Worthington-胶原酶世界供应商

发表于2024年10月10日由上海金畔生物科技有限公司

Worthington是一家创始于1947年，位于美国新泽西州的生产高纯度酶类及相关生化药剂的世界顶尖公司。Worthington通过ISO9001认证，致力于为客户提供zui 优质的产品及服务。供应的生物药剂主要纯化于牛胰腺、植物、发酵产物及其他自然资源，Worthington专长的蛋白提取与纯化技术保证了其所提供酶类拥有与其提取来源物中同等的生物活性，从而保证了研究结果的可靠性和稳定性。目前Worthington提供的产品覆盖细胞分离消化酶、DNA酶、RNA酶等几乎所有生命科学研究领域。其产品适用于单细胞测序，流式细胞分选，细胞治疗等领域的细胞分离、疫苗生产和生物制品加工。

特色产品

1. 胶原蛋白酶

粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种异构体，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和氨基肽酶。这种胶原蛋白水解和蛋白水解活性的结合能够有效地分解细胞间基质，这是组织解离的重要部分。复合物的一个组分是水解酶，其优先降解天然胶原中的序列Pro-Y-Gly-Pro中的Y-Gly键处的螺旋区，其中Y最常见地是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步肽酶消化的产物。粗胶原酶被金属螯合剂如半胱氨酸、EDTA或邻菲罗啉抑制，但不被DFP抑制。它也被α2-巨球蛋白（一种大的血浆糖蛋白）抑制。每种胶原酶的特定酶谱都与获得用于研究的细胞的组织相关（或与细胞的用途相关），并且作为相关性的结果，Worthington开发了几种类型的粗胶原酶。

•1型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。

•2型含有较高的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

•3型含有zui低水平的次级蛋白酶。

•4型被设计为胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损伤。

•5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。

•6型含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1。

•7型胶原酶和酪蛋白酶的活性是1型和2型胶原酶的四倍。

•纯化胶原酶，含有zui低的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。

粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织解离过程。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，如1、2、3和4型，或色谱纯化的胶原酶；后者通常与弹性蛋白酶、透明质酸酶等次生酶结合。为了获得最佳结果，必须根据待解离的组织定制蛋白水解活性的精确混合物。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好，但并不wan美，可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。

产品订货信息（部分）

货号	产品名称	规格
LS005275	Collagenase, Purified	4 ku
LK003240	Collagenase Vial, NCIS	1 vial
LK002067	Collagenase/Elastase Vial (CLSH)	5 vial
LS004194	Collagenase, Type 1	100 mg
LS004174	Collagenase, Type 2	100 mg
LS004180	Collagenase, Type 3	100 mg
LS004186	Collagenase, Type 4	100 mg
LS005280	Collagenase, Type 5	100 mg
LS005318	Collagenase, Type 6	100 mg
LS005332	Collagenase, Type 7	100 mg

2. 脱氧核糖核酸酶I（Deoxyribonuclease I）

牛胰腺脱氧核糖核酸酶是一种核酸内切酶，它分裂磷酸二酯键，优先与嘧啶核苷酸相邻，在3'位置具有游离羟基和在5'位置产生具有磷酸基团的多核苷酸。Worthington为不同的应用提供不同纯度的DNA酶。含有zui低水平的RNase和蛋白酶活性，适用于需要消化DNA以回收完整RNA的技术，或者必须保持结构蛋白或酶的完整性的技术。应用包括切口平移、DNA图谱、核RNA和蛋白质的分离、质粒构建、RNA探针的RNA聚合酶合成和RT-PCR。DNA酶还可用于组织培养工作，以消化受损细胞中的DNA，从而降低粘度，并去除膜结合的DNA片段。

产品订货信息（部分）

货号	产品名称	规格
LS006342	Deoxyribonuclease I, RNase & Protease Free, Solution	100 un
LS006331	Deoxyribonuclease I, Ribonuclease&Protease Free	2500 un
LS006330	Deoxyribonuclease I	25 ku
LS002004	Deoxyribonuclease I	5 mg
LS002058	Deoxyribonuclease I, Filtered	11 mg
LS002173	Deoxyribonuclease I, Standard Vial	2 ku
LK003170	DNase Vial (D2)	1 vial
LS002138	Deoxyribonuclease I	25 mg
LS002145	Deoxyribonuclease I	100 mg

3. 弹性蛋白酶（Elastase）

猪胰腺弹性蛋白酶的分子量为25.9 kDa，最适pH为8.5。虽然弹性蛋白酶会水解多种蛋白质底物，但它在蛋白酶中的du特之处在于其水解天然弹性蛋白酶的能力，而天然弹性蛋白是一种不受胰蛋白酶、糜蛋白酶或胃蛋白酶水解的底物。大豆胰蛋白酶抑制剂和激肽释放酶抑制剂抑制蛋白水解活性，但不抑制弹性水解活性。

产品订货信息

货号	产品名称	规格
LS006363	Elastase, Purified	5 mg
LS002290	Elastase, Lyophilized	25 mg
LS002274	Elastase, Suspension	25 mg

4. 木瓜蛋白酶（Papain）

木瓜蛋白酶是从番木瓜胶乳中提取的一种巯基蛋白酶。其分子量为23 kDa，最适pH范围为6.0-7.0。木瓜蛋白酶对亮氨酸甲酯作用会产生一种不溶性的聚亮氨酸肽。木瓜蛋白酶破坏软骨的细胞间基质。木瓜蛋白酶被半胱氨酸、硫化物和亚硫酸盐激活。

产品订货信息

货号	产品名称	规格
LS003124	Papain, Suspension	25 mg
LS003118	Papain, Lyophilized	25 mg

5. 核糖核酸酶 A（Ribonuclease A）

核糖核酸酶（RNase I）催化核苷酸的5'-核糖和连接在相邻嘧啶核苷酸的3'-核糖上的磷酸基团之间的磷酸二酯键的裂解，形成2'，3'-环状磷酸，然后可以水解成相应的3'-核苷磷酸。核糖核酸酶A的分子量为13700 Da。它在7.0-7.5的最佳pH范围内工作。核糖核酸酶B的分子量为14700±300 Da，它是一种糖蛋白，具有与核糖核酸酶A相似的氨基酸组成。每个分子含有6个甘露糖残基和2个N-乙酰葡糖胺残基。它是RNase A的糖基化衍生物。核糖核酸酶受到重金属离子的抑制，并受到DNA的竞争性抑制。由于分子生物学级RNase A基本上不含DNase和蛋白酶活性，该产品可用于在核酸工作中以及在使用其他酶或必须回收完整蛋白质的情况下从DNA中去除RNA。

产品订货信息

货号	产品名称	规格
LS002131	Ribonuclease A, DNase & Protease Free	1 mg
LS005649	Ribonuclease A, Purified	25 mg
LS005677	Ribonuclease A, Purified Solution	25 mg
LS003431	Ribonuclease A	200 mg
LS005710	Ribonuclease B	100 mg
LS01506	Ribonuclease A, Recombinant, Protease & DNase Free, Animal Free/AF	10 ku
LS01512	Ribonuclease A, Recombinant, Animal Free/AF	100 mg

6. 胰蛋白酶（Trypsin）

胰蛋白酶是一种胰腺丝氨酸蛋白酶，具有基于带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链的底物特异性。它来源于34 kDa无活性的前体酶原胰蛋白酶原，在酶促去除N-末端6-氨基酸前导序列后产生23.8 kDa胰蛋白酶分子。最适pH为8.0。胰蛋白酶被有机磷化合物如二异丙基氟磷酸盐和来自胰腺的天然抑制剂抑制。大豆、利马豆和蛋清也是天然抑制剂的来源。胰蛋白酶切割精氨酸和赖氨酸的酰胺键和酯键。Worthington测序级胰蛋白酶已进一步纯化，以去除可能干扰胰蛋白酶消化实验的微量污染蛋白酶和自溶产物，并在SDS-PAGE上显示出单一条带。

产品订货信息

货号	产品名称	规格
LS02120	SequENZ® Trypsin, Modified, Sequencing Grade	4×25 µg
LS02150	SequENZ® Trypsin, Modified, Sequencing Grade, Solution	250 µg
LS02119	Trypsin, Purified, Sequencing Grade II	1 mg
LS003740	Trypsin, TPCK Treated	100 mg
LS003708	Trypsin	100 mg
LS003750	Trypsin, TPCK-Treated, Irradiated	100 mg
LS004454	Trypsin, 2X, Sterile, Irradiated	100 mg
LS003736	Trypsin, 0.22µ Filtered	50 mg

更多其它产品详情请查询Worthington网站或咨询Worthington中国代理上海金畔生物。

Worthington热卖产品

货号	产品名称	规格	品牌
LS004176	Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶（金畔现货）	1 gm	Worthington
LS004196	Collagenase Type 1 (CLS-1)（金畔现货）	1 gm	Worthington
LS004188	Collagenase, Type 4（金畔现货）	1 gm	Worthington
LS004174	Collagenase, Type 2（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS004186	Collagenase, Type 4（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS004194	Collagenase Type 1 (CLS-1)（金畔现货）	100 mg	Worthington
ls003126	Papain, Suspension	100 mg	Worthington
LS004182	Collagenase, Type 3（金畔现货）	1 g	Worthington
LS004177	Collagenase Type 2 (CLS-2)2型胶原酶	5 g	Worthington
LS003119	Papain, Lyophilized（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS003740	Trypsin, TPCK Treated（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS004189	Collagenase, Type 4（金畔现货）	5 gm	Worthington
LK003150	Papain Dissociation System（金畔现货）	1 bx	Worthington
LS002139	Deoxyribonuclease I	100 mg	Worthington
LK003178	PDS Kit Papain Vial	5 vial	Worthington
LS004180	Collagenase, Type 3（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS002292	Elastase Lyophilized（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS002279	Elastase, Suspension (ES)（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS004197	Collagenase Type 1	5 gm	Worthington
LK003176	PDS Kit Papain Vial (PAP2)	1 vial	Worthington
LS003926	Phosphodiesterase I（金畔现货）	100 un	Worthington
LS004183	Collagenase, Type 3	5 gm	Worthington
LS002290	Elastase, Lyophilized	25 mg	Worthington
LS02104	Neutral Protease (Dispase), Purified（金畔现货）	50 mg	Worthington
LS02100	Neutral Protease (Dispase), Purified（金畔现货）	10 mg	Worthington
LS003086	Trypsin Inhbitor, Ovomucoid（金畔现货）	2 gm	Worthington
LS004106	STEMxyme® 1, Collagenase/Neutral Protease (Dispase®), Animal Free（金畔现货）	50 mg	Worthington
LS002138	Deoxyribonuclease I	25 mg	Worthington
LK003170	DNase Vial (D2) (D2	1 vial	Worthington
LS002007	Deoxyribonuclease I（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS003570	Trypsin Inhibitor, Soybean, Purified（金畔现货）	100 mg	Worthington
LS003127	Papain, Suspension	1 gm	Worthington
LS002294	Elastase, Lyophilized	1 gm	Worthington
LS002594	Hyaluronidase	50 ku	Worthington
LS003118	Papain, Lyophilized	25 mg	Worthington
LS004798	Nuclease, Micrococcal（金畔现货）	45 ku	Worthington
LK003153	Papain Dissociation System	3 bx	Worthington
LS006344	Deoxyribonuclease I, RNase & Protease Free, Solution（金畔现货）	500 un	Worthington
LS003744	Trypsin, TPCK Treated	1 gm	Worthington
LS002140	Deoxyribonuclease I	1 gm	Worthington
LS02122	Trypsin, Modified, SequENZ® Sequencing Grade	4×100μg	Worthington
LK003182	PDS Kit Inhibitor Vial (OI-BSA)	1 vi	Worthington
LS006363	Elastase, Purified（金畔现货）	5 mg	Worthington
LS002006	Deoxyribonuclease I（金畔现货）	20 mg	Worthington
LS003124	Papain, Suspension	25 mg	Worthington
LS002274	Elastase, Suspension（金畔现货）	25 mg	Worthington
LK003163	Papain Dissociation System, Without EBSS（金畔现货）	3 bx	Worthington
LS004212	Collagenase, Type 4, Filtered（金畔现货）	5×50 mg	Worthington
LS003605	Protease, S. Aureus (Endoproteinase Glu-C)	5 mg	Worthington
LS004330	Diaphorase	2 ku	Worthington

作为Worthington在中国区域的代理，上海金畔生物将为中国客户提供全面的Worthington产品。欢迎大家随时联系我们！！！

胶原酶I型

发表于2024年10月4日由上海金畔生物科技有限公司

胶原酶I型

简要描述：胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）（Gly）之间的肽键

详细介绍

产品咨询

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离

Collagenase II 胶原酶II型说明书

发表于2024年9月29日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase II 胶原酶II型说明书

产品详情

货号	规格	价格
LS004174-100mg	100mg	520
LS004176-1g	1g	3000
LS004177-5g	5g	13500
LS004177-15g	15g	询价

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为II型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca2+、Mg2+），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成1g/mL（即1000×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未全部解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase I 胶原酶I型蛋白酶肽链内切酶

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase I 胶原酶I型蛋白酶肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型。

在应用上有所偏向：

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥250 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途!

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca²⁺、Mg²⁺），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成100 mg/mL（即100×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20℃避光冻存。

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3）将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

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[10] Zhang W, Wang H, Yuan Z, et al. Moderate mechanical stimulation rescues degenerative annulus fibrosus by suppressing caveolin-1 mediated pro-inflammatory signaling pathway. Int J Biol Sci. 2021;17(5):1395-1412. Published 2021 Apr 3. doi:10.7150/ijbs.57774(IF:6.582)
[11] Hu D, Shen W, Gong C, et al. Grain-sized moxibustion promotes NK cell antitumour immunity by inhibiting adrenergic signalling in non-small cell lung cancer. J Cell Mol Med. 2021;25(6):2900-2908. doi:10.1111/jcmm.16320(IF:5.310)
[12] Zhao Z, Liang M, He H, et al. Ovalbumin-Induced Allergic Inflammation Diminishes Cross-Linked Collagen Structures in an Experimental Rabbit Model of Corneal Cross-Linking. Front Med (Lausanne). 2022;9:762730. Published 2022 May 26. doi:10.3389/fmed.2022.762730(IF:5.093)
[13] Tao X, Chen Q, Li N, et al. Serotonin-RhoA/ROCK axis promotes acinar-to-ductal metaplasia in caerulein-induced chronic pancreatitis. Biomed Pharmacother. 2020;125:109999. doi:10.1016/j.biopha.2020.109999(IF:4.545)
[14] Liu M, Yang Y, Kang W, et al. Berberine inhibits pancreatic intraepithelial neoplasia by inhibiting glycolysis via the adenosine monophosphate -activated protein kinase pathway. Eur J Pharmacol. 2022;915:174680. doi:10.1016/j.ejphar.2021.174680(IF:4.432)

产品描述

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型。

在应用上有所偏向：

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥250 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途!

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

Q：只用于分离细胞，选哪种胶原酶合适？

A：对于组织解离，常使用粗制胶原酶制剂，例如弹性蛋白酶，胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等；对于胶原蛋白结构和生物合成研究，常使用更高纯度的胶原酶制剂，不含其他蛋白水解活性。

Q：要把肿瘤细胞分散成单个细胞做流式检测，选择哪一种胶原酶比较适合？需要区分肿瘤发生的部位吗？后续用来做流式，不同消化强度对细胞表面抗原的影响大吗？

A：会影响细胞表面抗原，可以选择对抗原影响较小的胶原酶Ⅲ、胶原酶Ⅳ。

Q：胶原酶使用会受到血清影响吗？

A：胶原不会受到培养细胞所用的血清影响。

Q：胶原酶的使用会受哪些抑制剂影响？

A：胶原酶的抑制剂有 EDTA 、EGTA 等；二是重金属离子（Hg2+,Pb2+,Cd2+）；还有一些化学试剂如 Cysteine、 histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline 等对胶原酶也有抑制作用。

Q：用 PBS 溶解可以吗？用什么工作液浓度溶解？

A：建议在 Hank’s，Earle’s 或者其他平衡盐溶液中溶解，推荐使用工作浓度 0.05 % ~0.5 % (w/v)。

Q：实验过程中消化作用不佳

A：(1)如果是酶活不强或钙离子不足导致，应在低温干燥条件下储存胶原酶，胶原酶溶液分装后冻存(2)如果是钙离子不足导致，应将胶原酶溶液中钙离子浓度设置为 5mM。

Q：使用过程中出现细胞死亡

A：（1）如果是蛋白酶过量，应减少蛋白酶接触时间或是加入白蛋白或灭活血清（2）如果是 pH 改变应使用缓冲液（如 HBSS）；经常检查并重新调节 pH（3）如果氧气太少，应给消化液通无菌空气

Q：实验中出现细胞受损怎么办？

A：如果是蛋白酶过多导致，应减少蛋白酶用量或是加入白蛋白或灭活血清

Collagenase V胶原酶V型说明书

发表于2024年9月10日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase V胶原酶V型说明书

产品详情

货号	规格	价格
LS005280-100mg	100mg	￥630.00
LS005282-1g	1g	￥3,500.00
LS005283-5g	5g	￥14,900.00

产品描述

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为V型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），具有更高的胶原酶活性和酪蛋白酶活性，更低的胰酶水平以降低对细胞膜蛋白的损伤，适用于胰腺小岛细胞和结缔组织细胞的分离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次；

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率；

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5. 细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase II 胶原酶II型蛋白酶肽链内切酶

发表于2024年8月6日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase II 胶原酶II型蛋白酶肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解

结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型、II型、III型和IV型，在应用上有所偏向：1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为II型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

[1] Sun X, He X, Zhang Y, et al. Inflammatory cell-derived CXCL3 promotes pancreatic cancer metastasis through a novel myofibroblast-hijacked cancer escape mechanism. Gut. 2022;71(1):129-147. doi:10.1136/gutjnl-2020-322744(IF:23.059)
[2] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)
[3] Yu Q, Han F, Yuan Z, et al. Fucoidan-loaded nanofibrous scaffolds promote annulus fibrosus repair by ameliorating the inflammatory and oxidative microenvironments in degenerative intervertebral discs. Acta Biomater. 2022;148:73-89. doi:10.1016/j.actbio.2022.05.054(IF:8.947)
[4] Feng C, Xiong Z, Wang C, et al. Folic acid-modified Exosome-PH20 enhances the efficiency of therapy via modulation of the tumor microenvironment and directly inhibits tumor cell metastasis. Bioact Mater. 2020;6(4):963-974. Published 2020 Oct 9. doi:10.1016/j.bioactmat.2020.09.014(IF:8.724)
[5] Wang Y, Sun Q, Ye Y, et al. FGF-2 signaling in nasopharyngeal carcinoma modulates pericyte-macrophage crosstalk and metastasis. JCI Insight. 2022;7(10):e157874. Published 2022 May 23. doi:10.1172/jci.insight.157874(IF:8.315)
[6] Zheng Q, Liu P, Gao G, et al. Mitochondrion-processed TERC regulates senescence without affecting telomerase activities. Protein Cell. 2019;10(9):631-648. doi:10.1007/s13238-019-0612-5(IF:7.575)
[7] Guo H, Yin W, Zou Z, et al. Quercitrin alleviates cartilage extracellular matrix degradation and delays ACLT rat osteoarthritis development: An in vivo and in vitro study. J Adv Res. 2020;28:255-267. Published 2020 Jun 24. doi:10.1016/j.jare.2020.06.020(IF:6.992)
[8] Wang Y, Zhao M, Li W, et al. BMSC-Derived Small Extracellular Vesicles Induce Cartilage Reconstruction of Temporomandibular Joint Osteoarthritis via Autotaxin-YAP Signaling Axis. Front Cell Dev Biol. 2021;9:656153. Published 2021 Apr 1. doi:10.3389/fcell.2021.656153(IF:6.684)
[9] Zhang W, Wang H, Yuan Z, et al. Moderate mechanical stimulation rescues degenerative annulus fibrosus by suppressing caveolin-1 mediated pro-inflammatory signaling pathway. Int J Biol Sci. 2021;17(5):1395-1412. Published 2021 Apr 3. doi:10.7150/ijbs.57774(IF:6.582)
[10] Zhu L, Yang Y, Yan Z, et al. Controlled Release of TGF-β3 for Effective Local Endogenous Repair in IDD Using Rat Model. Int J Nanomedicine. 2022;17:2079-2096. Published 2022 May 9. doi:10.2147/IJN.S358396(IF:6.400)
[11] Zhou T, Xiang DK, Li SN, Yang LH, Gao LF, Feng C. MicroRNA-495 Ameliorates Cardiac Microvascular Endothelial Cell Injury and Inflammatory Reaction by Suppressing the NLRP3 Inflammasome Signaling Pathway. Cell Physiol Biochem. 2018;49(2):798-815. doi:10.1159/000493042(IF:5.500)
[12] Zheng Y, Chen Y, Lu X, et al. Inhibition of Histone Deacetylase 6 by Tubastatin A Attenuates the Progress of Osteoarthritis via Improving Mitochondrial Function. Am J Pathol. 2020;190(12):2376-2386. doi:10.1016/j.ajpath.2020.08.013(IF:4.307)
[13] Wang C, Wang Y, Wang C, et al. Therapeutic application of 3B-PEG injectable hydrogel/Nell-1 composite system to temporomandibular joint osteoarthritis. Biomed Mater. 2021;17(1):10.1088/1748-605X/ac367f. Published 2021 Nov 19. doi:10.1088/1748-605X/ac367f(IF:3.715)
[14] Hu H, Luo SJ, Cao ZR, et al. Depressive Disorder promotes Hepatocellular Carcinoma metastasis via upregulation of ABCG2 gene expression and maintenance of self-renewal. J Cancer. 2020;11(18):5309-5317. Published 2020 Jul 9. doi:10.7150/jca.45712(IF:3.565)
[15] Du Y, Chen X, Yang H, et al. Expression of Oocyte Vitellogenesis Receptor Was Regulated by C/EBPα in Developing Follicle of Wanxi White Goose. Animals (Basel). 2022;12(7):874. Published 2022 Mar 30. doi:10.3390/ani12070874(IF:2.752)

产品描述

结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

本品为II型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

Q：只用于分离细胞，选哪种胶原酶合适？

A：会影响细胞表面抗原，可以选择对抗原影响较小的胶原酶Ⅲ、胶原酶Ⅳ。

Q：胶原酶使用会受到血清影响吗？

A：胶原不会受到培养细胞所用的血清影响。

Q：胶原酶的使用会受哪些抑制剂影响？

Q：用 PBS 溶解可以吗？用什么工作液浓度溶解？

A：建议在 Hank’s，Earle’s 或者其他平衡盐溶液中溶解，推荐使用工作浓度 0.05 % ~0.5 % (w/v)。

Q：实验过程中消化作用不佳

A：(1)如果是酶活不强或钙离子不足导致，应在低温干燥条件下储存胶原酶，胶原酶溶液分装后冻存(2)如果是钙离子不足导致，应将胶原酶溶液中钙离子浓度设置为 5mM

Q：使用过程中出现细胞死亡

Q：实验中出现细胞受损怎么办？

A：如果是蛋白酶过多导致，应减少蛋白酶用量或是加入白蛋白或灭活血清

[1] Sun X, He X, Zhang Y, et al. Inflammatory cell-derived CXCL3 promotes pancreatic cancer metastasis through a novel myofibroblast-hijacked cancer escape mechanism. Gut. 2022;71(1):129-147. doi:10.1136/gutjnl-2020-322744(IF:23.059)
[2] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)
[3] Yu Q, Han F, Yuan Z, et al. Fucoidan-loaded nanofibrous scaffolds promote annulus fibrosus repair by ameliorating the inflammatory and oxidative microenvironments in degenerative intervertebral discs. Acta Biomater. 2022;148:73-89. doi:10.1016/j.actbio.2022.05.054(IF:8.947)
[4] Feng C, Xiong Z, Wang C, et al. Folic acid-modified Exosome-PH20 enhances the efficiency of therapy via modulation of the tumor microenvironment and directly inhibits tumor cell metastasis. Bioact Mater. 2020;6(4):963-974. Published 2020 Oct 9. doi:10.1016/j.bioactmat.2020.09.014(IF:8.724)
[5] Wang Y, Sun Q, Ye Y, et al. FGF-2 signaling in nasopharyngeal carcinoma modulates pericyte-macrophage crosstalk and metastasis. JCI Insight. 2022;7(10):e157874. Published 2022 May 23. doi:10.1172/jci.insight.157874(IF:8.315)
[6] Zheng Q, Liu P, Gao G, et al. Mitochondrion-processed TERC regulates senescence without affecting telomerase activities. Protein Cell. 2019;10(9):631-648. doi:10.1007/s13238-019-0612-5(IF:7.575)
[7] Guo H, Yin W, Zou Z, et al. Quercitrin alleviates cartilage extracellular matrix degradation and delays ACLT rat osteoarthritis development: An in vivo and in vitro study. J Adv Res. 2020;28:255-267. Published 2020 Jun 24. doi:10.1016/j.jare.2020.06.020(IF:6.992)
[8] Wang Y, Zhao M, Li W, et al. BMSC-Derived Small Extracellular Vesicles Induce Cartilage Reconstruction of Temporomandibular Joint Osteoarthritis via Autotaxin-YAP Signaling Axis. Front Cell Dev Biol. 2021;9:656153. Published 2021 Apr 1. doi:10.3389/fcell.2021.656153(IF:6.684)
[9] Zhang W, Wang H, Yuan Z, et al. Moderate mechanical stimulation rescues degenerative annulus fibrosus by suppressing caveolin-1 mediated pro-inflammatory signaling pathway. Int J Biol Sci. 2021;17(5):1395-1412. Published 2021 Apr 3. doi:10.7150/ijbs.57774(IF:6.582)
[10] Zhu L, Yang Y, Yan Z, et al. Controlled Release of TGF-β3 for Effective Local Endogenous Repair in IDD Using Rat Model. Int J Nanomedicine. 2022;17:2079-2096. Published 2022 May 9. doi:10.2147/IJN.S358396(IF:6.400)
[11] Zhou T, Xiang DK, Li SN, Yang LH, Gao LF, Feng C. MicroRNA-495 Ameliorates Cardiac Microvascular Endothelial Cell Injury and Inflammatory Reaction by Suppressing the NLRP3 Inflammasome Signaling Pathway. Cell Physiol Biochem. 2018;49(2):798-815. doi:10.1159/000493042(IF:5.500)
[12] Zheng Y, Chen Y, Lu X, et al. Inhibition of Histone Deacetylase 6 by Tubastatin A Attenuates the Progress of Osteoarthritis via Improving Mitochondrial Function. Am J Pathol. 2020;190(12):2376-2386. doi:10.1016/j.ajpath.2020.08.013(IF:4.307)
[13] Wang C, Wang Y, Wang C, et al. Therapeutic application of 3B-PEG injectable hydrogel/Nell-1 composite system to temporomandibular joint osteoarthritis. Biomed Mater. 2021;17(1):10.1088/1748-605X/ac367f. Published 2021 Nov 19. doi:10.1088/1748-605X/ac367f(IF:3.715)
[14] Hu H, Luo SJ, Cao ZR, et al. Depressive Disorder promotes Hepatocellular Carcinoma metastasis via upregulation of ABCG2 gene expression and maintenance of self-renewal. J Cancer. 2020;11(18):5309-5317. Published 2020 Jul 9. doi:10.7150/jca.45712(IF:3.565)
[15] Du Y, Chen X, Yang H, et al. Expression of Oocyte Vitellogenesis Receptor Was Regulated by C/EBPα in Developing Follicle of Wanxi White Goose. Animals (Basel). 2022;12(7):874. Published 2022 Mar 30. doi:10.3390/ani12070874(IF:2.752)

worthington 胶原酶现货说明书

发表于2024年8月4日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物worthington 胶原酶现货说明书

Collagenase

粗胶原酶制剂含有两种不同的胶原酶的几种亚型，一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨基肽酶。这种胶原分解和蛋白分解活性的结合有效地分解细胞间基质，细胞间基质是组织分解的重要部分。复合物的一种成分是一种水解酶，它优先降解天然胶原中的螺旋区，位于Pro-Y-Gly-Pro序列中的Y-Gly键，其中Y最常见的是中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步消化肽酶的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制，但不被DFP抑制。α2-巨球蛋白（一种大的血浆糖蛋白）也对其有抑制作用。酶活性需要Ca2+。每种胶原酶的特定酶谱都与获得研究细胞的组织（或细胞的用途）相关，因此Worthington建立了几种类型的粗胶原酶：1型、2型、3型和4型。

•1型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。

•2型含有较高相对水平的蛋白酶活性，尤其是梭菌蛋白酶。

•类型3含有低水平的次级蛋白酶。

•类型4的胰蛋白酶活性特别低，以限制对膜蛋白和受体的损害。

•5型含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。

•6型含有高胶原酶活性，酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1。与I型（col G）相比，设计用于II型（colH）胶原酶的富集。

•7型胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型胶原酶高4倍。

•纯化的胶原酶，代码：CLSPA，含有低的次级蛋白水解活性和高胶原酶活性。

新无动物型AFA、AFB和AFC、STZ1和STZ2胶原酶来源于不含动物成分的培养基中生长的培养物，设计用于必须防止引入潜在动物源病原体的生物加工应用。次级蛋白酶的水平类似于1型和2型胶原酶。

•CLSAFA是最初的AFA等级，旨在具有与1型和2型胶原酶相似的胶原酶和次级蛋白酶。

•CLSAFB含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。

•CLSAFC具有特别低的胰蛋白酶活性，类似于4型胶原酶。

•STZ1和STZ2，0.22μ过滤STEMxyme®AOF胶原酶/中性蛋白酶（Dispase®）混合物，用于原代和干细胞分离。

沃辛顿还提供预包装形式的每种0.22µm过滤制剂，用于直接重组和用于细胞分离和培养程序。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性很好，部分原因是使用参数的变化。然而，大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。沃辛顿胶原酶和污染物分析的详细描述可在沃辛顿酶手册中找到。此外，组织特异性参考和详细的分离条件可在沃辛顿组织分离指南中找到。

胶原酶测定是Mandl的改进，其中胶原酶与天然胶原孵育5小时，并使用Moore和Stein，JBC，176367，（1948）比色茚三酮法测定胶原分解程度。释放的氨基酸表示为每毫克胶原酶微摩尔亮氨酸。

用途：粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织分离过程。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂，如1型、2型、3型和4型，或色谱纯化的胶原酶（代码：CLSPA）；后者通常与二级酶（如弹性蛋白酶、透明质酸酶等）结合。为了获得最佳结果，蛋白水解活性的精确混合物必须适合待分离的组织。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好，可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。有关更多信息，请参阅胶原酶采样程序信息。沃辛顿还出版了《组织解离指南》，该指南提供了用于这些应用的酶的额外信息，以及多种细胞和组织类型的特定参考。

Collagenase III 胶原酶III型蛋白酶肽链内切酶

发表于2024年8月3日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase III 胶原酶III型蛋白酶肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为4种类型：胶原酶I型、II型、III型和IV型，在应用上有所偏向：1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备；3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

产品性质

分子量（Molecular Weight）	68-130 kDa
激活剂（Activators）	Ca²⁺、Zn²⁺
抑制剂（Inhibitors）	EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg²⁺, Pb²⁺, Cd²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Not inhibited by DFP or serum
活力单位（Unit definition）	在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

产品应用场景和主要特点

应用场景	名称	货号	主要特点
原生质体制备	Snailase 蜗牛酶	10404ES	来源于蜗牛的混合酶，可降解植物细胞壁。
生长调节剂 (生长促进剂生长延缓剂新型植物激素）	Zeatin 玉米素	41001ES	从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的，促进侧芽生长，刺激细胞分化，促进愈伤组织和种子发芽，还能防止叶片衰老。
	Trans-Zeatin 反玉米素	41002ES	高纯的反式玉米素，适用于植物组织培养。
	Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷	41003ES	是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素，功能上不仅促进细胞分裂，刺激茎芽增殖，抑制根的生成，阻止叶片衰老，还能激活基因表达和代谢活性。
	Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸	40509ES	适用于植物细胞或组织培养。
	(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸	41004ES	抑制幼苗生长。
	rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯	41012ES	近年来发现的一种植物激素或其前体，能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。
抗生素 (抗细菌抗真菌抗性筛选）	Timentin 特美汀	60230ES	特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。
	Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素	60214ES	实验室中应用非常普遍：微生物学研究，细胞培养内抑制细菌污染，分子生物学研究
	Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐	60208ES	主要对革兰氏阳性菌有效，作用于细菌的细胞壁，对人类的毒性较小。
	Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素	60162ES	有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长，从而有效控制细胞被细菌污染。
	Rifampicin 利福平	60234ES	有效的广谱抗菌抗生素。
	Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素	60206ES	对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。
	Aureobasidin A(AbA)金担子素A	60231ES	一种环状肽、抗真菌的抗生素，具有很强的抗真菌能力，主要抗酵母菌。
	Hygromycin B 潮霉素B	60225ES	用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。
	G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素	60220ES	将抗性基因导入细胞，使其获得对G418的耐药性，从而用来筛选携带抗性基因的细胞。
除草剂	Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%	41011ES	对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。
	Glufosinate-ammonium草铵膦	60221ES	毒性低，活性高，广谱的非选择性除草剂，其有效成分是草丁膦。
	Bialaphos 双丙氨膦	60235ES	用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系，且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

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40510ES60	Collagenase IV胶原酶IV型	100 mg
40511ES60	Collagenase V胶原酶V型	100 mg

HB220705

产品描述

本品为III型胶原酶，≥100 U/mg solid，常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

产品性质

分子量（Molecular Weight）	68-130 kDa
激活剂（Activators）	Ca²⁺、Zn²⁺
抑制剂（Inhibitors）	EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg²⁺, Pb²⁺, Cd²⁺, Cu²⁺, Zn²⁺, Not inhibited by DFP or serum
活力单位（Unit definition）	在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

产品应用场景和主要特点

应用场景	名称	货号	主要特点
原生质体制备	Snailase 蜗牛酶	10404ES	来源于蜗牛的混合酶，可降解植物细胞壁。
生长调节剂 (生长促进剂生长延缓剂新型植物激素）	Zeatin 玉米素	41001ES	从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的，促进侧芽生长，刺激细胞分化，促进愈伤组织和种子发芽，还能防止叶片衰老。
	Trans-Zeatin 反玉米素	41002ES	高纯的反式玉米素，适用于植物组织培养。
	Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷	41003ES	是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素，功能上不仅促进细胞分裂，刺激茎芽增殖，抑制根的生成，阻止叶片衰老，还能激活基因表达和代谢活性。
	Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸	40509ES	适用于植物细胞或组织培养。
	(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸	41004ES	抑制幼苗生长。
	rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯	41012ES	近年来发现的一种植物激素或其前体，能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。
抗生素 (抗细菌抗真菌抗性筛选）	Timentin 特美汀	60230ES	特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。
	Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素	60214ES	实验室中应用非常普遍：微生物学研究，细胞培养内抑制细菌污染，分子生物学研究
	Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐	60208ES	主要对革兰氏阳性菌有效，作用于细菌的细胞壁，对人类的毒性较小。
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	Rifampicin 利福平	60234ES	有效的广谱抗菌抗生素。
	Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素	60206ES	对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。
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4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

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1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

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HB220705

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[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

Worthington II型胶原酶现货供应

发表于2024年7月30日由上海金畔生物科技有限公司

世界*实验材料供应商Worthington 上海金畔生物为其中国代理，Worthington 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务， Worthington 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

Worthington 中国代理，Worthington 上海代理，Worthington 北京代理，Worthington 广东代理，Worthington 江苏代理 Worthington 湖北代理, Worthington 天津, Worthington 黑龙江代理, Worthington 内蒙古代理, Worthington 吉林代理, Worthington 福建代理, Worthington 江苏代理, Worthington 浙江代理, Worthington 四川代理,

Worthington Biochemical是一家始于1947年，位于美国新泽西州的生产高纯度酶类及相关生化药剂的世界*公司，公司致力于为客户提供zui的产品及服务。Worthington供应的生物药剂主要纯化于牛胰腺、植物、发酵产物及其他自然资源，公司专长的蛋白提取与纯化技术保证了其所提供酶类拥有与其提取来源物中同等的生物活性，从而保证了研究结果的可靠性和稳定性。目前Worthington提供的产品覆盖细胞分离消化酶、DNA酶、RNA酶等几乎所有生命科学研究领域。

公司主要产品：

一、无动物成分来源的新产品

1、来源于溶组织梭状芽孢杆菌发酵产物的胶原酶：该系列胶原酶*避免了动物来源成分，适用于无动物源成分胶原酶生物研究。主要产品包括：

CLSAFA：主要为胶原酶活性及其次的蛋白酶活性，性能与1/2型胶原酶类似。

CLSAFB：比CLSAFA有更高的胶原酶活性及酪蛋白酶活性

CLSAFC：有较低的胰蛋白酶活性，性能与4型胶原酶类似。

STZ1 & STZ2：为STEMxyme? AOF Collagenase/Neutral Protease (Dispase?) 混合物酶，适用于干细胞分离。

2、肌血球素：肌血球素是一个球形小分子，分子量约17KD，含有一个亚铁血红素分子，负责心肌和骨骼肌细胞哦氧气存储。

二、经典细胞分离试剂

1、细胞分离优化系统

Worthington Biochemical 公司提供一系列经典的组织/细胞分离用酶的解决方案，包括多种酶类及相应的使用说明、参考文献与操作手册，致力于使客户利用酶促消化分离获得zui大产量及活度的细胞。Worthington Biochemical 提供的产品种类繁多，适应于不同类型组织细胞的分离，价格合理。主要产品包括胶原蛋白酶1/2/3/4，胰蛋白酶及其抑制剂，透明质酸酶，弹性蛋白酶，木瓜蛋白酶以及DNA酶，中性蛋白酶等。

2、肝细胞分离系统

通常分离肝细胞的酶都是初制的或部分纯化的酶类，里面除了胶原酶外还含有多种杂蛋白酶，不利于肝细胞的分离纯化，实验可重复率低。Worthington 推出的精制1/4型胶原酶成分明确，特别适宜于肝细胞的分离纯化，性能可靠，实验可重复率高，实验方案及参数固定，所分离的肝细胞纯度与活性均较高。

3、新生鼠心肌细胞分离系统

Worthington供应的新生鼠心肌细胞分离系统使用纯化的分离酶，使心肌细胞分离批次间差异大为减小，而且细胞产量、纯度及活性均得以提高。分离操作方便，方案可靠，实验可重复率高。

4、木瓜蛋白酶分离系统

Worthington供应的木瓜蛋白酶适宜于消化分离形态完整、单个分散的细胞，适用于细胞培养、流式细胞术等多个研究领域。该产品还可适用于温和消化分离中枢神经系统组织（对胎鼠及新生鼠脑神经元分离尤为适宜），获得的细胞产量与活性优于胰蛋白酶。

三、特色产品:

1、胶原酶

?Type 1含有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶及胰蛋白酶活性。

?Type 2 含有更高水平的蛋白酶活性，特别是梭菌蛋白酶。

?Type 3 含有zui低水平的secondary proteases.

?Type 4在消化分离细胞时能zui大程度的保护细胞膜蛋白及上面的受体活性（胰蛋白酶消化时会损伤膜蛋白及其上受体）。

?Type 5 含有高度的胶原酶和酪蛋白酶活性。

?纯化胶原酶（CLSPA/CLSPANK）：含有高纯度的胶原酶。

2、DNA酶

Worthington提供不同纯化水平的NDA酶以适应于不同的研究目的，其中DPRF与DPRFS含有zui低水平的RNA酶及蛋白酶活性，

适宜用于在消化清除DNA的同时zui大程度保护RNA及目的蛋白/酶类的研究，如RT-PCR实验中RNA制备时基因组DNA清除、转录后清除DNA模板、northern杂交时清除非目的DNA、DNA缺口平移、DNA 绘图, 核RNA/蛋白的分离，质粒构建，RNA合成等。Worthington不仅提供牛胰腺来源的DNA酶，而且还提供微生物来源的重组DNA酶，*无动物来源成分，客户可根据研究需要进行选择。

3、RNA酶

Worthington提供的RNA酶 A/ B纯化自牛胰腺组织，并有多种纯化级别适宜于不同研究目的，如无DNA酶的RNA适宜于DNA的分离纯化，无蛋白酶RNA酶适宜于需保存蛋白质完整性与活性。

4、弹性蛋白酶

Worthington提供的弹性蛋白酶纯化自猪胰腺，被广泛应用于组织/细胞的消化分离，特别适宜于II型肺细胞的分离。

5、木瓜蛋白酶：

Worthington提供的木瓜蛋白酶纯化自番木瓜汁，相交于胰腺蛋白酶，木瓜蛋白酶能消化更多的蛋白亚基。在组织消化研究中，木瓜蛋白酶比其他蛋白酶有更高的效率及更低的损伤，适宜于神经细胞的分离。

6、胰蛋白酶

Worthington提供的胰蛋白酶纯化自牛胰腺组织，特别适宜于蛋白质测序研究（TRTPCK）和组织/细胞消化分离研究。该系列产品纯度高，保证了产品很好的溶解度、较小的批次差异及细胞毒性。除了高纯度胰蛋白酶外，Worthington还提供无病毒及支原体的胰蛋白酶以适应不同的研究需要。

货号	品名	活动力	规格
LS004174	Collagenase, Type 2 Prepared to contain higher clostripain activity. Suggested for bone, heart, liver, thyroid and salivary primary cell isolation. Supplied as a dialyzed, lyophilized powder. Store at 2-8癈.	≥125 units per mg dry weight	100 mg
LS004176			1 gm
LS004177			5 gm
LS004179			Bulk

LS004176 Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶大量现货，*

Collagenase IV 胶原酶IV型蛋白酶肽链内切酶

发表于2024年7月25日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase IV 胶原酶IV型蛋白酶肽链内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶，多糖酶，脂酶等，分别能够有效水解

结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为IV型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），特别适用于胰岛组织的消化。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB220705

[1] Wang J, Zhao J, Yan C, et al. Identification and evaluation of a lipid-lowering small compound in preclinical models and in a Phase I trial. Cell Metab. 2022;34(5):667-680.e6. doi:10.1016/j.cmet.2022.03.006(IF:27.287)
[2] Wang Z, Gong X, Li J, et al. Oxygen-Delivering Polyfluorocarbon Nanovehicles Improve Tumor Oxygenation and Potentiate Photodynamic-Mediated Antitumor Immunity. ACS Nano. 2021;15(3):5405-5419. doi:10.1021/acsnano.1c00033(IF:15.881)
[3] Deng CC, Hu YF, Zhu DH, et al. Single-cell RNA-seq reveals fibroblast heterogeneity and increased mesenchymal fibroblasts in human fibrotic skin diseases. Nat Commun. 2021;12(1):3709. Published 2021 Jun 17. doi:10.1038/s41467-021-24110-y(IF:14.919)
[4] Zhang QL, Hong S, Dong X, et al. Bioinspired nano-vaccine construction by antigen pre-degradation for boosting cancer personalized immunotherapy [published online ahead of print, 2022 Jun 8]. Biomaterials. 2022;287:121628. doi:10.1016/j.biomaterials.2022.121628(IF:12.479)
[5] Ma Z, Zhang W, Dong B, et al. Docetaxel remodels prostate cancer immune microenvironment and enhances checkpoint inhibitor-based immunotherapy. Theranostics. 2022;12(11):4965-4979. Published 2022 Jun 27. doi:10.7150/thno.73152(IF:11.600)
[6] Wang Y, Gong X, Li J, et al. M2 macrophage microvesicle-inspired nanovehicles improve accessibility to cancer cells and cancer stem cells in tumors. J Nanobiotechnology. 2021;19(1):397. Published 2021 Nov 27. doi:10.1186/s12951-021-01143-5(IF:10.435)
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产品描述

结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白、多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

本品为IV型胶原酶，≥125 CDU/mg solid（CDU = collagen digestion units），特别适用于胰岛组织的消化。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB220705

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