Targeting Systems—转染、荧光示踪
Targeting Systems公司是一家依靠美国国立卫生研究院(NIH)的小型商业创新研究基金资助,于1996年5月成立的高科技生物制品企业。在成立的*年即推出其*产品线—Targefect。Targeting Systems公司从成立zui初的一个员工目前已发展为拥有多样化的和强大的知识产权的生物企业,产品超过100种。凭借其在生物荧光研究领域的优势,Targeting Systems公司致力于新药研发、药物筛选、基因表达及干细胞研究与治疗的技术与产品供应。同时,Targeting Systems公司也在功能基因组学上*优势,包括基因表达调控,通过胞内注入功能性活性蛋白从而改变细胞功能状态,以及超敏感的报告基因检测的研发。目前公司的主打产品是荧光素酶(Luciferases)检测试剂盒,可以广泛应用于药物筛选、基因表达和干细胞研究。
Targeting Systems公司的产品的主要应用:
一、新药研发与药物筛选
荧光素酶是Targeting Systems公司的主打产品,该系列产品拥有zui强的荧光强度(红色、蓝色和绿色),产品有着非常宽的光谱选择,是目前市场上拥有zui大选择余地的超敏荧光素酶供应商,共有7种颜色的光谱,比市场上常规的Photinus和Renilla荧光素酶的荧光强6 – 1000倍。产品包括Gaussia荧光素酶,Cypridina荧光素酶,绿/蓝分泌型Renilla荧光素酶,红色Luciola Italica荧光素酶以及ans荧光素酶检测试剂。可一次性应用单/双或3个荧光素酶进行研究。
二、基因转染—Targefect产品线
Targeting Systems公司*的Virofect转染技术(一种腺病毒来源的强化配方,可直接将目的基因导入细胞核,zui大程度增强难转染细胞的转染效率)可实现转染以及难转染细胞的转染,包括多种原代培养细胞,转染效果甚至优于电转染。还提供根据特定细胞设计的转染试剂及转染实验方案,以提高特定难转染细胞的转染效率。多种因素促成了Targefect产品线的转染与*优势,包括Tarefect F-2 试剂,多肽增强子,Virofect转染技术等。这些*优势包括
1、使用*配方的试剂完成基因直接入核核;
2、使用简单而易于操作的脂质配方完成部分难转染细胞的基因转染;
3、使用基于腺病毒的增强试剂配方,利用细胞表面的腺病毒受体进行基因转染,这种方法可得到的基因转染以及增加所转基因的表达效率;
4、产品包括适用于大多数细胞株的细胞特异的转染试剂与方案。
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Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs) |
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HEK-293 cells |
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Human hepatocytes |
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Even Large DNA loads Vascularare efficiently delivered. Delivery of 170kD BACs in CV-1 cells |
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Smooth muscle cells |
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Macrophages (Raw 267.4 cells) |
三、肿瘤成像与细胞示踪
Targeting Systems公司利用慢病毒–荧光素酶结合技术 (LentiGlo TM)可表达zui强的荧光,实现稳定转染(几乎100%的转染效率),是体内生物成像(培养细胞或活体动物)的理想产品。LentiPower™试剂盒可在研究人员实验室快速得包装自己的荧光表达慢病毒。Targeting Systems公司的肿瘤成像与细胞示踪产品还具有以下优势:
快速制备稳定转染的细胞;
凭借特定的分泌型荧光素酶及强荧光蛋白可在体外培养细胞或体内研究基因表达;
具有zui高的转染效率,可稳定转染多数难转染细胞,如干细胞和神经细胞;
利用多种颜色(光谱)的荧光素酶及报告子可在同一组细胞中分析多个分子通路;
可在研究人员自己的启动子或目的时间点研究基因表达;
使用安全的自失活载体,可在研究干细胞或体内肿瘤生长和存活时不损伤细胞。
四、基因沉默(konckdown)
利用Targeting Systems公司的Targefect siRNA试剂盒可转入 siRNA /microRNA ,凭借基于Gaussia荧光素酶的pSiiScreen系统,可在体内或体外筛选。是实时高通量筛选siRNAs的理想工具。
五、干细胞研究
胚胎干细胞及间充质干细胞的转染试剂,利用蛋白输送系统可定向干细胞分化类型,而LentiGlo可检测细胞的生长和存活状态。
转染试剂:可将功能性活性蛋白导入各种原代人类干细胞的胞内或核内,通过导入特定的转录因子监测体内干细胞的分化状态。
StemTrack™:用于体内外无损伤监测干细胞存活、生长于分化。
Profect蛋白输送试剂(Protein delivery Reagents):
LentiGlo™:是Targeting Systems公司提供的*慢病毒–荧光素酶产品,可稳定转染人类干细胞,使之成为与荧光蛋白一起高共表达特定荧光素酶的细胞类型。
六、蛋白导入系统
Targeting Systems公司的蛋白导入系统可实现胞内或核内导入功能性蛋白、多肽或抗体,可将蛋白导入巨噬细胞,进而研究微生物导致的疾病的发病机理。具有如下优势优势:
可为包括人类干细胞在内的大多数细胞株导入多种蛋白;
导入蛋白具有高活性;
可导入功能性抗体;
可导入功能性酶(如CRE重组酶、caspase,β–半乳糖苷酶,荧光素酶等)进行多方面的细胞学研究;
可将功能性蛋白导入分化的细胞;
可用于鉴定微生物(细菌或寄生虫)发病机理的毒性因素,病理机制及鉴定特定的药物靶点;
可实现多个蛋白的同时共导入,导入效率高,可实现难转染细胞的蛋白导入。
七、LiveResponse™
该产品是Targeting Systems公司的产品,可使用5种分泌型的强荧光报告子—Gaussia荧光素酶(482 nm), Cypridina荧光素酶(463 nm), Blue-shifted Renilla荧光素酶(467 nm), Green Renilla荧光素酶(527 nm)及Red Italica firefly荧光素酶(613 nm)—在同一群细胞分析4种不同启动子活性,在活性中检测 NFKB 、CRE构件、 GPVR谱及凋亡。该产品还具有以下优势:
高的灵敏度及快速检测功能
在同一群细胞中可分析3条或更多哦分子通路,而且不损伤细胞的前提下进行实时研究。
通过选择不同发射波长的荧光素酶,可以实现一次荧光素酶试剂导入中研究多个荧光素酶报告子。
高荧光强度及稳定性使这些新颖的荧光素酶报告子非常适合于高通量筛选应用
与其他商业荧光素酶检测系统相比具有高性价比
体内无损伤应用。
八、蛋白表达系统
Targefect-293/Targefect-293F是Targeting Systems公司高水平的蛋白表达体系,其*的脂质体转染配方可实现293细胞和CHO细胞的转染,操作方法简便。