trilinkbiotech N-6001系列产品-上海金畔生物现货

Guanosine-3',5'-bisdiphosphate – (N-6001)

ppGpp, Magic Spot, Guanosine tetraphosphate

鸟苷3'，5'-双二磷酸-（N-6001）

ppGpp，魔点，鸟苷四磷酸

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描述

）特别地，ppGpp强烈抑制翻译机制的成分如tRNA和rRNA的合成（Paul，BJ，et al。，Gralla，JD，et al。），同时刺激氨基酸生物合成相关基因的转录（ Artimovitch，I.等）。这种ppGpp介导的机制可防止不必要的能源外流，以帮助细菌生存直至达到足够的氨基酸水平。ppGpp鸟苷四磷酸的合成是在严格的响应机制下由ATP和GDP合成的（图1）。RelA和SpoT蛋白在维持适当的ppGpp水平中起着关键作用（综述于（Potrykus，K.，et al。））。合成后，ppGpp转录因子与RNA聚合酶结合（Vrentas，CE等，）调节某些启动子的转录，该过程在大肠杆菌中受蛋白质DksA辅助，图2（Paul，BJ等）。在存在ppGpp的情况下，tRNA和rRNA的合成会减少，有利于氨基酸生物合成基因的转录。尽管人们了解了ppGpp的作用，但尚未*阐明ppGpp参与某些启动子调控的机制，并且在不同细菌之间存在差异（Bernardo，LM等）。ppGpp的分子机制仍在研究中，以更好地发挥作用。通过严格的响应了解不同细菌如何适应环境。严格的响应尽管ppGpp在体内细胞存活中起着至关重要的作用，通过体外实验，有几个小组对我们目前有关四磷酸鸟苷如何与RNA聚合酶和其他转录因子相互作用的知识做出了贡献（Lemke，JJ，Vrentas，CE，Powell，BS，deLivron，MA等）。著名的是，威斯康星大学的理查德·古斯（Richard Gourse）的实验室致力于了解RNA转录调控以及ppGpp在调节对变化的环境条件的响应中所起的作用。Paul et al。（2003）描述了一种很好表征的转录测定法，以检查添加的ppGpp浓度对体外转录过程中启动子活性的影响。在本文中，我们提供了一些通用指导原则，可以在其中改变ppGpp数量以评估其对细胞严格反应的影响的任何体外转录测定中遵循。* Potrykus和Cashel指出，从大肠杆菌提取物中的放射自显影照片中出现了两个斑点，这些斑点与氨基酸饥饿的压力有关。俄亥俄州立大学的伊琳娜·阿蒂西莫维奇（Irina Artsimovitch）称，这些斑点被标记为“魔术”，因为“微生物学家半个世纪以来一直在想，这种结构相对简单的小分子如何对调节细胞的存活产生如此深远的影响。” 使用ppGpp进行体外转录测定的基本实验参数：该测定法是研究ppGpp的细胞代谢方面的基本工具，这些方面对养分利用率的变化非常敏感，Schneider等人介绍了Gourse博士的基本方法之一。涉及制备将适当的反应缓冲液，DNA模板（超螺旋质粒或线性）结合的反应混合物，NTP的不平衡池（UTP的浓度非常低），以及存在或不存在ppGpp时感兴趣的RNA聚合酶。然后将转录反应在适当的温度和适当的温度下孵育，使用EDTA和甲酰胺溶液淬灭，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析，以确定转录产量。在Krásný和Gourse，Vrentras等人，Paul等人，Carmona等人和Bernardo等人中也描述了此协议的其他显着变化。注意：应包括含有缓冲液而不是ppGpp的对照反应。注意：必须为每个特定的启动子优化盐浓度（KCl或NaCl）。在高盐浓度下，ppGpp的作用更为明显（Potrykus，K.等）。” 我与之打交道的人一直都是专业人士，并且对产品有很好的工作知识。您提供的产品无法通过其他任何来源（ppGpp）获得。我有一个小型实验室，即使我们可以自己制作化合物，也不必专门找人制作化合物来加快我的研究工作。我认为你很棒—真的!!!“维多利亚·罗宾逊康涅狄格大学副教授

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