rTEV Protease重组烟草蚀纹病毒蛋白酶 rTEV重组蛋白酶
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产品描述
重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
|
反应时间（h） |
不同温度下剪切活性（%） |
|||
|
4℃ |
16℃ |
21℃ |
30℃ |
|
|
1 |
34 |
58 |
56 |
70 |
|
2 |
58 |
80 |
78 |
90 |
|
3 |
71 |
99 |
99 |
99 |
|
3.5 |
84 |
99 |
99 |
99 |
产品性质
|
来源（Source） |
大肠杆菌 |
|
外观（Appearance） |
无色透明液体 |
|
比活力（Specific Activity） |
5 U/μL |
|
活性定义（Unit Definition） |
在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT）中，30℃反应1 h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
|
纯化（Purification） |
Ni柱亲和纯化 |
|
纯度（Purity） |
≥95%（by SDS-PAGE） |
产品组分
|
编号 |
组分名称 |
产品货号/规格 |
|||
|
20403JP80/ （1000 U） |
20403JP92 （10×1000 U） |
20403JP10 （10 KU） |
20403JP50 （50 KU） |
||
|
20403-A |
rTEV Protease（5 U/μL） |
200 μL |
10×200 μL |
2×1 mL |
10 mL |
|
20403-B |
rTEV Buffer （10×） |
600 μL |
10×600 μL |
6 mL |
30 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。rTEV Buffer于-20℃保存，一年稳定。rTEV Protease，-20℃保存，6个月稳定；–80℃长期保存，一年稳定。建议收到货或者第一次使用时分装各组分保存，避免反复冻融。
应用实例
1. 在EP管中配制如下反应体系。
|
组分 |
用量 |
|
融合蛋白 |
40 μg |
|
rTEV Protease (5 U/μL) |
4 μL |
|
rTEV buffer（10×） |
10 μL |
2. 30℃孵育2h或4℃过夜。
注意事项
1. 影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/mL），EDTA（1 mM），Pestatin A（1 mM）以及E-64（3 mg/mL），而rTEV可兼容上述抑制剂；2）Zn离子浓度（>5 mM），同样对rTEV活性有抑制；3）与半胱氨酸反应的试剂，也是rTEV的潜在抑制剂。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途！
HB221013
产品描述
重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30℃时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30℃的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
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反应时间（h） |
不同温度下剪切活性（%） |
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4℃ |
16℃ |
21℃ |
30℃ |
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56 |
70 |
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58 |
80 |
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90 |
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3 |
71 |
99 |
99 |
99 |
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3.5 |
84 |
99 |
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产品性质
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来源（Source） |
大肠杆菌 |
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外观（Appearance） |
无色透明液体 |
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比活力（Specific Activity） |
5 U/μL |
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活性定义（Unit Definition） |
在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT）中，30℃反应1 h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
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纯化（Purification） |
Ni柱亲和纯化 |
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纯度（Purity） |
≥95%（by SDS-PAGE） |
产品组分
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编号 |
组分名称 |
产品货号/规格 |
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20403JP80/ （1000 U） |
20403JP92 （10×1000 U） |
20403JP10 （10 KU） |
20403JP50 （50 KU） |
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20403-A |
rTEV Protease（5 U/μL） |
200 μL |
10×200 μL |
2×1 mL |
10 mL |
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20403-B |
rTEV Buffer （10×） |
600 μL |
10×600 μL |
6 mL |
30 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。rTEV Buffer于-20℃保存，一年稳定。rTEV Protease，-20℃保存，6个月稳定；–80℃长期保存，一年稳定。建议收到货或者第一次使用时分装各组分保存，避免反复冻融。
应用实例
1. 在EP管中配制如下反应体系。
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组分 |
用量 |
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融合蛋白 |
40 μg |
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rTEV Protease (5 U/μL) |
4 μL |
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rTEV buffer（10×） |
10 μL |
2. 30℃孵育2h或4℃过夜。
注意事项
1. 影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1 mM），TLCK（1 mM），Bestatin（1 mg/mL），EDTA（1 mM），Pestatin A（1 mM）以及E-64（3 mg/mL），而rTEV可兼容上述抑制剂；2）Zn离子浓度（>5 mM），同样对rTEV活性有抑制；3）与半胱氨酸反应的试剂，也是rTEV的潜在抑制剂。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途！
HB221013
Q：该产品有什么纯化而来？
A：该产品来源于大肠杆菌经过Ni 柱亲和纯化而来。
Q：该产品有何优点？
A：重组型 TEV 蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然 TEV 酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。
Q：该产品可用于什么实验？、
A：rTEV 是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性。
Q：该产品的最适酶切时间和温度是多少？
A：16-30℃下反应 3-3.5h 最好。
Q：该产品分子量多大？
A：27.5。
Q：该产品带标签吗？
A：带his标签，酶切后可用Ni去除。
[1] Wang Y, Feng T, Zhu M, et al. PABPN1L assemble into "ring-like" aggregates in the cytoplasm of MII oocytes and is associated with female infertility†. Biol Reprod. 2022;106(1):83-94. doi:10.1093/biolre/ioab203(IF:4.285)
[2] Wang S, Lin H, Zhao T, et al. Expression and purification of an FGF9 fusion protein in E. coli, and the effects of the FGF9 subfamily on human hepatocellular carcinoma cell proliferation and migration. Appl Microbiol Biotechnol. 2017;101(21):7823-7835. doi:10.1007/s00253-017-8468-1(IF:3.420)
[3] Feng J, Duan Y, Qin Y, et al. The N-terminal pY33XL motif of CaPsy2 is critical for the function of protein phosphatase 4 in CaRad53 deactivation, DNA damage-induced filamentation and virulence in Candida albicans. Int J Med Microbiol. 2017;307(8):471-480. doi:10.1016/j.ijmm.2017.09.017(IF:3.391)
