D-荧光素钾盐在细胞标记方面具有重要作用

  D-荧光素钾盐是一种常用的生物染色剂,广泛应用于生物学、医学和环境科学等领域。具有高荧光强度、选择性好、稳定性强等特点,因此在细胞标记、免疫组化、荧光定量PCR等实验中得到了广泛应用。
  

 

  D-荧光素钾盐的主要作用:
  
  1.在细胞标记方面具有重要作用。通过将其与细胞特异性抗体结合,可以实现对特定细胞的标记。这种标记方法具有高灵敏度和高选择性,可以用于观察细胞形态、定位细胞器和蛋白质等。还可以用于活细胞成像,通过激光共聚焦显微镜等设备,可以实时观察细胞内分子的运动和相互作用,为研究细胞功能提供了重要手段。
  
  2.在免疫组化实验中也发挥着重要作用。免疫组化是一种检测特定蛋白质在组织或细胞中的表达水平的方法。通过与抗体结合,可以实现对目标蛋白质的高灵敏度检测。这种方法具有操作简便、结果直观等优点,被广泛应用于病理学、肿瘤学等领域。
  
  3.用于荧光定量PCR实验。荧光定量PCR是一种基于荧光信号的变化来定量分析目标基因的方法。将其作为荧光探针,可以实现对目标基因的定量检测。这种方法具有高灵敏度、高特异性和高通量等优点,被广泛应用于病原体检测、基因表达分析等领域。
  
  4.可以用于环境科学领域的研究。通过与污染物结合,实现对水体、土壤等环境中污染物的快速检测和定量分析。这种方法具有操作简便、结果准确等优点,为环境保护和污染治理提供了重要手段。
  
  D-荧光素钾盐作为一种重要的生物染色剂,在细胞标记、免疫组化、荧光定量PCR等领域具有广泛的应用前景。然而,在使用过程中需要注意其潜在的毒性和经济性问题。

D-荧光素钾盐代理


D-荧光素钾盐代理

简要描述:D-荧光素钾盐代理,D-荧光素钾盐上海代理,D-荧光素钾盐北京代理,D-荧光素钾盐 代理,D-荧光素钾盐一级代理,D-荧光素钾盐国内代理

上海金畔生物科技有限公司D-荧光素钾盐专业代理,具体产品信息欢迎电询:021-50837765

详细介绍

产品咨询

D-荧光素钾盐代理,D-荧光素钾盐上海代理,D-荧光素钾盐北京代理,D-荧光素钾盐 代理,D-荧光素钾盐一级代理,D-荧光素钾盐国内代理

上海金畔生物科技有限公司D-荧光素钾盐专业代理,具体产品信息欢迎电询:

 

D-荧光素钾盐,D-Luciferin, Potassium Salt,D-Luciferin  Potassium Salt现货,D-Luciferin现货D-荧光素钾盐现货,115144-35-9,D-Luciferin  free acid 现货,DLuciferin现货,D-荧光素钠盐,D-荧光素钠盐现货,进口D-荧光素钠盐,进口D-荧光素钾盐,d-荧光素钠,D-虫荧光素钠,103404-75-7,

 

·         详细信息:

·         D-Luciferin, Potassium Salt/D-荧光素钾盐;
分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O 分子量:320.32 g/mol 纯度:高级纯(99.7%
应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和荧光素酶融合基因体内/体外表达的成像分析;
2)广泛用于报告基因分析,免疫分析和ATP荧光卫生监测分析;
Protocol 1In Vitro Bioluminescent Assays/ 体外生物发光检测
1)配制成100 mM的储存液(200×,浓度30mg/ml)。混匀后立即使用或分装后-20℃冻存。
2)用预热好的组织培养基1200稀释储存液,配制工作液(终浓度150μg/mL)
3)去除培养细胞的培养基直至无残留。
4)图像分析前立即向细胞内添加荧光素工作液,然后进行图像分析(或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号)。
Protocol 2In vivo analysis in mice / 小鼠活体成像分析
1)用无菌的DPBSw/o Mg2+Ca2+)配制D-荧光素钾盐溶液(15mg/mL)0.2um滤膜过滤除菌。一旦使用,保持冰冷且避光。
2)按10 μL/g体重的浓度向每支小鼠注射相应量的15mg/mL荧光素溶液;
3)腹腔注射10-15 min后进行成像分析。(对每只动物模型做荧光素动力学研究以确定峰值信号获取时间)
使用荧光素发表的文献:
1. Barth et al. Molecular Therapy. 2008, 16. 957-964.
2. Mahller et al. Cancer Research.
 2008, 68 (4). 1170-1179.
3. Marques et al. Journal of Neurovirology.
 2008, 14 (3). 229-238.
4. Stish et al. J. Neurooncol.
 2008, 61 (1). 51-61.
5. Zhang et al. Cancer Research.
 2007, 67. 9389-9397. 6. Baia, G. et al, Brain Pathology, 2007, 18 (2), 172-179.
7. Barth, A. et al, Molecular Therapy,
 2008, 16 (5), 957-964.
8. Su Y. et al. Clinical and Experimental Metastasis,
 2009

名称

货号

规格

调整前价格

报价

*

 

D-萤火虫荧光素酸 *超纯级* 

12501

25 mg

900

650

450

(D-Luciferin, free acid)

D-萤火虫荧光素酸*超纯级* 

12502

100 mg

1140

1050

600

(D-Luciferin, free acid)

D-萤火虫荧光素酸*超纯级* 

12503

1g

6600

4050

3000

(D-Luciferin, free acid)

D-荧光素钾盐 *超级纯*

12505

25 mg

900

650

450

(D-Luciferin, potassium salt)

D-荧光素钾盐 *超级纯*

12506

100 mg

1140

1050

600

(D-Luciferin, potassium salt)

D-荧光素钾盐 *超级纯*

12507

1g

6600

4050

3000

(D-Luciferin, potassium salt)

D-荧光素钠盐 *超级纯*

12509

25 mg

900

650

450

(D-Luciferin, sodium salt)

D-荧光素钠盐 *超级纯*

12510

100 mg

1140

1050

600

(D-Luciferin, sodium salt)

D-荧光素钠盐 *超级纯*

12511

1g

6600

4050

3000

(D-Luciferin, sodium salt)

 

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司

Goldbio D-荧光素钾盐大量现货

 

Goldbio D-荧光素钾盐上海金畔生物大量现货

 

D-萤光素,钾盐(Proven and Published TM)

Goldbio 目录编号: LUCK-1G

CAS编号: 115144-35-9

尺寸:

Goldbio LUCK-1G 产品规格:
D-萤光素,钾盐,
4,5-二氢-2-(6-羟基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑甲酸钾盐,

 

分子生物学等级

式:KC 11 H 7 N 2 O 3 S 2

MW:318.42g / mol

颜色:淡黄色粉末

纯度:> 99%纯。(质量由九个独立标准(包括HPLC和FTIR)进行验证。)

储存/处理:储存于-20°C。防光。

PubChem化学品编号: 44134804

描述

萤光素蛋白是用于荧光素酶表达的体内成像的常见生物发光报告物 。用于萤火虫荧光素酶的这种水溶性底物利用ATP和Mg 2+作为辅因子,在氧的存在下发出特征性的黄绿色发射,其在37℃下在体内转变为红光。通过使用ATP,反应可以进一步用于指示能量或寿命的存在,以便作为生死攸关的污点。

萤光素是生物技术领域的常用试剂​​,专门用于 体内成像。通常将荧光素酶标记的肿瘤细胞,干细胞或感染性疾病接种到研究动物如大鼠或小鼠中进行调查。荧光素的注射允许通过生物发光成像(BLI)在这些模型系统中实时,无创地监测疾病进展和/或药物功效。

萤光素还通常用于 体外研究,包括荧光素酶和ATP测定,基因报告物测定,高通量测序和各种污染测定。

萤火虫萤光素与甲壳素萤光素相同。

Biotium

Biotium

简要描述:

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAYAREA——世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAYAREA——世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。

 

Biotium is a leading provider of innovative fluorescence detection technologies and products for life science research. Their fluorescent reagents and related biochemicals facilitate applications in genomics, proteomics, molecular biology, cell biology, neuroscience and drug screening.

 

Recent product highlights from Biotium include:

Mix-n-Stain™ CF™ Dye Antibody Labeling Kits

Label 5 to 100 ug of an Antibody with the Brightest Dyes in 30 minutes

Near IR CF™ Dyes

Simply the brightest and most stable near infrared fluorescent dyes for:

In vivo imaging

Near IR Western

Flow cytometry with 633 or 635 nm excitation

 

GelRed™& GelGreen™

GelRed and GelGreen are two superior fluorescent nucleic acid gel stains that are ultra sensitive, non-mutagenic and exceptionally stable.

产品列表:

Biotium

5(6)-CARBOXY-X-RHODAMINE-N-HYDROXYSUCCINIMIDE ESTER

5(6)-羧基-X-罗丹明-N-羟基琥珀酰亚胺酯

114616-32-9

Biotium

Fluorescein isothiocyanate isomer I

异硫氰酸荧光素酯

3326-32-7

Biotium

NONYL ACRIDINE ORANGE

10-壬基吖啶橙溴化物

75168-11-5

Biotium

4-METHYLUMBELLIFERYL PHOSPHATE DISODIUM SALT

4-甲基伞形酮磷酸二钠盐三水

22919-26-2

Biotium

TETRODOTOXIN

 

4368-28-9

Biotium

Diammonium 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonate)

2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐

30931-67-0

Biotium

1,1'-DIOCTADECYL-3,3,3',3'-TETRAMETHYLINDOCARBOCYANINE PERCHLORATE

N,N-二甲基甲酰胺

41085-99-8

Biotium

BIOCYTIN HYDRAZIDE HYDROCHLORIDE

N-生物素酰基-L-赖氨酸酰肼

102743-85-1

Biotium

5-Bromo-6-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside

5-溴-6-氯-3-吲哚基-beta-D-半乳糖苷

93863-88-8

Biotium

TPEN

N,N,N',N'-四(2-吡啶甲基)乙二胺

16858-02-9

Biotium

COELENTERAZINE H

腔肠素-H

50909-86-9

Biotium

ALPHA-BUNGAROTOXIN

Α-金环蛇毒

11032-79-4

Biotium

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside

5-溴-4-氯-3-吲哚半乳糖苷

7240-90-6

Biotium

BIOTIN-XX-NHS

BIOTIN-(AC5)2-OSU

89889-52-1

Biotium

4',6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride

4',6-二脒基-2-苯基吲哚

28718-90-3

Biotium

4-METHYLUMBELLIFERYL PHOSPHATE

4-甲基伞形酮磷酸酯

3368/4/5

Biotium

5(6)-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE

90% (TLC)

124387-19-5

Biotium

FURA 2

 

96314-98-6

Biotium

SULFORHODAMINE G

酸性桃红G

5873-16-5

Biotium

5(6)-CARBOXY-2',7'-DICHLOROFLUORESCEIN DIACETATE

5[6]-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

127770-45-0

Biotium

HYDROETHIDINE

HYDROETHIDINE

38483-26-0

Biotium

SULFORHODAMINE 101

磺基罗丹明101

60311-02-6

Biotium

L-N6-(1-IMINOETHYL)LYSINE DIHYDROCHLORIDE

L-N6-(1-亚氨基乙基)赖氨酸双盐酸盐

150403-89-7

 

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

谷胱甘肽(Glutathione)是一种由3个氨基酸残基(甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸)组成的小肽,保护细胞免受活性氧如自由基和过氧化物引起的细胞损伤。谷胱甘肽在细胞中主要以还原性谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide, GSSG)两种形式存在。

GSH是细胞中重要的抗氧化剂,能维持蛋白的还原状态。在谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)催化的反应中,两个GSH分子通过巯基脱氢形成二硫键而产生GSSG。此外,谷胱甘肽还原酶(GR)氧化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(β-NADPH2)的同时会将GSSG转变为GSH。在正常细胞中,GSH的含量超过谷胱甘肽总量的90%;当细胞中氧化应激水平上升时,GSSG含量增加,GSH/GSSG比例下降,所以,GSH/GSSG比例可做为细胞中氧化应激水平的指标。

该试剂盒采用了一种特殊的非荧光染料,通过与GSH反应发出强烈荧光(Ex/Em=490/520 nm),可定量分析样品中的GSH含量;也可通过GSSG Probe将GSSG还原成GSH,定量分析样品中的GSSG含量。该试剂盒灵敏度高,可以在100 µL测定体积中检测到少至1 pM的GSH或GSSG。

 

产品组分

组分编号

 组分名称

组分规格

储存条件

50120-A

Thiolite Green

1 vial

-20℃

50120-B

Assay Buffer

25 mL×1

-20℃

50120-C

GSH Standard

1 vial (62 µg)

-20℃

50120D

DMSO

400 μL×1

-20℃

50120E

GSSG Probe

1 vial

-20℃

50120-F

GSSG Standard

1 vial (124 µg)

-20℃

 

【注】:50120E组分(GSSG Probe)配置后须在2 h以内使用完毕,介意慎选。

 

运输和保存方法

冰袋运输。避光保存于-20℃,有效期2

 

注意事项

  1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  3. 粉末溶解前请先短暂离心,以保证产品全在管底。
  4. 请勿吸入、吞咽或者直接接触皮肤和眼睛。
  5. 本产品仅用于科研用途。

 

实验过程

1 试剂准备

GSH标准品母液(1 mM):将200 μL Assay Buffer(B组分)加入GSH StandardC组分)中制备1 mM GSH标准品母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C保存,避免反复冻融。

GSSG标准品母液(1 mM):将200 μL ddH2O加入GSSG StandardF组分)中制备1 mM GSSG标准品母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C保存,避免反复冻融。

Thiolite Green母液(100×):将100 μL DMSO(D组分)逐滴加入Thiolite Green(A组分)中,涡旋振荡混匀,制备100×Thiolite Green母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C避光保存,避免反复冻融。

【注】:为充分溶解也可用200 μL DMSO配置成50×Thiolite Green母液。

GSH工作液:100 μL Thiolite Green母液(100×)中加入10 mL Assay Buffer(B组分),混匀。

【注】:相当于两个96孔板的检测用量,请根据实际情况进行调整GSH工作液在室温下不稳定,注意避光,并在配置后2 h以内使用。

 Total GSH工作液:将5 mL的GSH工作液加入到GSSG Probe(E组分),涡旋振荡混匀。

【注】:相当于1个96孔板的检测用量,请根据实际情况进行调整Total Glutathione工作液在室温下不稳定,注意避光,并在配置后2 h以内使用。

2 GSH和GSSG标准液准备

2.1 向10 μL的GSH标准母液(1 mM)中加入990 μL的Assay Buffer(B组分)配置10 μM GSH标准液;然后用Assay Buffer(B组分)按1:1比例依次稀释200 μL的10 μM GSH标准液以制备5 μM、2.5 μM、1.25 μM、0.625 μM、0.3125 μM和0.1563 μM的GSH标准液。

2.2 向10 μL的GSSG标准母液(1 mM)中加入990 μL的Assay Buffer(B组分)配置10 μM GSSG标准液;然后用Assay Buffer(B组分)按1:1比例依次稀释200 μL的10 μM GSSG标准液以制备5 μM、2.5 μM、1.25 μM、0.625 μM、0.3125 μM、0.1563 μM和0.0781 μM的GSSG标准液。

【注】:稀释的GSH和GSSG标准液不稳定,需要在配置后4 h以内使用

3 样本制备

3.1 细胞样本:尽量使用新鲜样本。收集104-105个细胞,预冷PBS润洗后,加入100 μL裂解液(0.5% NP-40 in PBS, pH4-6),冰上裂解,12,000g 4℃离心15 min取上清,去蛋白处理(见3.4)后用于检测。

3.2 组织样本:取20 mg组织样本,预冷PBS润洗后,加入400 μL裂解液(0.5% NP-40 in PBS, pH4-6),冰上匀浆,12,000g 4℃离心15 min取上清,去蛋白处理(见3.4)后用于检测。

3.3 血浆、血清、血液和尿液样本:使用新鲜样本,去蛋白处理(见3.4)后,用于GSH/GSSG的测定。

3.4 样本去蛋白处理:组织、细胞和生物液体中可能存在干扰检测的蛋白酶类,可使用TCA/NaHCO3方法来去除蛋白。向样本中加入5倍体积预冷的100% TCA,混匀后冰上孵育5-10 min,12,000g 4℃离心5 min取上清,然后逐滴加入NaHCO3溶液中和至pH为4-6,取1 μL样品用pH试纸进行测定;13,000g 4℃离心15 min取上清用于GSH/GSSG的测定。

【注】:避免中和后的溶液pH超过7,因为GSH不稳定,在pH>7时容易被氧化。

4 检测GSH和Total GSH含量

4.1向黑色平底孔板中加入相应体积的标准液、待测样本和空白对照(使用Assay buffer,组分B),见Table1;对于96孔板,每孔加入50 μL标准液或待测样本,总测定体积为100 μL/孔;对于384孔板,每孔加入25 μL标准液或待测样本,总测定体积为50 μL/孔。

Table 1. Layout of GSH standards, GSSG standards, Blank Control and test samples in a solid black 96-well microplate.

Panel A: For GSH

Panel B: For Total GSH

BL

BL

TS

TS

BL

BL

TS

TS

GSH1

GSH1

GSSG1

GSSG1

GSH2

GSH2

GSSG2

GSSG2

GSH3

GSH3

 

 

GSSG3

GSSG3

 

 

GSH4

GSH4

 

 

GSSG4

GSSG4

 

 

GSH5

GSH5

 

 

GSSG5

GSSG5

 

 

GSH6

GSH6

 

 

GSSG6

GSSG6

 

 

GSH7

GSH7

 

 

GSSG7

GSSG7

 

 

GSH = GSH Standard (GSH1 – GSH7, 0.1563 to 10 µM), GSSG = GSSG Standard (GSSG1 – GSSG7, 0.0781 to 5 µM), BL = Blank Control, TS = Test Sample

4.2 对于测定GSH含量(Panel A),向GSH标准液、待测样本和空白对照中加入同等体积GSH工作液。

4.3 对于测定Total GSH含量(Panel B),向GSSG标准液、待测样本和空白对照中加入等体积Total GSH工作液。

4.4 混匀后,室温孵育10-60 min。

4.5 荧光酶标仪下测量荧光读值,Ex/Em = 490/520 nm。

【注】:如果样本荧光过高,注意稀释样本后再进行检测。

 

数据分析

1 从空白标准孔获得的读数用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值,荧光背景会随时间而增加,因此标准品和测试样本的荧光读值计算前需减去空白孔的荧光强度值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该方程可以用于计算样本中GSH和Total GSH含量。

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

1 GSH标准曲线

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

2 Total GSH标准曲线(横坐标为GSSG标准液浓度(0.0781-2.5 µM)换算成相应GSH浓度)

2 通过Panel A GSH的标准曲线计算样本中GSH的含量,注意样本制备过程中的稀释倍数。

3 通过Panel B GSSG的标准曲线计算样本中Total GSH的含量,注意样本制备过程中的稀释倍数。

4 由于1 mole的GSSG能转化成2 mole的GSH,GSSG= (Total GSH- GSH)/2。

HB221229

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

暂无内容

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

暂无内容

 

谷胱甘肽(Glutathione)是一种由3个氨基酸残基(甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸)组成的小肽,保护细胞免受活性氧如自由基和过氧化物引起的细胞损伤。谷胱甘肽在细胞中主要以还原性谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide, GSSG)两种形式存在。

GSH是细胞中重要的抗氧化剂,能维持蛋白的还原状态。在谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)催化的反应中,两个GSH分子通过巯基脱氢形成二硫键而产生GSSG。此外,谷胱甘肽还原酶(GR)氧化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(β-NADPH2)的同时会将GSSG转变为GSH。在正常细胞中,GSH的含量超过谷胱甘肽总量的90%;当细胞中氧化应激水平上升时,GSSG含量增加,GSH/GSSG比例下降,所以,GSH/GSSG比例可做为细胞中氧化应激水平的指标。

该试剂盒采用了一种特殊的非荧光染料,通过与GSH反应发出强烈荧光(Ex/Em=490/520 nm),可定量分析样品中的GSH含量;也可通过GSSG Probe将GSSG还原成GSH,定量分析样品中的GSSG含量。该试剂盒灵敏度高,可以在100 µL测定体积中检测到少至1 pM的GSH或GSSG。

 

产品组分

组分编号

 组分名称

组分规格

储存条件

50120-A

Thiolite Green

1 vial

-20℃

50120-B

Assay Buffer

25 mL×1

-20℃

50120-C

GSH Standard

1 vial (62 µg)

-20℃

50120D

DMSO

400 μL×1

-20℃

50120E

GSSG Probe

1 vial

-20℃

50120-F

GSSG Standard

1 vial (124 µg)

-20℃

 

【注】:50120E组分(GSSG Probe)配置后须在2 h以内使用完毕,介意慎选。

 

运输和保存方法

冰袋运输。避光保存于-20℃,有效期2

 

注意事项

  1. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭
  2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
  3. 粉末溶解前请先短暂离心,以保证产品全在管底。
  4. 请勿吸入、吞咽或者直接接触皮肤和眼睛。
  5. 本产品仅用于科研用途。

 

实验过程

1 试剂准备

GSH标准品母液(1 mM):将200 μL Assay Buffer(B组分)加入GSH StandardC组分)中制备1 mM GSH标准品母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C保存,避免反复冻融。

GSSG标准品母液(1 mM):将200 μL ddH2O加入GSSG StandardF组分)中制备1 mM GSSG标准品母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C保存,避免反复冻融。

Thiolite Green母液(100×):将100 μL DMSO(D组分)逐滴加入Thiolite Green(A组分)中,涡旋振荡混匀,制备100×Thiolite Green母液,用时置于冰上,未用完的分装-20°C避光保存,避免反复冻融。

【注】:为充分溶解也可用200 μL DMSO配置成50×Thiolite Green母液。

GSH工作液:100 μL Thiolite Green母液(100×)中加入10 mL Assay Buffer(B组分),混匀。

【注】:相当于两个96孔板的检测用量,请根据实际情况进行调整GSH工作液在室温下不稳定,注意避光,并在配置后2 h以内使用。

 Total GSH工作液:将5 mL的GSH工作液加入到GSSG Probe(E组分),涡旋振荡混匀。

【注】:相当于1个96孔板的检测用量,请根据实际情况进行调整Total Glutathione工作液在室温下不稳定,注意避光,并在配置后2 h以内使用。

2 GSH和GSSG标准液准备

2.1 向10 μL的GSH标准母液(1 mM)中加入990 μL的Assay Buffer(B组分)配置10 μM GSH标准液;然后用Assay Buffer(B组分)按1:1比例依次稀释200 μL的10 μM GSH标准液以制备5 μM、2.5 μM、1.25 μM、0.625 μM、0.3125 μM和0.1563 μM的GSH标准液。

2.2 向10 μL的GSSG标准母液(1 mM)中加入990 μL的Assay Buffer(B组分)配置10 μM GSSG标准液;然后用Assay Buffer(B组分)按1:1比例依次稀释200 μL的10 μM GSSG标准液以制备5 μM、2.5 μM、1.25 μM、0.625 μM、0.3125 μM、0.1563 μM和0.0781 μM的GSSG标准液。

【注】:稀释的GSH和GSSG标准液不稳定,需要在配置后4 h以内使用

3 样本制备

3.1 细胞样本:尽量使用新鲜样本。收集104-105个细胞,预冷PBS润洗后,加入100 μL裂解液(0.5% NP-40 in PBS, pH4-6),冰上裂解,12,000g 4℃离心15 min取上清,去蛋白处理(见3.4)后用于检测。

3.2 组织样本:取20 mg组织样本,预冷PBS润洗后,加入400 μL裂解液(0.5% NP-40 in PBS, pH4-6),冰上匀浆,12,000g 4℃离心15 min取上清,去蛋白处理(见3.4)后用于检测。

3.3 血浆、血清、血液和尿液样本:使用新鲜样本,去蛋白处理(见3.4)后,用于GSH/GSSG的测定。

3.4 样本去蛋白处理:组织、细胞和生物液体中可能存在干扰检测的蛋白酶类,可使用TCA/NaHCO3方法来去除蛋白。向样本中加入5倍体积预冷的100% TCA,混匀后冰上孵育5-10 min,12,000g 4℃离心5 min取上清,然后逐滴加入NaHCO3溶液中和至pH为4-6,取1 μL样品用pH试纸进行测定;13,000g 4℃离心15 min取上清用于GSH/GSSG的测定。

【注】:避免中和后的溶液pH超过7,因为GSH不稳定,在pH>7时容易被氧化。

4 检测GSH和Total GSH含量

4.1向黑色平底孔板中加入相应体积的标准液、待测样本和空白对照(使用Assay buffer,组分B),见Table1;对于96孔板,每孔加入50 μL标准液或待测样本,总测定体积为100 μL/孔;对于384孔板,每孔加入25 μL标准液或待测样本,总测定体积为50 μL/孔。

Table 1. Layout of GSH standards, GSSG standards, Blank Control and test samples in a solid black 96-well microplate.

Panel A: For GSH

Panel B: For Total GSH

BL

BL

TS

TS

BL

BL

TS

TS

GSH1

GSH1

GSSG1

GSSG1

GSH2

GSH2

GSSG2

GSSG2

GSH3

GSH3

 

 

GSSG3

GSSG3

 

 

GSH4

GSH4

 

 

GSSG4

GSSG4

 

 

GSH5

GSH5

 

 

GSSG5

GSSG5

 

 

GSH6

GSH6

 

 

GSSG6

GSSG6

 

 

GSH7

GSH7

 

 

GSSG7

GSSG7

 

 

GSH = GSH Standard (GSH1 – GSH7, 0.1563 to 10 µM), GSSG = GSSG Standard (GSSG1 – GSSG7, 0.0781 to 5 µM), BL = Blank Control, TS = Test Sample

4.2 对于测定GSH含量(Panel A),向GSH标准液、待测样本和空白对照中加入同等体积GSH工作液。

4.3 对于测定Total GSH含量(Panel B),向GSSG标准液、待测样本和空白对照中加入等体积Total GSH工作液。

4.4 混匀后,室温孵育10-60 min。

4.5 荧光酶标仪下测量荧光读值,Ex/Em = 490/520 nm。

【注】:如果样本荧光过高,注意稀释样本后再进行检测。

 

数据分析

1 从空白标准孔获得的读数用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值,荧光背景会随时间而增加,因此标准品和测试样本的荧光读值计算前需减去空白孔的荧光强度值。然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该方程可以用于计算样本中GSH和Total GSH含量。

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

1 GSH标准曲线

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

2 Total GSH标准曲线(横坐标为GSSG标准液浓度(0.0781-2.5 µM)换算成相应GSH浓度)

2 通过Panel A GSH的标准曲线计算样本中GSH的含量,注意样本制备过程中的稀释倍数。

3 通过Panel B GSSG的标准曲线计算样本中Total GSH的含量,注意样本制备过程中的稀释倍数。

4 由于1 mole的GSSG能转化成2 mole的GSH,GSSG= (Total GSH- GSH)/2。

HB221229

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

暂无内容

GSH/GSSG比例荧光检测试剂盒(绿色荧光)

暂无内容

Bangs 荧光微球


Bangs Laboratories,Inc。是一家用于诊断,研究和流式细胞仪应用的均匀聚合物二氧化硅磁性微球产品的制造商。我们还生产许多特种产品,以支持分析仪器的验证和质量控制程序,包括广泛的荧光计数尺寸细胞活力标准。

荧光微球

荧光微球是诊断和生命科学研究的主要支柱,可用作荧光标记物,分析底物和仪器标准。为了满足这些不同应用中微粒所需的*性能标准,我们备有大量荧光微球库存并提供定制染色服务。查看可用荧光染料的光谱

铕螯合纳米粒子

 

我们的高荧光铕(III)纳米粒子除了用于共价连接配体的功能良好的羧化表面外,还具有出色的稳定性。我们的Eu(III)纳米粒子已被用于开发基于时间分辨(TRF)荧光的高灵敏度测定(微孔板,侧向流动)和化学发光测定中的颗粒标记。珠粒以约1%固体(w / v)水悬浮液的形式提供。查看TRF条带测试读取器的激发和发射光谱以及仪器链接。在我们的Europium Chelate手册中了解我们如何与竞争对手展开竞争。

目录编号

描述

公称通径

规格范围

产品数据表

FCEU001

铕螯合物PS – COOH

0.10μm

0.090 – 0.110μm

PDS 741.pdf

FCEU002

铕螯合物PS – COOH

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 741.pdf

FCEU003

铕螯合物PS – COOH

0.30μm

0.270 – 0.330μm

PDS 741.pdf

 

目录编号

描述

产品数据表

21960

铕螯合COOH取样包(1mL0.10μm,0.20μm,0.30μm)

PDS 741.pdf

引用

Liang RL,Xu XP,Liu TC,Zhou JW,Wang XG,Ren ZQ,Hao F,Wu YS。(2015)使用基于铕(III)螯合物微粒的侧向流动测试条测定血清中甲胎蛋白的快速且灵敏的侧向流动免疫测定方法。Anal Chim Acta; 891:277-283。

Soukka T,Paukkunen J,HärmäH,LönnbergS,Lindroos H,Lövgren。(2001)使用纳米粒子标记技术的游离前列腺特异性抗原的超敏感时间分辨免疫荧光测定法。临床化学; 47(4):( 1269年至1278年

夏昕,徐,,柯茹,张,,邹,杨伟,李琦。(2013)一种高灵敏度的纳米粒子侧流免疫分析法,用于检测氯霉素残留。Anal Bioanal Chem; 405(23):7541-4。

Yeo SJ,Bao DT,Seo GE,Bui CT,Kim DTH,Anh NTV,…… Park H.(2017)。使用铕纳米颗粒改进针对禽流感H7亚型病毒的单克隆抗体的快速诊断应用。科学报告,7,7933。

Tuan Bao D,Kim DTH,Park H,Cuc BT,Ngoc NM,Linh NTP,… Yeo SJ。(2017)使用表位衍生肽治疗诊断试验进行荧光诊断快速检测禽流感病毒第7卷,第7期1835-1846

Tang Y,Zhang H,Liu X,Trofimchuk E,Feng S,Ma T,…,Lu X.(2017)Eu3 +掺杂聚苯乙烯微球的优势与用于免疫色谱分析的胶体金相比,用于检测牛奶中的三聚氰胺。J Food Sci。Mar; 82(3):694-697(200nm Eu螯合微球)

Do Thi Hoang Kim DT,Bao HP和Nguyen Minh Ngoc,SJY。(2018)。开发一种新的基于肽适体的免疫测定法,用于检测血清和尿液中的寨卡病毒。治疗诊断学,8(13),3629。(FCEU001,0.1μmEuroipium螯合物COOH纳米颗粒)

荧光聚苯乙烯

我们的非官能化微球适用于吸附涂层。查看可用荧光染料的光谱。有关一般吸附方案,请参见TechNote 204,吸附至微球。除非另有说明,荧光聚合物微球可以这些标准体积的~1%固体(w / v)水悬浮液获得:1mL,5mL,10mL和100mL。

 

目录编号

荧光颜色

公称通径

规格范围

产品数据表

FSDG001

龙绿

为0.05μm

0.040 – 0.060μm

PDS 731.pdf

FSFR001

闪红色

为0.05μm

0.040 – 0.060μm

PDS 731.pdf

FSDG002

龙绿

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FSSY002

阳光海岸黄色

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FSFR002

闪红色

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FSDG003

龙绿

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 731.pdf

FSPP003

梅紫

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 731.pdf

FSFR003

闪红色

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 731.pdf

FSDG004

龙绿

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FSEG004

嫉妒绿

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FSPP004

梅紫

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FSFR004

闪红色

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FSDG005

龙绿

2.00μm

1.80 – 2.20μm

PDS 731.pdf

FSPP005

梅紫

2.00μm

1.80 – 2.20μm

PDS 731.pdf

FSFR005

闪红色

2.00μm

1.80 – 2.20μm

PDS 731.pdf

FSDG006

龙绿

4.00μm

3.80 – 4.20μm

PDS 731.pdf

FSEG006

嫉妒绿

4.00μm

3.80 – 4.20μm

PDS 731.pdf

FSFR006

闪红色

4.00μm

3.80 – 4.20μm

PDS 731.pdf

FSDG007

龙绿

7.5μm

7.30 – 7.70μm

PDS 731.pdf

FSSY007

阳光海岸黄色

7.5μm

7.30 – 7.70μm

PDS 731.pdf

FSFR007

闪红色

7.5μm

7.30 – 7.70μm

PDS 731.pdf

FSEG008

嫉妒绿

10.0μm

9.50 – 10.50μm

PDS 731.pdf

FSDG009

龙绿

15.00μm

14.5 – 15.50μm

PDS 731.pdf

FSDG011

龙绿

>25.00μm

>25.00μm

PDS 731.pdf

参考

Lee,M,Reece,P,Marchington,R,Metzger,N,Dholakia,K(2007)在荧光光学显微镜上构建和校准光阱。纳特。议定书V.2 p3226-3238

Mattheyses,A,Simon,S,Rappoport,J(2010)用全内反射荧光显微镜成像细胞生物学家 J Cell Sci 123:3621-3628

Sun,Z,Martinez-Lemus,L,Trache,A,Trzeciakowski,J,Davis,G,Pohl,U,Meininger,G(2005)使用纤维连接蛋白和α5β1整联蛋白在血管平滑肌细胞上相互作用的机械性质原子力显微镜。Am J Physiol Heart Circ Physiol,289(6)H2526-H2535

Ogilvie,J,Beaurepaire,E,Alexandrou,A,Joffre,M,(2006)傅立叶变换相干反斯托克斯拉曼散射显微镜。Optics Letters,Optical Society of America,31(4),p480-2。

Chen X,Wang J,Versluis M,de Jong N,Villanueva FS。(2013)超快明场和荧光成像的微米尺寸物体的动力学。审查科学仪器84,063701

荧光羧基聚苯乙烯

生物分子可以共价固定在羧基官能化的微球上。在TechNote 205,Covalent Coupling中提供了一般的耦合协议。荧光羧基微球微球可以这些标准体积的~1%固体(w / v)水悬浮液获得:1mL,5mL,10mL和100mL。查看可用荧光染料的光谱。另请参阅我们用于悬架阵列开发的Quantumplex™套件。

 

目录编号

荧光颜色

公称通径

规格范围

产品数据表

FCDG001

龙绿

为0.05μm

0.040 – 0.060μm

PDS 731.pdf

FCFR001

闪红色

为0.05μm

0.040 – 0.060μm

PDS 731.pdf

FCDG002

龙绿

0.10μm

0.090 – 0.110μm

PDS 731.pdf

FCDG003

龙绿

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FCSG003

冲浪绿

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FCFR003

闪红色

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FCGB003

冰川蓝

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 731.pdf

FCDG004

龙绿

0.40μm

0.370-0.430μm

PDS 731.pdf

FCFR004

闪红色

0.40μm

0.370-0.430μm

PDS 731.pdf

FCDG005

龙绿

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 731.pdf

FCFR005

闪红色

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 731.pdf

FCDG006

龙绿

为1.0μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FCEG006

嫉妒绿

为1.0μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FCSY006

阳光海岸黄色

为1.0μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FCGB006

冰川蓝

为1.0μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FCFR006

闪红色

为1.0μm

0.95 – 1.05μm

PDS 731.pdf

FCSY007

阳光海岸黄色

为2.0μm

1.80 – 2.20μm

PDS 731.pdf

FCDG008

龙绿

5.0μM

4.80 – 5.20μm

PDS 731.pdf

FCEG008

嫉妒绿

5.0μM

4.80 – 5.20μm

PDS 731.pdf

FCGB008

冰川蓝

5.0μM

4.80 – 5.20μm

PDS 731.pdf

FCFR008

闪红色   

5.0μM

4.80 – 5.20μm

PDS 731.pdf

FCDG009

龙绿

10.0μm

9.50 – 10.50μm

PDS 731.pdf

FCDG011

龙绿

为15μm

14.50 – 15.50μm

PDS 731.pdf

参考

Adams EW,Ueberfeld J,Ratner DM,O'Keefe BR,Walt DR,Seeberger PH。(2003)Encoded fiber-optic microsphere arrays for probing protein-carbohydrate interaction.Angew Chem Int Ed Engl.10; 42(43):5317 -20。(Cat.235,QuantumPlex StarfireRed4.4μmCOOH)

Shapiro,K,Mazet,JA,Schriewer,A,Wuertz,S,Fritz,H,Miller,WA,…&Conrad,PA。(2010)使用超滤和胶囊过滤检测水中的弓形虫卵囊和替代微球。水研究,44(3),893-903。(10.35μm龙绿羧基,8.6μm冰蓝色羧基)

Pei X,Yin H,Lai T,Zhang J,Liu F,Xu X,Li N.(2017)使用荧光纳米颗粒计数平台分析多重检测核酸的Attomoles。Chem.10.1021 / acs.analchem.7b04551(~200nm羧化冰蓝,龙绿和嫉妒绿珠)

荧光磁性聚合物

 

封装(ME目录代码)和经典(MC目录代码)超顺磁性微球均使用导致整个聚合物基质中氧化铁晶体分布的方法合成。有关使用荧光磁性颗粒进行细胞标记和跟踪的具体信息,请参阅TSD 0748.封装磁性微球的表面预计不含氧化铁,而经典版本则会有一些暴露的氧化铁。COMPEL微球(UMC目录代码)高度均匀且呈球形。荧光磁性微球可以这些标准体积的~1%固体(w / v)水悬浮液获得:1mL,5mL,10mL和100mL。查看可用荧光染料的光谱。

 

目录编号

描述

荧光颜色

公称通径

规格范围

产品数据表

安全数据表

MCDG001

经典磁性聚合物

龙绿

0.9μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MCFR001

经典磁性聚合物

闪红色

0.9μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MEDG001

封装的磁性聚合物

龙绿

.86μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MEFR001

封装的磁性聚合物

闪红色

.86μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MEDG002

封装的磁性聚合物

龙绿

1.63μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MESY002

封装的磁性聚合物

阳光海岸黄色

1.63μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MEGB002

封装的磁性聚合物

冰川蓝

1.63μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

MEFR002

封装的磁性聚合物

闪红色

1.63μm

0.50 – 2.00μm

PDS 731.pdf

SDS MF220.pdf

UMGB001

COMPEL™磁性COOH改性

冰川蓝

3μm的

2.50 – 3.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMDG001

COMPEL™磁性COOH改性

龙绿

3μm的

2.50 – 3.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMEG001

COMPEL™磁性COOH改性

嫉妒绿

3μm的

2.50 – 3.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMFR001

COMPEL™磁性COOH改性

闪红色

3μm的

2.50 – 3.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMGB002

COMPEL™磁性COOH改性

冰川蓝

6微米

5.50 – 6.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMDG002

COMPEL™磁性COOH改性

龙绿

6微米

5.50 – 6.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMFR002

COMPEL™磁性COOH改性

闪红色

6微米

5.50 – 6.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMGB003

COMPEL™磁性COOH改性

冰川蓝

为8μm

7.50 – 8.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMDG003

COMPEL™磁性COOH改性

龙绿

为8μm

7.50 – 8.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

UMFR003

COMPEL™磁性COOH改性

闪红色

为8μm

7.50 – 8.50μm

PDS 705.pdf

SDS MF221.pdf

参考

Hinds,K,Hill,J,Shapiro,E,Laukkanen,M,Alfonso C. Silva,Combs,… Dunbar,C(2003)具有大磁性粒子的祖细胞和干细胞的内体标记允许单细胞的磁共振成像。Blood Aug 102(3)867-872

Shapiro,EM,Skrtic,S,Koretsky,AP(2005)调整大小:使用微米级氧化铁颗粒的细胞MRI。MAGN。立信。Med。,53:329-338

Rohani,R,de Chickera,SN,Willert,C,Chen,Y,Dekaban,G,Foster,P(2011)In Vivo Cellular MRI of Dendritic Cell Migration使用微米级氧化铁(MPIO)粒子 Mol Imaging Biol 13: 679

Slotkin,J,Cahill,K,Tharin,S,Shapiro,EM(2207)细胞磁共振成像:用于无创细胞定位神经治疗的纳米和微米尺寸颗粒,V4,3,P428-433

Tarulli E,Chaudhuri JD,Gretka V,Hoyles A,Morshead CM,Stanisz GJ。(2013)微米级超顺磁性氧化铁颗粒作为中风模型中骨髓间充质基质细胞迁移检测标志物的有效性。J Magn Reson Imaging.Jun; 37(6):1409-18。(MCDG001,0.9μm龙绿磁古典,60%mag)

荧光蛋白涂层聚苯乙烯

我们的库存包括各种链霉抗生物素蛋白包被的荧光微球,以约1%固体(w / v)水悬浮液的形式提供。请选择下面的目录代码链接或咨询我们的客户服务部门了解具体的可用性。查看可用荧光染料的光谱

目录编号

涂层/荧光颜色

公称通径

规格范围

产品数据表

CFDG001

SA / Dragon Green

0.20μm

0.190 – 0.210μm

PDS 721.pdf

CFDG002

SA / Dragon Green

0.40μm

0.370 – 0.430μm

PDS 721.pdf

CFFR002

SA / Flash Red

0.40μm

0.370 – 0.430μm

PDS 721.pdf

CFDG003

SA / Dragon Green

0.50μm

0.470 – 0.530μm

PDS 721.pdf

CFDG004

SA / Dragon Green

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 721.pdf

CFFR004

SA / Flash Red

1.00μm

0.95 – 1.05μm

PDS 721.pdf

STARLIGHT™校准幻灯片

 

我们的StarLight™校准载玻片具有充满活力的~6μm荧光微球,用单个荧光团染色,用于基本成像检查和校准。我们的四种标准版本适用于常见的显微镜滤镜组:冰蓝色(360,450),龙绿色(480,520),Envy Green(525,565)和Flash Red(660,690)。校准载玻片可单独购买,也可作为完整的4载玻片收集。请参见此处的荧光团光谱

目录编号

描述

产品数据表

SL1GB

StarLight™校准幻灯片 – 冰蓝色

PDS 857.pdf

SL1DG

StarLight™校准幻灯片 – Dragon Green

PDS 857.pdf

SL1EG

StarLight™校准幻灯片 – 羡慕绿色

PDS 857.pdf

SL1FR

StarLight™校准幻灯片 – 闪红色

PDS 857.pdf

SL04K

StarLight™系列 – Slide 4 -Pack

PDS 857.pdf

龙绿色强度标准

 

Dragon Green Intensity Standard是一个试剂盒,由5个单独的~8μm聚苯乙烯基微球群组成,用越来越多的Dragon Green荧光团染色。每个群体在1mL瓶中以~1.5×10 7个珠子/ mL供应。Dragon Green是荧光素的光谱替代品,适用于荧光素滤光片组。查看激发和发射光谱

目录编号

描述

产品数据表

安全数据表

DG06M

龙绿色强度标准(5强度)

PDS 704.pdf

SDS FG006.pdf

闪光红色强度标准

 

闪光红色强度标准是一个试剂盒,由5个单独的~8μm聚苯乙烯基微球群组成,用增加量的Flash Red荧光团染色。每个群体在1mL瓶中以~1.5×10 7个珠子/ mL供应。由于Flash Red在光谱上类似于Cy™5,因此传统的红色荧光团过滤器组(例如Cy™5 /显微镜,PE-Cy™5或APC /细胞仪)可与此标准一起使用。查看激发和发射光谱

目录编号

描述

产品数据表

安全数据表

FR06M

闪光红色强度标准(5个强度)

PDS 704.pdf

SDS FG006.pdf

 

 

 

 

目录编号

描述

体积(mL)

VC10B

ViaCheck™0%生存能力控制

20

VC25B

ViaCheck™25%生存能力控制

20

VC20B

ViaCheck™50%生存能力控制

20

VC30B

ViaCheck™75%生存能力控制

20

VC40B

ViaCheck™90%生存能力控制

20

VC50B

ViaCheck™100%生存能力控制

20

VC50N

ViaCheck™浓度控制(0.5×10 6

20

VC60N

ViaCheck™浓度控制(1×10 6

20

VC70N

ViaCheck™浓度控制(4×10 6

20

VC80N

ViaCheck™浓度控制(8×10 6

20

目录编号

描述

单位

VC10BSS

ViaCheck™0%活力控制SingleShots™

25或75

VC25BSS

ViaCheck™25%活力控制SingleShots™

25或75

VC20BSS

ViaCheck™50%活力控制SingleShots™

25或75

VC30BSS

ViaCheck™75%生存能力控制SingleShots™

25或75

VC40BSS

ViaCheck™90%活力控制SingleShots™

25或75

VC50BSS

ViaCheck™100%活力控制SingleShots™

25或75

VC50NSS

ViaCheck™浓度控制(0.5×10 6)SingleShots™

25或75

VC60NSS

ViaCheck™浓度控制(1×10 6)SingleShots™

25或75

VC70NSS

ViaCheck™%浓度控制(4×10 6)SingleShots™

25或75

VC80NSS

ViaCheck™%浓度控制(8×10 6)SingleShots™

25或75

目录编号

描述

897

吖啶橙

906

DAPI

891

荧光素(FITC)

894

赫斯特33342

892

碘化丙锭

目录编号

描述

450

活力染料补偿标准,4μm

451

活力染料补偿标准,8μm

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发,欢迎合作。

 

 

 

vectorlabs自发荧光猝灭剂

 

 

vectorlabs自发荧光猝灭剂

揭示真正的免疫荧光-即使在挑战性的组织中

在组织切片中,自发荧光是不需要的荧光,会导致很难或不可能将抗原特异性信号与非特异性背景区分开。该新型,申请的矢量® TrueVIEW®自发荧光猝灭试剂盒特异性结合,并从骤冷自发荧光元件非脂褐质源,显著增强信号噪声在大多数免疫荧光测定。

如果您需要满足以下条件的自发荧光阻断剂,请使用TrueVIEW Quencher:

  • 特别减少非脂褐素来源的自发荧光
  • 易于使用
  • 兼容多种荧光团
  • 与标准落射荧光和共聚焦激光显微镜兼容

 

具有DAPI的Vector®TrueVIEW®自发荧光猝灭试剂盒

 

SP-8500-15

SKU 单位大小
SP-8500-15 15毫升

 

描述

带有DAPI的TrueVIEW自体荧光猝灭试剂盒提供了一种新颖的方法,可减少来自非脂褐素来源的有害自体荧光并显着提高信噪比。由于醛固定,红细胞和诸如胶原蛋白和弹性蛋白之类的结构元素,它可以去除组织切片中不需要的自发荧光。试剂盒试剂的淬灭作用提供了靶抗原的清晰,明确的“真实视图”定位。

特征:

  • 对有问题的组织如肾脏和脾脏有效
  • 易于使用的一步式方法
  • 兼容多种荧光团
  • 与标准落射荧光和共聚焦激光显微镜兼容
  • 装载介质包含DAPI,可一步一步进行复染

一个试剂盒足以治疗大约100至150个组织切片。 

技术指标

更多信息
单位大小 15毫升
阻止动作 自发荧光

套件组件

套件内容:

  • TrueVIEW试剂A,5毫升
  • TrueVIEW试剂B,5毫升
  • TrueVIEW试剂C,5毫升
  • VECTASHIELD ®用DAPI鲜艳™抗荧光淬灭封固介质,加入2ml

 

 

技术信息

组织自发荧光经常发生于醛固定或固有的天然组织成分(胶原蛋白,弹性蛋白和红细胞)。自体荧光背景的程度和强度经常使得在免疫荧光应用中难以或不可能区分特定信号。

减少组织自发荧光的大多数方法主要作用于脂褐素颗粒,对TrueView Quencher靶向的见自发荧光来源没有广泛的作用。

当前减少自发荧光的方法主要包括“家庭酿造”混合物,例如硼氢化纳和其他基于墨水的产品。这些方法对于醛诱导的自发荧光基本上无效。相比之下,Vector TrueVIEW试剂可与亲水性化合物结合并有效淬灭内源性自发荧光。 

人扁桃体(FFPE);使用荧光素标记(绿色)对AE1 / AE3染色的切片。经过TrueVIEW处理,并使用带有DAPI的VECTASHIELD Vibrance防褪色固定介质(核蓝色)固定。 

容易申请

完成IF染色程序后:

行动方式

完成IF染色程序后:

信噪比优化

应结合Vector TrueVIEW淬灭试剂盒优化(滴定)一级抗体和检测试剂,以实现大的信噪比。 

优化曝光

为了获得TrueView Quencher处理过的幻灯片的佳图像采集,可能需要增加曝光时间。

Vector TrueVIEW试剂与其他自发荧光还原剂之间的比较

我们在使用标准荧光素(绿色)滤光片观察的福尔马林固定,石蜡包埋的人胰腺的连续切片上,比较了Vector TrueVIEW淬灭作用与其他市售的自发荧光减少产品和“自煮”试剂的有效性。没有进行特异性免疫荧光染色。下图突出显示了我们的结果。所有图像都是在相同条件下(包括显微镜物镜和曝光时间)采集的。 

 

BioActs 荧光染料产品

 

BioActs是一家研发公司,生产用于光学成像和诊断研究的荧光试剂,以及用于动物的光学造影剂。基于在染料研发和制造方面的丰富经验,我们公司开发并提供
高灵敏度,高纯度和高质量的新型生物荧光材料,如生物分子荧光染料,体外诊断产品的光学材料,近红外材料和造影剂,用于探针研究和体内研究等的开发。
我们的产品被用作国内外的光学材料和探针大学,研究机构和企业在医学,制药,化学等领域的基础和应用研究。特别是,我们的荧光试剂主要用作
体外诊断试剂盒中光学检测的荧光材料,用于
生物标记物的分子诊断和基于获得知识产权和高纯度的新化学结构的免疫诊断。

生化标签

BioActs提供Flamma的全谱® 荧光剂,生物偶联等官能性化合物。

 

 Flamma ®  荧光剂,荧光染料 

●  保持从紫外线到近红外线的全系列荧光物质阵容

●  为各种反应性基团和官能团提供可选择的选择,如NHS酯,马来酰亚胺和亿烯砜。

● 高纯度和明亮的荧光性能

 

  qFlamma ® 淬灭剂

●  淬火染料。用于基于FRET原理的荧光双标记探针。

●  与核酸,多肽和荧光纳米粒子结合使用,可用于  测量qPCR和酶活性。

● 淬火范围大,400~800nm。提供各种终端功能组。 提供间隔选项。

BioActs 荧光染料产品

Flamma® Fluors NHS ester / Flamma® Fluors Sulfo-NHS ester

Description

Size

Price

Flamma® 496 NHS ester

1mg

$99.00

[Catalog No. CWS1001]

Ex / Em: 496 / 516 nm

Replacement for FITC, Fluorescein

5mg

$346.50

Amine reactive conjugation

25mg

$1,299.38

Flamma® 552 NHS ester

1mg

$199.00

[Catalog No. PWS1122]

Ex / Em: 550 / 565 nm

Replacement for Alexa Fluor®555, Cy®3, DyLight®549, ATTO550

5mg

$696.90

Amine reactive conjugation

25mg

$2,437.75

Flamma® 581 NHS ester

1mg

$199.00

[Catalog No. PWS1415]

Ex / Em: 581 / 596 nm

5mg

$696.90

Amine reactive conjugation

25mg

$2,437.75

Flamma® 648 NHS ester

1mg

$199.00

[Catalog No. PWS1215]

Ex / Em: 648 / 663 nm

Replacement for Alexa Fluor®647, Cy®5, DyLight®649, ATTO647N

5mg

$696.90

Amine reactive conjugation

25mg

$2,437.75

Flamma® 675 NHS ester

1mg

$199.00

[Catalog No. PWS1515]

Ex / Em: 675 / 691 nm

Replacement for Alexa Fluor®680, Cy®5.5, DyLight®680, CF™680, IRDye®680LT

5mg

$696.90

Amine reactive conjugation

25mg

$2,437.75

Flamma® 749 NHS ester

1mg

$199.00

[Catalog No. PWS1301]

Ex / Em: 749 / 774 nm

Replacement for Cy®7.5, CF™770

5mg

$696.90

Amine reactive conjugation

25mg

$2,437.75

Flamma® 774 NHS ester

1mg

$209.00

[Catalog No. PWS1603]

Ex / Em: 774 / 806 nm

Replacement for Cy®7.5, CF™770

5mg

$731.50

Amine reactive conjugation

25mg

$2,560.25

Flamma® 496 Sulfo-NHS ester

1mg

$198.00

[Catalog No. CWSN1001]

Ex / Em: 496 / 516 nm

Replacement for FITC, Fluorescein

5mg

$693.00

Amine reactive conjugation

25mg

$2,598.75

Flamma® 552 Sulfo-NHS ester

1mg

$398.00

[Catalog No. PWSN1122]

Ex / Em: 550 / 565 nm

Replacement for Alexa Fluor®555, Cy®3, DyLight®549, ATTO550

5mg

$1,393.00

Amine reactive conjugation

25mg

$4,875.50

Flamma® 581 Sulfo-NHS ester

1mg

$398.00

[Catalog No. PWSN1415]

Ex / Em: 581 / 596 nm

5mg

$1,393.00

Amine reactive conjugation

25mg

$4,875.50

Flamma® 648 Sulfo-NHS ester

1mg

$398.00

[Catalog No. PWSN1215]

Ex / Em: 648 / 663 nm

Replacement for Alexa Fluor®647, Cy®5, DyLight®649, ATTO647N

5mg

$1,393.00

Amine reactive conjugation

25mg

$4,875.50

Flamma® 675 Sulfo-NHS ester

1mg

$398.00

[Catalog No. PWSN1515]

Ex / Em: 675 / 691 nm

Replacement for Alexa Fluor®680, Cy®5.5, DyLight®680, CF™680, IRDye®680LT

5mg

$1,393.00

Amine reactive conjugation

25mg

$4,875.50

Flamma® 749 Sulfo-NHS ester

1mg

$398.00

[Catalog No. PWSN1301]

Ex / Em: 749 / 774 nm

Replacement for Cy®7.5, CF™770

5mg

$1,393.00

Amine reactive conjugation

25mg

$4,875.50

Flamma® 774 Sulfo-NHS ester

1mg

$418.00

[Catalog No. PWSN1603]

Ex / Em: 774 / 806 nm

Replacement for Cy®7.5, CF™770

5mg

$1,463.00

Amine reactive conjugation

25mg

$5,120.50

 

描述

尺寸

价钱

qFlamma ® Black01 NHS酯

为1mg

133.70美元

[目录号QWS1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭

胺反应性结合

5毫克

$467.95

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$1,537.55

qFlamma ® Black01磺基-NHS酯

为1mg

$267.40

[目录号QWSN1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭

胺反应性结合

5毫克

935.90美元

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

3,075.10美元

qFlamma ® Black01将亿烯砜

为1mg

133.70美元

[目录号QWA1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭

胺反应性结合

5毫克

$467.95

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$1,537.55

qFlamma ® Black01羧酸

为1mg

66.85美元

[目录号QWC1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭无

反应性官能团

5毫克

$233.98

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$768.78

qFlamma ® Black01马来酰亚胺

为1mg

133.70美元

[目录号QWM1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭

硫醇反应性结合

5毫克

$467.95

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$1,537.55

qFlamma ® Black01胺

为1mg

$106.96

[目录号QWE1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭无

反应性官能团

5毫克

$374.36

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$1,230.04

qFlamma ® Black01硫醇

为1mg

200.55美元

[目录号QWT1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭无

反应性官能团

5毫克

$701.93

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$2,306.33

qFlamma ® Black01二氯三嗪

为1mg

$334.25

[目录号QWR1001] 

400~800 nm范围内的广泛猝灭

羟基反应性结合

5毫克

1,169.88美元

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$3,843.88

qFlamma ® Black01 PEG4炔

为1mg

$300.83

[目录号QWG1001] 

400~800 nm范围内的广泛淬灭

点击化学反应性结合

5毫克

$1,052.89

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$3,459.49

qFlamma ® Black01艾迪宝

为1mg

$300.83

[目录号QWD1001] 

在400~800 nm范围内进行广泛淬灭

无Cu点击化学反应性结合

5毫克

$1,052.89

应用于qPCR,测定酶活性等。

为25mg

$3,459.49

qFlamma ® Black01生物素

为1mg

$153.76

[目录号QWB1001] 

在400~800nm范围内进行广泛猝灭。

与抗生物素蛋白,链霉抗生物素蛋白特异性结合。

5毫克

$467.95

应用于qPCR,测量酶活性等。

为25mg

$1,537.55

 

 

 交联剂

●  通过在末端包含官能团或反应基团,化学连接多种分子,如肽和药物。

●  提供各种功能组,反应组和间隔选项

● 基于精密*的有机化学技术生产。

 

 经典标签染料

 

●  传统荧光染料,如Cy染料,TAMRA,FAM等。

●  提供各种功能组和反应组选项

 

 生物素化荧光染料

●  荧光染料与生物素结合。特别是快速结合Avidin和Streptavidin。

●  高耐高温,低pH值和蛋白质分解

● 用作FISH,流式细胞仪,微阵列,印迹分析等的二级检测器。

 

 蛋白质标记试剂盒

 

● Flamma的各种荧光物质® 荧光剂可以很容易地标记,以蛋白和抗体

●  提供从反应到纯化的整个过程所需的组分和缓冲液。

● 使用Flamma ® 荧光剂亿烯砜其有效地结合到蛋白质的伯胺基团。

  FS D  Fluor™ ,荧光染料 

   ● 优异的荧光强度和高量子产率

   ●  即使与生物分子结合后仍保持优异的荧光强度

   ●  各种频谱产品的排队

 

BioAct中国代理,BioAct上海代理,BioAct北京代理,BioAct广东代理,BioAct江苏代理BioAct湖北代理,BioAct天津代理,BioAct黑龙江代理,BioAct湖南代理BioAct内蒙古代理,BioAct吉林代理,BioAct福建代理,BioAct江苏代理,BioAct浙江代理,BioAct四川代理,BioAct代理

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

 

内质网红色荧光探针(活细胞) 活细胞内质网荧光探针|ER-Tracker Red(BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging

内质网红色荧光探针(活细胞) 活细胞内质网荧光探针|ER-Tracker Red(BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。

本品为,由红色荧光染料BODIPY® TR和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 587 nm,Em= 615 nm。格列本脲(Glibenclamide, glyburide),一种常用降血糖药物,在胰岛β细胞、胰岛素的分泌、心肌衰竭细胞功能以及心律不齐的研究等方面具有重要科研用途。格列本脲高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲受体,且本受体富集存在内质网上,因此适合用作内质网荧光探针。

本品为溶于DMSO的1 mMER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液,推荐工作浓度为~1 μM。

产品性质

分子式(Formula)

C44H42BClF2N6O7S2

分子量(Molecular Weight)

915.23

外观(Appearance)

液体

Ex/Em

587/615 nm

滤片(Filter)

TRITC

结构式(Structure)

内质网红色荧光探针(活细胞) 活细胞内质网荧光探针|ER-Tracker Red(BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging

运输和保存方法

冰袋运输。≤-20℃避光干燥保存,至少六个月有效。避免反复冻融。

注意事项

1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。

2)DMSO有毒,请小心操作。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4)本产品仅作科研用途!

使用方法

本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。

1. 试剂准备

使用前将ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。

2.  细胞样品处理及染色

2.1 将1 mM ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度为~1 µM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。

注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到最佳实验结果。

2.2 染色

对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15-30 min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。

细胞如需固定,请参考以下步骤。

3.细胞固定

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2 min。

注:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。

3.2 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5 min,共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。

注:不建议对细胞进行透化处理,因为经Triton X-100透化后,无信号保留。

相关产品

40761ES50

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)

50 µL(1mM)

40763ES20

ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

20 µL (1mM)

40764ES20

ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网红色荧光探针

20 µL (1mM)

40765ES30

Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide) 高尔基体绿色荧光探针

30 µL (1mM)

40741ES50

MitoTracker® Red CMXRos 线粒体红色荧光探针

50 µg

40742ES50

MitoTracker® Green FM 线粒体绿色荧光探针

50 µg

40743ES50

MitoTracker® Deep Red FM 线粒体远红色荧光探针

50 µg

40738ES50

LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针

50 μL

40739ES50

LysoTracker Red DND-99 溶酶体红色荧光探针

50 μL

36314ES60

4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛

100 mL

36314ES76

500 mL

20107ES72

Triton X-100 曲拉通X-100

250 mL

60162ES76

1× HBSS (with Ca2+, Mg2+), pH 7.4

500 mL

40761ES50

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)

50 µL(1mM)

40763ES20

ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

20 µL (1mM)

40764ES20

ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网红色荧光探针

20 µL (1mM)

40765ES30

Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide) 高尔基体绿色荧光探针

30 µL (1mM)

40741ES50

MitoTracker® Red CMXRos 线粒体红色荧光探针

50 µg

40742ES50

MitoTracker® Green FM 线粒体绿色荧光探针

50 µg

40743ES50

MitoTracker® Deep Red FM 线粒体远红色荧光探针

50 µg

40738ES50

LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针

50 μL

40739ES50

LysoTracker Red DND-99 溶酶体红色荧光探针

50 μL

36314ES60

4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛

100 mL

36314ES76

500 mL

20107ES72

Triton X-100 曲拉通X-100

250 mL

60162ES76

1× HBSS (with Ca2+, Mg2+), pH 7.4

500 mL

Q: 请问HBSS 里面的钙镁离子在里面起到什么作用?

A: 有利于维持细胞状态,利于后续的染色。

Q: 请问固定后的死细胞还能染上吗?

A: 该探针主要染的是活细胞的内质网,固定样本基本染不上色。

Q: 染色之后可以加抗荧光淬灭剂防止荧光淬灭吗?

A: 活细胞的染色,不需要加抗荧光淬灭封片液。

Q: 固定后的荧光还会淬灭么?或者说可以维持多长时间?

A: ER-Tracker Red 按照后附的使用说明染色后,用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留, 荧光均会有淬灭的现象的。具体的荧光维持时间这边没有数据给您参考。

Q: 请问 mito-tracker green 和 ER-traker red 是同时染还是分开依次染,染完后荧光可持续多久(也就是在多长时间内还可以检测)?

A: 建议分开依次染色,荧光均存在淬灭的现象,染色完建议尽快检测,一般 1 小时内检测荧光强度基本变化不大。

[1] Zhou F, Hong Y, Liang R, et al. Rapid printing of bio-inspired 3D tissue constructs for skin regeneration. Biomaterials. 2020;258:120287. doi:10.1016/j.biomaterials.2020.120287(IF:10.317)
[2] Wu T, Wang X, Cheng J, et al. Nitrogen-doped graphene quantum dots induce ferroptosis through disrupting calcium homeostasis in microglia. Part Fibre Toxicol. 2022;19(1):22. Published 2022 Mar 24. doi:10.1186/s12989-022-00464-z(IF:9.400)
[3] Fu C, Zhan J, Huai J, et al. Furin-instructed molecular self-assembly actuates endoplasmic reticulum stress-mediated apoptosis for cancer therapy. Nanoscale. 2020;12(22):12126-12132. doi:10.1039/d0nr00151a(IF:7.790)
[4] Li B, Huang J, Liu J, et al. Discovery of a Nur77-mediated cytoplasmic vacuolation and paraptosis inducer (4-PQBH) for the treatment of hepatocellular carcinoma. Bioorg Chem. 2022;121:105651. doi:10.1016/j.bioorg.2022.105651(IF:5.275)

产品描述

ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。

本品为,由红色荧光染料BODIPY® TR和 Glibenclamide 偶联而成,其Ex= 587 nm,Em= 615 nm。格列本脲(Glibenclamide, glyburide),一种常用降血糖药物,在胰岛β细胞、胰岛素的分泌、心肌衰竭细胞功能以及心律不齐的研究等方面具有重要科研用途。格列本脲高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲受体,且本受体富集存在内质网上,因此适合用作内质网荧光探针。

本品为溶于DMSO的1 mMER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液,推荐工作浓度为~1 μM。

产品性质

分子式(Formula)

C44H42BClF2N6O7S2

分子量(Molecular Weight)

915.23

外观(Appearance)

液体

Ex/Em

587/615 nm

滤片(Filter)

TRITC

结构式(Structure)

内质网红色荧光探针(活细胞) 活细胞内质网荧光探针|ER-Tracker Red(BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging

运输和保存方法

冰袋运输。≤-20℃避光干燥保存,至少六个月有效。避免反复冻融。

注意事项

1)避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。

2)DMSO有毒,请小心操作。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4)本产品仅作科研用途!

使用方法

本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。

1. 试剂准备

使用前将ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。

2.  细胞样品处理及染色

2.1 将1 mM ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度为~1 µM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。

注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s 平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到最佳实验结果。

2.2 染色

对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15-30 min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。

细胞如需固定,请参考以下步骤。

3.细胞固定

3.1 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2 min。

注:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide)留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。

3.2 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5 min,共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。

注:不建议对细胞进行透化处理,因为经Triton X-100透化后,无信号保留。

相关产品

40761ES50

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)

50 µL(1mM)

40763ES20

ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

20 µL (1mM)

40764ES20

ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网红色荧光探针

20 µL (1mM)

40765ES30

Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide) 高尔基体绿色荧光探针

30 µL (1mM)

40741ES50

MitoTracker® Red CMXRos 线粒体红色荧光探针

50 µg

40742ES50

MitoTracker® Green FM 线粒体绿色荧光探针

50 µg

40743ES50

MitoTracker® Deep Red FM 线粒体远红色荧光探针

50 µg

40738ES50

LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针

50 μL

40739ES50

LysoTracker Red DND-99 溶酶体红色荧光探针

50 μL

36314ES60

4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛

100 mL

36314ES76

500 mL

20107ES72

Triton X-100 曲拉通X-100

250 mL

60162ES76

1× HBSS (with Ca2+, Mg2+), pH 7.4

500 mL

40761ES50

ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)

50 µL(1mM)

40763ES20

ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针

20 µL (1mM)

40764ES20

ER-Tracker Red (BODIPY® TR Glibenclamide),for live-cell imaging 内质网红色荧光探针

20 µL (1mM)

40765ES30

Golgi-Tracker Green (BODIPY® FL C5-Ceramide) 高尔基体绿色荧光探针

30 µL (1mM)

40741ES50

MitoTracker® Red CMXRos 线粒体红色荧光探针

50 µg

40742ES50

MitoTracker® Green FM 线粒体绿色荧光探针

50 µg

40743ES50

MitoTracker® Deep Red FM 线粒体远红色荧光探针

50 µg

40738ES50

LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针

50 μL

40739ES50

LysoTracker Red DND-99 溶酶体红色荧光探针

50 μL

36314ES60

4% Paraformaldehyde 4%多聚甲醛

100 mL

36314ES76

500 mL

20107ES72

Triton X-100 曲拉通X-100

250 mL

60162ES76

1× HBSS (with Ca2+, Mg2+), pH 7.4

500 mL

Q: 请问HBSS 里面的钙镁离子在里面起到什么作用?

A: 有利于维持细胞状态,利于后续的染色。

Q: 请问固定后的死细胞还能染上吗?

A: 该探针主要染的是活细胞的内质网,固定样本基本染不上色。

Q: 染色之后可以加抗荧光淬灭剂防止荧光淬灭吗?

A: 活细胞的染色,不需要加抗荧光淬灭封片液。

Q: 固定后的荧光还会淬灭么?或者说可以维持多长时间?

A: ER-Tracker Red 按照后附的使用说明染色后,用甲醛等固定后染色效果可以被部分保留, 荧光均会有淬灭的现象的。具体的荧光维持时间这边没有数据给您参考。

Q: 请问 mito-tracker green 和 ER-traker red 是同时染还是分开依次染,染完后荧光可持续多久(也就是在多长时间内还可以检测)?

A: 建议分开依次染色,荧光均存在淬灭的现象,染色完建议尽快检测,一般 1 小时内检测荧光强度基本变化不大。

[1] Zhou F, Hong Y, Liang R, et al. Rapid printing of bio-inspired 3D tissue constructs for skin regeneration. Biomaterials. 2020;258:120287. doi:10.1016/j.biomaterials.2020.120287(IF:10.317)
[2] Wu T, Wang X, Cheng J, et al. Nitrogen-doped graphene quantum dots induce ferroptosis through disrupting calcium homeostasis in microglia. Part Fibre Toxicol. 2022;19(1):22. Published 2022 Mar 24. doi:10.1186/s12989-022-00464-z(IF:9.400)
[3] Fu C, Zhan J, Huai J, et al. Furin-instructed molecular self-assembly actuates endoplasmic reticulum stress-mediated apoptosis for cancer therapy. Nanoscale. 2020;12(22):12126-12132. doi:10.1039/d0nr00151a(IF:7.790)
[4] Li B, Huang J, Liu J, et al. Discovery of a Nur77-mediated cytoplasmic vacuolation and paraptosis inducer (4-PQBH) for the treatment of hepatocellular carcinoma. Bioorg Chem. 2022;121:105651. doi:10.1016/j.bioorg.2022.105651(IF:5.275)

emsdiasum Fluoromount-G荧光封片剂

 

emsdiasum Fluoromount-G荧光封片剂—经典的抗荧光淬灭封片剂

摘要

荧光淬灭(quench)是指荧光分子由内部因素和外部因素同时作用造成的不可逆破坏。内部因素主要是分子从激发态回到基态以非辐射跃迁形式释放能量。外部因素则通常是因为荧光分子在激发光的照射下,经历多次激发/发射过程后,造成分子内部结构发生不可逆的变化,从而导致其不能吸收更多的光子,影响进一步发射荧光。

 

 

荧光的淬灭:荧光淬灭(quench)是指荧光分子由内部因素和外部因素同时作用造成的不可逆破坏。内部因素主要是分子从激发态回到基态以非辐射跃迁形式释放能量。外部因素则通常是因为荧光分子在激发光的照射下,经历多次激发/发射过程后,造成分子内部结构发生不可逆的变化,从而导致其不能吸收更多的光子,影响进一步发射荧光。我们也称之为该分子被光“漂白”了。同时,当激光功率高时,荧光分子有可能在高强度的激光下被“漂白”,造成荧光淬灭现象。需要注意的是,当荧光物质浓度过大时,也可能会产生自淬灭现象。

能够引起荧光淬灭的物质称淬灭剂。如卤素离子、重金属离子、具有氧化性的有机化合物(硝基化合物、重氮化合物、羰基化合物和羟基化合物)及氧分子等。在具体操作实验中,要注意上述淬灭剂对实验可能造成影响。

 

产品名称及描述 品牌 货号
Fluoromount-G荧光封片剂 emsdiasum 17984-25
DAPI-Fluoromount-G荧光封片剂 emsdiasum 17984-24