UCF012001

发表于2024年4月18日由上海金畔生物科技有限公司

JET高通量细胞培养器UCF012002/UCF012010/UCF012001是由医用级高分子材料聚苯乙烯（GPPS）制成（号:ZL201220167380.4ZL201220167162.0），是细胞大规模培养以及细胞药生产等的理想工具。

JET高通量细胞培养器UCF012002/UCF012010/UCF012001

产品概述：

近十几年来，由于生物制品行业的飞速发展，传统的通过生物化学技术从动物组织获取生物制品的方法已经远远不能满足市场的需求，通过动物细胞在体外大规模培养来表达特定的蛋白、单克隆抗体、干扰素及病毒疫苗制品已成为目前普遍的技术。

目前常用的细胞培养方法有常规细胞培养皿、板、瓶培养及转瓶培养、生物反应器培养等。上述细胞培养装置存在以下重大缺陷，1）细胞培养器皿和装置单位体积提供细胞生长的表面积小，细胞生长密度低，单次培养收获细胞数量少，而反复多次培养需花费大量材料、人工及时间；2）常规细胞培养皿、板和瓶均为开放式，加液、接种及细胞收获操作过程极易发生污染。

洁特开发的高通量细胞培养器产品由医用级高分子材料聚苯乙烯（GPPS)制成（号:ZL201220167380.4ZL201220167162.0），是细胞大规模培养以及细胞药生产等的理想工具。

JET高通量细胞培养器UCF012002/UCF012010/UCF012001

产品特点：

l 培养表面作疏水或亲水处理，适合细胞悬浮或贴壁培养；

l 单层或高达10层培养装置，可一次性大规模培养细胞；

l 装配有孔径 0.22 µm 疏水膜盖，防止气体交换时可能发生的污染；

l 不吸收细胞因子和生长因子，收获细胞时采用常规胰酶消化法；

l 无热源、内毒素，无DNase酶和RNase酶；

l 伽玛辐射消毒灭菌。

产品参数：

目录号	类型	生长表面积（cm2）	工作体积(ml)	材料	盖	特性描述	包装


UCF010001	1层	656	130-200	PS/HDPE	直径33 mm标准螺旋透气盖，0.22μm疏水膜	普通型，表面未处理，悬浮培养	8个/箱
UCF010002	2层	1296	260-400	PS/HDPE			6个/箱
UCF010005	5层	3216	650-1000	PS/HDPE			4个/箱
UCF010010	10层	6416	1300-2000	PS/HDPE			2个/箱
UCF011001	1层	656	130-200	PS/HDPE	直径33 mm标准螺旋透气盖，0.22μm疏水膜	标准型，表面处理，贴壁细胞培养	8个/箱
UCF011002	2层	1296	260-400	PS/HDPE			6个/箱
UCF011005	5层	3216	650-1000	PS/HDPE			4个/箱
UCF011010	10层	6416	1300-2000	PS/HDPE			2个/箱
UCF012001	1层	656	130-200	PS/HDPE	直径33 mm标准螺旋透气盖，0.22μm疏水膜	标准型，CellATTACHTM超亲水表面处理，贴壁细胞培养	8个/箱
UCF012002	2层	1296	260-400	PS/HDPE			6个/箱
UCF012005	5层	3216	650-1000	PS/HDPE			4个/箱
UCF012010	10层	6416	1300-2000	PS/HDPE			2个/箱

订购信息

l采用具有防压200磅、优质外包装纸箱，更好的保护产品；

l四种培养室组合以供客户根据实际需要选择；

l储存温度范围：-20°C ~ +50C；

l每个包装均有批号，便于质量跟踪；

l产品及配件经伽马射线消毒，方便开启使用。

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3

发表于2024年3月16日由上海金畔生物科技有限公司

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述
Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量文库构建专用配套试剂盒，共分为4个Set，每个Set中包含12种不同的Barcode接头，适用于Illumina®高通量测序平台多样品DNA文库构建。试剂盒中提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度保证了文库构建的稳定性和可重复性。

产品组分

编号	组分	产品规格
编号	组分	12×4T	12×16 T
12615	DNA Adapter 1-12	12 μL each	48 uL each
12616	DNA Adapter 13-24	12 μL each	48 uL each
12617	DNA Adapter 25-36	12 μL each	48 uL each
12618	DNA Adapter 37-48	12 μL each	48 uL each

运输和保存方法

冰袋运输，-20℃保存，有效期18个月。

注意事项

1）本试剂盒中DNA Adapter的浓度统一为15 μM，单个文库构建的接头使用量根据所用试剂盒进行调整。

2）切勿加热接头，应在室温让其缓慢溶解，实验室温度最好设置为20-25℃。接头避免反复冻融，可短暂存放于4℃。

3）小规格试剂盒（12×4 T）每种组分的DNA Adapter包装量足够进行4个DNA文库构建，共计足够进行48个DNA文库构建，大规格试剂盒（12×16 T）每种组分的DNA Adapter包装量足够进行16个DNA文库构建，共计足够进行192个DNA文库构建。

4）使用Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®试剂盒构建的DNA文库结构如下：

5’ – Universal Adapter – Insert DNA Sequence – DNA Barcode Adapter- 3’

5）试剂盒中提供的每种DNA Adapter中都包含Universal Adapter，且提供一种Barcode序列标签，用于高通量测序时区分样品。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

DNA Adapter的序列如下：

Universal Adapter：5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3’

Barcode Adapter：5’-GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCACXXXXXX1ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

1XXXXXX表示接头的Barcode区域，其在每个接头中的序列见下表。测序前在Sample Sheet中只需输入这个Barcode序列（6 bp）即可。

名称	序列	名称	序列
DNA Adapter 1	CGATGT	DNA Adapter 25	ACTGAT
DNA Adapter 2	TGACCA	DNA Adapter 26	ATGAGC
DNA Adapter 3	ACAGTG	DNA Adapter 27	ATTCCT
DNA Adapter 4	GCCAAT	DNA Adapter 28	CAAAAG
DNA Adapter 5	CAGATC	DNA Adapter 29	CAACTA
DNA Adapter 6	CTTGTA	DNA Adapter 30	CACCGG
DNA Adapter 7	ATCACG	DNA Adapter 31	CACGAT
DNA Adapter 8	TTAGGC	DNA Adapter 32	CACTCA
DNA Adapter 9	ACTTGA	DNA Adapter 33	CAGGCG
DNA Adapter 10	GATCAG	DNA Adapter 34	CATGGC
DNA Adapter 11	TAGCTT	DNA Adapter 35	CATTTT
DNA Adapter 12	GGCTAC	DNA Adapter 36	CCAACA
DNA Adapter 13	AGTCAA	DNA Adapter 37	CGGAAT
DNA Adapter 14	AGTTCC	DNA Adapter 38	CTAGCT
DNA Adapter 15	ATGTCA	DNA Adapter 39	CTATAC
DNA Adapter 16	CCGTCC	DNA Adapter 40	CTCAGA
DNA Adapter 17	GTAGAG	DNA Adapter 41	GCGCTA
DNA Adapter 18	GTCCGC	DNA Adapter 42	TAATCG
DNA Adapter 19	GTGAAA	DNA Adapter 43	TACAGC
DNA Adapter 20	GTGGCC	DNA Adapter 44	TATAAT
DNA Adapter 21	GTTTCG	DNA Adapter 45	TCATTC
DNA Adapter 22	CGTACG	DNA Adapter 46	TCCCGA
DNA Adapter 23	GAGTGG	DNA Adapter 47	TCGAAG
DNA Adapter 24	GGTAGC	DNA Adapter 48	TCGGCA

推荐Barcode组合：

2个样本：可使用（4, 6）、或（3, 19）。

3个样本：可使用（4, 6, 其他任意1个barcode）、或（3, 19, 其他任意1个barcode）、或（1, 5, 19）、或（3, 12, 15）等。

4个样本：可使用（4, 6, 其他任意2个barcode）、或（3, 19, 其他任意2个barcode）、或（3, 4, 6, 19）、或（1, 2, 5, 16）等。

质量控制

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3
图. 接头Agilent 2100检测图。

相关产品

接头类型		货号	名称	规格	价格（元）
短接头	单端 96 Index	12611ES02	Hieff NGS^® 96 Single Index Primer Kit for Illumina^® , Set 1（48种）	48×2 T	1493
	单端 96 Index	12612ES02	Hieff NGS^® 96 Single Index Primer Kit for Illumina^® , Set 2（48种）	48×2 T	1493
	双端 384 Index	12613ES02	Hieff NGS^® 384 Dual Index Primer Kit for Illumina^® ，Set 1（96 种）	96×2 T	2753
	双端 384 Index	12614ES02	Hieff NGS^® 384 Dual Index Primer Kit for Illumina^® ，Set 2（96 种）	96×2 T	2753
完整接头		12615ES04/16	Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 1	12×4/ 12×16 T	1256/4526
		12616ES04/16	Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 2	12×4/ 12×16 T	1256/4536
		12617ES04/16	Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 3	12×4/ 12×16 T	1256/4536
		12618ES04/16	Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina^®, Set 4	12×4/ 12×16 T	1256/4536
Tn5接头		12610ES96	Hieff NGS^® Tagment Index Kit for Illumina^®(96 Index)	96 T	1365

HB220530

Q：构建得到的文库产量低的原因？

A：1、DNA 质量低，样本中含抑制物（抑制酶活性等）

Input DNA 制备过程中带入的高浓度金属离子螯合剂或者其他盐，可能会影响末端修复以及 A 尾添加等步骤的反应效率，DNA 在TE 溶液中进行片段化，不要在无菌超纯水中进行。

2、RNA 污染

样本中存在RNA 污染会导致DNA 定量不准确，使文库构建时DNA 上样量不足。

3、PCR free 的时候上样量不足

当使用完整接头且Input DNA 大于 200 ng 时候，不用 PCR 扩增。如果文库拷贝数过低不能进行直接测序，可在接头连接完成后对DNA 文库进行PCR 扩增。

4、接头出现降解：接头存储不当会出现降解，影响连接效率。一般稀释过的接头可在室温放置 48h。

判断接头是否降解的方法：

a.用安捷伦 2100 毛细血管电泳检测，通过电泳条带大小判断；如果未发生降解，则条带大小大概为 62bp（complete adapter），如果发生降解，则无条带或条带很小。

b.用Qubit、酶标仪等检测仪器进行浓度测量，粗略判断接头是否降解。

检测方法：取 1uL，15uM 的complete 接头（12615ES-12618ES）若 Qubit 检测浓度 600ng/ul 左右，则接头正常，反之若小于 600ng/ul，则接头可能降解成单链或小片段。酶标仪检测同理。

Q：最后一步扩增，短接头中Primer 和长接头的Primer 是否一致？

A：不一致。短接头建库：接头连接时候是连接一样的双端接头 PE Adapter,后期进行文库扩增再利用不同的 Index Primer 扩增出完整携带不同的DNA 文库。长接头建库：接头连接时候的连接的是带有不同Index 的完整接头，后期扩增的时候再用两端的通用引物 Primer Mix 扩增完整的文库，使用长接头时，若在PCR 扩增之前文库浓度就达到上机要求，则无需进行PCR 文库扩增。

Q：接头中index/Barcode 组合原则是什么？

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3 A：碱基平衡，荧光平衡（详情可查看翊圣生物公众号微信软文一文全面解析 NGS 接头的奥秘）

产品组分

编号	组分	产品规格
编号	组分	12×4T	12×16 T
12615	DNA Adapter 1-12	12 μL each	48 uL each
12616	DNA Adapter 13-24	12 μL each	48 uL each
12617	DNA Adapter 25-36	12 μL each	48 uL each
12618	DNA Adapter 37-48	12 μL each	48 uL each

运输和保存方法

冰袋运输，-20℃保存，有效期18个月。

注意事项

1）本试剂盒中DNA Adapter的浓度统一为15 μM，单个文库构建的接头使用量根据所用试剂盒进行调整。

2）切勿加热接头，应在室温让其缓慢溶解，实验室温度最好设置为20-25℃。接头避免反复冻融，可短暂存放于4℃。

4）使用Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®试剂盒构建的DNA文库结构如下：

5’ – Universal Adapter – Insert DNA Sequence – DNA Barcode Adapter- 3’

5）试剂盒中提供的每种DNA Adapter中都包含Universal Adapter，且提供一种Barcode序列标签，用于高通量测序时区分样品。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

DNA Adapter的序列如下：

Universal Adapter：5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3’

Barcode Adapter：5’-GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCACXXXXXX1ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

1XXXXXX表示接头的Barcode区域，其在每个接头中的序列见下表。测序前在Sample Sheet中只需输入这个Barcode序列（6 bp）即可。

名称	序列	名称	序列
DNA Adapter 1	CGATGT	DNA Adapter 25	ACTGAT
DNA Adapter 2	TGACCA	DNA Adapter 26	ATGAGC
DNA Adapter 3	ACAGTG	DNA Adapter 27	ATTCCT
DNA Adapter 4	GCCAAT	DNA Adapter 28	CAAAAG
DNA Adapter 5	CAGATC	DNA Adapter 29	CAACTA
DNA Adapter 6	CTTGTA	DNA Adapter 30	CACCGG
DNA Adapter 7	ATCACG	DNA Adapter 31	CACGAT
DNA Adapter 8	TTAGGC	DNA Adapter 32	CACTCA
DNA Adapter 9	ACTTGA	DNA Adapter 33	CAGGCG
DNA Adapter 10	GATCAG	DNA Adapter 34	CATGGC
DNA Adapter 11	TAGCTT	DNA Adapter 35	CATTTT
DNA Adapter 12	GGCTAC	DNA Adapter 36	CCAACA
DNA Adapter 13	AGTCAA	DNA Adapter 37	CGGAAT
DNA Adapter 14	AGTTCC	DNA Adapter 38	CTAGCT
DNA Adapter 15	ATGTCA	DNA Adapter 39	CTATAC
DNA Adapter 16	CCGTCC	DNA Adapter 40	CTCAGA
DNA Adapter 17	GTAGAG	DNA Adapter 41	GCGCTA
DNA Adapter 18	GTCCGC	DNA Adapter 42	TAATCG
DNA Adapter 19	GTGAAA	DNA Adapter 43	TACAGC
DNA Adapter 20	GTGGCC	DNA Adapter 44	TATAAT
DNA Adapter 21	GTTTCG	DNA Adapter 45	TCATTC
DNA Adapter 22	CGTACG	DNA Adapter 46	TCCCGA
DNA Adapter 23	GAGTGG	DNA Adapter 47	TCGAAG
DNA Adapter 24	GGTAGC	DNA Adapter 48	TCGGCA

推荐Barcode组合：

2个样本：可使用（4, 6）、或（3, 19）。

3个样本：可使用（4, 6, 其他任意1个barcode）、或（3, 19, 其他任意1个barcode）、或（1, 5, 19）、或（3, 12, 15）等。

4个样本：可使用（4, 6, 其他任意2个barcode）、或（3, 19, 其他任意2个barcode）、或（3, 4, 6, 19）、或（1, 2, 5, 16）等。

质量控制

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3
图. 接头Agilent 2100检测图。

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HB220530

Q：构建得到的文库产量低的原因？

A：1、DNA 质量低，样本中含抑制物（抑制酶活性等）

2、RNA 污染

样本中存在RNA 污染会导致DNA 定量不准确，使文库构建时DNA 上样量不足。

3、PCR free 的时候上样量不足

当使用完整接头且Input DNA 大于 200 ng 时候，不用 PCR 扩增。如果文库拷贝数过低不能进行直接测序，可在接头连接完成后对DNA 文库进行PCR 扩增。

4、接头出现降解：接头存储不当会出现降解，影响连接效率。一般稀释过的接头可在室温放置 48h。

判断接头是否降解的方法：

b.用Qubit、酶标仪等检测仪器进行浓度测量，粗略判断接头是否降解。

Q：最后一步扩增，短接头中Primer 和长接头的Primer 是否一致？

Q：接头中index/Barcode 组合原则是什么？

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3

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JET高通量细胞培养器UCF012002/UCF012010/UCF012001

Hieff NGS®高通量文库构建专用配套试剂盒set3|Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®,Set 3

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