成立于2006年3月的Adar Biotech是下一代医疗技术的开发商。该公司开发了用于增强药物输送的微型医疗设备,并开发了另一种具有国土安全/生物应用的医疗设备。该公司还向研究团体提供产品和服务。Adar Biotech生产功能性树脂和重组蛋白,并为客户提供免疫学和细胞培养服务。
Adar Biotech的研究服务包括:定制肽合成。单克隆和多克隆抗体的发展。生物测定开发服务:ELISA,快速测试,基于荧光和HTS兼容的测定。荧光团和其他标记物与蛋白质的自定义缀合。基因克隆和基因表达。蛋白质纯化和折叠。交钥匙研发项目服务。
adarbiotech 1031-5说明书
在免疫沉淀(IP)应用中,ADAR适用于结合抗原兔抗体的快速沉淀。
Catalog No. | Price (USD) |
Cat. 1031-5 (5ml) | 897 |
Cat. 1031-10 (10ml) | 1,599 |
Cat. 1031-25 (25ml) | 3,550 |
Cat. 1031-Bulk | Contact us |
防兔珠子1031-5/10/25
免疫沉淀珠
介绍
利用从正常兔血清中分离的igg,在兔igg亲和柱上亲和纯化山羊抗兔igg(全分子)。洗脱后的抗体通过蛋白g柱进一步纯化,以便从其他种类的抗体中分离出igg。纯化的抗体用targetlock与sepharose珠偶联
化学。
抗兔珠子规范
基质:sepharosetm cl-4b
耦合方式:TargetLock。
偶联密度:0.7-1.2mg/ml羊抗兔igg
兔IgG结合能力:小0.6 mg/ml珠子
平均粒径:40-165微米
允许的pH值范围:3.0-11.0
珠状结构:高度交联的球形琼脂糖,4%
大背压:0.3Mpa,3bar
大流速:4ml/min/cm~2
建议流速:1-3ml/min/cm~2
储存:4°C,PBS,pH 7.4,0.3N NaCl,添加01%(w/v)叠氮化物作为防腐剂。
方案:用抗兔珠亲和纯化免疫球蛋白
A.所需缓冲器
结合缓冲液(1L):磷酸盐缓冲盐(PBS),pH值7.4
中和缓冲液(50ml):Tris 1M pH 8.0,用1M HCl调节pH至8.0。
洗涤缓冲液(200毫升):PBS pH 7.4可选PBS加1%Triton X-100。
洗脱缓冲液(100ml):0.1m甘氨酸缓冲液,用1N HCl调节pH至2.8。
再生缓冲液(100ml):0.1m甘氨酸缓冲液,用1N HCl调节pH至2.4。
储存缓冲液:含0.1% sodium azide的PBS作为防腐剂。
B.样品制备
备注:在0oC至4oC下工作,以尽可能减少抗体降解。
1。如果血清是来源,用4℃的结合缓冲液稀释5ml至15ml终体积。
2.将稀释后的血清上清液在4℃下以10000xg离心15分钟至沉淀碎片。
3。通过0.45μm过滤器过滤上清液。
c.柱亲和纯化
备注:通常5毫升的床容量用于从0.5升含有单克隆抗体的培养物或50毫升
X10稀释血清。
一。用30ml结合缓冲液在50ml锥形管中洗涤蛋白抗兔珠子三次。
每次让珠子自然沉淀5分钟,用移液管移走上部液相。
2.用清洗过的珠子将珠子倒入空的柱子中,将直径为1-1.5厘米的柱子包装起来。柱制备后,用5-10个柱体积洗涤,使柱与结合缓冲液平衡。建议流速为1-2 ml/min/cm~2
是的。
三。将样品置于室温。使用注射器或泵,以0.2 ml/min至0.5 ml/min的速率将样品应用于色谱柱。在大多数情况下,所用样品的总体积并不重要。保存流经部分以进行SDS-PAGE分析。
四。用20列容量的洗涤缓冲液洗涤。
5个。制备带有5%v/v中和缓冲液的标记微乳管。把管子放在冰桶上
6.用洗脱缓冲液以1-2ml/min/cm~2的流速洗脱到标记的微乳管中
是的。
免疫球蛋白的洗脱通常需要两到四个柱体积。当对洗脱部分中的目标蛋白进行定量时,使用洗脱缓冲液作为空白。
d.再平衡、再生和储存
一。用再生缓冲区的10个列卷重新生成列。快速工作,因为色谱柱的ph值应保持在2.4的低水平。
2.在洗脱步骤结束时,立即用10床体积的结合缓冲液清洗柱。
三。储存条件:将色谱柱储存在有储存缓冲液的冰箱中。