avidity BirA 生物素说明书

Bulk BirA – Bulk BirA：BirA 生物素-蛋白质连接酶批量反应试剂盒，980.00 美元

BirA 生物素-蛋白质连接酶通过 ATP 中间体（生物素 5'-腺苷酸）以高效和有针对性的方式将 d-生物素共价添加到生物素受体肽/蛋白质上。该试剂盒包含 300 µg BirA 酶，适用于需要更大规模反应或在工作中更频繁使用 BirA 生物素化反应的人员。

请注意：我们强烈建议使用 AviTag 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反应速率对 AviTag 序列进行生物素化，并且与使用的其他肽序列相比，其反应速率可达到一个数量级或更高。与其他多肽生物素化序列相比，AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育时间，从而最大限度地减少与蛋白酶和蛋白质不稳定性相关的辅助问题。

产品信息

套件作为：

• 十 (10) 瓶 10 µL，每瓶 3mg/mL BirA 生物素-蛋白质连接酶（总共 300 µg）
• 十 (10) 个小瓶，每瓶 1.5 mL BiomixA（0.5 M bicine 缓冲溶液，pH 8.3）
• 十 (10) 瓶每瓶 1.5 mL BiomixB（100 mM ATP、100 mM Mg2+乙酸盐、500 µM d-生物素）
• 十 (10) 个 1.5 mL 小瓶，每个额外的 BIO-200（500 µM d-生物素）

BirA 生物素-蛋白质连接酶 (EC 6.3.4.15) 通过 ATP 中间体（生物素 5'-腺苷酸）以高效且有针对性的方式将 d-生物素与生物素受体肽/蛋白质共价添加。酶促生物素化蛋白质的下游应用是多种多样的、重要的和强大的。生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用经常被用于亲和层析或蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或亲和素/链霉亲和素-报告酶偶联物（-HRP、-碱性磷酸酶）或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化 MHC 分子的多聚体形式是免疫生物学中的常用工具。

当与我们的 AviTag™ 生物素受体肽氨基酸序列结合使用时，生物素化发生的速度是天然大肠杆菌 BCCP 底物的两倍，与其他肽序列的生物素化相比，其发生率高出一个数量级或更多。因此，与其他可用序列相比，AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育时间来完成生物素化。如果蛋白质不稳定性或蛋白酶活性是一个问题，这可能对下游的成功很重要。

我们的 BirA 酶是大肠杆菌野生型，由 birA 基因编码，并通过传统方法纯化至 99% 以上的纯度。

这种酶的其他名称包括：生物素连接酶；生物素操纵子阻遏蛋白；比拉; 生物素全酶合成酶；生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶；生物素-[乙酰辅酶A-羧化酶]连接酶；生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶；乙酰辅酶A全羧化酶合成酶；乙酰辅酶A全羧化酶合成酶；生物素：脱羧酶连接酶；生物素全酶合成酶；HCS。

Avidity，LLC于1996年由Millard Cull，Larry Lansing，Ron Gill博士和Mark Seville博士创立，基于生物素对抗生物素蛋白或链霉亲和素的非凡亲和力开发肽标签和分子生物学产品。在Affymax担任研究人员的同时，Millard参与了AviTag技术的发现，发现了其商业潜力，并获得了Affymax的*权利。他开始使用Avidity作为试剂公司，将AviTag技术的使用权授予其他公司，并销售与该技术一起使用的产品。

带有AviTag标签的人类全长ORF克隆已经被构建在多种T7和CMV启动子表达系统,可以立即购买使用。AviTag标签蛋白可以被体内或体外的生物素连接酶生物素化，而且抗生物素蛋白或链霉亲和素可以专一地与生物素结合，正基于这两个反应，AviTag?技术可以应用于蛋白的固定，纯化和显影。 虽然Avidity是一个小公司，科学带来的好处及其AviTag已得到认可。目前， AviTag技术已经在22个国家的世界制药公司和研究人员中得到认可。 

随着Avidity成熟，该公司正在扩大其科学视野，并调查使用生物发光 – 如在深海生物体中发现 – 使其产品对科学界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接触AvidTag与Prolume的高斯荧光素酶和绿色荧光蛋白（GFP）结合使用。*款高斯AviTag产品于2007年11月发布。

此外，Avidity正在与几家公司合作，通过将非常灵敏的光学传感器与基于荧光素酶的测定相结合，开发出新一代高度移动，简单，廉价且功能强大的诊断功能。结合BP蛋白质组学（新型测定生物化学），Prolume（发光/荧光分子和硬件创新专家），黑森林工程（光学器件工程），Avidity正在开发用于检测和鉴定的蛋白质和DNA微阵列生物芯片和生物传感器的疾病病原体和复合高通量筛选（HTS）。

  BirA生物素蛋白连接酶标准反应试剂盒

货号：BirA500 

品名：BirA-500: BirA biotin-protein ligase standard reaction kit

产品信息

生物素蛋白连接酶（BirA的EC 6.3.4.15）activates形成生物素生物素和5′- adenylate转移到生物素蛋白的生物素接受（如avitag™肽）。它也抑制功能的生物素操纵子。该基因编码的蛋白是由BirA的基因。

BirA生物素 – 蛋白质连接酶（EC 6.3.4.15）以和靶向的方式通过ATP中间体（生物素5'-腺苷酸）共价加入生物素受体肽/蛋白质中的d生物素。酶促生物素化蛋白质的下游应用是多样的，重要和有力的。*的生物素 – 抗生物素蛋白/链霉抗生物素蛋白相互作用通常用于亲和层析或蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或抗生物素蛋白/链霉亲和素 – 报道酶结合物（-HRP，碱性磷酸酶）或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化MHC分子的多聚体形式是免疫生物学中的常用工具。

当与我们的AviTag TM生物素受体肽氨基酸序列组合使用时，生物素化发生在天然大肠杆菌BCCP底物的两倍，比其他肽序列的生物素化多达一个数量级。因此，与其他可用序列相比，AviTagTM序列需要较少的BirA酶和较短的生物素化孵育时间才能完成。如果蛋白质不稳定或蛋白酶活动是关注的，这对下游成功可能是重要的。

我们的BirA酶是由birA基因编码的大肠杆菌野生型，并通过传统方法纯化至大于99％的纯度。

该酶的其他名称包括：生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白;的birA;生物素全酶合成酶;生物素 – [乙酰-CoA羧化酶]合成酶;生物素 -[乙酰辅酶A羧化酶]连接酶;生物素 -[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;乙酰CoA高脱羧酶合成酶;乙酰CoA高脱羧酶合成酶;生物素：apocar​boxylase连接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

试剂盒组成：

l 两瓶，每瓶20uL，1mg/mL BirA生物素蛋白连接酶（共40ug）

l 两瓶，每瓶1.5mL，BiomixA（0.5M双甘酯缓冲溶液，pH8.3）

l 两瓶，每瓶1.5mL，BiomixB（100mM ATP，100mM镁(OAC)2，500uM d-生物素）

l 两瓶，每瓶1.5mL，额外的BIO-200（500uM d-生物素）

储存条件：

试剂盒，干冰运输，-80度保存。如解冻后使用，4度保存。解冻后的酶可以在液氮中重新储存，-80度储存。

其他组份，biomixa，biomixb和bio-200，-20度长期保存。biomixa和bio-200，在4度可短期储存。Biomixb，-20度保存或者更低温度储存。

稳定性：生物素蛋白连接酶BirA，4度存放一个月，活性保留>80。长期保存-80度，每次解冻，酶活性降低10%。

实验步骤：

以700 µl纯化好的 MHC/peptide 复合物（1-2mg）为例，加入：100 µl BiomixA，100 µl BiomixB，100 µl d-biotin，10 µl BirA enzyme (30 µg)，0.5 ul pepstatin (2 mg/ml in DMSO)，0.5 µl leupeptin (2 mg/ml in dH2O)室温孵育过夜（反应液中不要有EDTA）

https://www.avidity.com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit

avidity BirA500说明书

BirA500 – BirA-500: BirA biotin-protein ligase standard reaction kit,  $250.00

BirA500-BirA-500：BirA生物素蛋白连接酶标准反应试剂盒，250.00美元

BirA生物素蛋白连接酶（EC 6.3.4.15）激活生物素形成5'-腺苷酸生物素，并将生物素转移至生物素受体蛋白（如AviTag™肽）。它还起着生物素操纵子阻遏物的作用。该蛋白质由birA基因编码。

请注意：我们强烈建议使用AviTag™氨基酸序列，而不是其他生物素肽序列。BirA酶以2倍于天然底物（BCCP）的反应速率对AviTag™序列进行生物素化处理，并且比使用中的其他肽序列高出一个数量级或更多。与其他Biotinylation-of-Peptide序列相比，AviTag™需要较少的酶量和较短的孵育时间，从而大程度地减少了与蛋白酶和蛋白质不稳定性相关的辅助问题。

产品信息

套件随附以下物品：

• 两（2）个小瓶，每瓶20uL 1mg / mL BirA生物素蛋白连接酶（总共40ug）
• 两（2）个小瓶，每个1.5mL BiomixA（0.5M Bicine缓冲溶液，pH 8.3）
• 两（2）个每瓶1.5mL的BiomixB（100mM ATP，100mM Mg（OAc）2、500uM d-生物素）
• 两（2）个每小瓶1.5mL的BIO-200（500uM d-生物素）

BirA生物素蛋白连接酶（EC 6.3.4.15）通过ATP中间体（生物素5'-腺苷酸）以高效且有针对性的方式将d-生物素共价添加到生物素受体肽/蛋白质上。酶促生物素化蛋白的下游应用是多种，重要和强大的。通常利用*的生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用来进行亲和层析或将蛋白质固定在表面或底物上。通过抗生物素抗体或抗生物素蛋白/链霉亲和素-报告酶偶联物（-HRP，-碱性磷酸酶）或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化的MHC分子的多聚体形式是免疫生物学中流行的工具。

当与我们的AviTag™生物素受体肽氨基酸序列结合使用时，生物素化的发生率是自然大肠杆菌BCCP底物的两倍，并且比其他肽序列的生物素化高出一个数量级或更多。因此，与其他可用序列相比，AviTag™序列需要较少的BirA酶和较短的孵育时间即可完成生物素化反应。如果需要考虑蛋白质的不稳定性或蛋白酶活性，这对于下游的成功可能很重要。

我们的BirA酶是野生型大肠杆菌，由birA基因编码，并通过传统方法纯化至纯度超过99％。该酶的其他名称包括：生物素连接酶；生物素操纵子阻遏蛋白 birA; 生物素全酶合成酶；生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶；生物素-[乙酰-CoA-羧化酶]连接酶；生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶；乙酰辅酶A全羧化酶合成酶；乙酰辅酶A全羧化酶合成酶；生物素：脱羧羧化酶连接酶；生物素全酶合成酶；HCS。