biontex转染试剂选择指南

发表于2024年10月7日由上海金畔生物科技有限公司

biontex转染试剂选择指南

使用说明：

在“转染试剂选择指南”中，您可以通过设置不同的过滤器（例如，针对核酸和细胞类型的组合）找到现有参考。页面顶部“搜索参考”中的适当关键字也可以产生结果。参考文献表明找到的转染试剂已成功用于相应的应用。理想情况下，应测试的转染参数和转染效率。

如果该列表不包括有关您的细胞类型的参考，这并不意味着没有合适的试剂可用，而只是没有关于该细胞类型的经验报告。

细胞类型描述	核酸/递送分子	产品	书目数据	关联
小鼠原代成肌细胞	miRNA	Metafectene PRO	CE Winbanks 等人，J. Biol。化学，2011 年 4 月；286: 13805 – 13814	关联
小鼠原代肝细胞	miRNA	Metafectene PRO	S. Surendran 等人，《科学报告》，2016 年，6：18958；DOI：10.1038/srep18958	关联
人原代成纤维细胞	siRNA	Metafectene PRO	T. Stiff 等人，PLoS Genet., 2013, 9(3): e1003360, doi.org/10.1371/journal.pgen.1003360	关联
早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，《科学报告》，7：43287，DOI：10.1038/srep43287	关联
晚二龄幼虫小菜蛾血腔	质粒	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017
Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Z. Guo 等人，《科学报告》，2015，5：13728；DOI：10.1038/srep13728	关联
小鼠（18.5 dpc 胎儿或新生儿）卵巢	miRNA	Metafectene	H. Zhang 等人，Reproduction，2014 年 6 月；148: 43 – 54	关联
兔（新西兰）来自关节软骨的原代软骨细胞	质粒	Metafectene	J.-H. Ryu 等人，J. Biol。化学，2006 年 8 月；281：22039 – 22047	关联
Spodoptera exigua hemocoel 第一天幼虫 L5（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Y. Kim 等人, Peptides, 2015, 68: 91-98;doi.org/10.1016/j.peptides.2015.02.003
L3D1 NP 幼虫的 Plutella xylostella hemocoel（菱背蛾或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等，J. of General Virology，2016，97：2780-2796；DOI 10.1099/jgv.0.000560	关联
早三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）的Plutella xylostella hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	J. Zhou 等人，Pest Manag。科学，2020，76：712–720，DOI：10.1002/ps.5569	关联
Plutella xylostella，三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	B. Park 等人，昆虫科学，2012，19：47–54，DOI 10.1111/j.1744-7917.2011.01421.x
甜菜夜蛾五龄幼虫（L5）（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	J. Park 等人，PLoS ONE，2014，9(9)：e105717，doi：10.1371/journal.pone.0105717	关联
小鼠混合神经元-神经胶质小脑培养物	质粒	K2转染系统
Rabitt (Lapine) 关节软骨细胞	质粒	Metafectene	P. Orth 等人，Mol Biotechnol，2008 年 2 月；38(2): 137-44
小鼠软骨细胞	质粒	Metafectene	A. Jash 等人，PLoS ONE，2012，7(7)：e40828，doi：10.1371/journal.pone.0040828	关联
甜菜夜蛾幼虫和蛹（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Ahmed 等人，《科学报告》，2019，9：4988，doi.org/10.1038/s41598-019-41541-2	关联
小鼠异种移植肿瘤，由人类 Hep-2 细胞建立	质粒	Metafectene	J. Zhou et al., Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Zazhi, Mar 2006; 20(6): 264-7
甜菜夜蛾四龄和五龄幼虫（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	S. Ahmed 等人，无脊椎动物病理学杂志，2018，doi.org/10.1016/j.jip.2018.05.009
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学
人原代 CD14+ 单核细胞	miRNA	Metafectene SI	S. Smith，JCI 洞察力，2018，3(15):e120798，doi.org/10.1172/jci.insight.120798	关联
人永生化淋巴细胞细胞系（EBV永生化）	siRNA	Metafectene PRO	M. Pradas-Juni 等人，Mol. 内分泌学, 2014, 28(9): 1558-1570, doi: 10.1210/me.2014-1065	关联
Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)	双链RNA	Metafectene PRO	AAM Mohamed 等人，PLoS ONE，2014，9(3)：e92680，doi：10.1371/journal.pone.0092680	关联
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500	关联
小鼠永生化皮肤成纤维细胞（缺乏 Lap2-alpha）	质粒	Metafectene PRO	E. Bartova 等，Protoplasma，2017，254：2035-2043，DOI 10.1007/s00709-017-1076-1

细胞类型描述	核酸/递送分子	产品	书目数据	关联
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S. Surendran，博士论文，2014 年，印第安纳大学
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	Al B. Md Abdullaha 等人，Dev。和比较。免疫学, 2020, 103, 103500, doi.org/10.1016/j.dci.2019.103500	关联
Plutella xylostella 幼虫（菱形或卷心菜蛾）	质粒	Metafectene PRO	W. Gad 等人，J. Gen. Virol.，2008 年 4 月；89: 931 – 938	关联
L5 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	AA Baki 等人，Arch。昆虫生化。生理学，2019:100:e21524，doi.org/10.1002/arch.21524
甜菜夜蛾幼虫血腔（甜菜夜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Md. Sadekuzzaman 等人，Dev。和比较。Immunol., 2017, 77: 210-220, DOI: 10.1016/j.dci.2017.08.014
大鼠原代肝细胞	siRNA	Metafectene PRO	F. Damiano 等，Biochem。J., 2013, 449: 543–553, doi:10.1042/BJ20120906
大鼠（Wistar 新生儿）原代海马神经元	siRNA	Metafectene	PJ Kammermeier, J. Neurosci., 2008 年 8 月；28: 8560 – 8567	关联
4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射	siRNA	Metafectene	S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109	关联
人类皮肤黑色素瘤（FFPE 组织切片）	质粒	Metafectene PRO	M. Venza 等人，Biochim。等生物物理学。学报，2015，1849：247-256；doi.org/10.1016/j.bbagrm.2014.12.004
小鼠肝细胞	质粒	Metafectene PRO	S.-Y。Cai 等人，JCI 洞察力。2017, 2(5): e90780, doi.org/10.1172/jci.insight.90780
人胎儿皮质干细胞培养	质粒	Metafectene	S. Couillard-Despres 等人，2014 年，US 8,841,430	googleapis.com/c6/aa/0f/25b3644975870e/US8841430.pdf” style=”box-sizing: border-box; text-decoration: none; color: rgb(51,153,204); padding-bottom: 0px; padding-top: 0px; padding-left: 0px; margin: 0px; padding-right: 0px; touch-action: manipulation” target=”_blank”>关联
Antheraea pernyi pupae in diaupase (Chinese Tasar Moth)	双链RNA	Metafectene PRO	Q. Wang 等人, PLoS ONE, 2013, 8(11): e79381, doi:10.1371/journal.pone.0079381	关联
爪蟾XCT细胞	质粒	Metafectene PRO	M. Dubinska-Magiera 等，Protoplasma，2016，253：943-956；DOI 10.1007/s00709-015-0861-y	关联
Plutella xylostella，早期三龄幼虫（菱背蛾或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	阿里先生等人，无脊椎动物病理学杂志，2012，110：389–397，doi.org/10.1016/j.jip.2012.05.003
小鼠原代肝细胞	质粒	Metafectene PRO	JS Park 等人，BMC Res Notes，2011 年 1 月；4:8
Plodia interpunctella 幼虫（印度粉蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	G. Deok Han 等人，Pesticide Biochem。和生理学，2017 年 11 月，143：48-56，doi.org/10.1016/j.pestbp.2017.09.010
小鼠足细胞	siRNA	K2转染系统	F. Kliewe 等人，科学报告，nature.com，7：9916，DOI：10.1038/s41598-017-10116-4	关联
Plutella xylostella 早期三龄幼虫（菱形或卷心菜蛾）	双链RNA	Metafectene PRO	Z. Guo 等人，2015，PLoS Genet 11(4)：e1005124。doi:10.1371/journal.pgen.1005124	关联
从新生儿包皮中分离的人角质形成细胞	siRNA	Metafectene	S. Bruche，博士论文，2014，伦敦帝国理工学院	关联
Maruca vitrata L4 晚期幼虫（豆类荚螟）	双链RNA	Metafectene PRO	A. Al Baki 等人，Pest Manag。科学，2020，76：1020–1030，DOI：10.1002/ps.5612	关联
Tribolium castaneum（晚龄幼虫的血腔）	质粒	Metafectene PRO	R. Hepat 等人，J. Virol.，2013 年 10 月，第 87 卷，第 20 期，11223–11230	关联
L5D1 幼虫（豆类荚螟）的 Maruca vitrata hemocoel	双链RNA	Metafectene PRO	MA Al Baki 等人，公共科学图书馆 ONE，2018 年，13 (10)：e0204935，doi.org/10.1371/journal。pone.0204935	关联
4-6 周龄 Balb/c IL2 NOD SCID（无效）小鼠尾静脉注射	siRNA	Metafectene	S. Romano 等人，细胞死亡和疾病，2013 年，4：e578，doi：10.1038/cddis.2013.109	关联
晚二龄幼虫小菜蛾血腔	双链RNA	Metafectene PRO	S. Kumar 等人，Comp. 生化。和生理学，2014，A 部分 177：27-34，doi.org/10.1016/j.cbpa.2014.07.017
小鼠培养的海马神经元	质粒	Metafectene PRO	A. Schneider, 论文, 2018, Albert-Ludwigs-Universität Freiburg

德国Biontex转染试剂简介

发表于2024年10月5日由上海金畔生物科技有限公司

德国Biontex转染试剂简介
Biontex 公司成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried，专注于转染试剂的研发和应用。

（一） K2^® Transfection System ，Biontex最新产品
全新高效的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具

产品特点：

真核细胞依赖自身的先天性免疫系统，能够识别并抑制外来物质（如脂多糖、细菌、病毒核酸及蛋白质）的入侵。此外，细胞还可以将这些外来物质的信息通过信号分子传导给相邻的细胞，使这些临近细胞在无需接触病原体的情况下产生防御体系。
为降低细胞自身的免疫反应，提高基因转染效率，Biontex公司最新开发了K2® Transfection System，由K2^® Transfection Reagent 和 K2^® Multiplier两部分组成。K2^® Transfection Reagent是一种高效的阳离子脂质，而K2^®Multiplier则可以降低细胞对外来核酸及脂质体的免疫反应。

应用实例1：

K2转染pCMV-GFP的效率® 转染系统和Metafectene Pro与几种细胞系的市售转染试剂L2k进行了比较。

应用实例2：

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
K2® Transfection System	T060-8.0	1.5 ml Transfection reagent 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System	T060-8.2	2 X 1.5 ml Transfection reagent 2 X 6.5 ml Multiplier
K2® Transfection System	T060-8.5	5 X 1.5 ml Transfection reagent 5 X 6.5 ml Multiplier

（二）METAFECTENE^® SI⁺
特别适合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效转染试剂

特点:

METAFECTENE^® SI⁺是一种脂质复合物，经特殊优化适用于siRNA和microRNA转染（siCOM技术），综合了Biontex公司RMA和TOP技术的特点，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等优点，适用于所有细胞系和原代细胞。

siCOM技术(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA转染试剂，本技术不需要将siRNA和miRNA转运到细胞核。因此，METAFECTENE^® SI⁺主要目的在于大化的内吞作用并快速*释放RNA进入细胞质。

转基因HeLa-GFP细胞GFP表达序列的研究® SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可见的是GFP表达在72小时内下降到最大值。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® SI⁺	T100-1.0	1 ml RNA transfection reagent 2 ml SI⁺ buffer (10x)
METAFECTENE^® SI⁺	T100-2.0	2 X 1 ml RNA transfection reagent 2 X 2 ml SI⁺ buffer (10x)
METAFECTENE^® SI⁺	T100-5.0	5 X 1 ml RNA transfection reagent 5 X 2 ml SI⁺ buffer (10x)

（三） METAFECTENE® EASY
更快、更简便、更高效的转染技术

特点：

在开发第二代DNA转染试剂（METAFECTENE^®及其升级版本METAFECTENE^®PRO）的时候，Biontex的主要目标是大化转染效率(RMA技术)和最小化毒性作用(TOP技术)。进一步开发的Biontex FEE技术预示着第三代质粒转染试剂的开始：METAFECTENE^®EASY⁺。

FEE技术
FEE技术是优化的具更高转染效率的技术，通过固定DNA /脂质体比率和转染复合物体积而适用于广泛的细胞类型。不需要针对每种细胞类型进行费时、费力的条件优化。

变质体® EASY的转染效率与METAFECTENE相当® 无需优化DNA/脂质体（深蓝色柱：COS-7，浅蓝色柱：HeLa细胞）。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-1.0	1 ml Transfection reagent 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent 2 X 2 ml EASY+ buffer (10x)
METAFECTENE^® EASY⁺	T090-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent 5 X 2 ml EASY+ buffer (10x)

（四）METAFECTENE^® PRO
真核细胞的高效、低毒性转染试剂

METAFECTENE^® PRO是针对哺乳动物细胞的新一代转染试剂。采用毒性优化技术（TOP技术），Biontex成功地降低了转染试剂对细胞的毒性，并显著提高DNA进入细胞的效率。除了能加强细胞的转染效率之外，METAFECTENE^® PRO的另一个主要特点是提高细胞内基因的表达。

TOP技术(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是现代转染试剂达到效率和广泛应用性的首要前提条件。TOP技术的基本准则是模拟物质天然结构，加强生物降解能力，提高细胞耐受性。另外，通过物理化学修饰，降低脂质复合体的稳定性，从而促进DNA在细胞质的释放。

METAFECTENE转染效率的比较® PRO与各种细胞系（代谢物）® 100%)

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^® PRO	T040-1.0	1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^® PRO	T040-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^® PRO	T040-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent

（五）METAFECTENE^®

RMA技术(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解（RMA）技术，一方面能促进细胞内涵体中“质子海绵”的活性，另一方面能促进脂质体复合物分解，通过小片段质子化结构模拟磷脂结构。当内涵体处于酸性环境时，正电荷累积在脂质体复合物的磷脂双分子结构中，通过电荷的排斥力，这些电荷最终引起脂质体复合物的分解，同时高效地将DNA/RNA释放到细胞质中。
最后，胞质中非络合的DNA/RNA急剧增多，以DNA为例，这个结果导致其在胞质中的活性显著提升，DNA与细胞核接触的可能性增加，从而大大提高转染效率。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
METAFECTENE^®	T020-1.0	1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^®	T020-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent
METAFECTENE^®	T020-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent

其他相关产品：

产品名称	产品介绍	规格	货号
METAFECTENE®FluoR	转染全过程可视化低毒性：维持细胞最佳形态可使用显微镜观察细胞密度应用：转染真核细胞	0.5 ml 1.0 ml	T050-0.5 T050-1.0
INSECTOGENE	简便、高效地转染昆虫细胞生产重组蛋白；与杆状病毒表达系统兼容；耐受血清抑制；快速，操作简便；性价比高应用：昆虫细胞转染	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T030-1.0 T030-2.0 T030-5.0
DOTAP	第一代转染试剂用于DNA或者反义核苷酸寡聚体转染哺乳动物细胞。价格便宜，已被大量文献报道。	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T010-1.0 T010-2.0 T010-5.0
PROTEOfectene®	快速、高效的蛋白转染试剂广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型低毒性，耐受血清抑制	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E010-0.1 E010-0.25 E010-0.5
PROTEOfectene®AB	快速、高效的蛋白转染试剂广泛适用于各种蛋白质转染和各种细胞类型低毒性，全血清耐受具有所有同型抗原的单克隆/多克隆抗体	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E020-0.1 E020-0.25 E020-0.5

二、自主生产的转染试剂：HTfect transfection kit

HTfect transfectionKit是盎然生物技术有限公司研发的一种高效、低毒、廉价且重复性好的新型转染试剂，适用于大部分细胞类型。本产品特别适合于HEK293、HeLa、HT1080等细胞的转染，在重组蛋白表达，病毒包装， microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等实验中用途广泛。同时，本产品也不受血清的干扰，实验操作简单。
产品优势

使用实例
用HTfect transfection kit 将3 μgpLVX-cmyc-EGFP质粒转染HEK293细胞，两天后使用Olympus倒置荧光显微镜（IX71）进行观察和拍照。（左图为明场细胞图像，右图为绿色荧光细胞图像）。

产品订购信息：

产品名称	货号	规格
Htfect transfection kit	AB-TP1001	Sol.A 1.25 ml Sol.B 20 ml
Htfect transfection kit	AB-TP1002	Sol.A 2.5 ml Sol.B 40 ml
Htfect transfection kit	AB-TP1003	Sol.A 5 ml Sol.B 80 ml

1. 通过抑制细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率，特别适用于转染人类细胞
2. 多数情况下，比其他常见转染试剂（如，Lip2K）有更高转染效率
3. 细胞毒性较低
- 整合了RMA和TOP技术
- 沉默效率更高，siRNA用量更少
- 操作简便、快速，适合大规模筛选
1. 快速：一次转染实验只需3天
2. 简便：优化条件时，只需摸索两个固定的 DNA:lipid比例
3. 高效：升级产品提高了转染效率，进一步降低毒性
4. 经济：EASY⁺的显著特征，EASY⁺降低了核酸复合物(DNA +脂质)所需要的体积，节约至少50%的成本
1. METAFECTENE^®是一种基于脂质体的包含阳离子和中性脂质的复合物，在DNA转染哺乳动物细胞时达到很高的转染效率。属于第二代转染试剂。
2. RMA技术是高效转染率的保证。另外，METAFECTENE^®的低毒性和耐受血清抑制等特性使其具有广泛的应用空间。
1. 转染效率高，尤其对HEK293T细胞的转染效率高达95%以上。
2. 细胞毒性小，显著低于L2K等试剂。
3. 转染过程中无需更换无血清培养液，操作简单。
4. 性价比高，特别适合大规模转染实验，如表达重组蛋白或者包装病毒等。
5. 结果重复性好。

Targeting Systems—转染、荧光示踪

发表于2024年10月2日由上海金畔生物科技有限公司

Targeting Systems—转染、荧光示踪

Targeting Systems公司是一家依靠美国国立卫生研究院（NIH）的小型商业创新研究基金资助，于1996年5月成立的高科技生物制品企业。在成立的*年即推出其*产品线—Targefect。Targeting Systems公司从成立zui初的一个员工目前已发展为拥有多样化的和强大的知识产权的生物企业，产品超过100种。凭借其在生物荧光研究领域的优势，Targeting Systems公司致力于新药研发、药物筛选、基因表达及干细胞研究与治疗的技术与产品供应。同时，Targeting Systems公司也在功能基因组学上*优势，包括基因表达调控，通过胞内注入功能性活性蛋白从而改变细胞功能状态，以及超敏感的报告基因检测的研发。目前公司的主打产品是荧光素酶（Luciferases）检测试剂盒，可以广泛应用于药物筛选、基因表达和干细胞研究。

Targeting Systems公司的产品的主要应用：

一、新药研发与药物筛选

荧光素酶是Targeting Systems公司的主打产品，该系列产品拥有zui强的荧光强度(红色、蓝色和绿色)，产品有着非常宽的光谱选择，是目前市场上拥有zui大选择余地的超敏荧光素酶供应商，共有7种颜色的光谱，比市场上常规的Photinus和Renilla荧光素酶的荧光强6 – 1000倍。产品包括Gaussia荧光素酶，Cypridina荧光素酶，绿/蓝分泌型Renilla荧光素酶，红色Luciola Italica荧光素酶以及ans荧光素酶检测试剂。可一次性应用单/双或3个荧光素酶进行研究。

二、基因转染—Targefect产品线

Targeting Systems公司*的Virofect转染技术（一种腺病毒来源的强化配方，可直接将目的基因导入细胞核，zui大程度增强难转染细胞的转染效率）可实现转染以及难转染细胞的转染，包括多种原代培养细胞，转染效果甚至优于电转染。还提供根据特定细胞设计的转染试剂及转染实验方案，以提高特定难转染细胞的转染效率。多种因素促成了Targefect产品线的转染与*优势，包括Tarefect F-2 试剂，多肽增强子，Virofect转染技术等。这些*优势包括

1、使用*配方的试剂完成基因直接入核核；

2、使用简单而易于操作的脂质配方完成部分难转染细胞的基因转染；

3、使用基于腺病毒的增强试剂配方，利用细胞表面的腺病毒受体进行基因转染，这种方法可得到的基因转染以及增加所转基因的表达效率；

4、产品包括适用于大多数细胞株的细胞特异的转染试剂与方案。


Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) Targefect-HUVEC	HEK-293 cells Targefect-293	Human hepatocytes Targefect-Hepatocyte


Even Large DNA loads Vascularare efficiently delivered. Delivery of 170kD BACs in CV-1 cells Targefect-BAC	Smooth muscle cells Targefect-SMC	Macrophages (Raw 267.4 cells) Targefect-RAW

三、肿瘤成像与细胞示踪

Targeting Systems公司利用慢病毒–荧光素酶结合技术 (LentiGlo TM)可表达zui强的荧光，实现稳定转染（几乎100%的转染效率），是体内生物成像（培养细胞或活体动物）的理想产品。LentiPower™试剂盒可在研究人员实验室快速得包装自己的荧光表达慢病毒。Targeting Systems公司的肿瘤成像与细胞示踪产品还具有以下优势：

快速制备稳定转染的细胞；

凭借特定的分泌型荧光素酶及强荧光蛋白可在体外培养细胞或体内研究基因表达；

具有zui高的转染效率，可稳定转染多数难转染细胞，如干细胞和神经细胞；

利用多种颜色（光谱）的荧光素酶及报告子可在同一组细胞中分析多个分子通路；

可在研究人员自己的启动子或目的时间点研究基因表达；

使用安全的自失活载体，可在研究干细胞或体内肿瘤生长和存活时不损伤细胞。

四、基因沉默（konckdown）

利用Targeting Systems公司的Targefect siRNA试剂盒可转入 siRNA /microRNA ，凭借基于Gaussia荧光素酶的pSiiScreen系统，可在体内或体外筛选。是实时高通量筛选siRNAs的理想工具。

五、干细胞研究

胚胎干细胞及间充质干细胞的转染试剂，利用蛋白输送系统可定向干细胞分化类型，而LentiGlo可检测细胞的生长和存活状态。

转染试剂：可将功能性活性蛋白导入各种原代人类干细胞的胞内或核内，通过导入特定的转录因子监测体内干细胞的分化状态。

StemTrack™：用于体内外无损伤监测干细胞存活、生长于分化。

Profect蛋白输送试剂（Protein delivery Reagents）：

LentiGlo™：是Targeting Systems公司提供的*慢病毒–荧光素酶产品，可稳定转染人类干细胞，使之成为与荧光蛋白一起高共表达特定荧光素酶的细胞类型。

六、蛋白导入系统

Targeting Systems公司的蛋白导入系统可实现胞内或核内导入功能性蛋白、多肽或抗体，可将蛋白导入巨噬细胞，进而研究微生物导致的疾病的发病机理。具有如下优势优势：

可为包括人类干细胞在内的大多数细胞株导入多种蛋白；

导入蛋白具有高活性；

可导入功能性抗体；

可导入功能性酶（如CRE重组酶、caspase，β–半乳糖苷酶，荧光素酶等）进行多方面的细胞学研究；

可将功能性蛋白导入分化的细胞；

可用于鉴定微生物（细菌或寄生虫）发病机理的毒性因素，病理机制及鉴定特定的药物靶点；

可实现多个蛋白的同时共导入，导入效率高，可实现难转染细胞的蛋白导入。

七、LiveResponse™

该产品是Targeting Systems公司的产品，可使用5种分泌型的强荧光报告子—Gaussia荧光素酶(482 nm), Cypridina荧光素酶(463 nm), Blue-shifted Renilla荧光素酶（467 nm）, Green Renilla荧光素酶(527 nm)及Red Italica firefly荧光素酶(613 nm)—在同一群细胞分析4种不同启动子活性，在活性中检测 NFKB 、CRE构件、 GPVR谱及凋亡。该产品还具有以下优势：

高的灵敏度及快速检测功能

在同一群细胞中可分析3条或更多哦分子通路，而且不损伤细胞的前提下进行实时研究。

通过选择不同发射波长的荧光素酶，可以实现一次荧光素酶试剂导入中研究多个荧光素酶报告子。

高荧光强度及稳定性使这些新颖的荧光素酶报告子非常适合于高通量筛选应用

与其他商业荧光素酶检测系统相比具有高性价比

体内无损伤应用。

八、蛋白表达系统

Targefect-293/Targefect-293F是Targeting Systems公司高水平的蛋白表达体系，其*的脂质体转染配方可实现293细胞和CHO细胞的转染，操作方法简便。

重要通知：Ozbiosciences公司现已停产Cosfect系列转染试剂！！！

发表于2024年10月2日由上海金畔生物科技有限公司

尊敬的广大客户：

我们很遗憾地得知Ozbiosciences公司已停产Cosfect系列转染试剂。Ozbiosciences是一家位于法国的生物科技公司，专注于开发和生产生命科学研究的创新产品。该公司提供广泛的产品和服务，包括转染试剂，用于蛋白纯化的磁珠，以及定制肽合成服务。

我们理解这一消息对需要使用该产品的客户造成的不便，我们深感抱歉。上海金畔生物科技有限公司一直致力于为客户提供高质量的产品和服务，因此，我们正在与其他供应商协商，寻找可替代的转染试剂，以满足客户的需求。我们将尽快提供更多有关可替代产品的信息，并为客户提供帮助和建议，以确保您的研究不受影响。如果您需要任何帮助或有任何疑问，请随时联系我们的技术支持团队。

PEI转染的方法

发表于2024年9月24日由上海金畔生物科技有限公司

PEI转染的方法

常规转染技术可分为两大类，一类是瞬时转染，一类是稳定转染（*转染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染，外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。

PEI转染的方法
材料：质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI （聚乙烯亚胺，是线性的） 1×HBS （pH7.4）
配方： PEI 储存液（100 μM）：称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）
中， 0.2 μm 滤膜过滤，储存于4℃备用。
1×HBS （pH7.4）：将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水，加入20 ml 1 M 的
HEPES，调pH 值到7.4，定容至1 L，过滤（0.2 μm 滤膜）后储存于4℃备用。
方法：
1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的*培养基以4×105 至8×105
细胞/cm2 的密度平铺细胞于60 mm 组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，
使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于
含5％ CO2 的37℃温箱中孵育8-24 h,当细胞贴壁*后即可开始转染。转染
前换入2 mL 预热的无血清培养基。
2. 制备PEI-DNA 混合物：以60 mm 组织培养皿用420 μL 反应总体积为例。准
备两支1.5 mL 离心管，一管将质粒DNA（总量2-8 μg 为佳）加入240 μL HBS
中，混匀。另一管中则用HBS 将100 μM 的PEI 储存液稀释成10 μM，充分
混合。然后取180 μL 10 μM PEI 溶液加入含有DNA 的HBS 中，充分混匀后
室温静置20-30 min。zui后将这420 μL 的PEI-DNA 混合液逐滴加入上述单层
细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％ CO2 的37℃ 温箱
孵育。
注：每次用100 μM 的PEI 储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的
浓度一致。
3. 培养6-10 h 后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16 h 左右
可以观测到报告基因的表达。

订货信息

货号	品名	价格￥	规格	品牌	备注
23966-2	POLYETHYLENIMINE LINEAR	2864	2 g	polysciences	大量现货
24765-2	POLYETHYLENEIMINE 'MAX'	3184	2 g	polysciences	转染效率高30% 更好溶解
78002qf01	线性PEI转染液	200	1ml	jinpanbio	23966配制
78002qf02	线性PEI转染液	800	50ml	jinpanbio	23966配制
78002qf03	线性PEI转染液	5500	500ml	jinpanbio	23966配制
78003qf01	线性PEI转染液	200	1ml	jinpanbio	24765配制
78003qf02	线性PEI转染液	700	50ml	jinpanbio	24765配制
78003qf03	线性PEI转染液	2200	500ml	jinpanbio	24765配制
78004qf01	POLYETHYLENIMINE LINEAR	1432	1g	jinpanbio	23966分装
78005qf01	POLYETHYLENEIMINE 'MAX'(40 000M.W.*	1592	1g	jinpanbio	24765分装

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

发表于2024年9月24日由上海金畔生物科技有限公司

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff Trans^®mRNA转染试剂是一款针对mRNA细胞转染的阳离子多聚物转染试剂，对常规细胞、原代细胞、神经细胞都具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸–转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！

注意事项

1）转染操作时，以细胞融合度达70%-80%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2）制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3）使用无RNA酶污染的耗材与试剂。

4）2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。

5）初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

6）本产品仅作科研用途！

操作流程（以24孔板为例，其他培养板加样体积请参考表一）

注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA–转染试剂复合物：

1）对于每孔细胞，使用10 μL无血清培养基（如OPTI-MEM培养基）稀释0.4 μg mRNA，轻轻混匀。

2）对于每孔细胞，使用10 μL无血清培养基（如OPTI-MEM培养基）稀释0.8–1.6 μL转染试剂，轻轻混匀，室温孵育5 min。

3）将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4）室温静置孵育20 min。

3. 将mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。

4. 37℃，5% CO₂培养箱培养24-96 h，直至进行基因表达分析。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养容器	表面积	每孔体积		mRNA转染
培养容器	表面积	培养基体积	稀释液体积	mRNA	试剂体积
96-well	0.3 cm²	100 μL	2×5 μL	0.2 μg	0.2-0.4 μL
24-well	2 cm²	500 μL	2×10 μL	0.4 μg	0.8-1.6 μL
12-well	4 cm²	1 mL	2×20 μL	0.8 μg	1.6-3.2 μL
6-well	10 cm²	2 mL	2×50 μL	1 μg	2-4 μL
60-mm	20 cm²	5 mL	2×100 μL	4 μg	8-16 μL
10-cm	60 cm²	15 mL	2×300 μL	12 μg	24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考，mRNA与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！

注意事项

1）转染操作时，以细胞融合度达70%-80%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2）制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释mRNA和转染试剂。

3）使用无RNA酶污染的耗材与试剂。

4）2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。

5）初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

6）本产品仅作科研用途！

操作流程（以24孔板为例，其他培养板加样体积请参考表一）

注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1. 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-80%为佳。

2. 按照以下体系配制mRNA–转染试剂复合物：

1）对于每孔细胞，使用10 μL无血清培养基（如OPTI-MEM培养基）稀释0.4 μg mRNA，轻轻混匀。

2）对于每孔细胞，使用10 μL无血清培养基（如OPTI-MEM培养基）稀释0.8–1.6 μL转染试剂，轻轻混匀，室温孵育5 min。

3）将稀释的mRNA与稀释的转染试剂轻轻混匀。

4）室温静置孵育20 min。

3. 将mRNA-转染试剂复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。

4. 37℃，5% CO₂培养箱培养24-96 h，直至进行基因表达分析。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养容器	表面积	每孔体积		mRNA转染
培养容器	表面积	培养基体积	稀释液体积	mRNA	试剂体积
96-well	0.3 cm²	100 μL	2×5 μL	0.2 μg	0.2-0.4 μL
24-well	2 cm²	500 μL	2×10 μL	0.4 μg	0.8-1.6 μL
12-well	4 cm²	1 mL	2×20 μL	0.8 μg	1.6-3.2 μL
6-well	10 cm²	2 mL	2×50 μL	1 μg	2-4 μL
60-mm	20 cm²	5 mL	2×100 μL	4 μg	8-16 μL
10-cm	60 cm²	15 mL	2×300 μL	12 μg	24-48 μL

【注】该表使用量仅供参考，mRNA与转染试剂具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

HB221102

Q：40809主要成分是PEI吗？

A：不是，是类似LNP的组分。

Hieff Trans® mRNA转染试剂(mRNA Transfection Reagent)

暂无内容

世界转染试剂汇总

发表于2024年9月21日由上海金畔生物科技有限公司

世界转染试剂汇总

简要描述：世界上有很多转染试剂，到底你该选用哪种？

详细介绍

产品咨询

promega

产品名称

包装

目录号

价格(元)

FuGENE® 6 Transfection Reagent

1ml

E2691

3976

FuGENE® HD Transfection Reagent

5 × 1ml

E2312

33264

TransFastTM Transfection Reagent

1.2mg

E2431

2247

FuGENE® 6 Transfection Reagent

5 × 1ml

E2692

16190

FuGENE® 6 Transfection Reagent

0.5ml

E2693

2294

FuGENE® HD Transfection Reagent

1ml

E2311

6720

origene

多种转染试剂满足您的特定的cDNA和shRNA转染需求。

Cell Types	Examples	Recommended Reagents
Commonly used established cell lines	Hela, MCF 7, K562, Jurkat, 3T3, COS	TurboFectin 8.0
Most established cell lines and primary cells	Above, plus MEF, HUVEC, SMC, lymphocytes, etc.	Magnetofection PolyMag Magnetofection CombiMag
Primary neurons and neuronal cell lines	Hippocampal neurons and neuronal cell lines PC-12, B95, C6, N2A or SH-5YSY, etc.	Magnetofection NeuroMag
Virus infection of non-permissive cells		Magnetofection ViroMag
HEK293T, CHO, 293S, etc		MegaTran 1.0
For siRNA transfection	HEK293T	siTran 1.0

TurboFectin 8.0^TM是针对核酸转染真核细胞所优化的一种高效率的新型转染试剂，由配方的脂质体和组蛋白混合物，溶在80%的酒精中。适用于在各种不同构建类型的细胞中转染TrueClone®/TrueORF®克隆 (基因过表达) 以及 HuSH-29® (用于基因沉默的shRNA)。
- 性能优越: 与FuGENE®6 相媲美的高转染效率和低毒性
- 应用广泛: 使用TurboFectin 8.0 已经成功转染超过100种细胞系及原代细胞类型
- *: 比FuGENE^®价格便宜
Magnetofection ^TM是一种新型, 简易，高效的转染方法。利用磁力将含有磁珠的目的基因载体，吸向靶细胞。
- 可用于更多种细胞，更加适用于难转染的细胞。包括原代细胞和神经细胞
- 与常规转染方法相比，转染效率极大提高。
- 在较短的孵育过程内，拥有比常规转染方法高上千倍的转染效率
了解更多春季*
MegaTran 1.0 是一种非脂质体聚合物，适用于大量DNA和shRNA转染及大规模蛋白质制备。
适用细胞系：CHO，HEK293，293F suspension cells，Hela，COS-7，NIH3T3，MEF，Sf9，U2OS等。
- 高效，低毒。
- 提高瞬时转染后蛋白的表达量。
- 价格非常优惠。

INVITROGEN

Transfection Reagent	Key Features & Applications of Reagent
Lipofectamine™ LTX Transfection Reagent	High transfection efficiency and significantly lower toxicity levels for a wide range of cell lines Significantly improved transfection performance in a number of primary and hard-to-transfect cell lines Optimized protocols for over 30 different cell lines are available so much less time is needed for evaluation and optimization
FreeStyle™ MAX Transfection Reagent	Optimized for transient transfection in CHO suspension cells and also works for HEK-293 cells Used for a large-scale transient protein production with milligrams of protein yield
Lipofectamine™ RNAiMAX Transfection Reagent	Superior transfection efficiency requiring lower RNAi concentrations leading to more effective gene knockdown with minimal non-specific effects Easy optimization due to minimal cytotoxicity across a 10-fold concentration range of transfection reagent Compatibility with a broad range of cell types providing the most versatile approach to all of your gene silencing experiments
Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent	Achieves highest efficiency and expression results for plasmid or RNAi transfections Works effectively with many cell types (adherent or suspension) Easy and fast protocol – no need for wash steps before or after transfection Complexes can be added to cells growing in serum-containing media Ideal if transfecting at confluencies of 90% or greater (minimizes cytotoxicity following transfection)
Lipofectamine™ 2000 CD Transfection Reagent	Same performance as Lipofectamine™ 2000, certified animal-origin free (“CD” = chemically defined)
Oligofectamine™ Transfection Reagent	Transfection of antisense oligonucleotides
293fectin™ Transfection Reagent	Used for transient protein production in combination with the FreeStyle™ 293 Expression System Optimized for suspension FreeStyle™ 293-F cells
Cellfectin® Transfection Reagent	Optimal transfection of insect cells, including S2, Sf9, Sf21 and High Five™ cells
DMRIE-C Transfection Reagent	Transfection of suspension cells, including CHO, lymphoid and Jurkat cell lines.
Lipofectamine™ Transfection Reagent	First generation reagent for plasmid DNA transfections In most cases, Lipofectamine™ 2000 provides better performance than Lipofectamine™ Transfection Reagent
Lipofectin® Transfection Reagent	First generation reagent for plasmid DNA transfections In most cases, Lipofectamine™ 2000 provides better performance than Lipofectin® Transfection Reagent
Optifect™ Transfection Reagent	Broad use reagent designed for low confluency applications (<70% confluent at the time of transfection) Useful for cell lines that are sensitive to transfection reagents

Plasmid DNA Transfection

To obtain efficient gene transfer by transfection, plasmid DNA can be complexed with lipid reagents to mediate efficient delivery into the cell's nucleus. This process is essential for subsequent protein expression of the gene of interest. Plasmids are small circular DNA molecules that naturally occur in bacteria, and are actually used by the bacteria to transfer genetic information. The mechanism of adding a DNA Plasmid into a mammalian cell is known as plasmid transfection.

Invitrogen offers a wide range of transfection reagents for your specific needs. For cell types specific protocols, please refer to Transfection Selection Tool.

Order:
- Plasmid Transfection Reagents
- Electroporation Instruments & Reagents

Featured Product – Lipofectamine™ LTX with PLUS™ Reagent

Our latest and most efficient Lipofectamine™ product. The best choice for transfecting plasmid DNA into standard and other difficult to transfect cell types; highest transfection efficiency and viability with superb expression for all cell types.

High transfection efficiency and high gene expression with minimal cytotoxicity in a broad range of cells
Significantly improved transfection performance in a number of primary and disease-relevant cell types
No washes or media changes required – just set up and go!

In 90% of the cell lines that we have tested, transfection performance is enhanced by using Lipofectamine™ LTX and PLUS™ Reagent together.

Learn more about Lipofectamine™ LTX with PLUS™ Reagent

15338100,15338500

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Ordering Information

Sku	Product Catalog	Size	Price	Quantity
15338-100	Lipofectamine™ LTX & Plus Reagent	1 ml	488.43 USD
15338-500	Lipofectamine™ LTX Reagent	15 ml	6592.80 USD

POLYPEI转染试剂说明书

发表于2024年8月8日由上海金畔生物科技有限公司

POLYPEI转染试剂说明书

产品详情

货号	规格	价格
78EF10004-1ml	1ml	950.00
78EF10004-5ml	5ml	3200.00

产品描述

细胞转染是指将外源分子导入真核细胞内以改变其基因型或表型的一种技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制基因功能的常规手段，广泛应用于基因功能研究、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等领域。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。其中化学介导方法因其兼具高效低毒、方便快捷等优点，应用广泛。化学介导方法包括经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法以及多种阳离子物质介导的转染方法。

理想的细胞转染方法应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。已有众多文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动，影响基因表达，对研究数据产生一定程度的干扰。同时，脂质体会对目的细胞造成细胞毒性，这种毒性是由其脂质特性决定的。市面上多种商业化的脂质体转染试剂要求细胞铺板密度较高，以90%-95%为佳，这有助于减少阳离子脂质体细胞毒性造成的影响。但是，如果研究的基因要求比较长的表达时间，例如细胞周期相关基因，或者细胞表面蛋白，又或者转染后续需要进行继续培养和功能研究，则不适合用脂质体核酸转染试剂。目前众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上，以寻找更高效低毒，同时对研究影响较小的转染试剂。

PolyShooter^TM Transfection Reagent是一种基于阳离子高分子聚合物的新型转染试剂，适用于DNA、RNA的转染。其原理为带正电的高分子聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后，与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞，随后在胞质中释放，实现外源核酸的细胞转染。

PolyShooter^TM Transfection Reagent对多种常见细胞具有高水平转染效率，具有高效低毒、操作简单、重复性好等优点。其配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。同时，转染后不需要除去PolyShooter^TMTransfection Reagent-核酸复合物或更换新鲜培养基，也可根据具体情况优化转染体系。

产品特点

1.转染效率好——针对广泛类型的细胞，均表现出的转染效率和高重组蛋白表达水平

2.细胞毒性低——作用温和，能较好地实现高转染效率与低细胞毒性之间的平衡

3.操作简单——在血清存在时亦具有可靠的转染效率，转染后无需去除复合物或更换新鲜培养基

4.高性价比——经济的价格，同时实现高效的转染效果

PolyShooter^TMTransfection Reagent采用阳离子高分子聚合物为主要成分，适用于DNA、RNA的转染。

使用方法

（以24孔板为例，其他培养板加样体积参考表一：转染量度标准）

1: 准备待转染细胞

贴壁细胞：转染前一天，将胰酶消化后的细胞按照每孔0.5-1.5×10⁵个细胞的量进行铺板，使其在转染时密度为50%左右。

悬浮细胞：转染当天，配制转染试剂-核酸复合物之前，在24孔板中进行细胞铺板，每500 µL生长培养基中加入1-3×10⁵个细胞。

Ø 细胞状态会极大影响转染效率，待转染细胞应处于良好生长状态，建议使用生长处于指数期、存活率大于90% 的细胞进行转染。

2: 准备PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物

（1）取1 μg质粒加入到1.5 mL离心管中，加入2.5 μL* PolyShooter^TM转染试剂与质粒混合，室温孵育3分钟。

Ø * 转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，通常情况下，DNA（μg）和 PolyShooter^TM转染试剂（μL）的用量比例为1：2.5。建议初次使用时，可在1：2-1：5的范围内调整以优化转染效果。

（2）往上述混合物中加入100 μL无血清基础培养基（与培养体系一致，且无血清无双抗），轻轻混匀，在室温下静置30分钟，形成PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物。

Ø PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物在室温下4个小时内保持稳定。

3: 细胞转染

给细胞更换新鲜的预热的Complete medium 500 μL/孔，将上述100 µL PolyShooter^TM 转染试剂-核酸复合物加入每孔细胞，轻轻摇动培养板混匀。

Ø 对于悬浮细胞系：转染5小时后，可选择加入PMA和/或PHA以提高CVM启动子的活性并促进基因表达。对于Jurkat细胞，PHA和PMA的终浓度分别为1 µg/mL和50 ng/mL，可以提高CMV启动子活性和基因表达。对于K562细胞，只加入PMA足以提高启动子活性。

4. 分析转染细胞

转染细胞培养24-48小时后，可根据实际情况用荧光检测法、Western Blot、RT-PCR、ELISA、流式细胞术、报告基因等检测转染效果，或加入筛选药物进行稳定细胞株的筛选。

表一：转染量度标准

细胞培养装置	生长培养基体积（mL）	质粒（μg）	PolyShooterTM转染试剂（μL）	无血清基础培养基体积（μL）
96孔板	0.1	0.2	0.5	20
24孔板	0.5	1	2.5	100
12孔板	1	2	5	200
6孔板	2	2-4	5-10	400
60 mm培养皿	4	3-5	7.5-12.5	800
100 mm培养皿	10	5-10	12.5-25	2000
125 mL摇瓶	30-35	30-35	75-87.5	6000
500 mL摇瓶	120-140	120-140	300-350	24000
1000 mL摇瓶	240-280	240-280	600-700	48000

实验案例分析

09/实验案例分析

1: 转染前一天，将图2所示9种状态良好的细胞接种于24孔板，使其在转染时密度约为50%。

2: 按照每孔计量，取1μg GFP质粒加入到1.5 mL离心管中，加入2.5 μL PolyShooter^TMTransfection Reagent与质粒混合，室温孵育3 min后，往混合物

加入100 μL无血清基础DMEM培养基，轻轻混匀，在室温下静置30 min，形成PolyShooter^TM转染试剂-核酸复合物。

3: 给细胞更换新鲜的预热的Complete medium 500 μL/孔，将上述100 µL PolyShooter^TM 转染试剂-核酸复合物加入每孔细胞，轻轻摇动培养板混匀。

4：转染细胞培养48小时后，用荧光显微镜检测GFP绿色荧光蛋白表达情况，并拍照记录，实验结果如图2所示。

图2: 转染细胞培养48小时后，用荧光显微镜检测GFP绿色荧光蛋白表达情况

注意事项

1. 核酸质量：想要获得最高的转染效率和较低的细胞毒性，应选用高纯度、无菌、无污染、无内毒素的优质核酸。质粒中的内毒素是转染的大敌，内毒素会导致转染效率显著下降，特别是对内毒素敏感的细胞，例如原代细胞、悬浮细胞、造血细胞等。推荐使用无内毒素质粒抽提试剂盒进行质粒提取，保证质粒A₂₆₀/A₂₈₀比值为1.8-2.0。同时，需合理计算质粒用量，转染过量的质粒可能会导致细胞毒性甚至死亡；

2. 细胞质量：细胞状态会极大影响转染效率，建议使用生长处于指数期、存活率大于90%的细胞进行转染；

3. 细胞密度：建议细胞传代后12-24 h内、细胞密度约为50%时进行转染。不同的细胞转染实验，对细胞密度的要求不尽相同。在进行不同核酸或不同细胞系的转染时，需要根据说明书再次优化实验条件。此外，在实验过程中保证相同的接种条件，确保实验数据的可重复性；

4. 质粒与转染试剂使用比例：对于大多数细胞系，转染复合物中DNA (μg)与PolyShooter^TM Transfection Reagent (μL) 的比例在1：2至1：5之间，推荐比例为1:2.5。想要获得好的转染结果，需要对这一比例进行优化，根据所转染细胞及质粒选择适合的转染比例；

5. PolyShooter^TM Transfection Reagent可用于有血清培养基的转染，并且转染前后不需要换培养基。但是，制备转染复合物时要求用无血清基础培养基稀释DNA和转染试剂，因为血清会影响复合物的形成；

6. 由于一些特殊培养基中的某些成分可能会抑制阳离子聚合物介导的转染，因此有必要检测特殊培养基与PolyShooter^TM Transfection Reagent的相容性；

7. 为了您的健康安全，请规范操作，穿戴实验服与手套开展实验；

8. 本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及治疗。

运输及保存方法

冰袋（wet ice）运输。4℃保存，有效期6个月。-30℃至-10℃保存，有效期12个月，避免反复冻融。

常见细胞系转染试剂 Hieff Trans® 293 Transfection Reagent

发表于2024年8月5日由上海金畔生物科技有限公司

常见细胞系转染试剂 Hieff Trans® 293 Transfection Reagent

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff Trans® 常见细胞系转染试剂是一种高性能阳离子聚合物转染试剂，适用于常见贴壁或悬浮的多种细胞的质粒DNA转染，包括HEK293，MCF-7，RAW 264.7，HUVEC，HBE，THP-1，PC-3，A549，Hela，BJ，U-87 MG，Caco-2等。Hieff Trans® 常见细胞系转染试剂经过精心设计，结构明确、分子量均一，可实现高效、高重复性的细胞转染使其兼具优异的阳离子聚合物转染试剂/DNA复合物形成能力和转染到细胞内DNA的快速释放能力，保证了优异的转染性能和极低的细胞毒性。

产品信息

货号	40817ES03 / 40817ES10
规格	1 mL / 10 mL

组分信息

组分编码	组分名称	40817ES03	40817ES10
40817	Hieff Trans® 常见细胞系转染试剂	1 mL	10 mL

储存条件

2-8ºC保存，有效期2年。

使用说明

以6孔板贴壁培养HEK 293T为例

1. 接种细胞

根据细胞状态，选择合适的接种密度，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2. 准备DNA-转染试剂复合物

2.1 质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:0.5 ~ 1:3。

2.2 质粒稀释：使用50 μL无血清培养基稀释2 μg质粒，并轻轻混匀。

2.3 试剂稀释：使用50 μL无血清培养基稀释4 μL 转染试剂，并轻轻混匀。

2.4 配置复合物：将配置好的试剂稀释液加入到质粒稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置10-20 min，备用。

3. 转染细胞

3.1 直接将配置好的DNA-转染试剂复合物加入到细胞培养板的每个孔中，摇动培养板，轻轻混匀。

3.2 在37℃，5% CO₂培养箱中培养24-72h后进行检测分析。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养容器	表面积（cm²）	DNA稀释		转染试剂稀释		培养基总量
培养容器	表面积（cm²）	DNA量（μg）	稀释液体积（μL）	转染试剂量（μL）	稀释液体积（μL）	培养基总量
96孔板	0.3	0.1	5	0.2	5	100 μL
48孔板	0.7	0.2	10	0.4	10	200 μL
24孔板	1.9	0.5	25	1	25	500 μL
12孔板	3.8	1	25	2	25	1 mL
6孔板	10	2	50	4	50	2 mL
25 cm²培养瓶	21	4	100	8	100	4 mL
75 cm²培养瓶	58	8	250	16	250	10 mL
10 cm²培养皿	60	8	250	16	250	10 mL

注意事项

1. 转染过程中推荐使用高质量的质粒，如不含内毒素的质粒。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

3. 本产品仅用于科研用途，不可用于人体。

Ver.CN20230522

产品信息

货号	40817ES03 / 40817ES10
规格	1 mL / 10 mL

组分信息

组分编码	组分名称	40817ES03	40817ES10
40817	Hieff Trans® 常见细胞系转染试剂	1 mL	10 mL

储存条件

2-8ºC保存，有效期2年。

使用说明

以6孔板贴壁培养HEK 293T为例

1. 接种细胞

根据细胞状态，选择合适的接种密度，以转染时细胞密度在70%~80%为宜。

2. 准备DNA-转染试剂复合物

2.1 质粒与试剂比例：建议质粒（μg）与试剂（μL）参考配比区间为1:0.5 ~ 1:3。

2.2 质粒稀释：使用50 μL无血清培养基稀释2 μg质粒，并轻轻混匀。

2.3 试剂稀释：使用50 μL无血清培养基稀释4 μL 转染试剂，并轻轻混匀。

2.4 配置复合物：将配置好的试剂稀释液加入到质粒稀释液中，轻轻涡旋混匀后，室温静置10-20 min，备用。

3. 转染细胞

3.1 直接将配置好的DNA-转染试剂复合物加入到细胞培养板的每个孔中，摇动培养板，轻轻混匀。

3.2 在37℃，5% CO₂培养箱中培养24-72h后进行检测分析。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养容器	表面积（cm²）	DNA稀释		转染试剂稀释		培养基总量
培养容器	表面积（cm²）	DNA量（μg）	稀释液体积（μL）	转染试剂量（μL）	稀释液体积（μL）	培养基总量
96孔板	0.3	0.1	5	0.2	5	100 μL
48孔板	0.7	0.2	10	0.4	10	200 μL
24孔板	1.9	0.5	25	1	25	500 μL
12孔板	3.8	1	25	2	25	1 mL
6孔板	10	2	50	4	50	2 mL
25 cm²培养瓶	21	4	100	8	100	4 mL
75 cm²培养瓶	58	8	250	16	250	10 mL
10 cm²培养皿	60	8	250	16	250	10 mL

注意事项

1. 转染过程中推荐使用高质量的质粒，如不含内毒素的质粒。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及通风橱操作。

3. 本产品仅用于科研用途，不可用于人体。

Ver.CN20230522

常见细胞系转染试剂 Hieff Trans® 293 Transfection Reagent

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Hieff Trans<sup>®</sup>通用型转染试剂

发表于2024年7月29日由上海金畔生物科技有限公司

Hieff Trans<sup>®</sup>通用型转染试剂

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hieff Trans^®通用型转染试剂是基于最新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂，适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对难转染细胞也具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中，血清的存在不会影响转染效率，这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸–转染试剂复合物或更换新鲜培养基，也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

产品组分

组分编号	组分名称	规格/货号
组分编号	组分名称	40808ES02	40808ES03	40808ES03
40808-A	Universal-A溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL
40808-B	Universal-B溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！

注意事项

1) 转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。

3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

4) 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。

5) 2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。

6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

7) 本产品仅作科研用途！

操作流程

1. DNA转染

注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1) 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳。

2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。

3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。

4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。

5) 室温孵育5分钟。

6) 将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。

7) 37℃，5% CO₂培养箱培养48-96 h，直至进行基因表达分析。

2. siRNA转染

转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样，但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(第3步)。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养皿		96-well	24-well	6-well
贴壁细胞		1-4×10⁴	0.5-2×10⁵	0.25-1×10⁶
使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。	Opti-MEM培养基	5 μL	25 μL	125 μL
使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。	Universal-B溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。	Opti-MEM培养基	5 μL	25 μL	125 μL
	DNA (0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Universal-A溶液(2 μL/μg DNA)	0.2 μL	1 μL	5 μL
将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。	稀释的DNA	5 μL	25 μL	125 μL
将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。	稀释的Universal-B溶液	5 μL	25 μL	125 μL
室温孵育5分钟
DNA-脂质体复合物形成	复合物成分（每孔）	96-well	24-well	6-well
	Opti-MEM培养基	10 μL	50 μL	250 μL
	DNA(0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Universal-B溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
	Universal-A溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。	DNA-脂质体复合物	10 μL	50 μL	250 μL

【注】该表使用量仅供参考，DNA与Universal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

相关产品

名称	货号	规格
Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂	40802ES02	0.5 mL
	40802ES03	1.0 mL
	40802ES08	5×1mL
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂	40803ES70	200 T
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES76	500 μL
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES86	5×500 μL
Hieff Trans^® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂	40805ES02	0.5 mL
	40805ES03	1.0 mL
	40805ES08	5×1 mL
Hieff Trans^® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA体外转染试剂	40806ES02	0.5 mL
	40806ES03	1.0 mL
Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000	40815ES03	1 g
Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000	40815ES08	5×1 g
Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000（rapid lysis）线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000	40816ES02	100 mg
	40816ES03	1 g

HB220930

产品组分

组分编号	组分名称	规格/货号
组分编号	组分名称	40808ES02	40808ES03	40808ES03
40808-A	Universal-A溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL
40808-B	Universal-B溶液	0.5 mL	1 mL	5×1 mL

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。产品2-8ºC保存，一年有效。不可冷冻！

注意事项

1) 转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳，具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。

3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

4) 使用高纯度的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，质粒中的内毒素是转染的大敌。

5) 2-8ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖。

6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最高的转染效率。

7) 本产品仅作科研用途！

操作流程

1. DNA转染

注：转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1) 细胞铺板，至转染操作时，以细胞融合度达70%-90%为佳。

2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。

3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。

4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。

5) 室温孵育5分钟。

6) 将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。

7) 37℃，5% CO₂培养箱培养48-96 h，直至进行基因表达分析。

2. siRNA转染

转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样，但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(第3步)。

不同细胞培养容器转染用量（仅供参考）：

培养皿		96-well	24-well	6-well
贴壁细胞		1-4×10⁴	0.5-2×10⁵	0.25-1×10⁶
使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。	Opti-MEM培养基	5 μL	25 μL	125 μL
使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液，轻轻混匀。	Universal-B溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
使用Opti-MEM培养基稀释DNA，得到DNA预混液，然后添加Universal-A溶液，轻轻混匀，得到稀释的DNA。	Opti-MEM培养基	5 μL	25 μL	125 μL
	DNA (0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Universal-A溶液(2 μL/μg DNA)	0.2 μL	1 μL	5 μL
将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。	稀释的DNA	5 μL	25 μL	125 μL
将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)。	稀释的Universal-B溶液	5 μL	25 μL	125 μL
室温孵育5分钟
DNA-脂质体复合物形成	复合物成分（每孔）	96-well	24-well	6-well
	Opti-MEM培养基	10 μL	50 μL	250 μL
	DNA(0.5–5 μg/μL)	0.1 μg	0.5 μg	2.5 μg
	Universal-B溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
	Universal-A溶液	0.2 μL	1 μL	5 μL
将DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中，轻轻混匀。	DNA-脂质体复合物	10 μL	50 μL	250 μL

【注】该表使用量仅供参考，DNA与Universal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

相关产品

名称	货号	规格
Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂	40802ES02	0.5 mL
	40802ES03	1.0 mL
	40802ES08	5×1mL
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂	40803ES70	200 T
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES76	500 μL
Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES86	5×500 μL
Hieff Trans^® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂	40805ES02	0.5 mL
	40805ES03	1.0 mL
	40805ES08	5×1 mL
Hieff Trans^® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA体外转染试剂	40806ES02	0.5 mL
	40806ES03	1.0 mL
Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000	40815ES03	1 g
Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000	40815ES08	5×1 g
Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000（rapid lysis）线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000	40816ES02	100 mg
	40816ES03	1 g

HB220930

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[1] Xie F, Su P, Pan T, et al. Engineering Extracellular Vesicles Enriched with Palmitoylated ACE2 as COVID-19 Therapy. Adv Mater. 2021;33(49):e2103471. doi:10.1002/adma.202103471(IF:30.849)
[2] Su WQ, Yu XJ, Zhou CM. SARS-CoV-2 ORF3a Induces Incomplete Autophagy via the Unfolded Protein Response. Viruses. 2021;13(12):2467. Published 2021 Dec 9. doi:10.3390/v13122467(IF:5.048)
[3] Zu S, Xue Q, He Z, et al. Duck PIAS2 Promotes H5N1 Avian Influenza Virus Replication Through Its SUMO E3 Ligase Activity. Front Microbiol. 2020;11:1246. Published 2020 Jun 11. doi:10.3389/fmicb.2020.01246(IF:4.236)

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