QC纯化液。

三、标准品回收质控QC的制备（可选）

根据需要设QC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的标准品回收为例），具体操作如下：

  1. 取100 μL 溶液③加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为标准品回收QC。
  2. 标准品回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备标准品回收QC纯化液。

四、阴性质控NCS的制备

根据实验设置阴性质控，具体操作如下：

  1. 取100 μL样本基质溶液（或DNA 稀释液）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为阴性质控NCS。
  2. 阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

五、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

  1. 无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。
  2. 每管或孔中的NTC样本为20 μL CHO qPCR Mix + 20 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

六、反应体系

组分

体积（μL）

CHO qPCR Mix

20

DNA template

20

总体积

40

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需的qPCR Mix总量：qPCR Mix =（反应孔数+2）×20 μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

2. 加样完成密封好管子后，请先低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。

下图为参考板位：

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

该示例是对CHO残留DNA qPCR法检测操作的展示，检测样本包括：1个无模板对照NTC、6个浓度梯度的DNA标准曲线、3个样本加标回收QC、3个待测样本、3个标准品回收QC（可选）、3个阴性质控NCS（1个即可）。建议每个样本做3个重复孔。

七、扩增程序参数设置（两步法）（以Bio-Rad公司CFX 96 qPCR仪、软件版本4.1.2433.1219为例）

  1. 创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。
  2. 创建1个检测探针，命名为“CHO-DNA”，选择“run setup”栏中的“select run type”下方的“user-define”，在“run setup”界面中开始程序、板位、通道的设置：

2.1 首先，在“protocol”下点击“Create New”开始设置PCR程序，设置好后点击“OK”，保存程序文件。

2.2 点击“Next”或者“plate”进入孔位设置界面，点击“create new”，在“Scan Mode”中可以选择“All Channels”或者“SYBR/FAM Only”选项。用鼠标勾选反应格，点击“select fluorophores”选项，勾选“FAM”后点击“OK”，在“sample type”选项下选择“unknow”（或其他样本类型），勾选“target name栏下的“load”右边的框，同时根据个人需求设置“target name”，也可不设置。根据个人需求在选项“Sample names”和“Biological Group”中输入样本名称和组别，也可不设置。点击“OK”保存好最后的结果文件。

2.3 点击“Next”或“Start run”，开始仪器运行。

  1. 扩增程序设置：设置反应体积40 μL。

循环步骤

温度（℃）

时间

循环数

预变性

95 ℃

5 min

1

变性

95 ℃

15 sec

40

退火/延伸（收集荧光）

60 ℃

30 sec

八、qPCR 结果分析

  1. 上机结束后，在程序的右上角点击“plate setup” 栏下的“view/edit plate”，选中标准品的反应格，在右侧的“sample type”栏下选择“standard”，设置好每个梯度的重复孔，在“loda concentration”下输入所做的浓度后按“enter”键确认，依次将标准品的梯度设置完成。
  2. 点击“OK”，返回到初始界面，即可读取标准曲线的R²、扩增效率（Eff%）、斜率（Slope）、截距（Intercept）等。正常的标曲：R²＞0.99；扩增效率在90%≤Eff%≤110%范围内；Slope在–3.4左右。
  3. 根据设置的样本名称和组别，读取无模板对照NTC、阴性质控NCS、待测样本和样本加标回收等的检测值，单位为fg/μL，后续可在检测报告中将单位换算成pg/μL或pg/mL。

HB221226

Q：我们CHO标准品用的是哪里的？

A：是我们内部自己抽提的CHO细胞的基因组DNA，每批次参考品采用中检院的国家标准品标定，结果如下：

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

翌圣E.coli的试剂盒的标准品分别从E.coli菌株中抽提的基因组DNA，有完整的溯源；抽提之后我们会用Qubit进行浓度检测；再根据这个浓度进行标准品的稀释，后续会用qPCR的方法与中检院购买的国家DNA进行标定，Yeasen DNA参考品与国家标准物质（同样会用Qubit的检测方法进行浓度复核）标曲基本无偏差（老师这边可以看一下下图我们做的对比结果）。

Q：细胞残留DNA的前提取有配套的机型么？如果用湖州申科的适配么？

A：我们目前有手动提取和自动提取两个版本，其中自动提取可以适配奥盛 Auto-Pure32A 全自动核酸提取仪及同类型仪器，后期也可以根据客户需要进行调整。我们的前处理试剂盒，可以适配我司的所有残留DNA检测试剂盒，申科的试剂盒原则上应该都可以适配。

CHO细胞残留DNA检测试剂盒|CHO Host Cell DNA Residue Detection Kit

暂无内容

moleculardevices抗CHO HCP检测试剂盒

发表于由

Molecular Devices 始创于上世纪80年代美国硅谷，作为 高通量仪器设备的品牌，一直致力于为生命科学研 究及药物研发提供先进的解决方案。其产品覆盖 微孔板检测分析、高通量筛选、高内涵成像、克隆筛 选等。公司以持续创新、快速、先进质量的产品及完 善的售后服务为宗旨服务客户。

 

moleculardevices抗CHO HCP检测试剂盒

ANTI-CHO HCP DETECTION KIT – PACK

  • $4,256.00

​

货号：18-5123

宿主细胞蛋白质检测试剂盒，用于定量生物处理样品中残留的CHO宿主细胞蛋白质。包括5个分析试剂盒，每个试剂盒包含一个托盘，其中96个生物传感器涂有Cygnus 3g抗CHO HCP抗体，以及分析所有当前八位体系统上96个HCP样品所需的所有校准品、试剂和缓冲液。含10%的托盘价格折扣。

 

 

BioGenes CHO|360-HCP STANDARD简介

发表于由

 

BioGenes 是定制抗体和免疫分析开发的服务提供商，也是复杂分析服务的专家。在过去的 30 年中，来自 40 多个国家/地区的客户信任我们在生物疗法开发、测试和生产方面获得认可的服务和产品。


BioGenes CHO|360-HCP STANDARD简介

 

 

CHO|360-HCP STANDARD

IP 120
 

用于蛋白质印迹的抗原材料和作为 ELISA 中加标和恢复测试的阳性对照。CHO-HCP 由 CHO 亚细胞系 S 和 K1 发酵的模拟发酵的细胞培养上清液制备。标准浓度由 Bradford 估计为 0.5 mg/mL。

 

 

细节

0.25 毫克
0.5 毫克/毫升；0.5 毫升; 在含 0.01% Tween 20 的 PBS pH 7.2 中稀释

 

 

BioGenes 服务和产品系列的亮点

  • 开发定制的单克隆、多克隆和抗*型抗体

  • 宿主细胞蛋白 ELISA 开发

  • 通用宿主细胞蛋白 ELISA 试剂盒

  • 从 2D DIGE 到 Western Blot 的 HCP 分析

  • 药代动力学和免疫原性测定和测试

 

德国biogenes CHO宿主蛋白检测试剂盒

发表于由

德国biogenes CHO宿主蛋白检测试剂盒

CHO|360-HCP ELISA

CHO | 360-HCP ELISA是增强的通用宿主细胞蛋白（HCP）测定。它被设计为覆盖更广泛的中国仓鼠卵巢（CHO）宿主细胞蛋白（HCP），而不是其他商业上可获得的通用HCP测定。

CHO | 360-HCP ELISA基于*的分析设计，采用不同制备的HCP抗原和来自两个物种的抗体：

  • 抗原由从CHO-K1和CHO-S的模拟发酵获得的总HCP和分级HCP制备 
  • 通过免疫山羊和兔子产生特异性抗体
  • 方法得到四种不同的HCP ELISA试剂盒（A型至D型），共同构建增强型通用CHO | 360-HCP试验
     
类型 种类 HCP
A型 山羊 总HCP
B型 山羊 分级HCP
C型 兔子 总HCP
D型 兔子 分级HCP

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D）的灵敏度

  • LOD介于0.5 – 1,0 ng / mL之间
  • LOQ在2 – 3 ng / mL之间
  • 工作范围2 – 100 ng / mL

图1：对于不同的CHO HCP标准浓度，通过测量的OD值（A450）的非线性回归获得所有四种CHO | 360-HCP ELISA（A型至D型）的标准曲线。

HCP恢复很大程度上取决于所用ELISA试剂盒的类型

“没有一种通用的HCP ELISA适用于所有样品，建议用户在做出选择前测试不同的试剂盒。”

为了举例说明，我们在大量模拟CHO HCP样品的基础上测试了CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D）和市售的通用CHO HCP测定法。图2显示，在大多数情况下，使用四种CHO | 360-HCP ELISAs试剂盒中的一种估算出宜回收率。在样品4的情况下，用ELISA试剂盒D型估计回收率> 90％，而ELISA试剂盒A，B和C以及商业试剂盒不太敏感，后者仅识别20％的宿主细胞蛋白质。

图2：使用五种不同的CHO HCP测定 – CHO | 360-HCP ELISA试剂盒类型（A至D）和市售的通用CHO HCP测定法测试选择的模拟CHO HCP样品。高于100％的回收率是基于高估。

产品概述

产品

产品代码

CHO | 360-HCP ELISA入门套装

IP 001

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒A型

IP 101

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒B型

IP 102

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒C型

IP 103

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒D型

IP 104

抗CHO抗体A型

IP 111

抗CHO抗体B型

IP 112

抗CHO抗体C型

IP 113

抗CHO抗体D型

IP 114

CHO | 360-HCP标准

IP 120

CHO | 360-HCP分析缓冲液

IP 130 

 

品名 货号 欧元
CHO|360-HCP ELISA Starter Set IP 001 1605
CHO|360-HCP ELISA Kit Type A IP 101 535
CHO|360-HCP ELISA Kit Type B IP 102 535
CHO|360-HCP ELISA Kit Type C IP 103 535
CHO|360-HCP ELISA Kit Type D IP 104 535
Anti-CHO antibody Type A IP 111 485
Anti-CHO antibody Type B IP 112 485
Anti-CHO antibody Type C IP 113 485
Anti-CHO antibody Type D IP 114 485
CHO|360-HCP Standard IP 120 1300
CHO|360-HCP Assay Buffer IP 130 150
E.coli|360 HCP ELISA Type A-D Starter Set IP 2001 1605
E.coli|360 HCP ELISA BL21(DE3) Starter Set IP 2002 805
E.coli|360-HCP ELISA W3110 Starter Set IP 2003 805
E.coli|360-HCP ELISA Type A IP 201 535
E.coli|360-HCP ELISA Type B IP 202 535
E.coli|360-HCP ELISA Type C IP 203 535
E.coli|360-HCP ELISA Type D IP 204 535
Anti-E.coli antibody Type A IP 211 485
Anti-E.coli Antibody Type B IP 212 485
Anti-E.coli antibody Type C IP 213 485
Anti-E.coli antibody Type D IP 214 485
E.coli|360-HCP Standard Type A IP 221 1300
E.coli|360-HCP Standard Type B IP 222 1300
E.coli|360-HCP Standard Type C IP 223 1300
E.coli|360-HCP Standard Type D IP 224 1300
E.coli|360-HCP Assay Buffer IP 230 150
BlueCap LX-Buffer S 201 52
BlueCap LX-Buffer S 201 116
BlueCap LX-Buffer S 201 439
BlueCap Blocking Solution S 204 52
BlueCap Blocking Solution S 204 116
BlueCap Blocking Solution S 204 439
BlueCap Antibody Stabilizer TRIS-based S 208 48
BlueCap Antibody Stabilizer TRIS-based S 208 105
BlueCap Antibody Stabilizer TRIS-based S 208 315
BlueCap Washing Buffer Tris based no Tween 500ml S 211.500 36
BlueCap POD Stabilizer S 220 31
BlueCap POD Stabilizer S 220 63
BlueCap POD Stabilizer S 220 149

 

 

BioGenes CHO | 360-HCP ELISA试剂盒说明书

发表于由

BioGenes CHO | 360-HCP ELISA试剂盒说明书

 

BioGenes中国代理, BioGenes上海代理， BioGenes北京代理，BioGenes广东代理， BioGenes江苏代理BioGenes湖北代理,BioGenes天津代理, BioGenes黑龙江代理, BioGenes内蒙古代理, BioGenes吉林代理, BioGenes福建代理,  BioGenes江苏代理, BioGenes浙江代理,  BioGenes四川代理,

BioGenes是定制免疫测定和抗体开发的服务提供商，致力于质量和服务。

BioGenes成立于1992年，总部位于德国柏林，是一家*的合作伙伴，为40个国家的600多家客户提供服务。该公司与制药，生物技术公司，CMO和体外诊断公司保持着长期合作关系。

BioGenes为生物制品的质量控制提供高度定制的解决方案，从药物发现和药物开发到生物制品的生产，以及用于诊断目的。



该公司专注于复杂的定制单克隆，多克隆和抗*型抗体开发，并在高灵敏度和强大的ELISAs和宿主细胞蛋白（HCP）检测的开发，优化，预验证和生产方面拥有良好的记录。

此外，BioGenes还提供增强型通用360-HCP ELISA试剂盒，并为客户提供全面的分析服务。

CHO|360-HCP ELISA Kits and Components

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒和组件

CHO | 360-HCP ELISA是增强的通用宿主细胞蛋白（HCP）测定。它被设计为覆盖更广泛的中国仓鼠卵巢（CHO）宿主细胞蛋白（HCP），而不是其他商业上可获得的通用HCP测定。

CHO | 360-HCP ELISA基于*的分析设计，采用单独制备的HCP抗原和来自两个物种的抗体：

  • 抗原由从CHO-K1和CHO-S的模拟发酵获得的总和分级的HCP制备
  • 通过免疫山羊（试剂盒类型A，B）和兔子（试剂盒类型C，D）产生特异性抗体

该方法产生四种不同的HCP ELISA试剂盒，它们共同制备增强的通用CHO | 360-HCP试验。 

根据相应的ICH-指南ICH Q2（R1）（“分析程序的验证：文本和方法”），在BioGenes中对CHO | 360-HCP ELISA方法进行鉴定，由于该方法的性质作为生物测定，略有偏差。

在1D和2D分析中，通过覆盖≥80％的CHO | 360-HCP抗原分布证明了所有四种抗体制剂（A至D）的高特异性。对于每个CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D），在测定工作范围内的三个加标样品中，在接受标准100±30％的加标抗原内估计满意的回收率。CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D）的高灵敏度，由验证参数LOD，LOQ和工作范围描述，如下所示：

  • LOD：0.5 – 1.0 ng / mL
  • LOQ：2 – 3 ng / mL
  • 工作范围：2 – 100 ng / mL

 

类型

种类

HCP

A型

山羊

总HCP

B型

山羊

分级HCP

C型

兔子

总HCP

D型

兔子

分级HCP

 

 

货号

品名

欧元价

IP 103

CHO|360-HCP ELISA Kit Type C

495

IP 104

CHO|360-HCP ELISA Kit Type D

495

IP 111

Anti-CHO antibody Type A

450

IP 112

Anti-CHO antibody Type B

450

IP 113

Anti-CHO antibody Type C

450

IP 114

Anti-CHO antibody Type D

450

IP 120

CHO|360-HCP Standard

1200

IP 130

CHO|360-HCP Assay Buffer

150

IP 102

CHO|360-HCP ELISA Kit Type B

495

IP 101

CHO|360-HCP ELISA Kit Type A

495

CHO | 360-HCP ELISA启动子套装  IP 001

€1,485.00

 *酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。
起动装置为客户提供了所有必要的组件，可以快速，轻松地为特定过程选择合适的套件类型（A，B，C或D）

入门套件包括四个完整的即用型套件：

1x A型，1x B型，1x C型，1x D型

每种套件类型包含：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体结合物
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒A型   IP 101

€495.00

 *

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物A型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒B型  IP 102

€495.00

 *

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物B型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒C型IP 103

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物C型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

 

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

 

 

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒D型 IP 104

 

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

  • 预涂96孔微量测试板
  • 标准CHO-HCP
  • 抗体缀合物D型
  • 酶结合物
  • 洗涤缓冲液
  • 分析缓冲液
  • 底物缓冲液
  • 停止解决方案

 

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

 

 

Capricorn Scientific CHO-A说明书

发表于由

Capricorn Scientific成立于2013年，是一家新的德国细胞培养基，血清和试剂生产商。我们生产的主要重点是生产用于生物技术，诊断和研究应用的高质量动物血清。严格的测试程序以及全面的可追溯性记录和文档保证了我们产品的和可重复的质量。

作为一家规模较小的公司，我们可以灵活地提供各种传统和定制产品，以更低的成本，更短的交付周期和个性化的客户服务满足当今市场不断增长的需求。

我们的技术，经验丰富的专家团队多年来一直致力于细胞培养领域。我们致力于为活跃的细胞培养公司提供高质量，可靠性和服务。

 

Capricorn Scientific CHO-A说明书

CP-CHO Medium, protein-free CHO Medium, with L-Glutamine, sterile-filtered

CP-CHO培养基，无蛋白CHO培养基，含L-谷氨酰胺，无菌过滤

 

货号：CHO-A(500毫升)

 

产品阐述，产品说明

 

CP-CHO是在无血清条件下培养CHO细胞的培养基.该培养基用于支持灌注培养的生长。

 

一些成分，如酵母抽提物的添加，以丰富的介质，以获得大的性能。

 

培养基不含动物成分。

 

Applications ·

 

CHO K1和CHO-DG-44细胞

 

·在CHO细胞灌注培养中的应用

 

商品概述

 

外观(颜色)清澈的液体

 

pH 6.9 – 7.5

 

渗透压290-340 mOsm/kg

 

内毒素≤10 EU/ml

 

不育通行证

 

储存温度2-8度；黑暗和凉爽

 

保质期指到期日的产品标签

 

使用建议

 

可以建议增加：

 

Pluronic：1克/升

 

柠檬酸铁：20毫克/升

 

胰岛素：5毫克/升

 

配方

 

CP-CHO的配方是摩羯座科学公司的专有技术。如需更多资料，请参阅我们的技术服务。

 

预防措施及免责声明

 

本产品仅供研究用。请查阅材料安全数据表，以获取有关危险和安全处理做法的信息。

 

 

Capricorn Scientific产品目录：

货号

品名

规格

价格

DMEM-LPA

DMEM Low Glucose (1 g/l), with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

7.50 €

DMEM-LPSTA

DMEM Low Glucose (1 g/l), with Stable Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

9.50 €

DMEM-LPXA

DMEM Low Glucose (1 g/l), w/o L-Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

7.50 €

DMEM-HA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), with L-Glutamine

500 ml

6.40 €

DMEM-HHSTA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), with Stable Glutamine, with 25 mM HEPES

500 ml

9.50 €

DMEM-HPA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

7.50 €

DMEM-HPSTA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), with Stable Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

7.00 €

DMEM-HPXA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), w/o L-Glutamine, with Sodium Pyruvate

500 ml

7.50 €

DMEM-HXA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), w/o L-Glutamine

500 ml

6.40 €

DMEM-HXRXA

DMEM High Glucose (4.5 g/l), w/o L-Glutamine, w/o Phenol Red

500 ml

10.50 €

DMEM-12-A

DMEM/Ham’s F-12, with L-Glutamine

500 ml

8.60 €

DMEM-12-HXA

DMEM/Ham’s F-12, w/o L-Glutamine, with 15 mM HEPES

500 ml

8.60 €

HAM-12-A

Ham’s F-12, with L-Glutamine

500 ml

9.50 €

IMDM-A

IMDM, with L-Glutamine, without Supplements

500 ml

9.00 €

L15-XA

Leibovitz’s L-15 Medium, w/o L-Glutamine

500 ml

12.40 €

MCC-A

McCoy’s Medium, with L-Glutamine

500 ml

12.70 €

M199-A

Medium 199, with L-Glutamine

500 ml

8.90 €

MEM-A

MEM with Earle’s Salts, with L-Glutamine

500 ml

7.20 €

MEM-STA

MEM with Earle’s Salts, with Stable Glutamine

500 ml

9.40 €

MEM-XA

MEM with Earle’s Salts, w/o L-Glutamine

500 ml

6.40 €

MEMA-RXA

MEM Alpha Modification, w/o L-Glutamine, with Nucleosides

500 ml

19.90 €

MEMA-XRXA

MEM Alpha Modification, w/o L-Glutamine, w/o Nucleosides

500 ml

13.00 €

RPMI-A

RPMI 1640, with L-Glutamine

500 ml

6.40 €

RPMI-HA

RPMI 1640, with L-Glutamine, with 25 mM HEPES

500 ml

9.90 €

RPMI-HXA

RPMI 1640, w/o L-Glutamine, with 25 mM HEPES

500 ml

9.50 €

RPMI-STA

RPMI 1640, with Stable Glutamine

500 ml

8.40 €

RPMI-XA

RPMI 1640, w/o L-Glutamine

500 ml

5.80 €

RPMI-XRXA

RPMI 1640, w/o L-Glutamine, w/o Phenol Red

500 ml

9.90 €

FM1-F

FreezeMe One, Cryopreservation Medium with Fetal Bovine Serum

50 ml

65.00 €

FM2-F

FreezeMe Two, Cryopreservation Medium Serum-free

50 ml

70.00 €

TP-A

TumorPlus 263, Complete Medium for Tumor Cells, with L-Glutamine

500 ml

29.90 €

HP-A

HybridomaPrime, Hybridoma Medium, Serum-free

500 ml

34.90 €

HY-A

HybridomaPlus, Hybridoma Medium, Protein-free

500 ml

39.90 €

FP-A

FibroPlus 333 Complete Medium for Fibroblasts, with L-Glutamine

500 ml

29.90 €

ERP-B

EndoPrime Complete Medium for C*tion of Primary Cells

100 ml

on request

ERP-A

EndoPrime Complete Medium for C*tion of Primary Cells

500 ml

on request

HPR-B

HepaPrime Complete Medium for C*tion of Primary Hepatocytes

100 ml

on request

HPR-A

HepaPrime Complete Medium for C*tion of Primary Hepatocytes

500 ml

on request

NKR-G

NK-Prime Complete Medium for C*tion of Primary Natural Killer Cells

20 ml

on request

NKR-B

NK-Prime Complete Medium for C*tion of Primary Natural Killer Cells

100 ml

on request

CHOA-500ML

CHO-ONE A

500 ml

45.00 €

CHOE-500ML

CHO-ONE E

500 ml

49.00 €

CHOE-1000ML

CHO-ONE E

1000ml

89.00 €

CHOF1-100ML

CHO-ONE F1

100 ml

23.00 €

CHOF1-500ML

CHO-ONE F1

500 ml

95.00 €

CHOF2-10ML

CHO-ONE F2

10 ml

15.00 €

CHOF2-50ML

CHO-ONE F2

50 ml

49.00 €

CHO-K1

CHO-ONE Starter Kit

 

169.00 €

CHO-K2

CHO-ONE Expansion Kit

 

950.00 €

DMEM-LPA-P10

DMEM Low Glucose (1 g/l) powder medium, with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

14.90 €

DMEM-LPA-P50

DMEM Low Glucose (1 g/l) powder medium, with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

62.90 €

DMEM-HA-P10

DMEM High Glucose (4.5 g/l) powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

15.50 €

DMEM-HA-P50

DMEM High Glucose (4.5 g/l) powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

66.50 €

DMEM-HPA-P10

DMEM High Glucose (4.5 g/l) powder medium, with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

15.50 €

DMEM-HPA-P50

DMEM High Glucose (4.5 g/l) powder medium, with L-Glutamine, with Sodium Pyruvate, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

66.50 €

MEM-A-P10

MEM with Earle’s Salts powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

14.90 €

MEM-A-P50

MEM with Earle’s Salts powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

62.90 €

RPMI-A-P10

RPMI 1640 powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

15.50 €

RPMI-A-P50

RPMI 1640 powder medium, with L-Glutamine, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

66.50 €

RPMI-HA-P10

RPMI 1640 powder medium, with L-Glutamine, with 25 mM HEPES, w/o Sodium Bicarbonate

10 L

20.10 €

RPMI-HA-P50

RPMI 1640 powder medium, with L-Glutamine, with 25 mM HEPES, w/o Sodium Bicarbonate

50 L

89.90 €

FBS-52B

Fetal Bovine Serum, Collected in Australia

100 ml

on request

FBS-52A

Fetal Bovine Serum, Collected in Australia

500 ml

on request

FBS-12B

Fetal Bovine Serum, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-12A

Fetal Bovine Serum, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-22B

Fetal Bovine Serum, Collected in USA

100 ml

on request

FBS-22A

Fetal Bovine Serum, Collected in USA

500 ml

on request

FBS-HI-12B

Fetal Bovine Serum, Heat Inactivated, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-HI-12A

Fetal Bovine Serum, Heat Inactivated, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-HI-22B

Fetal Bovine Serum, Heat Inactivated, Collected in USA

100 ml

on request

FBS-HI-22A

Fetal Bovine Serum, Heat Inactivated, Collected in USA

500 ml

on request

FBS-11B

Fetal Bovine Serum Advanced, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-11A

Fetal Bovine Serum Advanced, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-HI-11B

Fetal Bovine Serum Advanced, Heat Inactivated, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-HI-11A

Fetal Bovine Serum Advanced, Heat Inactivated, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-TET-12B

Fetal Bovine Serum, Tetracycline Negative, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-TET-12A

Fetal Bovine Serum, Tetracycline Negative, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-ES-22B

Fetal Bovine Serum, ES cell pre-tested, Collected in USA

100 ml

on request

FBS-ES-22A

Fetal Bovine Serum, ES cell pre-tested, Collected in USA

500 ml

on request

FBS-DIA-12B

Fetal Bovine Serum, Dialysed, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-DIA-12A

Fetal Bovine Serum, Dialysed, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-IG-12B

Fetal Bovine Serum, IgG Stripped, Collected in South America

100 ml

on request

FBS-IG-12B

Fetal Bovine Serum, IgG Stripped, Collected in South America

500 ml

on request

FBS-ED-12F

Fetal Bovine Serum Exosome Depleted

50 ml

on request

FBS-ED-12B

Fetal Bovine Serum Exosome Depleted

100 ml

on request

FBS-ED-12A

Fetal Bovine Serum Exosome Depleted

500 ml

on request

NCS-1B

Newborn Calf Serum

100 ml

12.00 €

NCS-1A

Newborn Calf Serum

500 ml

38.00 €

NCS-HI-1B

Newborn Calf Serum, Heat Inactivated

100 ml

13.10 €

NCS-HI-1A

Newborn Calf Serum, Heat Inactivated

500 ml

43.00 €

CS-1B

Calf Serum

100 ml

8.00 €

CS-1A

Calf Serum

500 ml

29.50 €

ABS-1B

Adult Bovine Serum

100 ml

8.00 €

ABS-1A

Adult Bovine Serum

500 ml

29.50 €

ABS-1C

Adult Bovine Serum

1000 ml

on reques

HOS-1B

Horse Serum

100 ml

7.20 €

HOS-1A

Horse Serum

500 ml

32.00 €

DHS-1B

Donor Horse Serum

100 ml

9.00 €

DHS-1A

Donor Horse Serum

500 ml

35.00 €

GOA-1B

Goat Serum

100 ml

24.00 €

GOA-1A

Goat Serum

500 ml

105.00 €

POR-1B

Porcine Serum

100 ml

10.50 €

POR-1A

Porcine Serum

500 ml

39.00 €

MOU-1B

Mouse Serum

100 ml

499.00 €

RAT-1B

Rat Serum

100 ml

499.00 €

RAB-1B

Rabbit Serum

100 ml

99.00 €

HUM-3B

Human Serum, Type AB, Male

100 ml

134.00 €

BSA-1U

Bovine Serum Albumin, Fraction V, pH 7.0, Origin USA

50 g

56.00 €

BSA-1S

Bovine Serum Albumin, Fraction V, pH 7.0, Origin USA

100 g

77.00 €

BSA-1V

Bovine Serum Albumin, Fraction V, pH 7.0, Origin USA

250 g

on request

BSA-1T

Bovine Serum Albumin, Fraction V, pH 7.0, Origin USA

500 g

299.00 €

BSA-FAF-1U

Bovine Serum Albumin, Fatty Acid Free, Origin USA

50 g

99.00 €

BSA-FAF-1S

Bovine Serum Albumin, Fatty Acid Free, Origin USA

100 g

178.00 €

BSA-PF-1U

Bovine Serum Albumin, Protease Free, Origin USA

50 g

88.00 €

BSA-PF-1S

Bovine Serum Albumin, Protease Free, Origin USA

100 g

151.00 €

HSA-1R

Human Serum Albumin

10 g

56.00 €

HSA-1U

Human Serum Albumin

50 g

227.00 €

HSA-1S

Human Serum Albumin

100 g

420.00 €

N2-K

N2 Supplement (100x), Serum-free

5 ml

45.00 €

C21-H

NCS21 Supplement (50x), Serum-free

10 ml

45.00 €

ITS-H

ITS (100x), Insulin, Transferrin, Selenium

10 ml

25.00 €

HCS-F

Hybridoma Supplément, Serum-free

50 ml

99.00 €

GLN-B

L-Glutamine, 200 mM

100 ml

8.00 €

STA-B

Stable Glutamine, 200 mM

100 ml

14.50 €

NPY-B

Sodium Pyruvate, 100 mM

100 ml

10.50 €

NEAA-B

MEM Nonessential Amino Acids (100x)

100 ml

8.50 €

ACC-1B

Accutase Cell Detachment Solution

100 ml

26.00 €

ACM-1G

AccuMax Cell Detachment Solution

20 ml

29.00 €

ACM-1F

AccuMax Cell Detachment Solution

50 ml

69.00 €

TRY-1B

Trypsin-EDTA (0.05 %) in DPBS (1x)

100 ml

7.00 €

TRY-1B10

Trypsin-EDTA (0.5 %) in DPBS (10x)

100 ml

11.50 €

TRY-2B

Trypsin (0.25 %) in DPBS (1x)

100 ml

7.00 €

TRY-2B10

Trypsin (2.5 %) in DPBS (10x)

100 ml

11.50 €

TRY-3B

Trypsin-EDTA (0.25 %) in HBSS (1x) with Phenol Red

100 ml

9.50 €

TRY-4B

Trypsin-EDTA (0.05 %) in HBSS (1x) with Phenol Red

100 ml

8.50 €

AMP-B

Amphotericin B Solution (250 µg/ml)

100 ml

14.00 €

AAS-B

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

100 ml

14.00 €

GEN-10B

Gentamicin Solution (10 mg/ml)

100 ml

50.00 €

PS-B

Penicillin/Streptomycin (100x)

100 ml

8.00 €

PSG-B

Penicillin/Streptomycin (100x), with L-Glutamine

100 ml

15.00 €

MYX-B

MycoXpert, Mycoplasma Removal Reagent (50x)

100 ml

99.00 €

LSM-B

Lymphocytes Separation Media, Density 1.077 g/ml

100 ml

12.00 €

LSM-A

Lymphocytes Separation Media, Density 1.077 g/ml

500 ml

36.50 €

FM1-F

FreezeMe One, Cryopreservation Medium with Fetal Bovine Serum

50 ml

65.00 €

FM2-F

FreezeMe Two, Cryopreservation Medium Serum-free

50 ml

70.00 €

MYX-B

MycoXpert, Mycoplasma Removal Reagent (50x)

100 ml

99.00 €

PBS-10XA

Dulbecco's PBS (10x), w/o Ca & Mg, w/o Phenol Red

500 ml

13.00 €

PBS-1A

Dulbecco's PBS (1x), w/o Ca & Mg, w/o Phenol Red

500 ml

6.50 €

PBS-2A

Dulbecco's PBS (1x), with Ca & Mg, w/o Phenol Red

500 ml

8.00 €

HBSS-1A

Hanks' Balanced Salts (1x), with Ca & Mg, w/o Phenol Red

500 ml

7.50 €

HBSS-2A

Hanks' Balanced Salts (1x), w/o Ca & Mg, w/o Phenol Red

500 ml

7.00 €

HBSS-3A

Hanks' Balanced Salts (1x), w/o Ca & Mg, with Phenol Red

500 ml

7.50 €

HEP-B

HEPES Buffer Solution (1 M)

100 ml

39.00 €

PBS-1A-P10

Dulbecco's PBS (1x) powder, w/o Ca & Mg, w/o Phenol Red

10 L

10.90 €

PBS-1A-P50

Dulbecco's PBS (1x) powder, w/o Ca & Mg, w/o Phenol Red

50 L

43.10 €

 

 

 Capricorn Scientific中国代理, Capricorn Scientific上海代理， Capricorn Scientific北京代理，Capricorn Scientific广东代理， Capricorn Scientific江苏代理Capricorn Scientific湖北代理,Capricorn Scientific天津代理, Capricorn Scientific黑龙江代理, Capricorn Scientific内蒙古代理, Capricorn Scientific吉林代理, Capricorn Scientific福建代理,  Capricorn Scientific江苏代理, Capricorn Scientific浙江代理,  Capricorn Scientific四川代理,

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

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3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

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5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发，欢迎合作。

 

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

发表于由

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

中国仓鼠卵巢细胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）是生物制品中抗体、重组蛋白、疫苗生产中广泛使用的动物细胞表达系统。使用了该细胞的产品，在其生产纯化过程中不可避免的会引入宿主细胞蛋白（HCP）杂质，从而降低产品的疗效，并导致不良的毒性或免疫反应，因此需要保证生物制品终产品中HCP残留水平尽可能的低。

ELISA法是一种使用简单、灵敏度高且客观的HCP检测方法。本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理进行CHO-K1细胞HCP残留量的检测，将梯度稀释后的CHO-K1 HCP标准品（36714-B）和待测样本加入预包被抗CHO-K1 HCP抗体的酶标板（36714-A），然后加入稀释后的生物素标记的CHO-K1 HCP检测抗体（36714-C），最后加入稀释后的Streptavidin-HRP（SA-HRP）（36714-D），形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+ SA‐HRP 复合物，洗板后加入TMB显色液（36714-H）显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液（36714-I）的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的CHO-K1 HCP的量呈正相关。本试剂盒可以用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

 

产品信息

货号

36714ES48 / 36714ES96

规格

48 T / 96 T

检测范围

1.5625-100 ng/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4小时

灵敏度

0.5 ng/mL

回收率

80 – 120%

板内差

<10%

板间差

<15%

 

实验数据

1.标曲数据

典型的参考标准曲线如下（以下标准曲线图仅供参考，应以同次实验标准品所绘标准曲线计算样本含量）：

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

2.检测流程图

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

图2：实验步骤流程简图

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

暂无内容

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

暂无内容

 

中国仓鼠卵巢细胞（Chinese Hamster Ovary，CHO）是生物制品中抗体、重组蛋白、疫苗生产中广泛使用的动物细胞表达系统。使用了该细胞的产品，在其生产纯化过程中不可避免的会引入宿主细胞蛋白（HCP）杂质，从而降低产品的疗效，并导致不良的毒性或免疫反应，因此需要保证生物制品终产品中HCP残留水平尽可能的低。

ELISA法是一种使用简单、灵敏度高且客观的HCP检测方法。本试剂盒应用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）的实验原理进行CHO-K1细胞HCP残留量的检测，将梯度稀释后的CHO-K1 HCP标准品（36714-B）和待测样本加入预包被抗CHO-K1 HCP抗体的酶标板（36714-A），然后加入稀释后的生物素标记的CHO-K1 HCP检测抗体（36714-C），最后加入稀释后的Streptavidin-HRP（SA-HRP）（36714-D），形成抗体+抗原+抗体‐Biotin+ SA‐HRP 复合物，洗板后加入TMB显色液（36714-H）显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液（36714-I）的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的CHO-K1 HCP的量呈正相关。本试剂盒可以用于生物制品纯化工艺过程的优化、中间工艺过程的杂质控制以及终产品的放行检测。

 

产品信息

货号

36714ES48 / 36714ES96

规格

48 T / 96 T

检测范围

1.5625-100 ng/mL

检测方法

双抗夹心法

检测时长

4小时

灵敏度

0.5 ng/mL

回收率

80 – 120%

板内差

<10%

板间差

<15%

 

实验数据

1.标曲数据

典型的参考标准曲线如下（以下标准曲线图仅供参考，应以同次实验标准品所绘标准曲线计算样本含量）：

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

2.检测流程图

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

图2：实验步骤流程简图

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

暂无内容

CHO HCP ELISA检测试剂盒 HCP残留量检测 CHO HCP ELISA kit (CHO-K1)

暂无内容

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

发表于由

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的CHO残留DNA含量的试剂盒。

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测CHO细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒(Cat#18461ES/18462ES)配套使用。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

41305ES50 

(50T)

41305ES60

 (100T)

41305-A

CHO qPCR Mix

0.75 mL

1.5 mL

41305-B

CHO Primer&Probe Mix

200 μL

400 μL

41305–C

DNA Dilution Buffer

2×1.8 mL

4×1.8 mL

41305–D

CHO DNA Control (30 ng/μL)

25 μL

50 μL

41305–E

IC

50 μL

100 μL

【注】：1. IC：Internal control，内部对照。

 

运输和保存方法

1. 所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期2年。且41305-A和41305–B均需避光保存。

2. 收到货后，请检查共5个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

 

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途。

 

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500，ABI Quant Studio 5，ABI Step OnePlus；

上海宏石医疗科技：SLAN-96S。

 

使用方法

一、CHO DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA Dilution Buffer（DNA稀释液）将CHO DNA Control进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL，30 pg/μL，3 pg/μL，300 fg/μL，30 fg/μL，3 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的CHO DNA Control和DNA Dilution Buffer置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为Std0，Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6。

3. 在标记为Std0的1.5 mL离心管中加入90 μL DNA Dilution Buffer和10 μL CHO DNA Control (30 ng/μL)，即稀释为3ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于–20℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。

4. 在Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6管中先分别加入90 μL DNA Dilution Buffer，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管

稀释比例

终浓度

Std1

10 μL Std0 + 90 μL DNA Dilution Buffer

300 pg/μL

Std2

10 μL Std1 + 90 μL DNA Dilution Buffer

30 pg/μL

Std3

10 μL Std2 + 90 μL DNA Dilution Buffer

3 pg/μL

Std4

10 μL Std3 + 90 μL DNA Dilution Buffer

300 fg/μL

Std5

10 μL Std4 + 90 μL DNA Dilution Buffer

30 fg/μL

Std6

10 μL Std5 + 90 μL DNA Dilution Buffer

3 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试3 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于–20℃。

3. 已融化未使用的DNA Dilution Buffer可保存于2-8℃ 7天，若长时间不用，请放置于–20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

 

二、样本加标回收质控ERC的制备

根据需要设置ERC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加30 pg CHO DNA量的ERC为例），具体操作如下：

1. 取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10 μL Std3，混匀，标记为ERC。

2. 加标回收ERC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收ERC纯化液。

 

三、阴性抽提质控NCS的制备

根据实验设置阴性抽提质控NCS，具体操作如下：

1. 取100 μL样本基质溶液（或DNA Dilution Buffer）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为NCS。

2. 阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

 

四、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

1. 无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。

2. 每管或孔中的NTC反应体系为20 μL Mix混合液（即15 μL CHO qPCR Mix + 4μL CHO Primer&Probe Mix + 1μL IC）+ 10 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

 

五、反应体系

组分

体积（μL）

CHO qPCR Mix

15

CHO Primer&Probe Mix

4

IC

1

DNA template

10

总体积

30

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需Mix混合液总量：Mix混合液=（反应孔数+2）× (15+4+1) μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

2. 反应孔数=（6个浓度梯度的标准曲线+1个无模板对照NTC+1个阴性抽提质控NCS+待测样本TS个数+待测样本对应加标回收ERC个数）× 3。

NTC (No Template Control)：DNA Dilution Buffer

NCS (Negative Control Solution)：样本基质溶液或DNA Dilution Buffer进行样本前处理后，所得纯化液为NCS

TS (Test Sample)：待测样本

ERC (Extraction Recovery Control)：待测样本中加入如30 pg标准品DNA后进行样本前处理，所得纯化液为加标回收ERC

3. 加样完成密封好管子后，请低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。

下图为参考板位：

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

该示例是对CHO残留DNA qPCR法检测操作的展示，检测样本包括：6个浓度梯度的CHO DNA标准曲线、1个无模板对照NTC、1个阴性质控NCS、3个待测样本TS、3个加样回收ERC。建议每个样本做3个重复孔。

 

六、扩增程序参数设置（两步法）（以ABI公司7500 qPCR仪、软件版本2.0为例）

1. 创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。

2. 创建1个检测探针，命名为“CHO-DNA”，选择报告荧光基团为“FAM”，猝灭荧光基团为“none”，再创建1个检测探针，命名为“IC”，选择报告荧光基团为“CY5”，猝灭荧光基团为“none”。参比荧光为“ROX”（参比荧光可根据仪器型号等情况，选择是否需要添加）。

3. 在“Assign target (s) to the selected wells”面板中，将标准曲线孔的“Task”一栏设置为“Standard”，并且在“Quantity”一栏分别赋值为“300000”，“30000”，“3000”，“300”，“30”，“3”（含义为每孔的DNA浓度，单位为fg/μL），并且在相应的“sample name”一栏中命名为“300 pg/μL”，“30 pg/μL”，“3 pg/μL”，“300 fg/μL”，“30 fg/μL”，“3 fg/μL”；将无模板对照NTC孔的“Task”一栏设置为“NTC”；将阴性质控NCS孔、待测样本TS孔、样本加标回收ERC孔的“Task”一栏设置为“Unknown”，并且在相应的“Sample Name”一栏中分别命名为“NCS”，“TS”，“ERC”；之后点击“Start Run”，开始仪器运行。

4. 扩增程序设置：设置反应体积30 μL。

循环步骤

温度(℃)

时间

循环数

预变性

95℃

5 min

1

变性

95℃

15 sec

40

退火/延伸（收集荧光）

60℃

30 sec

 

七、qPCR 结果分析

1. 在“Analysis”的“Amplification Plot”面板中，系统会自动给出“Threshold”，有时系统给出的“Threshold”离基线太近，导致复孔之间Ct相差甚远，可手动调节“Threshold”至合适位置，点击“Analyze”。此时可在“Multicomponent Plot”初步查看扩增曲线的形态是否正常。

2. 在“Analysis”的“Standard Curve”面板中，可读取标准曲线的R²、扩增效率(Eff%)、斜率(Slope)、截距(Intercept)等。正常的标曲：R²>0.99，扩增效率在90%≤Eff%≤110%范围内，Slope在-3.6~-3.1。

3. 在“Analysis”的“View well table”面板中，“Quantity”一栏可读取无模板对照NTC、阴性质控NCS、待测样本TS、样本加标回收ERC的检测值，单位为fg/μL，后续可在检测报告中将单位换算成pg/μL或pg/mL。

4. 结果分析的参数设置需依据具体的机型及使用的软件版本，一般也可由仪器自动判读。

5. 根据待测样本TS和样本加标回收ERC的检测结果计算加标回收率，加标回收率要求在50%~150%之间。加标回收率计算公式：回收率(%) = {样本加标测定值(eg.pg/µL)-样本测定值(eg.pg/µL)} x洗脱体积(µL) / DNA加入量理论值(eg.pg) x 100%。

6. 阴性质控NCS的Ct值应大于标曲最低浓度Ct的均值。

7. 无模板对照NTC的检测结果应为Undetermined或Ct值≥35。

HB221201

 

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

暂无内容

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

暂无内容

 

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的CHO残留DNA含量的试剂盒。

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测CHO细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒(Cat#18461ES/18462ES)配套使用。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

41305ES50 

(50T)

41305ES60

 (100T)

41305-A

CHO qPCR Mix

0.75 mL

1.5 mL

41305-B

CHO Primer&Probe Mix

200 μL

400 μL

41305–C

DNA Dilution Buffer

2×1.8 mL

4×1.8 mL

41305–D

CHO DNA Control (30 ng/μL)

25 μL

50 μL

41305–E

IC

50 μL

100 μL

【注】：1. IC：Internal control，内部对照。

 

运输和保存方法

1. 所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期2年。且41305-A和41305–B均需避光保存。

2. 收到货后，请检查共5个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

 

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途。

 

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500，ABI Quant Studio 5，ABI Step OnePlus；

上海宏石医疗科技：SLAN-96S。

 

使用方法

一、CHO DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA Dilution Buffer（DNA稀释液）将CHO DNA Control进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL，30 pg/μL，3 pg/μL，300 fg/μL，30 fg/μL，3 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的CHO DNA Control和DNA Dilution Buffer置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为Std0，Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6。

3. 在标记为Std0的1.5 mL离心管中加入90 μL DNA Dilution Buffer和10 μL CHO DNA Control (30 ng/μL)，即稀释为3ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于–20℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。

4. 在Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6管中先分别加入90 μL DNA Dilution Buffer，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管

稀释比例

终浓度

Std1

10 μL Std0 + 90 μL DNA Dilution Buffer

300 pg/μL

Std2

10 μL Std1 + 90 μL DNA Dilution Buffer

30 pg/μL

Std3

10 μL Std2 + 90 μL DNA Dilution Buffer

3 pg/μL

Std4

10 μL Std3 + 90 μL DNA Dilution Buffer

300 fg/μL

Std5

10 μL Std4 + 90 μL DNA Dilution Buffer

30 fg/μL

Std6

10 μL Std5 + 90 μL DNA Dilution Buffer

3 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试3 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于–20℃。

3. 已融化未使用的DNA Dilution Buffer可保存于2-8℃ 7天，若长时间不用，请放置于–20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

 

二、样本加标回收质控ERC的制备

根据需要设置ERC中的CHO DNA标准品浓度（以制备加30 pg CHO DNA量的ERC为例），具体操作如下：

1. 取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10 μL Std3，混匀，标记为ERC。

2. 加标回收ERC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收ERC纯化液。

 

三、阴性抽提质控NCS的制备

根据实验设置阴性抽提质控NCS，具体操作如下：

1. 取100 μL样本基质溶液（或DNA Dilution Buffer）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为NCS。

2. 阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

 

四、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

1. 无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。

2. 每管或孔中的NTC反应体系为20 μL Mix混合液（即15 μL CHO qPCR Mix + 4μL CHO Primer&Probe Mix + 1μL IC）+ 10 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

 

五、反应体系

组分

体积（μL）

CHO qPCR Mix

15

CHO Primer&Probe Mix

4

IC

1

DNA template

10

总体积

30

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需Mix混合液总量：Mix混合液=（反应孔数+2）× (15+4+1) μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

2. 反应孔数=（6个浓度梯度的标准曲线+1个无模板对照NTC+1个阴性抽提质控NCS+待测样本TS个数+待测样本对应加标回收ERC个数）× 3。

NTC (No Template Control)：DNA Dilution Buffer

NCS (Negative Control Solution)：样本基质溶液或DNA Dilution Buffer进行样本前处理后，所得纯化液为NCS

TS (Test Sample)：待测样本

ERC (Extraction Recovery Control)：待测样本中加入如30 pg标准品DNA后进行样本前处理，所得纯化液为加标回收ERC

3. 加样完成密封好管子后，请低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。

下图为参考板位：

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

该示例是对CHO残留DNA qPCR法检测操作的展示，检测样本包括：6个浓度梯度的CHO DNA标准曲线、1个无模板对照NTC、1个阴性质控NCS、3个待测样本TS、3个加样回收ERC。建议每个样本做3个重复孔。

 

六、扩增程序参数设置（两步法）（以ABI公司7500 qPCR仪、软件版本2.0为例）

1. 创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。

2. 创建1个检测探针，命名为“CHO-DNA”，选择报告荧光基团为“FAM”，猝灭荧光基团为“none”，再创建1个检测探针，命名为“IC”，选择报告荧光基团为“CY5”，猝灭荧光基团为“none”。参比荧光为“ROX”（参比荧光可根据仪器型号等情况，选择是否需要添加）。

3. 在“Assign target (s) to the selected wells”面板中，将标准曲线孔的“Task”一栏设置为“Standard”，并且在“Quantity”一栏分别赋值为“300000”，“30000”，“3000”，“300”，“30”，“3”（含义为每孔的DNA浓度，单位为fg/μL），并且在相应的“sample name”一栏中命名为“300 pg/μL”，“30 pg/μL”，“3 pg/μL”，“300 fg/μL”，“30 fg/μL”，“3 fg/μL”；将无模板对照NTC孔的“Task”一栏设置为“NTC”；将阴性质控NCS孔、待测样本TS孔、样本加标回收ERC孔的“Task”一栏设置为“Unknown”，并且在相应的“Sample Name”一栏中分别命名为“NCS”，“TS”，“ERC”；之后点击“Start Run”，开始仪器运行。

4. 扩增程序设置：设置反应体积30 μL。

循环步骤

温度(℃)

时间

循环数

预变性

95℃

5 min

1

变性

95℃

15 sec

40

退火/延伸（收集荧光）

60℃

30 sec

 

七、qPCR 结果分析

1. 在“Analysis”的“Amplification Plot”面板中，系统会自动给出“Threshold”，有时系统给出的“Threshold”离基线太近，导致复孔之间Ct相差甚远，可手动调节“Threshold”至合适位置，点击“Analyze”。此时可在“Multicomponent Plot”初步查看扩增曲线的形态是否正常。

2. 在“Analysis”的“Standard Curve”面板中，可读取标准曲线的R²、扩增效率(Eff%)、斜率(Slope)、截距(Intercept)等。正常的标曲：R²>0.99，扩增效率在90%≤Eff%≤110%范围内，Slope在-3.6~-3.1。

3. 在“Analysis”的“View well table”面板中，“Quantity”一栏可读取无模板对照NTC、阴性质控NCS、待测样本TS、样本加标回收ERC的检测值，单位为fg/μL，后续可在检测报告中将单位换算成pg/μL或pg/mL。

4. 结果分析的参数设置需依据具体的机型及使用的软件版本，一般也可由仪器自动判读。

5. 根据待测样本TS和样本加标回收ERC的检测结果计算加标回收率，加标回收率要求在50%~150%之间。加标回收率计算公式：回收率(%) = {样本加标测定值(eg.pg/µL)-样本测定值(eg.pg/µL)} x洗脱体积(µL) / DNA加入量理论值(eg.pg) x 100%。

6. 阴性质控NCS的Ct值应大于标曲最低浓度Ct的均值。

7. 无模板对照NTC的检测结果应为Undetermined或Ct值≥35。

HB221201

 

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

暂无内容

CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)

暂无内容