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biontex2023价格表

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biontex2023价格表-上海金畔生物

Biontex是一家基因工程领域的公司，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried。Biontex公司主要致力于转染载体方面的研究。其目标是想通过改进自己的核酸运载载体和蛋白运载载体不断加强在转染技术方面的优势从而开发大量的高质量的基因工程产品。目前，公司主打的产品是一种能适用所有类型细胞并且在体内和体外都能高效转染的不引起免疫反应的合成转染载体。Biontex除了独步的转染试剂外，还提供无支原体的细胞培养试剂、支原体去除和检测产品、用于蛋白表达纯化的介质——固相琼脂糖。简而言之，biontex公司的所有产品都是围绕的显微成像技术而展开的　　 　　

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
EA010-2.0 10x EASY-buffer 2 ml 2ml 476 biontex 期货4周 上海金畔生物
SI010-2 0 10x SI-buffer 2 ml 2ml 476 biontex 期货4周 上海金畔生物
T010-1.0 DOTAP 1 x 1 ml 1x1ml 1498 biontex 期货4周 上海金畔生物
T010-2.0 DOTAP 2 x 1 ml 2x1ml 2506 biontex 期货4周 上海金畔生物
T010-5.0 DOTAP 5 x 1 ml 5x1ml 4956 biontex 期货4周 上海金畔生物
T030-1.0 INSECTOGENE 1 x 1 ml 1x1ml 2520 biontex 期货4周 上海金畔生物
T030-2.0 INSECTOGENE 2 x 1 ml 2x1ml 4606 biontex 期货4周 上海金畔生物
T030-5.0 INSECTOGENE 5 x 1 ml 5x1ml 10220 biontex 期货4周 上海金畔生物
T020-1.0 METAFECTENE® 1 x 1 ml 1x1ml 2926 biontex 期货4周 上海金畔生物
T020-2.0 METAFECTENE® 2 x 1 ml 2x1ml 5348 biontex 期货4周 上海金畔生物
T020-5.0 METAFECTENE® 5 x 1 ml 5x1ml 11970 biontex 期货4周 上海金畔生物
T090-1.0 METAFECTENE® EASY+ 1 x 1 ml 1x1ml 4130 biontex 期货4周 上海金畔生物
T090-2.0 METAFECTENE® EASY+ 2 x 1 ml 2x1ml 7742 biontex 期货4周 上海金畔生物
T090-5.0 METAFECTENE® EASY+ 5 x 1 ml 5x1ml 25704 biontex 期货4周 上海金畔生物
T100-1.0 METAFECTENE® SI+ 1 x 1 ml 1x1ml 4368 biontex 期货4周 上海金畔生物
T100-2.0 METAFECTENE® SI+ 2 x 1 ml 2x1ml 8372 biontex 期货4周 上海金畔生物
T100-5.0 METAFECTENE® SI+ 5 x 1 ml 5x1ml 19418 biontex 期货4周 上海金畔生物
T040-1.0 METAFECTENE® PRO 1 x 1 ml 1x1ml 3598 biontex 期货4周 上海金畔生物
T040-2.0 METAFECTENE® PRO 2 x 1 ml 2x1ml 7000 biontex 期货4周 上海金畔生物
T040-5.0 METAFECTENE® PRO 5 x 1 ml 5x1ml 16268 biontex 期货4周 上海金畔生物
T050-0.5 METAFECTENE® FluoR 1 x 0.5 ml 1×0.5ml 2072 biontex 期货4周 上海金畔生物
T050-1.0 METAFECTENE® FluoR 1 x 1 ml 1x1ml 3570 biontex 期货4周 上海金畔生物
T060-0.75 K2® Transfection System 1 x 750 µl 1x750ul 3080 biontex 期货4周 上海金畔生物
T060-1.0 K2® Transfection System 1 x 1.5 ml 1×1.5ml 5236 biontex 期货4周 上海金畔生物
T060-2.0 K2® Transfection System 2 x 1.5 ml 2×1.5ml 9856 biontex 期货4周 上海金畔生物
T060-5.0 K2® Transfection System 5 x 1.5 ml 5×1.5ml 23100 biontex 期货4周 上海金畔生物
T080-1.0 K4® Transfection System 1 x 1 ml 1x1ml 3472 biontex 期货4周 上海金畔生物
T080-2.0 K4® Transfection System 2 x 1 ml 2x1ml 6552 biontex 期货4周 上海金畔生物
T080-5.0 K4® Transfection System 5 x 1 ml 5x1ml 15400 biontex 期货4周 上海金畔生物
T082-1.0 3.5 ml K4® Multiplier ea 1526 biontex 期货4周 上海金畔生物
T082-2.0 2 x 3.5 ml K4® Multiplier 3.5mlK4®Multiplier 2772 biontex 期货4周 上海金畔生物
M020-025 MycoSPY® Master Mix 25 assays 25assays 2240 biontex 期货4周 上海金畔生物
M020-050 MycoSPY® Master Mix 50 assays 50assays 3850 biontex 期货4周 上海金畔生物
E010-0.1 PROTEOfectene® 1 x 100 µl 1x100ul 4186 biontex 期货4周 上海金畔生物
E010-0.25 PROTEOfectene® 1 x 250 µl 1x250ul 8540 biontex 期货4周 上海金畔生物
E020-0.1 PROTEOfectene® AB 1 x 100 µl 1x100ul 4186 biontex 期货4周 上海金畔生物
E020-0.25 PROTEOfectene® AB 1 x 250 µl 1x250ul 8540 biontex 期货4周 上海金畔生物
K010-0.1 µ-Transfection Kit VI Kit 8372 biontex 期货4周 上海金畔生物
K020-0.1 µ-Transfection Kit VI FluoR Kit 9604 biontex 期货4周 上海金畔生物
K030-0.25 µ-Proteofection Kit VI Kit 14924 biontex 期货4周 上海金畔生物
K040-0.25 µ-Proteofection Kit VI AB Kit 14924 biontex 期货4周 上海金畔生物
T060-0.2 K2® Transfection System 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 期货4周 上海金畔生物
T080-0.2 K4® Transfection System 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 期货4周 上海金畔生物
T082-0.5 K4® Multiplier ea 0 biontex 期货4周 上海金畔生物
T020-0.2 METAFECTENE® 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 期货4周 上海金畔生物
T040-0.2 METAFECTENE® PRO 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 期货4周 上海金畔生物
T100-0.2 METAFECTENE® SI+ 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 期货4周 上海金畔生物

关键词：biontex；biontex 代理；T040-1.0；T080-1.0；K4® Transfection System

biontex转染试剂选择指南

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biontex转染试剂选择指南
 

使用说明：

在“转染试剂选择指南”中，您可以通过设置不同的过滤器（例如，针对核酸和细胞类型的组合）找到现有参考。页面顶部“搜索参考”中的适当关键字也可以产生结果。参考文献表明找到的转染试剂已成功用于相应的应用。理想情况下，应测试的转染参数和转染效率。


如果该列表不包括有关您的细胞类型的参考，这并不意味着没有合适的试剂可用，而只是没有关于该细胞类型的经验报告。

细胞类型 细胞类型描述 货号 核酸/递送分子 产品 书目数据 PDF 关联

 

 小鼠原代成肌细胞   miRNA Metafectene PRO CE Winbanks 等人，J. Biol。化学，2011 年 4 月；286: 13805 – 13814   关联

 

 小鼠原代肝细胞   miRNA Metafectene PRO S. Surendran 等人，《科学报告》，2016 年，6：18958；DOI：10.1038/srep18958   关联

 

 人原代成纤维细胞   siRNA Metafectene PRO T. Stiff 等人，PLoS Genet., 2013, 9(3): e1003360, doi.org/10.1371/journal.pgen.1003360   关联

 

 早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等人，《科学报告》，7：43287，DOI：10.1038/srep43287   关联

 

 晚二龄幼虫小菜蛾血腔   质粒 Metafectene PRO S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017    

 

 Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Z. Guo 等人，《科学报告》，2015，5：13728；DOI：10.1038/srep13728   关联

 

 小鼠（18.5 dpc 胎儿或新生儿）卵巢   miRNA Metafectene H. Zhang 等人，Reproduction，2014 年 6 月；148: 43 – 54   关联

 

 兔（新西兰）来自关节软骨的原代软骨细胞   质粒 Metafectene J.-H. Ryu 等人，J. Biol。化学，2006 年 8 月；281：22039 – 22047   关联

 

 Spodoptera exigua hemocoel 第一天幼虫 L5（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Y. Kim 等人, Peptides, 2015, 68: 91-98;doi.org/10.1016/j.peptides.2015.02.003    

 

 L3D1 NP 幼虫的 Plutella xylostella hemocoel（菱背蛾或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等，J. of General Virology，2016，97：2780-2796；DOI 10.1099/jgv.0.000560   关联

 

 早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel   双链RNA Metafectene PRO J. Zhou 等人，Pest Manag。科学，2020，76：712–720，DOI：10.1002/ps.5569   关联

 

 Plutella xylostella，三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO B. Park 等人，昆虫科学，2012，19：47–54，DOI 10.1111/j.1744-7917.2011.01421.x    

 

 甜菜夜蛾五龄幼虫（L5）（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO J. Park 等人，PLoS ONE，2014，9(9)：e105717，doi：10.1371/journal.pone.0105717   关联

 

 小鼠混合神经元-神经胶质小脑培养物   质粒 K2转染系统    

 

 Rabitt (Lapine) 关节软骨细胞   质粒 Metafectene P. Orth 等人，Mol Biotechnol，2008 年 2 月；38(2): 137-44    

 

 小鼠软骨细胞   质粒 Metafectene A. Jash 等人，PLoS ONE，2012，7(7)：e40828，doi：10.1371/journal.pone.0040828   关联

 

 甜菜夜蛾幼虫和蛹（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Ahmed 等人，《科学报告》，2019，9：4988，doi.org/10.1038/s41598-019-41541-2   关联

 

 小鼠异种移植肿瘤，由人类 Hep-2 细胞建立   质粒 Metafectene J. Zhou et al., Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Zazhi, Mar 2006; 20(6): 264-7    

 

 甜菜夜蛾四龄和五龄幼虫（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO S. Ahmed 等人，无脊椎动物病理学杂志，2018，doi.org/10.1016/j.jip.2018.05.009    

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学    

 

 人原代 CD14+ 单核细胞   miRNA Metafectene SI S. Smith，JCI 洞察力，2018，3(15):e120798，doi.org/10.1172/jci.insight.120798   关联

 

 人永生化淋巴细胞细胞系（EBV永生化）   siRNA Metafectene PRO M. Pradas-Juni 等人，Mol. 内分泌学, 2014, 28(9): 1558-1570, doi: 10.1210/me.2014-1065   关联

 

 Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)   双链RNA Metafectene PRO AAM Mohamed 等人，PLoS ONE，2014，9(3)：e92680，doi：10.1371/journal.pone.0092680   关联

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500   关联

 

 小鼠永生化皮肤成纤维细胞（缺乏 Lap2-alpha）   质粒 Metafectene PRO E. Bartova 等，Protoplasma，2017，254：2035-2043，DOI 10.1007/s00709-017-1076-1  
细胞类型 细胞类型描述 货号 核酸/递送分子 产品 书目数据 PDF 关联

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学    

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500   关联

 

 Plutella xylostella 幼虫（菱形或卷心菜蛾）   质粒 Metafectene PRO W. Gad 等人，J. Gen. Virol.，2008 年 4 月；89: 931 – 938   关联

 

 L5 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel   双链RNA Metafectene PRO AA Baki 等人，Arch。昆虫生化。生理学，2019:100:e21524，doi.org/10.1002/arch.21524    

 

 甜菜夜蛾幼虫血腔（甜菜夜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Md. Sadekuzzaman 等人，Dev。和比较。Immunol., 2017, 77: 210-220, DOI: 10.1016/j.dci.2017.08.014    

 

 大鼠原代肝细胞   siRNA Metafectene PRO F. Damiano 等，Biochem。J., 2013, 449: 543–553, doi:10.1042/BJ20120906    

 

 大鼠（Wistar 新生儿）原代海马神经元   siRNA Metafectene PJ Kammermeier, J. Neurosci., 2008 年 8 月；28: 8560 – 8567   关联

 

 4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射   siRNA Metafectene S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109   关联

 

 人类皮肤黑色素瘤（FFPE 组织切片）   质粒 Metafectene PRO M. Venza 等人，Biochim。等生物物理学。学报，2015，1849：247-256；doi.org/10.1016/j.bbagrm.2014.12.004    

 

 小鼠肝细胞   质粒 Metafectene PRO S.-Y。Cai 等人，JCI 洞察力。2017, 2(5): e90780, doi.org/10.1172/jci.insight.90780    

 

 人胎儿皮质干细胞培养   质粒 Metafectene S. Couillard-Despres 等人，2014 年，US 8,841,430   googleapis.com/c6/aa/0f/25b3644975870e/US8841430.pdf” style=”box-sizing: border-box; text-decoration: none; color: rgb(51,153,204); padding-bottom: 0px; padding-top: 0px; padding-left: 0px; margin: 0px; padding-right: 0px; touch-action: manipulation” target=”_blank”>关联

 

 Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)   双链RNA Metafectene PRO Q. Wang 等人, PLoS ONE, 2013, 8(11): e79381, doi:10.1371/journal.pone.0079381   关联

 

 爪蟾XCT细胞   质粒 Metafectene PRO M. Dubinska-Magiera 等，Protoplasma，2016，253：943-956；DOI 10.1007/s00709-015-0861-y   关联

 

 Plutella xylostella，早期三龄幼虫（菱背蛾或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO 阿里先生等人，无脊椎动物病理学杂志，2012，110：389–397，doi.org/10.1016/j.jip.2012.05.003    

 

 小鼠原代肝细胞   质粒 Metafectene PRO JS Park 等人，BMC Res Notes，2011 年 1 月；4:8    

 

 Plodia interpunctella 幼虫（印度粉蛾）   双链RNA Metafectene PRO G. Deok Han 等人，Pesticide Biochem。和生理学，2017 年 11 月，143：48-56，doi.org/10.1016/j.pestbp.2017.09.010    

 

 小鼠足细胞   siRNA K2转染系统 F. Kliewe 等人，科学报告，nature.com，7：9916，DOI：10.1038/s41598-017-10116-4   关联

 

 Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）   双链RNA Metafectene PRO Z. Guo 等人，2015，PLoS Genet 11(4)：e1005124。doi:10.1371/journal.pgen.1005124   关联

 

 从新生儿包皮中分离的人角质形成细胞   siRNA Metafectene S. Bruche，博士论文，2014，伦敦帝国理工学院   关联

 

 Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）   双链RNA Metafectene PRO A. Al Baki 等人，Pest Manag。科学，2020，76：1020–1030，DOI：10.1002/ps.5612   关联

 

 Tribolium castaneum（晚龄幼虫的血腔）   质粒 Metafectene PRO R. Hepat 等人，J. Virol.，2013 年 10 月，第 87 卷，第 20 期，11223–11230   关联

 

 L5D1 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel   双链RNA Metafectene PRO MA Al Baki 等人，公共​​科学图书馆 ONE，2018 年，13 (10)：e0204935，doi.org/10.1371/journal。pone.0204935   关联

 

 4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射   siRNA Metafectene S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109   关联

 

 晚二龄幼虫小菜蛾血腔   双链RNA Metafectene PRO S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017    

 

 小鼠培养的海马神经元   质粒 Metafectene PRO A. Schneider, 论文, 2018, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg  

 

 

 

 

德国Biontex转染试剂简介

发表于由

 

德国Biontex转染试剂简介
Biontex 公司成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried，专注于转染试剂的研发和应用。

（一） K2® Transfection System ，Biontex最新产品
全新高效的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具



产品特点：


真核细胞依赖自身的先天性免疫系统，能够识别并抑制外来物质（如脂多糖、细菌、病毒核酸及蛋白质）的入侵。此外，细胞还可以将这些外来物质的信息通过信号分子传导给相邻的细胞，使这些临近细胞在无需接触病原体的情况下产生防御体系。
为降低细胞自身的免疫反应，提高基因转染效率，Biontex公司最新开发了K2® Transfection System，由K2® Transfection Reagent 和 K2® Multiplier两部分组成。K2® Transfection Reagent是一种高效的阳离子脂质，而K2®Multiplier则可以降低细胞对外来核酸及脂质体的免疫反应。

应用实例1：

K2转染pCMV-GFP的效率® 转染系统和Metafectene Pro与几种细胞系的市售转染试剂L2k进行了比较。

应用实例2：


产品订购信息：

产品名称 货号 规格
K2® Transfection System T060-8.0 1.5 ml Transfection reagent
6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System T060-8.2 2 X 1.5 ml Transfection reagent
2 X 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System T060-8.5 5 X 1.5 ml Transfection reagent
5 X 6.5 ml Multiplier




（二）METAFECTENE® SI+
特别适合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效转染试剂

特点:

METAFECTENE® SI+是一种脂质复合物，经特殊优化适用于siRNA和microRNA转染（siCOM技术），综合了Biontex公司RMA和TOP技术的特点，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等优点，适用于所有细胞系和原代细胞。

siCOM技术(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA转染试剂，本技术不需要将siRNA和miRNA转运到细胞核。因此，METAFECTENE® SI+主要目的在于大化的内吞作用并快速*释放RNA进入细胞质。

转基因HeLa-GFP细胞GFP表达序列的研究® SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可见的是GFP表达在72小时内下降到最大值。


产品订购信息：

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® SI+ T100-1.0 1 ml RNA transfection reagent
2 ml SI+ buffer (10x)
METAFECTENE® SI+ T100-2.0 2 X 1 ml RNA transfection reagent
2 X 2 ml SI+ buffer (10x)
METAFECTENE® SI+ T100-5.0 5 X 1 ml RNA transfection reagent
5 X 2 ml SI+ buffer (10x)





（三） METAFECTENE® EASY
更快、更简便、更高效的转染技术

特点：


在开发第二代DNA转染试剂（METAFECTENE®及其升级版本METAFECTENE®PRO）的时候，Biontex的主要目标是大化转染效率(RMA技术)和最小化毒性作用(TOP技术)。进一步开发的Biontex FEE技术预示着第三代质粒转染试剂的开始：METAFECTENE®EASY+。

FEE技术
FEE技术是优化的具更高转染效率的技术，通过固定DNA /脂质体比率和转染复合物体积而适用于广泛的细胞类型。不需要针对每种细胞类型进行费时、费力的条件优化。

变质体® EASY的转染效率与METAFECTENE相当® 无需优化DNA/脂质体（深蓝色柱：COS-7，浅蓝色柱：HeLa细胞）。

产品订购信息：

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® EASY+ T090-1.0 1 ml Transfection reagent
2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE® EASY+ T090-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
2 X 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE® EASY+ T090-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent
5 X 2 ml EASY+ buffer (10x)





（四）METAFECTENE® PRO
真核细胞的高效、低毒性转染试剂

METAFECTENE® PRO是针对哺乳动物细胞的新一代转染试剂。采用毒性优化技术（TOP技术），Biontex成功地降低了转染试剂对细胞的毒性，并显著提高DNA进入细胞的效率。除了能加强细胞的转染效率之外，METAFECTENE® PRO的另一个主要特点是提高细胞内基因的表达。


TOP技术(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是现代转染试剂达到效率和广泛应用性的首要前提条件。TOP技术的基本准则是模拟物质天然结构，加强生物降解能力，提高细胞耐受性。另外，通过物理化学修饰，降低脂质复合体的稳定性，从而促进DNA在细胞质的释放。


METAFECTENE转染效率的比较® PRO与各种细胞系（代谢物）® 100%)

产品订购信息：

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® PRO T040-1.0 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® PRO T040-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® PRO T040-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent




（五）METAFECTENE®



RMA技术(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解（RMA）技术，一方面能促进细胞内涵体中“质子海绵”的活性，另一方面能促进脂质体复合物分解，通过小片段质子化结构模拟磷脂结构。当内涵体处于酸性环境时，正电荷累积在脂质体复合物的磷脂双分子结构中，通过电荷的排斥力，这些电荷最终引起脂质体复合物的分解，同时高效地将DNA/RNA释放到细胞质中。
最后，胞质中非络合的DNA/RNA急剧增多，以DNA为例，这个结果导致其在胞质中的活性显著提升，DNA与细胞核接触的可能性增加，从而大大提高转染效率。

产品订购信息：

产品名称 货号 规格
METAFECTENE® T020-1.0 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® T020-2.0 2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE® T020-5.0 5 X 1 ml Transfection reagent



其他相关产品：

产品名称 产品介绍 规格 货号
METAFECTENE®FluoR 转染全过程可视化
低毒性：维持细胞最佳形态
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0.5 ml

1.0 ml

T050-0.5

T050-1.0
INSECTOGENE 简便、高效地转染昆虫细胞生产重组蛋白；
与杆状病毒表达系统兼容；
耐受血清抑制；
快速，操作简便；
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应用：昆虫细胞转染

1 ml

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DOTAP 第一代转染试剂
用于DNA或者反义核苷酸寡聚体转染哺乳动物细胞。价格便宜，已被大量文献报道。

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PROTEOfectene® 快速、高效的蛋白转染试剂
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低毒性，耐受血清抑制

0.1 ml

0.25 ml

0.5 ml

E010-0.1

E010-0.25

E010-0.5
PROTEOfectene®AB 快速、高效的蛋白转染试剂
广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型
低毒性，全血清耐受
具有所有同型抗原的单克隆/多克隆抗体

0.1 ml

0.25 ml

0.5 ml

E020-0.1

E020-0.25

E020-0.5


二、自主生产的转染试剂：HTfect transfection kit

HTfect transfectionKit是盎然生物技术有限公司研发的一种高效、低毒、廉价且重复性好的新型转染试剂，适用于大部分细胞类型。本产品特别适合于HEK293、HeLa、HT1080等细胞的转染，在重组蛋白表达，病毒包装， microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等实验中用途广泛。同时，本产品也不受血清的干扰，实验操作简单。
产品优势

使用实例
用HTfect transfection kit 将3 μgpLVX-cmyc-EGFP质粒转染HEK293细胞，两天后使用Olympus倒置荧光显微镜（IX71）进行观察和拍照。（左图为明场细胞图像，右图为绿色荧光细胞图像）。


产品订购信息：

产品名称 货号 规格
Htfect transfection kit AB-TP1001 Sol.A 1.25 ml
Sol.B 20 ml
Htfect transfection kit AB-TP1002 Sol.A 2.5 ml
Sol.B 40 ml
Htfect transfection kit AB-TP1003 Sol.A 5 ml
Sol.B 80 ml
    1. 通过抑制细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率，特别适用于转染人类细胞
    2. 多数情况下，比其他常见转染试剂（如，Lip2K）有更高转染效率
    3. 细胞毒性较低
    • 整合了RMA和TOP技术
    • 沉默效率更高，siRNA用量更少
    • 操作简便、快速，适合大规模筛选
    1. 快速：一次转染实验只需3天
    2. 简便：优化条件时，只需摸索两个固定的 DNA:lipid比例
    3. 高效：升级产品提高了转染效率，进一步降低毒性
    4. 经济：EASY+的显著特征，EASY+降低了核酸复合物(DNA +脂质)所需要的体积，节约至少50%的成本
    1. METAFECTENE®是一种基于脂质体的包含阳离子和中性脂质的复合物，在DNA转染哺乳动物细胞时达到很高的转染效率。属于第二代转染试剂。
    2. RMA技术是高效转染率的保证。另外，METAFECTENE®的低毒性和耐受血清抑制等特性使其具有广泛的应用空间。
    1. 转染效率高，尤其对HEK293T细胞的转染效率高达95%以上。
    2. 细胞毒性小，显著低于L2K等试剂。
    3. 转染过程中无需更换无血清培养液，操作简单。
    4. 性价比高，特别适合大规模转染实验，如表达重组蛋白或者包装病毒等。
    5. 结果重复性好。

biontex2022年价格表，欢迎选购！

发表于由

Biontex Laboratories GmbH 成立于 1997 年，是一家基因工程领域的创新生物技术公司。该公司的业务重点是产品开发，允许将遗传物质（转染）和蛋白质（蛋白转染）有效地引入真核细胞，并以易于处理、低毒和高效为前景。

我们目前的研究重点是开发克服先天免疫系统的全新策略，先天免疫系统被认为是成功转染的障碍。我们的最终目标是为所有细胞类型提供量身定制的转染系统。

上海金畔生物biontex2022年价格表，欢迎选购！

Cat.No. Product Group: Buffer Systems  Final Customer 
EA010-2.0 10x EASY-buffer 2 ml  $34.00 
SI010-2.0 10x SI-buffer 2 ml  $34.00 
Cat.No. Product Group: Gene Transfection  Final Customer 
T010-1.0 DOTAP 1 x 1 ml  $107.00 
T010-2.0 DOTAP 2 x 1 ml  $179.00 
T010-5.0 DOTAP 5 x 1 ml  $354.00 
T030-1.0 INSECTOGENE 1 x 1 ml  $180.00 
T030-2.0 INSECTOGENE 2 x 1 ml  $329.00 
T030-5.0 INSECTOGENE 5 x 1 ml  $730.00 
T020-1.0 METAFECTENE® 1 x 1 ml  $209.00 
T020-2.0 METAFECTENE® 2 x 1 ml  $382.00 
T020-5.0 METAFECTENE® 5 x 1 ml  $855.00 
T090-1.0 METAFECTENE® EASY+ 1 x 1 ml  $295.00 
T090-2.0 METAFECTENE® EASY+ 2 x 1 ml  $553.00 
T090-5.0 METAFECTENE® EASY+ 5 x 1 ml  $1,836.00 
T100-1.0 METAFECTENE® SI+ 1 x 1 ml  $312.00 
T100-2.0 METAFECTENE® SI+ 2 x 1 ml  $598.00 
T100-5.0 METAFECTENE® SI+ 5 x 1 ml  $1,387.00 
T040-1.0 METAFECTENE® PRO 1 x 1 ml  $257.00 
T040-2.0 METAFECTENE® PRO 2 x 1 ml  $500.00 
T040-5.0 METAFECTENE® PRO 5 x 1 ml  $1,162.00 
T050-0.5 METAFECTENE® FluoR 1 x 0.5 ml  $148.00 
T050-1.0 METAFECTENE® FluoR 1 x 1 ml  $255.00 
T060-0.75 K2® Transfection System 1 x 750 µl  $220.00 
T060-1.0 K2® Transfection System 1 x 1.5 ml  $374.00 
T060-2.0 K2® Transfection System 2 x 1.5 ml  $704.00 
T060-5.0 K2® Transfection System 5 x 1.5 ml  $1,650.00 
T080-1.0 K4® Transfection System 1 x 1 ml  $248.00 
T080-2.0 K4® Transfection System 2 x 1 ml  $468.00 
T080-5.0 K4® Transfection System 5 x 1 ml  $1,100.00 
T082-1.0 3.5 ml K4® Multiplier  $109.00 
T082-2.0 2 x 3.5 ml K4® Multiplier  $198.00 
Cat.No. Product Group:  Mycrolasmafree Cell Culture   Final Customer 
M020-025 MycoSPY® Master Mix 25 assays  $160.00 
M020-050 MycoSPY® Master Mix 50 assays  $275.00 
Cat.No. Product Group: Gene Transfection  Final Customer 
E010-0.1 PROTEOfectene® 1 x 100 µl  $299.00 
E010-0.25 PROTEOfectene® 1 x 250 µl  $610.00 
E020-0.1 PROTEOfectene® AB 1 x 100 µl  $299.00 
E020-0.25 PROTEOfectene® AB 1 x 250 µl  $610.00 
Cat.No. Product Group: µ-Transfection Kits  Final Customer 
K010-0.1 µ-Transfection Kit VI  $598.00 
K020-0.1 µ-Transfection Kit VI FluoR  $686.00 
K030-0.25 µ-Proteofection Kit VI  $1,066.00 
K040-0.25 µ-Proteofection Kit VI AB  $1,066.00 
Cat.No. Product Group: Test samples / -kits  Final Customer 
T060-0.2 K2® Transfection System 1 x 200 µl  $-   
T080-0.2 K4® Transfection System 1 x 200 µl  $-   
T082-0.5 K4® Multiplier  $-   
T020-0.2 METAFECTENE® 1 x 200 µl  $-   
T040-0.2 METAFECTENE® PRO 1 x 200 µl  $-   
T100-0.2 METAFECTENE® SI+ 1 x 200 µl  $-   

Biontex代理

发表于由

Biontex代理

Biontex是一家基因工程领域的公司。它成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried。Biontex公司主要致力于转染载体方面的研究。其目标是想通过改进自己的核酸运载载体和蛋白运载载体不断加强在转染技术方面的优势从而开发大量的高质量的基因工程产品。目前，公司主打的产品是一种能适用所有类型细胞并且在体内和体外都能高效转染的不引起免疫反应的合成转染载体。Biontex除了转染试剂外，还提供无支原体的细胞培养试剂、支原体去除和检测产品、用于蛋白表达纯化的介质——固相琼脂糖。

Biontex常卖产品：

货号 品名 规格 品牌
T040-1.0 METAFECTENERPRO 1ml biontex
T080-1.0 K4® Transfection System 1x1ml biontex
T010-1.0 DOTAP 1x1ml biontex
T030-1.0 INSECTOGENE 1x1ml biontex
T060-1.0 K2 Transfection System 1.5ml biontex

biontex Proteofection常见问题解答

发表于由

biontex Proteofection常见问题解答

Proteofectene® 和 Proteofectene®AB 有什么区别？

PROTEOfectene®和PROTEOfectene® AB是含有 Proteofectene®AB 的脂质制剂，专为抗体的蛋白转染而开发。

► Proteofection 使用的蛋白质或抗体必须具有什么样的质量？

您感兴趣的蛋白质或抗体中存在的任何杂质、污染物或添加剂都可能影响PROTEOfectene®或PROTEOfectene® AB 的递送效率。因此，使用尽可能纯的蛋白质/抗体。
如果与感兴趣的蛋白质相比存在过多的稳定剂，例如去污剂，则可以抑制递送。稳定剂如甘油或其他类似的添加剂不会干扰蛋白质的传递。

► BSA 是否会干扰 Proteofectene AB 的 Proteofection？

抗体溶液中的 BSA 会抑制抗体递送！0.1% 到 2% BSA 是抗体溶液中的常见浓度——这意味着 1 mg/ml 到 20 mg/ml。在这些溶液中，BSA 的比例大大超过了抗体。BSA 在抗体PROTEOfectene® AB 复合物形成期间与抗体竞争，因此抑制抗体递送。

► 防腐剂会干扰 Proteofect 吗？

如果防腐剂如叠氮化纳以高浓度存在，则可能会导致细胞毒性。如有必要，可通过透析去除。

► 什么是 Proteofectene® Reagent，它是如何工作的？

PROTEOfectene®是一种基于脂质的制剂，可与蛋白质形成非共价复合物。这些复合物被细胞内化，蛋白质被释放到细胞质中。
只需将您感兴趣的蛋白质与PROTEOfectene®在 1xPBS 中孵育10-15 分钟，用无血清培养基稀释，然后将混合物应用于您的细胞，3-48 小时后，您就可以检测蛋白质活性了。

► 用 Proteofectene® 和阳性对照 R–藻红蛋白对我的细胞进行蛋白转染是成功的，但用我的蛋白质进行的蛋白转染不起作用！

由于它们的特定特性，某些蛋白质可能无法通过PROTEOfectene®有效递送。因此，在生理条件下带正电荷的碱性蛋白质很难被引入细胞。另一个原因可能是前蛋白的杂质（例如去污剂、防腐剂、稳定剂）。

► 为什么要直接对纯化的蛋白质进行 proteofect？

与使用转染 DNA 的基因表达研究相比，蛋白质转染 (Proteofection) 的速度非常快，因为它绕过了转录和翻译等细胞过程。此外，避免了潜在有害的随机 DNA 整合到目标细胞的基因组中。PROTEOfectene®可以将活性蛋白质直接输送到细胞中，用于涉及细胞周期、细胞凋亡和许多其他因素的各种问题的研究。

► 为什么 Proteofectene® 试剂盒中包含 R–藻红蛋白？

R-藻红蛋白 (100 µg/ml) 与PROTEOfectene® 一起提供作为阳性对照。以 1:2 的蛋白质：脂质比使用它（对于 1 μg 蛋白质，需要2 μl PROTEOfectene®）。
R 藻红蛋白已被输送到许多不同的细胞中，因此成功输送的可能性很高。提供此对照蛋白是为了帮助您设置实验，并且应该用于您实验的每个新细胞系。如果细胞毒性是一个问题，阳性对照使用户能够确定递送的蛋白质是否影响细胞活力。

► 为什么 FITC-IgG 包含在 Proteofectene®AB 试剂盒中？

FITC 标记的 IgG（阳性对照，100 μg/ml）是一种荧光标记的抗体（免疫球蛋白）作为阳性对照。以 1:1 – 1:2 的抗体：试剂比例使用（对于 1 μg 抗体，需要 1-2 μl PROTEOfectene® AB）。提供此对照抗体是为了帮助您设置实验，并且应该用于您实验的每个新细胞系。FITC-IgG 已被输送到许多不同的细胞中；因此，成功运输的可能性很高。

 

Biontex2024年价格表

发表于由

Biontex2024年价格表

Biontex是一家基因工程领域的高新技术公司。它成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried。Biontex公司主要致力于转染载体方面的研究。其目标是想通过改进自己的核酸运载载体和蛋白运载载体不断加强在转染技术方面的优势从而开发大量的高质量的基因工程产品

目前，公司主打的产品是一种能适用所有类型细胞并且在体内和体外都能高效转染的不引起免疫反应的合成转染载体。　　 　　

Biontex除了独步的转染试剂外，还提供无支原体的细胞培养试剂、支原体去除和检测产品、用于蛋白表达纯化的介质——固相琼脂糖。简而言之，biontex公司的所有产品都是围绕的显微成像技术而展开的。

特别告知：为保证产品质量与良好性能，所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用！！！本次报价有效时间为2024年1月16日—2024年12月14日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
T040-1.0 METAFECTENE® PRO 1 x 1 ml 1x1ml 3780 biontex 4-5周 上海金畔生物
T060-1.0 K2® Transfection System 1 x 1.5 ml 1×1.5ml 5502 biontex 4-5周 上海金畔生物
T080-1.0 K4® Transfection System 1 x 1 ml 1x1ml 3640 biontex 4-5周 上海金畔生物
T010-1.0 DOTAP 1 x 1 ml 1x1ml 1568 biontex 4-5周 上海金畔生物
T020-1.0 METAFECTENE® 1 x 1 ml 1x1ml 3066 biontex 4-5周 上海金畔生物
T030-1.0 INSECTOGENE 1 x 1 ml 1x1ml 2646 biontex 4-5周 上海金畔生物
EA010-2.0 10x EASY-buffer 2 ml 2ml 504 biontex 4-5周 上海金畔生物
SI010-2.0 10x SI-buffer 2 ml 2ml 504 biontex 4-5周 上海金畔生物
T010-2.0 DOTAP 2 x 1 ml 2x1ml 2632 biontex 4-5周 上海金畔生物
T010-5.0 DOTAP 5 x 1 ml 5x1ml 5208 biontex 4-5周 上海金畔生物
T030-2.0 INSECTOGENE 2 x 1 ml 2x1ml 4830 biontex 4-5周 上海金畔生物
T030-5.0 INSECTOGENE 5 x 1 ml 5x1ml 10738 biontex 4-5周 上海金畔生物
T020-2.0 METAFECTENE® 2 x 1 ml 2x1ml 5614 biontex 4-5周 上海金畔生物
T020-5.0 METAFECTENE® 5 x 1 ml 5x1ml 12572 biontex 4-5周 上海金畔生物
T090-1.0 METAFECTENE® EASY+ 1 x 1 ml 1x1ml 4340 biontex 4-5周 上海金畔生物
T090-2.0 METAFECTENE® EASY+ 2 x 1 ml 2x1ml 8134 biontex 4-5周 上海金畔生物
T090-5.0 METAFECTENE® EASY+ 5 x 1 ml 5x1ml 26992 biontex 4-5周 上海金畔生物
T100-1.0 METAFECTENE® SI+ 1 x 1 ml 1x1ml 4592 biontex 4-5周 上海金畔生物
T100-2.0 METAFECTENE® SI+ 2 x 1 ml 2x1ml 8792 biontex 4-5周 上海金畔生物
T100-5.0 METAFECTENE® SI+ 5 x 1 ml 5x1ml 20384 biontex 4-5周 上海金畔生物
T040-2.0 METAFECTENE® PRO 2 x 1 ml 2x1ml 7350 biontex 4-5周 上海金畔生物
T040-5.0 METAFECTENE® PRO 5 x 1 ml 5x1ml 17080 biontex 4-5周 上海金畔生物
T050-0.5 METAFECTENE® FluoR 1 x 0.5 ml 1×0.5ml 2170 biontex 4-5周 上海金畔生物
T050-1.0 METAFECTENE® FluoR 1 x 1 ml 1x1ml 3752 biontex 4-5周 上海金畔生物
T060-0.75 K2® Transfection System 1 x 750 µl 1x750ul 3234 biontex 4-5周 上海金畔生物
T060-2.0 K2® Transfection System 2 x 1.5 ml 2×1.5ml 10346 biontex 4-5周 上海金畔生物
T060-5.0 K2® Transfection System 5 x 1.5 ml 5×1.5ml 24248 biontex 4-5周 上海金畔生物
T080-2.0 K4® Transfection System 2 x 1 ml 2x1ml 6874 biontex 4-5周 上海金畔生物
T080-5.0 K4® Transfection System 5 x 1 ml 5x1ml 16170 biontex 4-5周 上海金畔生物
T082-1.0 3.5 ml K4® Multiplier 3.5ml 1596 biontex 4-5周 上海金畔生物
T082-2.0 2 x 3.5 ml K4® Multiplier 2×3.5ml 2912 biontex 4-5周 上海金畔生物
M020-025 MycoSPY® Master Mix 25 assays 25assays 2352 biontex 4-5周 上海金畔生物
M020-050 MycoSPY® Master Mix 50 assays 50assays 4046 biontex 4-5周 上海金畔生物
E010-0.1 PROTEOfectene® 1 x 100 µl 1x100ul 4396 biontex 4-5周 上海金畔生物
E010-0.25 PROTEOfectene® 1 x 250 µl 1x250ul 8960 biontex 4-5周 上海金畔生物
E020-0.1 PROTEOfectene® AB 1 x 100 µl 1x100ul 4396 biontex 4-5周 上海金畔生物
E020-0.25 PROTEOfectene® AB 1 x 250 µl 1x250ul 8960 biontex 4-5周 上海金畔生物
K010-0.1 µ-Transfection Kit VI kit 8792 biontex 4-5周 上海金畔生物
K020-0.1 µ-Transfection Kit VI FluoR kit 10080 biontex 4-5周 上海金畔生物
K030-0.25 µ-Proteofection Kit VI kit 15666 biontex 4-5周 上海金畔生物
K040-0.25 µ-Proteofection Kit VI AB kit 15666 biontex 4-5周 上海金畔生物
T060-0.2 K2® Transfection System 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 4-5周 上海金畔生物
T080-0.2 K4® Transfection System 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 4-5周 上海金畔生物
T082-0.5 K4® Multiplier ea 0 biontex 4-5周 上海金畔生物
T020-0.2 METAFECTENE® 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 4-5周 上海金畔生物
T040-0.2 METAFECTENE® PRO 1 x 200 µl 1x200ul 0 biontex 4-5周 上海金畔生物



关键词：Biontex、转染载体、细胞培养试剂、支原体去除、固相琼脂糖

biontex2022价格表

发表于由

     2018德国慕尼黑Biontex 转染试剂 成立于1997年，是一家基因工程领域的创新型生物技术公司。该公司的业务重点是产品开发，允许将遗传物质（转染）和蛋白质（蛋白质转染）有效引入真核细胞，并且易于操作，低毒和高效。biontex是我们经销的品牌之一。      https://www.biontex.com/asia/，Biontex Laboratories GmbH.

更多报价欢迎下载附件。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 报价来源
EA010-2.0 10x EASY-buffer 2ml 476 biontex 4-6周 上海金畔生物
SI010-2.0 10x SI-buffer 2ml 476 biontex 4-6周 上海金畔生物
T010-1.0 DOTAP 1x1ml 1498 biontex 4-6周 上海金畔生物
T010-2.0 DOTAP 2x1ml 2506 biontex 4-6周 上海金畔生物
T010-5.0 DOTAP 5x1ml 4956 biontex 4-6周 上海金畔生物
T030-1.0 INSECTOGENE 1x1ml 2520 biontex 4-6周 上海金畔生物
T030-2.0 INSECTOGENE 2x1ml 4606 biontex 4-6周 上海金畔生物
T030-5.0 INSECTOGENE 5x1ml 10220 biontex 4-6周 上海金畔生物

biontex转染常见问题解答

发表于由

biontex转染常见问题解答

 “先天免疫系统”对合成载体系统的转染有什么作用？

先天免疫系统能够检测所谓的“病原体相关分子模式”（PAMP）。这些包括例如细胞外源核酸。取决于细胞类型的“先天免疫系统”有多明显，它启动针对假定病原体的防御措施的能力也越大。这导致了K2® 转染系统和后来的K4® 转染系统的开发。

► 决定细胞是否容易、难或不可能转染 DNA 的因素有哪些？

使用化学转染方法，特定细胞类型进行内吞作用和增殖的能力发挥了关键作用，因为脂质复合物/复合物最初通过内吞作用逃逸到细胞质中，然后从内体中释放出来。如果在分裂过程中核膜在短时间内是可渗透的，则脂质复合物/复合物或解复合的 DNA 只能渗透到细胞核（即克服“核屏障”）。如果这两个过程中的一个以不完善的形式发生，即使转染方法的应用是最佳的，也可能相应地降低转染效率。因此，低增殖或无增殖的细胞（如原代细胞或神经细胞）或内吞活性低的细胞（如 Jurkat 细胞）被认为难以转染也就不足为奇了。另一个关键因素是先天免疫系统，它针对每种细胞类型的发展各不相同。细胞能够检测外来核酸并进入防御状态。具有低发育先天免疫系统的细胞（例如 HEK293 细胞）因此易于转染，而具有强发育免疫系统的细胞（例如 Jurkat 细胞）则难以转染。
一个加剧的因素是，上面给出的这些现象可能不仅在细胞类型与细胞类型之间*不同，而且在同一细胞类型的不同基因型之间也可能*不同。不同大学甚至同一机构内不同工作组的同名细胞中可能会出现不同的行为，也可以在细胞系的长期传代过程中观察到。这种复杂性将协议参数从一个用户传输到另一个用户的选项减少到最小，即使显然涉及相同的细胞类型。

► 我一直使用不同的转染试剂。我现在可以使用 Metafectene 和我的旧试剂相同的优化方案吗？

不; 每个转染试剂都有一组特定的属性，包括：

大肠杆菌的特定组成和比例
每个分子的特定净载量和 pH 值
聚集体稳定性/脂质复合物稳定性

这些不同的特性对它们与 DNA 和所讨论的细胞类型的相互作用有直接和特定的影响。因此，协议参数不能从一种试剂转移到另一种试剂。

► 能​​否预测特定细胞类型的转染能力？

不，这是不可能的。每种细胞类型和每种转染试剂的高度特异性特性之间的相互作用非常复杂，以致于对转染效率的预测是徒劳的。另一方面，经验值表明，例如静止细胞、悬浮细胞和原代细胞通常难以转染。但没有规则无一​​例外。

► 获得最佳 DNA 转染结果的理想细胞培养条件是什么？

用合成载体系统转染 DNA 的一个基本原则是，这种材料只能在细胞分裂过程中穿透“核屏障”。作为不可避免的结果，必须遵守以下几个方面：
细胞培养传代数不应超过 30 次。每次传代都会发生一定的遗传分化；这意味着最能抵抗传代压力的细胞将不成比例地增殖。此外，细胞培养基的成分会改变细胞的生理状态，因为细胞会根据现有的营养条件调整自身。这导致与原始细胞的遗传差异逐渐扩大。
转染时细胞应尽可能快地生长。细胞应保持在高增殖状态，称为对数期或指数期。通过选择适合快速增殖的培养基并为要使用的细胞类型和适当的格式创建生长曲线，从而为接种和生长持续时间设置最佳细胞数量，可以最容易地实现这一阶段。由于生长抑制，定期保持在汇合条件下的细胞只有在经过几次传代后才能恢复其全部生长潜力。
 

 
光学汇合与实际汇合不同。上面的生长曲线表示目视确定的汇合（覆盖整个生长表面）对应于实际汇合（生长曲线的第 5 阶段）的程度。这两个汇合值通常有显着差异。以图中所示的 COS7 细胞为例，很明显，在最常见的情况下，仅实现了早期生长期 3。出于这个原因，如果要在贴壁细胞上执行该过程，作为规则，细胞在转染当天应具有约 90% 的视觉确定的汇合度。
 

 

► 如何确定脂质复合物形成的最佳参数？

脂质复合物的形态一方面与阳离子脂质的类型和所用转染试剂的脂质组成密切相关，另一方面与遗传物质与转染试剂的比例密切相关。每种细胞类型都显示出特定的转染能力，具体取决于产生的脂质复合物形态
。可以通过应用优化过程确定以下最佳转染参数：
首先必须确定 DNA/RNA 与脂质的最佳比例。通常认为，脂质复合物需要净正电荷才能与带负电荷的细胞膜表面静电相互作用，以实现成功的内吞吸收。在大多数情况下，这个比例大约为 1-7µl 脂质对 1µg DNA/RNA。
第二个关键因素是每个细胞的 lipoplex 量；如果这太高，产生的毒性会过度补偿转染的成功。因此应改变脂质复合物的量以反映已知的 DNA/RNA 与脂质的最佳比例。

► 我已经注意到我的转染过程中的毒性作用。原因是什么？

阳离子脂质能够扩散到细胞膜中并使其不稳定。随着脂质复合物中脂质含量的增加，这可能是毒性增加的主要原因。出于这个原因，与 DNA/RNA 量相关的高水平脂质只能在有限的范围内使用。
由于未知的原因，脂质复合物对细胞的毒性影响比转染试剂本身要大得多。
必须假设先天免疫系统在检测到细胞内的外来核酸后触发细胞凋亡，这很难与毒性相区分。
这导致了第二个限制：过多的 lipoplex 水平会损害转染成功。毒性的另一个原因可能是通过表达或抑制的蛋白质本身进行所需的细胞操作，这可能对细胞生理学产生重大影响。在这种情况下，最佳转染可能会导致高细胞死亡率，这只能通过下调转染效率来避免。

► 培养基中使用的培养基和血清如何影响转染成功？

细胞培养中使用的血清（例如 FCS、FBS）是一种高度复杂的不确定混合物，由水溶性血液成分（如生长因子和营养物质）组成，并且总是对转染成功有重大影响。
血清具有广泛的脂质复合物抑制特性。因此，在脂质复合物形成（结合转染试剂和遗传物质）期间不得存在血清。
用这些转染试剂形成的脂质复合物可以与含血清的细胞培养基一起添加到细胞中，而不会影响转染结果。事实上，当存在血清时，这些试剂会定期提供更高水平的转染效率。
血清支持细胞生长行为。其成分，如生长激素，可显着促进待转染细胞的生长和细胞分裂率，从而显着提高转染效率。在选择合适的细胞培养基时，还应考虑细胞的增殖行为。如果存在多种可能性，则应选择细胞增殖率最高的培养基。
由于血清的保质期极其有限（最长 1 个月），应注意所用血清在有效期内，因为使用过期血清会显着损害细胞所需的成分。在这种情况下，细胞显示出*不同和减少的生长模式（见图），并且无法再预期最佳转染结果。
血清的质量可能因批次而异。如果所有其他参数保持不变，成分的多样性会导致不同的转染结果。

► 支原体对转染成功有影响吗？

是的，因为细胞培养物的任何污染，无论是真菌、病毒还是细菌，都会对转染结果产生重大影响，通常会导致整个细胞培养物死亡。由于支原体污染具有不可见且不会导致细胞死亡的特殊特性，因此污染可能会在很长一段时间内未被发现。然而，这些细菌对转染成功有广泛的影响：
由于精氨酸需求增加，细胞生长显着降低（见图）
支原体被先天免疫系统识别并调节细胞因子的产生
支原体引起染色体畸变
支原体滞留在细胞膜中并可能调节细胞膜过程，如内吞作用。
有和无支原体污染的 HeLa 细胞的不同细胞生长：
 

 
支原体污染对转染效率的影响：
 

 
在 48 孔板上用 pCMVßgal 转染 HeLa 和 HepG2 细胞。通过 ONPG 和 BCA 分析评估比吸收值。下图显示了支原体污染对 HeLa 和 HepG2 细胞的广泛影响（未污染细胞效率的 17% 和 5.6%）：

支原体可以在几乎所有已知的细胞类型中增殖，因此无处不在。据估计，大约 80% 的日本细胞培养物、65% 的阿根廷细胞培养物和 15% 的美国细胞培养物被支原体污染。主要来源是实验室工作人员以及胰蛋白酶和血清，它们是从动物来源分离的细胞培养添加剂。

► 我如何确定我的细胞是否被支原体污染，如果是这种情况该怎么办？

一种长期存在的支原体检测方法是 DAPI 染色。然而，由于其极低的检测灵敏度，该方法仅显示出显着水平的污染。PCR 方法明显更灵敏，因此是检测方法。Biontex 提供基于 PCR 的检测试剂盒MycoSPY®和MycoSPY® Master Mix，它们甚至可以识别支原体基因组的单个拷贝。如果细胞培养物受到污染，我们建议使用MycoRAZOR®进行处理。

► DNA/RNA 的类型及其质量对转染成功有什么影响？

基本上，具有更高纯度的遗传材料将始终提供更好的转染结果。需要特别注意的一个因素是被称为内毒素的脂多糖污染。它们在制造过程中由细菌引入，即使以微量存在，也会被先天免疫系统检测到，从而显着损害转染过程。应注意遗传材料的清洁包括去除内毒素，可提供商业试剂盒。不建议将基于“小量制备方案”的质粒清洗用于转染目的，因为遗传物质的特定结构直接影响转染成功：
由于启动子具有特定的表达率，因此细胞具有特征量或每单位时间的表达产物量。
根据细胞类型，待表达基因或产生的蛋白质的特定特征可能显着影响细胞的生理学，甚至导致细胞死亡。

遗传物质的尺寸和三级结构也会影响潜在的转染成功。一般来说，以下原则适用：
细胞的转染能力随遗传物质的量而下降
超螺旋质粒在瞬时转染中更有效，而线性 DNA 更适合于稳定转染。

► 我计划更改为不同的细胞培养格式。我应该注意什么？

Lipoplexes 粘附在细胞培养容器的自由塑料表面上，因此在转染过程中丢失。这就是为什么不能简单地将针对特定容器格式确定的最佳参数与其他容器格式成比例地应用的原因。
使用的容器规格越小，lipoplex 的量/mm² 就必须越高。当从 6 孔培养皿缩小到 96 孔格式时，必须使用大约三倍于 lipoplex / cm² 的量才能实现可比的转染效率。

► Biontex 是否提供针对特定细胞系和转染试剂的特定方案？

不。鉴于常见问题解答中给出的大量参数是成功转染的影响因素，很明显，提供通用的特定协议是徒劳的。我们网站上列出的已发表案例研究只能说明如何尽快实现成功转染，一般不能声称具有普遍适用性。最后可能需要在自己的实验室环境中进行优化。

► 某些手册中描述的冻融循环的作用是什么？

在室温或 4°C 下长期储存期间，脂质体制剂往往会凝结。这意味着大小分布向更大的脂质体移动，这可能对转染效率产生负面影响。冷冻和解冻脂质是一种已知的生产脂质体的方法，因此也可用于为某些转染试剂重建理想的脂质体大小分布。
为此目的，该试剂在冰箱中冷冻，然后在室温下解冻。软涡旋后，试剂再次储存在 4°C。建议在使用 METAFECTENE 转染试剂系列（METAFECTENE®、METAFECTENE® PRO、METAFECTENE® SI）和K2® 转染试剂/ K4® 转染试剂，两个月后。

► 转染试剂、核酸或脂质复合物的稀释溶液可以储存多长时间？

原则上，核酸和阳离子脂质或聚合物等带电分子倾向于粘附在玻璃和塑料表面。虽然在高浓度溶液的情况下由此产生的质量损失可以忽略不计，但用于形成脂质复合物的稀溶液的条件是不同的。根据我们的经验，这种影响是不可避免的。聚丙烯仍然是 lipoplex 形成容器的最佳可用材料（在聚苯乙烯和玻璃之前）。因此，应注意将稀释的溶液尽可能短地留在容器中。Lipoplexes 还倾向于粘附在塑料表面上，此外，还会“老化”。这意味着 lipopolex 聚集成更大的单元，在胞吞作用中不能被细胞吸收，这降低了它们的转染能力。因此，