标签归档：胰蛋白酶

重组胰蛋白酶（r-Trypsin）说明书

发表于由

重组胰蛋白酶（r-Trypsin）说明书

产品详情

货号

规格

价格

78CL10007-10mg

10mg

300

78CL10007-100mg

100mg

900

78CL10007-1g

1g

￥4,500.00

78CL10007-10g

10g

45000

78CL10007-20g

20g

￥NaN

产品描述

        重组胰蛋白酶：CAS：9002-07-7；EC：3.4.21.4 重组胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，可特异切割赖氨酸及精氨酸 C 末端肽键。本 产品为重组猪胰蛋白酶，氨基酸序列与猪胰来源的胰蛋白酶一致，重组基因 工程生产，毕赤酵母表达。

产品性质

来源：毕赤酵母

性状：白色或类白色冻干粉

纯度(SDS-PAGE)：单一主条带

比活：≥3800 USP units/mg pro

特异性：切割精氨酸和赖氨酸羧基端肽键

产品特点

无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。

纯度高：不含其他蛋白酶，无非特异性切割。 产量高：吨级罐生产，批产量可达 400g，适合工业客户生产。

符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程遵循 NSF ISO 9001:2015 质量体系并符合 GMP 指导原则。

质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。

支持定制：规格可根据客户需求定制。

使用方法

使用方法

推荐使用 1mM HCl 溶液溶解，胰蛋白酶：目的蛋白=1:50-1:1000，分子量约 24kD, 最适 pH7.0-9.0，最适温度 25-35℃。

注意事项：活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF 等，金属离子螯合剂如 EDTA 等会 抑制酶活；高浓度的无机盐对酶活性会有一定的影响。

注意事项

本品具有吸潮性，应室温平衡后再取用。本品不得用于临床诊断和治疗。

运输及保存方法

冻干粉可在低于–15℃条件下保存 2 年以上。

产品用途

重组胰岛素及类似物生产；GLP-1 及类似物的生产;各种细胞培养，如疫苗生产，干细胞的分离等；重组蛋白、多肽的生产;蛋白类、抗体类药物的质量检测;蛋白质结构与功能研究，如蛋白质质谱、测序、肽图谱分析;某些特殊化合物的酶促合成;其他小分子蛋白或多肽的生产，如美容肽，抗菌肽、食品风味肽的生产等。


haemtech玉米胰蛋白酶抑制剂说明书

发表于由

haemtech玉米胰蛋白酶抑制剂说明书

Corn Trypsin Inhibitor (CTI)

玉米胰蛋白酶抑制剂（CTI）

 

CTI对正常人血浆的APTT和PT
的影响该图显示了添加的CTI对正常人血浆的PT和aPTT的影响。将CTI添加到正常的人血浆中至各种终浓度，然后在进行测定之前，将混合物在冰上孵育一小段时间。PT保持不变，而aPTT加倍，每毫升血浆中添加约60微克CTI。

  • CTI-01 

      |
    尺寸 1毫克
    公式 20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4
    分子量  
    贮存 -80°摄氏度
    纯度 通过SDS-PAGE，> 95％
    化合物  
    含量测定 aPTT分析
    保质期（正确存放） 12个月
    化学式  

  •  
    尺码 25 X 2毫升，25 X 3毫升，25 X 5毫升
    公式 11 mM柠檬酸盐，50 ug / mL CTI（终）
    分子量  
    贮存 4°摄氏度
    纯度 不适用
    化合物  
    含量测定 不适用
    保质期（正确存放） 6个月
    化学式  
 
  •  
  • 样品凝胶信息
  •  
  • 特性
  •  
  • 参考
  •  
  • 样本出版物

纯化的CTI
玉米胰蛋白酶抑制剂（CTI）是一种小蛋白质，位于大多数玉米物种的籽粒中。在血液凝结实验中测试时，CTI不仅是胰蛋白酶的抑制剂，还是一种特定的人因子XIIa抑制剂（1-6）。该抑制剂与胰蛋白酶或XIIa因子形成一对一的复合物，当添加至血浆中时，可延长活化的部分凝血活酶时间，而不会影响PT分析（6）。XIIa因子的特异性使该抑制剂可用于分离和研究依赖组织因子（TF）的凝血反应（6）。

在文献中已证明使用CTI研究TF依赖性反应（6，8-10）。研究表明，在尝试在全血或血浆样品中进行TF依赖性测定时，必须抑制凝血的接触途径。在样品收集点添加CTI可以防止在随后的样品处理步骤中激活接触途径，从而减少了体外伪影。当尝试在低TF浓度下工作时，CTI的常见用途与凝血酶生成测定相关。HTI的CTI产品已针对此特定应用进行了性能测试。

该蛋白质由112个氨基酸组成，计算得出的分子量为12,028（7）。计算的分子量与通过纯化蛋白质的沉降平衡分析确定的分子量（12,500）非常吻合（3）。CTI氨基酸序列与其他胰蛋白酶或丝氨酸蛋白酶抑制剂的氨基酸序列比较发现几乎没有相似性（7）。

CTI使用已公开程序的组合进行纯化（3,4）。为了开始纯化过程，将CTI从新鲜甜玉米的籽粒中提取到生理缓冲液中。然后使用丙酮对提取物进行脱脂，并通过凝胶过滤和离子交换色谱法进一步纯化蛋白质。通过SDS-PAGE分析，终的CTI制剂在还原和非还原条件下均显示为单个谱带。

测试了CTI制剂延长aPTT分析而不影响PT分析的能力。确定每批CTI的比活度，将一个单位定义为将正常人血浆的aPTT加倍所需的CTI量。

纯化的CTI是在20 mM Tris，0.15 M NaCl，pH 7.4中配制的，应在-20°C或更低温度下冷冻保存。

采血管
为了简化添加CTI的样本采集过程，HTI开发了包含CTI的采血管。这些管（我们的SCAT-27系列）允许您将血液直接吸到含有CTI的抗凝剂上，从而简化了进行TF依赖性研究的过程。您可以选择使用我们的标准CTI /柠檬酸盐配方（11mM柠檬酸盐，50 ug / mL CTI），也可以创建自己的定制配方。HTI的采血管不是无菌的，其制造和销售仅供研究使用。尽管可以为您定制尺寸，但仍提供三种标准尺寸。

SCAT-27-4.5 / 5-5毫升管

SCAT-27-2.7 / 5-3 mL试管

SCAT-27-1.8 / 5-2毫升管

凝胶 Novex 4-12％Bis-Tris
加载 玉米胰蛋白酶抑制剂，每泳道1 µg
缓冲 MES
标准

参见BluePlus 2; 肌球蛋白（188 kDa），磷酸化酶B（98 kDa），BSA（62 kDa），谷氨酸脱氢酶（49 kDa），酒精脱氢酶（38 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（17 kDa），溶菌酶（14 kDa），抑肽酶（6 kDa），胰岛素，B链（3 kDa）。

 

本土化 玉米仁
行动方式 与胰蛋白酶或因子XIIa形成一对一的复合物，并抑制它们各自的催化活性。
分子量 12,500（3）
消光系数
E
1％
1厘米，280海里
= 20.0（由超速离心研究确定）
结构 由112个氨基酸组成的单链蛋白（3,7）

 

haemtech 玉米胰蛋白酶抑制剂说明书

发表于由

haemtech 玉米胰蛋白酶抑制剂说明书

玉米胰蛋白酶抑制剂 (CTI)

CTI对正常人血浆的APTT和PT
的影响该图说明了添加的CTI对正常人血浆的PT和aPTT的影响。将 CTI 添加到正常混合的人血浆中以达到不同的最终浓度，并在进行分析之前让混合物在冰上孵育一小段时间。PT 保持不受影响，而 aPTT 加倍，每毫升血浆添加约 60 微克 CTI。

  • 价格：请询价

     样本数据表  |   安全数据表
    尺寸 1毫克
    公式 20 mM Tris，150 mM NaCl，pH 7.4
    分子量
    贮存 -80°C
    纯度 >95% SDS-PAGE
    化合物
    化验 aPTT检测
    保质期（正确储存） 12个月
    化学式
  • 价格：请询价

     安全数据表
    尺寸 25 X 2 毫升、25 X 3 毫升、25 X 5 毫升
    公式 11 mM 柠檬酸盐，50 ug/mL CTI（最终）
    分子量
    贮存 4°C
    纯度 不适用
    化合物
    化验 不适用
    保质期（正确储存） 6个月
    化学式

  •  

纯化的 CTI
玉米胰蛋白酶抑制剂 (CTI) 是一种小蛋白，存在于大多数玉米品种的籽粒中。CTI 不仅是胰蛋白酶抑制剂，而且在凝血实验中测试时也是一种特定的人因子 XIIa 抑制剂 (1-6)。该抑制剂与胰蛋白酶或因子 XIIa 形成一对一的复合物，当添加到血浆中时，会延长活化的部分凝血活酶时间而不影响 PT 测定 (6)。因子 XIIa 的特异性使抑制剂可用于组织因子 (TF) 依赖性凝血反应的分离和研究 (6)。

文献 (6, 8-10) 中记载了使用 CTI 研究 TF 依赖性反应。研究表明，当试图在全血或血浆样品中进行 TF 依赖性测定时，抑制凝血的接触途径是不可少的。在样品收集点添加 CTI 可防止在后续样品处理步骤中激活接触通路，从而减少体外伪影。当试图在低 TF 浓度下工作时，CTI 最常见的用途是与凝血酶生成分析有关。HTI 的 CTI 产品已针对此特定应用进行了性能测试。

该蛋白质由 112 个氨基酸组成，计算出的分子量为 12,028 (7)。计算的分子量与通过纯化蛋白质 (12,500) 的沉降平衡分析确定的分子量非常吻合 (3)。将 CTI 的氨基酸序列与其他胰蛋白酶或丝氨酸蛋白酶抑制剂的氨基酸序列进行比较，发现几乎没有或没有相似之处 (7)。

CTI 使用已公开程序的组合进行纯化 (3,4)。为了开始纯化过程，将 CTI 从新鲜甜玉米的籽粒中提取到生理缓冲液中。然后使用丙酮将提取物脱脂，并通过使用凝胶过滤和离子交换层析进一步纯化蛋白质。最终的 CTI 制剂在还原和非还原条件下通过 SDS-PAGE 分析显示为单条带。

测试 CTI 制剂在不影响 PT 分析的情况下延长 aPTT 分析的能力。测定每批CTI的比活，定义一个单位为使正常人血浆aPTT加倍所需的CTI量。

纯化的 CTI 在 20 mM Tris、0.15 M NaCl、pH 7.4 中配制，应在 -20°C 或更低温度下冷冻储存。

采血管
为了简化添加 CTI 的样本采集过程，HTI 开发了含有 CTI 的采血管。这些管（我们的 SCAT-27 系列）允许您将血液直接抽到含有 CTI 的抗凝剂上，从而简化了进行 TF 相关研究的过程。您可以选择使用我们的标准 CTI/柠檬酸盐配方（11mM 柠檬酸盐，50 ug/mL CTI），也可以创建自己的定制配方。HTI 的采血管不是无菌的，制造和销售仅供研究使用。尽管可以为您制造定制尺寸，但可提供三种标准尺寸。

SCAT-27-4.5/5 – 5 毫升管

SCAT-27-2.7/5 – 3 毫升管

SCAT-27-1.8/5 – 2 毫升管

 

resynbio MagReSyn胰蛋白酶

发表于由

resynbio MagReSyn胰蛋白酶

 

MagReSyn®胰蛋白酶

用于蛋白质的快速，自动胰蛋白酶消化，用于质谱样品制备

MagReSyn ®胰蛋白酶的微粒由共价固定的测序级胰蛋白酶的（TPCK处理以防止胰凝乳蛋白酶活性）为前质谱蛋白质消化分析。多孔高容量MagReSyn ®  微粒技术允许高容量的酶活性从而允许快速消化。磁性固定化的胰蛋白酶具有稳定的抗变性能力，并且在变性条件下（包括尿素和SDS 的存在）具有有限的胰蛋白酶自溶功能，可保持功能，从而实现了新的自动化和小型化消化流程，从而提高了消化再现性。  

支持：专有的聚合物微粒含有氧化铁（磁铁矿）
：消化比 20微升（300微克）每50微克蛋白质样本微球体珠子尺寸：〜5-10微米制剂： 15 mg.ml -1  悬浮在50mM乙酸

MagReSyn®胰蛋白酶性能优越

快速协议

  • 胰蛋白酶含量高，可确保快速消化

改进的稳定性和兼容性

  • 胰蛋白酶的多点共价结合
  • 低胰蛋白酶浸出可减少样品污染
  • 在变性条件下（例如尿素和SDS）的稳定性可简化样品制备工作流程

可自动化

  • 适用于电磁处理站上的自动消化
  • 减少样品制备的可变性并提高重现性

含有标准蛋白质混合物（50 µg）和50 µlMagReSyn®胰蛋白酶的SDS浓度升高的样品的消化效率。第1、3、5、7、9和11道：标准蛋白质混合物，其中SDS的浓度递增，分别为0.01％，0.02％，0.1％，0.25％，0.5％和1％；第2、4、6、8、10和12道代表各自浓度的SDS中MagReSyn®胰蛋白酶的消化效率。

使用MagReSyn®胰蛋白酶进行的消化可为多种蛋白质提供良好的蛋白质覆盖，包括大而难消化的甲状腺球蛋白和肌红蛋白。

玉米胰蛋白酶抑制剂Corn Trypsin Inhibitor说明书

发表于由

 Enzyme Research ，Enzyme Research 介绍,Enzyme Research 代理,Enzyme Research 代理,Enzyme Research *代理,Enzyme Research 中国代理

Enzyme Research 是一家拥有超过25年的酶研究的实验室，生产和开发多种用于基本凝血研究的多种酶和辅因子。在过去的十年Enzyme Research Laboratories为科学家参与止血和血栓形成的研究提供了宝贵支持。

Corn Trypsin Inhibitor

 

CTI              Corn Trypsin Inhibitor

Corn Trypsin Inhibitor （CTI） is a specific and potent inhibitor of human factor XIIa. It is purified from fresh Indiana sweet corn by solvent extraction and chromatographic methods. A suggested inhibitory concentration is 24 fold molar excess over the enzyme concentration. CTI purity is determined by SDS-PAGE and shows no reduction upon incubation with 2-mercaptoethanol.

Buffer Composition = 20 mM Tris-HCl/0.3 M NaCl/pH 8.2
Molecular Weight = 14,000 daltons
Concentration determined by BCA

Trypsin胰蛋白酶 胰蛋白酶粉末|Trypsin powder 1:250

发表于由

Trypsin胰蛋白酶 胰蛋白酶粉末|Trypsin powder 1:250

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

 

胰蛋白酶（Trypsin）是一种普遍发现于脊椎动物消化系统的丝氨酸蛋白酶，能水解蛋白，以无活性的胰蛋白酶原（trypsinogen）的形式分泌于胰腺中。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端（二者紧接脯氨酸的情况除外）。胰蛋白酶包括两个亚基，α亚基（有2个多肽链构成）和β亚基（有1个多肽链构成）。其水解活性可被多种抑制剂抑制，包括：1）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯；2）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；3）银离子；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、DFP、亮抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，经γ射线处理灭活病毒，酶活≥ 250 units/mg。广泛用于细胞传代，将贴壁细胞从培养板上消化水解下来制备单细胞悬液，常用的工作浓度是0.25-5%（w/v）。

 

产品性质

 

中文别名（Chinese synonym）

胰蛋白酶，猪胰脏来源；

英文别名（English synonym）

Trypsin, porcine pancreas; Parenzyme; Tryptar; Trypure; Parenzymol; U-4858;

CAS号（CAS NO.）

9002-07-7

分子量（Molecular weight）

23.8 kDa

外观（Apperance）

白色至类白色粉末

消光系数（Extinction coefficient）

E1%280=14.3

等电点（Isoelectric Point）

pH 10.5

溶解性（Solubility）

溶于水，几乎不溶于乙醇和甘油

比活力（Specific activity）*

＞250 U/mg

*活力定义（Unit definition）：The activity causing a change in absorbance of 0.003/minute at 253 nm.

 

运输和保存方法

 

冰袋运输。冻干粉2~8℃干燥保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换，

1 BAEE U：在25℃，pH 7.6 的条件下，以BAEE为底物，3.2 mL的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个胰蛋白酶酶活单位。

1 TAME U：在25℃，pH 8.2，0.001 M的Ca2+的条件下，每分钟水解 1 μM的TAME 的样品量。

1 USP U：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

3）本产品仅作科研用途！

 

 

使用方法（用于贴壁细胞的消化）

 

1. 胰酶浓缩液（0.25%）的配置

称取0.25 g胰酶粉末溶于100 mL HBSS（无钙，镁）缓冲液，并调整pH在7.4-7.6范围。此时得到的即0.25%胰酶浓缩液，置于4℃短时间保存，3个月相对稳定。建议分装冻存，利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀，属于正常现象，不会影响其使用效力。

【注】冻干粉也可溶于其他不含钙镁离子的平衡盐缓冲液如PBS。

细胞的消化可以直接用胰酶溶液，但通常使用的是胰酶-EDTA溶液，因为EDTA是一种II价金属离子螯合剂，能够螯合钙镁离子，减少细胞间的粘附性，从而增强胰酶的活性。

2. 胰酶-EDTA溶液的配制(0.25%(w/v))：

无Ca2+、Mg2+及酚红的平衡盐溶液

To 500 mL

胰蛋白酶

1.25 g

EDTA

0.10 g

3. 贴壁细胞的消化

方法一

1）移除培养板中的培养液，用不含Ca2+、Mg2+的缓冲液清洗单层贴壁细胞，直至清除残余血清，吸除盐溶液。

2）向上述贴壁细胞中加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，至完全覆盖细胞即可。

3）倾斜培养板，吸取胰酶-EDTA溶液，反复吹洗细胞数次，注意消化时间不可过长。

【注】消化时间跟细胞类型、细胞密度、所用血清浓度、胰酶活性、以及消化前细胞培养时间有关。

4）将细胞于室温孵育直至细胞分离，期间可将细胞培养板置于显微镜下观察，避免细胞过度消化，从而避免胰酶对细胞造成的损伤。

5）加入10 mL细胞培养液，轻轻反复吹吸从而将细胞从培养板底尽可能吹离，吹洗时尽量避免气泡的产生。

6）进行下一步操作或将细胞冻存。

【注】操作时务必小心谨慎，同时时刻注意避免交叉污染发生的可能性。

方法二

以25 cm2 T-Flask为例，

1）无菌条件下吸除培养瓶中培养液。

2）加入3 mL冰的胰蛋白酶-EDTA溶液（配方同上）。

3）孵育30 s（或更长，如果需要）。置于低倍镜观察，如果有部分细胞开始变圆脱离培养瓶壁，此时可吸除胰酶溶液，继续孵育至细胞完全脱落。

4）加入10 mL新鲜MEM培养液，可用枪快速的将培养液加入，有助于使细胞脱落；然后使用相同的枪头，轻轻地多次吹洗细胞并混匀后，吸取其中5 mL于一个新的培养瓶中。

5）置培养条件下孵育。

HB230224

Trypsin胰蛋白酶 胰蛋白酶粉末|Trypsin powder 1:250

暂无内容

[1] Xu W, Che Y, Zhang Q, et al. Apaf-1 Pyroptosome Senses Mitochondrial Permeability Transition. Cell Metab. 2021;33(2):424-436.e10. doi:10.1016/j.cmet.2020.11.018(IF:21.567)
[2] Zhang W, Liu J, Li X, et al. Precise Chemodynamic Therapy of Cancer by Trifunctional Bacterium-Based Nanozymes. ACS Nano. 2021;15(12):19321-19333. doi:10.1021/acsnano.1c05605(IF:15.881)
[3] Peng J, Chen J, Xie F, et al. Herceptin-conjugated paclitaxel loaded PCL-PEG worm-like nanocrystal micelles for the combinatorial treatment of HER2-positive breast cancer. Biomaterials. 2019;222:119420. doi:10.1016/j.biomaterials.2019.119420(IF:12.479)

产品描述

 

胰蛋白酶（Trypsin）是一种普遍发现于脊椎动物消化系统的丝氨酸蛋白酶，能水解蛋白，以无活性的胰蛋白酶原（trypsinogen）的形式分泌于胰腺中。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端（二者紧接脯氨酸的情况除外）。胰蛋白酶包括两个亚基，α亚基（有2个多肽链构成）和β亚基（有1个多肽链构成）。其水解活性可被多种抑制剂抑制，包括：1）有机磷化合物，如氟磷酸异丙酯；2）来源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制剂；3）银离子；4）特定蛋白酶抑制剂，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、DFP、亮抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是来源于猪胰腺的胰蛋白酶冻干粉，经γ射线处理灭活病毒，酶活≥ 250 units/mg。广泛用于细胞传代，将贴壁细胞从培养板上消化水解下来制备单细胞悬液，常用的工作浓度是0.25-5%（w/v）。

 

产品性质

 

中文别名（Chinese synonym）

胰蛋白酶，猪胰脏来源；

英文别名（English synonym）

Trypsin, porcine pancreas; Parenzyme; Tryptar; Trypure; Parenzymol; U-4858;

CAS号（CAS NO.）

9002-07-7

分子量（Molecular weight）

23.8 kDa

外观（Apperance）

白色至类白色粉末

消光系数（Extinction coefficient）

E1%280=14.3

等电点（Isoelectric Point）

pH 10.5

溶解性（Solubility）

溶于水，几乎不溶于乙醇和甘油

比活力（Specific activity）*

＞250 U/mg

*活力定义（Unit definition）：The activity causing a change in absorbance of 0.003/minute at 253 nm.

 

运输和保存方法

 

冰袋运输。冻干粉2~8℃干燥保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）胰蛋白冻干粉产品常遇到的活性定义及其转换，

1 BAEE U：在25℃，pH 7.6 的条件下，以BAEE为底物，3.2 mL的反应体系中，A253吸光值每分钟会发生0.001的变化即为一个胰蛋白酶酶活单位。

1 TAME U：在25℃，pH 8.2，0.001 M的Ca2+的条件下，每分钟水解 1 μM的TAME 的样品量。

1 USP U：在指定条件下，每分钟引起吸光值发生0.003的变化的样品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

3）本产品仅作科研用途！

 

 

使用方法（用于贴壁细胞的消化）

 

1. 胰酶浓缩液（0.25%）的配置

称取0.25 g胰酶粉末溶于100 mL HBSS（无钙，镁）缓冲液，并调整pH在7.4-7.6范围。此时得到的即0.25%胰酶浓缩液，置于4℃短时间保存，3个月相对稳定。建议分装冻存，利于长期保存。解冻后可能会出现少量沉淀，属于正常现象，不会影响其使用效力。

【注】冻干粉也可溶于其他不含钙镁离子的平衡盐缓冲液如PBS。

细胞的消化可以直接用胰酶溶液，但通常使用的是胰酶-EDTA溶液，因为EDTA是一种II价金属离子螯合剂，能够螯合钙镁离子，减少细胞间的粘附性，从而增强胰酶的活性。

2. 胰酶-EDTA溶液的配制(0.25%(w/v))：

无Ca2+、Mg2+及酚红的平衡盐溶液

To 500 mL

胰蛋白酶

1.25 g

EDTA

0.10 g

3. 贴壁细胞的消化

方法一

1）移除培养板中的培养液，用不含Ca2+、Mg2+的缓冲液清洗单层贴壁细胞，直至清除残余血清，吸除盐溶液。

2）向上述贴壁细胞中加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液，至完全覆盖细胞即可。

3）倾斜培养板，吸取胰酶-EDTA溶液，反复吹洗细胞数次，注意消化时间不可过长。

【注】消化时间跟细胞类型、细胞密度、所用血清浓度、胰酶活性、以及消化前细胞培养时间有关。

4）将细胞于室温孵育直至细胞分离，期间可将细胞培养板置于显微镜下观察，避免细胞过度消化，从而避免胰酶对细胞造成的损伤。

5）加入10 mL细胞培养液，轻轻反复吹吸从而将细胞从培养板底尽可能吹离，吹洗时尽量避免气泡的产生。

6）进行下一步操作或将细胞冻存。

【注】操作时务必小心谨慎，同时时刻注意避免交叉污染发生的可能性。

方法二

以25 cm2 T-Flask为例，

1）无菌条件下吸除培养瓶中培养液。

2）加入3 mL冰的胰蛋白酶-EDTA溶液（配方同上）。

3）孵育30 s（或更长，如果需要）。置于低倍镜观察，如果有部分细胞开始变圆脱离培养瓶壁，此时可吸除胰酶溶液，继续孵育至细胞完全脱落。

4）加入10 mL新鲜MEM培养液，可用枪快速的将培养液加入，有助于使细胞脱落；然后使用相同的枪头，轻轻地多次吹洗细胞并混匀后，吸取其中5 mL于一个新的培养瓶中。

5）置培养条件下孵育。

HB230224

Trypsin胰蛋白酶 胰蛋白酶粉末|Trypsin powder 1:250

暂无内容

[1] Xu W, Che Y, Zhang Q, et al. Apaf-1 Pyroptosome Senses Mitochondrial Permeability Transition. Cell Metab. 2021;33(2):424-436.e10. doi:10.1016/j.cmet.2020.11.018(IF:21.567)
[2] Zhang W, Liu J, Li X, et al. Precise Chemodynamic Therapy of Cancer by Trifunctional Bacterium-Based Nanozymes. ACS Nano. 2021;15(12):19321-19333. doi:10.1021/acsnano.1c05605(IF:15.881)
[3] Peng J, Chen J, Xie F, et al. Herceptin-conjugated paclitaxel loaded PCL-PEG worm-like nanocrystal micelles for the combinatorial treatment of HER2-positive breast cancer. Biomaterials. 2019;222:119420. doi:10.1016/j.biomaterials.2019.119420(IF:12.479)

重组胰蛋白酶(质谱级）Recombinant trypsin

发表于由

重组胰蛋白酶(质谱级）Recombinant trypsin

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胰蛋白酶（Trypsin）是胰脏分泌的一种丝氨酸肽链内切酶，识别位点为蛋白质中赖氨酸或者精氨酸，切割位点为赖氨酸或者精氨酸残基中的羧基端。本产品为毕赤酵母表达的重组猪胰蛋白酶，在GMP法规下生产，不含任何动物源成分，无动物源性的病毒污染（如猪流感病毒、猪细小病毒等），天然缺乏糜蛋白酶活性，并已过滤除菌。本品活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF 和 TLCK 等、金属离子螯合剂如EDTA 等的抑制。 

金畔生物重组胰蛋白酶活性以国际通用活性（USP）为准，优于进口同类产品，其中β-Trypsin的HPLC含量可达80%以上，储存稳定性高，蛋白质组学酶解漏切率比进口产品低50%。

 

产品特点

1.活性高，稳定性好

2.不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等

 

产品应用

1.蛋白质分析，如蛋白质质谱、测序、肽图谱分析。

 

产品性质

来源（Source）

毕赤酵母表达

蛋白纯度（Purity）

>95%

浓度（Concentration）

2.0 mg/mL

比活（Specific activity）

>6800 USP Unit/mg

β-Trypsin

>80%

α-Trypsin

<20%

储存液（Buffer）

1 mM HCL

酶活定义（Unit Definition）

25℃，pH7.6，反应体系3.2 mL（1 cm光路），每分钟酶解BAEE使253 nm下的吸收值增加0.003定义为1个USP单位。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明（仅供参考）

1.本品可直接应用于蛋白质酶切，推荐的酶切比例为1:50-1:100

2.37℃酶切过夜

 

注意事项

1. 本品收到后尽量避免反复冻融。

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230725

重组胰蛋白酶(质谱级）Recombinant trypsin

暂无内容

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胰蛋白酶（Trypsin）是胰脏分泌的一种丝氨酸肽链内切酶，识别位点为蛋白质中赖氨酸或者精氨酸，切割位点为赖氨酸或者精氨酸残基中的羧基端。本产品为毕赤酵母表达的重组猪胰蛋白酶，在GMP法规下生产，不含任何动物源成分，无动物源性的病毒污染（如猪流感病毒、猪细小病毒等），天然缺乏糜蛋白酶活性，并已过滤除菌。本品活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如 PMSF 和 TLCK 等、金属离子螯合剂如EDTA 等的抑制。 

金畔生物重组胰蛋白酶活性以国际通用活性（USP）为准，优于进口同类产品，其中β-Trypsin的HPLC含量可达80%以上，储存稳定性高，蛋白质组学酶解漏切率比进口产品低50%。

 

产品特点

1.活性高，稳定性好

2.不含任何蛋白酶抑制剂，如PMSF等

 

产品应用

1.蛋白质分析，如蛋白质质谱、测序、肽图谱分析。

 

产品性质

来源（Source）

毕赤酵母表达

蛋白纯度（Purity）

>95%

浓度（Concentration）

2.0 mg/mL

比活（Specific activity）

>6800 USP Unit/mg

β-Trypsin

>80%

α-Trypsin

<20%

储存液（Buffer）

1 mM HCL

酶活定义（Unit Definition）

25℃，pH7.6，反应体系3.2 mL（1 cm光路），每分钟酶解BAEE使253 nm下的吸收值增加0.003定义为1个USP单位。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明（仅供参考）

1.本品可直接应用于蛋白质酶切，推荐的酶切比例为1:50-1:100

2.37℃酶切过夜

 

注意事项

1. 本品收到后尽量避免反复冻融。

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230725

重组胰蛋白酶(质谱级）Recombinant trypsin

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重组胰蛋白酶(质谱级）Recombinant trypsin

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