biochain Z7030031用户手册和说明

小鼠内皮祖细胞体外生长

产品编号：Z7030031

介绍

内皮祖细胞（epc）是内皮细胞系中的一种原始细胞类型。它们是骨髓来源的细胞，具有类似于胚胎血管母细胞的特性。这些祖细胞迁移到血液中，能够分化成各种成熟的血管内皮细胞类型。

epc在血管生成和血管生成中起着重要作用。近的证据表明

epc在肿瘤生长和转移中的作用。epc数目的改变与淋巴瘤、多发性骨髓瘤、lewis肺癌和肝细胞癌（hcc）有关。在各种疾病的发病机制中，包括冠状动脉疾病（cad）、缺血、肺动脉高压、脑血管疾病、急性心肌梗死、糖尿病、关节炎和伤口愈合中，epc的数量和功能也发生了变化。此外，epc对衰老和吸烟相关疾病有影响，提示epc在这些领域有潜在的应用。

epoc的规范与表征

从7-8周龄c57/bl6小鼠骨髓中分离出生物链小鼠内皮生长细胞（mepoc），并进行体外培养。我们的mepoc产品在第9-10次传代时作为冷冻保存或增殖细胞交付。该细胞被认为是晚期epc，因为它是cd 133-。每个冷冻瓶在1毫升冷冻培养基中含有大于5 x 10 ⁵细胞。我们的mepocs具有与内皮祖细胞相同的纺锤状形态。

保管部

对于冷冻保存的细胞，在接收时立即将细胞从干冰转移到液氮中，并将细胞保存在液氮中，直到需要进行细胞培养进行实验。

航运

冷冻保存的细胞在干冰上运输；增殖细胞在室温下运输。

epoc培养说明

一、MEPOC生长培养基的制备

我们推荐使用Biochain的MEPOC生长培养基（CAT Z7030033）培养我们的MEPC。

一。在室温水浴中解冻MEPOC生长介质补充剂（CAT Z7030034）。

2.在Mepoc基本培养基（CAT Z7030035）的瓶子（500 ml）中加入整个体积（25 ml）的EPOC生长培养基补充剂，制备Mepoc生长培养基。生物链的mepoc生长培养基不含抗生素，但如果担心污染，可以在培养基中添加抗生素。

三。使用前，在37°C水浴中加热部分mepoc生长介质。

二。解冻冷冻细胞

一。在37°C水浴中加热EPOC生长培养基。

2.用70%乙醇擦拭冰冻小瓶的外部。在37°C的水浴中快速解冻冷冻细胞。

三。将细胞悬液无菌转移到15ml试管中。用1毫升生长培养基冲洗小瓶，并在15毫升试管中与细胞混合。以170克（或1400转/分）的速度离心5分钟，使细胞沉淀。除去上清液。加入5ml新鲜小鼠epc培养基，置于t25烧瓶中。

四。在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。每隔一天换一次。健康的培养物显示纺锤体形态，培养2-3天后细胞数量应加倍。

三、亚培养细胞

一。当细胞达到100%汇合时进行继代培养。

2.在通过细胞前一天更换培养基。

三。在37°C水浴中加热Dulbecco的PBS、0.05%胰蛋白酶/EDTA和MEPOC生长培养基。

四。用Dulbecco的PBS冲洗细胞。

5个。用胰蛋白酶/EDTA溶液（1.5毫升/25平方厘米）培养细胞3-5分钟，直到大约90%的细胞开始分离。轻轻地填充血管使细胞分离。

6.加入相当于胰蛋白酶/EDTA体积1/10的胎牛血清中和胰蛋白酶，轻轻摇动培养管混合。

7号。轻轻地重新悬浮细胞，并将细胞转移到15ml锥形管中。

8个。在室温下将细胞悬液在170 x g下离心5分钟。

9号。小心地去除上清液，不要干扰细胞颗粒。在生长培养基中重新悬浮细胞。

10个。将它们按1:5的比例放入新的培养皿中。

11号。在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。每隔一天换一次。

iv.在充满mepoc生长培养基的t25、t75、t125和t225烧瓶中提供增殖性epoc增殖性epoc。

当烧瓶到达时：

一。从烧瓶中倒出大部分培养基，并在烧瓶中留适量。

2.在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。第二天换成中号，以后每隔一天换一次。健康的培养基在培养2-3天后，纺锤形细胞形态和细胞数量应加倍。

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References

1. Asahara T, Murohara T, Sullivan A, Silver M, van der Zee R, Li T, Witzenbichler B, Schatteman G and Isner JM (1997). Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science. 275:964-967.

2. Gupta M (2007). Circulating endothelial cells and circulating endothelial cell progenitors as surrogate markers for determining response to antiangiogenic agents. Clin Colorectal Cancer 6(5):337-338.

3. Gao D, Nolan DJ, Mellick AS, Bambino K, McDonnell K, Mittal V. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lung metastasis. Science. 2008 Jan 11; 319(5860):195-8.

BioChain是高质量加工生物样品产品和分析服务的者，用于推进转化医学，伴随诊断和临床产品研发。BioChain的产品可用于DNA和RNA测序，PCR和RT-PCR，基因表达分析，DNA和RNA纯化，蛋白质提取和纯化以及蛋白质表达分析。BioChain的下一代测序一站式服务，从临床样品采集，样品制备，测序到生物信息学分析，将*改变行业。

除了我们*的生物标本和样品制备业务，BioChain正在进入临床应用领域，为癌症和生殖健康提供临床基因组学诊断产品和临床试验服务。BioChain致力于通过持续流程改进计划以竞争力的价格实现高质量的产品和服务。BioChain建立了全面的质量保证计划，以满足客户的满意度，并为我们的内部生产设施保持ISO 9001：2015和ISO 13485：2003认证。

Human EPOC freezing medium

人EPOC冷冻培养基

目录 ＃

Z7030006

概观

设计BioChain的内皮祖细胞生长细胞（EPOC）生长培养基并测试我们的人和小鼠内皮祖细胞生长细胞（hEPOC和mEPOC）。它包括两个组成部分：EPC基础培养基和EPC生长培养基补充剂。

描述

BioChain为细胞培养提供特定的培养基

· 

· 产品编号： Z7030006

· 大小： 50毫升

冷冻EPOC

1) 当EPC细胞达到90%~95%汇合时冷冻。

(2)37°C水浴中温Dulbecco‘s PBS(不含Ca2和Mg2)和0.05%胰蛋白酶/EDTA。解冻EPOC冷冻 g室温培养基。

3.去除EPOC培养基，用Dulbecco‘s PBS冲洗EPOC，用胰蛋白酶/EDTA溶液孵育EPOC，直到约90%的细胞开始脱落。莫尼 在显微镜下观察细胞以避免过度胰蛋白酶化。

4)加入相当于胰蛋白酶/EDTA溶液体积1/10的胎牛血清，中和胰蛋白酶。轻轻摇动文化容器混合。

5)将细胞悬液转入15 ml锥形管。取悬浮液的一个小别名来计数细胞。细胞悬液150×g，室温离心5分钟。

6.小心 把上清液拿掉。加入一定量的EPOC冷冻培养基，再悬浮细胞至0.5至1×10 6/ml.在每个冷冻瓶中分配1毫升。

7)将冷冻瓶放入冷冻容器中，慢慢地放入冷冻容器中。 在摄氏-80度的冷冻机中保持温度。第二天将小瓶转移到液氮中进行长期储存。

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小鼠EPOC冷冻培养基

概观

设计BioChain的内皮祖细胞生长细胞（EPOC）生长培养基并测试我们的人和小鼠内皮祖细胞生长细胞（hEPOC和mEPOC）。它包括两个组成部分：EPC基础培养基和EPC生长培养基补充剂。

描述

BioChain为细胞培养提供特定的培养基

• 产品编号： Z7030036

• 大小： 50毫升