Hieff Canace®耐U+高保真DNA聚合酶混合液(Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix)
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×预混溶液,包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase,dNTP以及对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系,具有灵敏度高、特异性强、保真性好等优点。在进行扩增反应时,体系只需加入引物和模板即可,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。本产品提供是所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能和批次间稳定性。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
使用说明正文
- 文库扩增反应体系(冰上配制)
- 将表1中试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用。
- 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1. PCR扩增反应体系
组分 |
体积 (µL) |
模板DNA |
X |
正向引物 (10-25 μM) |
1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM) |
1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix |
25 |
ddH2O |
Total to 50 |
- 使用移液器轻轻吹打货震荡混匀,并短暂离心将反应液收集至管底。
- 将PCR管置于PCR仪中,设置表2所示反应程序,进行PCR扩增。
表2. PCR扩增反应程序
温度 |
时间 |
循环数 |
98°C |
1 min |
1 |
98°C |
10 sec |
1-15(根据实验要求) |
60°C |
30 sec |
|
72°C |
30 sec |
|
72°C |
5 min |
1 |
4°C |
Hold |
– |
【注】:
1)预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;文库为1 min;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2) 退火温度推荐使用60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3) 延伸温度和时间:推荐使用72°C,延伸时间根据实际需要进行调整。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×预混溶液,包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase,dNTP以及对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系,具有灵敏度高、特异性强、保真性好等优点。在进行扩增反应时,体系只需加入引物和模板即可,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。本产品提供是所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能和批次间稳定性。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
使用说明正文
- 文库扩增反应体系(冰上配制)
- 将表1中试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用。
- 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1. PCR扩增反应体系
组分 |
体积 (µL) |
模板DNA |
X |
正向引物 (10-25 μM) |
1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM) |
1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix |
25 |
ddH2O |
Total to 50 |
- 使用移液器轻轻吹打货震荡混匀,并短暂离心将反应液收集至管底。
- 将PCR管置于PCR仪中,设置表2所示反应程序,进行PCR扩增。
表2. PCR扩增反应程序
温度 |
时间 |
循环数 |
98°C |
1 min |
1 |
98°C |
10 sec |
1-15(根据实验要求) |
60°C |
30 sec |
|
72°C |
30 sec |
|
72°C |
5 min |
1 |
4°C |
Hold |
– |
【注】:
1)预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;文库为1 min;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2) 退火温度推荐使用60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3) 延伸温度和时间:推荐使用72°C,延伸时间根据实际需要进行调整。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
暂无内容
暂无内容