FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

酶切点位

5'-CCTCN7-3'

3'-GGAGN6-5'
 

产品描述

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

keywords: MnlI、Mnl I、Mnl i、Mnl1、Mnl 1、MnlⅠ、Mnl Ⅰ、Mnl

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15051-A

FuniCut™ MnlI

50 μL

15051-B

10×FuniCut™ Buffer

1 mL

15051-C

10×FuniCut™ Color Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存,有效期2年。

 

识别位置

5'-CCTCN7-3'

3'-GGAGN6-5'

 

推荐反应条件

1× FuniCut™ 缓冲液;

最适37°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min。

 

注意事项

1)3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性

2)受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切阻断;

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

4)本产品仅作科研用途!

 

质量控制

1. 功能活性检测:最适反应温度下,在20 μL反应体系中,1 μL酶能够在15 min内完全消化1 μg λDNA。

2. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。

3. 酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1)按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作):

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL(~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut™ MnlI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut TM Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。

2)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3)37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR 产物),或30~60 min(基因组 DNA)。

4)80°C孵育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。

2. 双酶切或多酶切

1)每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2)所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3)如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。

3.质粒的扩大反应体系

组分

体积(20 μL

体积(20 μL

体积(50 μL

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut™ MnlI

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

:如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。

 

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

262

34

26

14

13

51

61

397

 

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

无影响

无影响

序列可能重叠

剪切阻断

 

不同反应缓冲液中的活性

反应缓冲液

FuniCut™

Buffer

Thermo Scientific

FuniDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

:活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

相关产品

产品名称

货号

规格

Top10化学感受态细胞

11801ES80

10×100 μL

DH5α化学感受态细胞

11802ES80

10×100 μL

Hieff Canace® Gold 高保真DNA聚合酶

10148ES60

100 U

2×Hieff Canace® Gold 高保真酶预混液

10149ES03

1 mL

Hieff Clone® 多片段一步法快速克隆试剂盒

10912ES10

10 T

Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 通用型一步法快速克隆试剂盒

10922ES20

20 T

Hieff MutTM 定点突变试剂盒

11003ES10

10 T

HB220620

 

FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

暂无内容

FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

暂无内容

酶切点位

5'-CCTCN7-3'

3'-GGAGN6-5'
 

产品描述

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

keywords: MnlI、Mnl I、Mnl i、Mnl1、Mnl 1、MnlⅠ、Mnl Ⅰ、Mnl

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15051-A

FuniCut™ MnlI

50 μL

15051-B

10×FuniCut™ Buffer

1 mL

15051-C

10×FuniCut™ Color Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存,有效期2年。

 

识别位置

5'-CCTCN7-3'

3'-GGAGN6-5'

 

推荐反应条件

1× FuniCut™ 缓冲液;

最适37°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min。

 

注意事项

1)3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性

2)受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切阻断;

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

4)本产品仅作科研用途!

 

质量控制

1. 功能活性检测:最适反应温度下,在20 μL反应体系中,1 μL酶能够在15 min内完全消化1 μg λDNA。

2. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。

3. 酶切-连接-再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1)按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作):

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL(~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut™ MnlI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut TM Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。

2)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3)37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR 产物),或30~60 min(基因组 DNA)。

4)80°C孵育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。

2. 双酶切或多酶切

1)每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2)所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3)如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。

3.质粒的扩大反应体系

组分

体积(20 μL

体积(20 μL

体积(50 μL

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut™ MnlI

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

:如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。

 

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

262

34

26

14

13

51

61

397

 

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

无影响

无影响

序列可能重叠

剪切阻断

 

不同反应缓冲液中的活性

反应缓冲液

FuniCut™

Buffer

Thermo Scientific

FuniDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

:活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

相关产品

产品名称

货号

规格

Top10化学感受态细胞

11801ES80

10×100 μL

DH5α化学感受态细胞

11802ES80

10×100 μL

Hieff Canace® Gold 高保真DNA聚合酶

10148ES60

100 U

2×Hieff Canace® Gold 高保真酶预混液

10149ES03

1 mL

Hieff Clone® 多片段一步法快速克隆试剂盒

10912ES10

10 T

Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit 通用型一步法快速克隆试剂盒

10922ES20

20 T

Hieff MutTM 定点突变试剂盒

11003ES10

10 T

HB220620

 

FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

暂无内容

FastCut™ MnlI快速限制性内切酶,MnlI内切酶,快速内切酶MnlI

暂无内容

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

BsmBI属于Type IIs型内切酶,可识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。本产品提供优化的反应缓冲液,可使BsmBI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,可增强多种酶的稳定性。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15203-A

BsmBI10 U/μL

100 μL

15203-B

10×BsmBI Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存,有效期2年。

 

识别位置

5'-CGTCTC(N)1-3'

3'-GCAGAG(N)5-5'

 

推荐反应条件

BsmBI Buffer

55°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min

 

注意事项

13 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性;

2)受CpG甲基化影响,序列完全重叠,剪切受阻;

3)受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切可能受影响;

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

4)本产品仅作科研用途!

 

质量控制

1. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。

2. 酶切连接再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

3. DNase残留检测:1 μL酶与双链DNA底物在37°C下孵育16 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA底物无变化。

 

使用方法

DNA酶切流程

1按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作):

组分

体系

10×BsmBI Buffer

5 μL

底物DNA*

1 μg

BsmBI10 U/μL

1 μL

ddH2O

up to 50 μL

*DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响BsmBI酶活性。

注:反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性。

2)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

355°C孵育15 min-1 h。一般推荐5-10 U/μg质粒DNA10-20 U/μg基因组DNA,孵育1 h。如需过夜酶切,请将酶量调整为1 U

4)停止反应(可选):80°C孵育20 min即可使酶失活,或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。

5)如进行小体系反应,可参考如下反应体系配制(冰上操作):

组分

10 μL

25 μL

10×BsmBI Buffer

1 μL

2.5 μL

底物DNA

0.1 μg

0.5 μg

BsmBI10 U/μL

1 U

5 U

ddH2O

up to 10 μL

up to 25 μL

注:为避免蒸发,10 μL反应体系的孵育时间不应超过1 h

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

M13mp18/19

Adeno2

14

0

1

2

2

1

21

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠,

剪切阻断

无影响

序列可能重叠,

剪切可能受影响

 

HB221019

Q:15048ES和15203ES这两款产品的区别是什么?

A:两款产品是同一个酶切位点的同工酶,15203酶切效果更好,但价格相对较贵。15048相对酶切效果弱于15203,并且属于温度敏感型,使用和保存要谨慎,性价比较高。

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

暂无内容

 

BsmBI属于Type IIs型内切酶,可识别非回文序列,并在识别序列之外进行切割,常用于Golden Gate组装。本产品提供优化的反应缓冲液,可使BsmBI最大限度发挥功能,同时反应缓冲液包含重组白蛋白,可增强多种酶的稳定性。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15203-A

BsmBI10 U/μL

100 μL

15203-B

10×BsmBI Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存,有效期2年。

 

识别位置

5'-CGTCTC(N)1-3'

3'-GCAGAG(N)5-5'

 

推荐反应条件

BsmBI Buffer

55°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min

 

注意事项

13 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性;

2)受CpG甲基化影响,序列完全重叠,剪切受阻;

3)受EcoBI甲基化影响,序列可能重叠,剪切可能受影响;

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作

4)本产品仅作科研用途!

 

质量控制

1. 超长时间孵育检测:最适反应温度下,将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,但延长孵育时间可能出现星号活性。

2. 酶切连接再酶切检测:最适反应温度下,使用1 μL酶消化底物,回收酶切产物,在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接,将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

3. DNase残留检测:1 μL酶与双链DNA底物在37°C下孵育16 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,双链DNA底物无变化。

 

使用方法

DNA酶切流程

1按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作):

组分

体系

10×BsmBI Buffer

5 μL

底物DNA*

1 μg

BsmBI10 U/μL

1 μL

ddH2O

up to 50 μL

*DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响BsmBI酶活性。

注:反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性。

2)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

355°C孵育15 min-1 h。一般推荐5-10 U/μg质粒DNA10-20 U/μg基因组DNA,孵育1 h。如需过夜酶切,请将酶量调整为1 U

4)停止反应(可选):80°C孵育20 min即可使酶失活,或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。

5)如进行小体系反应,可参考如下反应体系配制(冰上操作):

组分

10 μL

25 μL

10×BsmBI Buffer

1 μL

2.5 μL

底物DNA

0.1 μg

0.5 μg

BsmBI10 U/μL

1 U

5 U

ddH2O

up to 10 μL

up to 25 μL

注:为避免蒸发,10 μL反应体系的孵育时间不应超过1 h

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

M13mp18/19

Adeno2

14

0

1

2

2

1

21

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠,

剪切阻断

无影响

序列可能重叠,

剪切可能受影响

 

HB221019

Q:15048ES和15203ES这两款产品的区别是什么?

A:两款产品是同一个酶切位点的同工酶,15203酶切效果更好,但价格相对较贵。15048相对酶切效果弱于15203,并且属于温度敏感型,使用和保存要谨慎,性价比较高。

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

暂无内容

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

RNase H(核糖核酸酶 H)是一种内切核糖核酸酶,特异性地水解 DNA/RNA 杂交链上的RNA的磷酸二酯键,但不会水解单链和双链 DNA 或RNA 中的磷酸二酯键。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

 

12906ES60

(100 U)

12906ES76

(500 U)

12906ES90

(5,000 U)

12906ES20

(20 mL)

12906-A

RNase   H

20   μL

100   μL

1 mL

20   mL

12906-B

10×RNase   H Reaction Buffer*

200   μL

1 mL

10×1   mL

4×50   mL

【注】:*10×RNase H Reaction Buffer:750 mM KCl,500 mM Tris-HCl,30 mM MgCl2,100 mM Dithiothreitol,pH 8.3 @ 25℃。

 

产品应用

1. cDNA二链合成前去除mRNA;

2. RT-PCR/RT-qPCR实验中,cDNA一链合成后去除RNA;

3. Oligo(dT)与mRNA杂交之后去除poly(A);

4. RNA特异位点的剪切。

 

单位定义

在50 μL的应体系中,37℃下反应20 min时,水解RNA-DNA杂交链生成1 nmol核糖核苷酸所需要的酶量定义为1 U。

 

质量控制

1. 脱氧核糖核酸内切酶检测:RNase H孵育超螺旋质粒DNA,未见明显降解;

2. 核糖核酸酶测定:RNase H孵育[3H]-RNA后未见明显降解;

3. 寡核苷酸标记实验:RNase H孵育放射性标记的单链或者双链DNA,未见明显降解。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1. RNase H对物理变性敏感,混合时轻轻颠倒试管摇匀,请勿剧烈振荡;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220707

 

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H(核糖核酸酶 H)是一种内切核糖核酸酶,特异性地水解 DNA/RNA 杂交链上的RNA的磷酸二酯键,但不会水解单链和双链 DNA 或RNA 中的磷酸二酯键。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

 

12906ES60

(100 U)

12906ES76

(500 U)

12906ES90

(5,000 U)

12906ES20

(20 mL)

12906-A

RNase   H

20   μL

100   μL

1 mL

20   mL

12906-B

10×RNase   H Reaction Buffer*

200   μL

1 mL

10×1   mL

4×50   mL

【注】:*10×RNase H Reaction Buffer:750 mM KCl,500 mM Tris-HCl,30 mM MgCl2,100 mM Dithiothreitol,pH 8.3 @ 25℃。

 

产品应用

1. cDNA二链合成前去除mRNA;

2. RT-PCR/RT-qPCR实验中,cDNA一链合成后去除RNA;

3. Oligo(dT)与mRNA杂交之后去除poly(A);

4. RNA特异位点的剪切。

 

单位定义

在50 μL的应体系中,37℃下反应20 min时,水解RNA-DNA杂交链生成1 nmol核糖核苷酸所需要的酶量定义为1 U。

 

质量控制

1. 脱氧核糖核酸内切酶检测:RNase H孵育超螺旋质粒DNA,未见明显降解;

2. 核糖核酸酶测定:RNase H孵育[3H]-RNA后未见明显降解;

3. 寡核苷酸标记实验:RNase H孵育放射性标记的单链或者双链DNA,未见明显降解。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存,有效期两年。

 

注意事项

1. RNase H对物理变性敏感,混合时轻轻颠倒试管摇匀,请勿剧烈振荡;

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

3. 本产品仅做科研用途;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220707

 

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

ludger内切糖苷酶产品


ludger内切糖苷酶产品

糖苷内切酶是从糖蛋白上切割完整聚糖的酶。这些酶在不含甘油,NaCl或其他添加剂(如EDTA)的清洁制剂中高度稳定。测试所有酶的蛋白水解或未预期的糖苷活性。

糖苷内切酶是糖蛋白分析中使用广泛的酶。这些酶从糖蛋白中释放出完整的聚糖,而糖苷外切酶则释放出单个的单糖(即唾液酸,半乳糖,β-N-乙酰氨基葡糖胺,甘露糖等)。

尽管PNGase F实际上是酰胺酶,但由于其裂解完整的N-连接聚糖的相似活性,通常将其包括在酶组中。它在天冬酰胺氨基酸和N-连接聚糖的壳二糖核心的一个β-N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)之间裂解。Endo F酶和Endo H在一个和第二个GlcNAc之间裂解N-连接的聚糖,留下带电荷的残基,这有助于增加去糖基化蛋白质的溶解度,从而降低蛋白质聚集体沉淀的可能性。PNGase F裂解所有N-连接的聚糖,而Endo H和Endo F酶去除特定类型的N-连接的聚糖。

O-糖苷酶也包括在这种酶的分类中,其从丝氨酸或苏氨酸氨基酸中去除了核心1 O-连接的聚糖(Gal-β(1-3)GalNAc- α)。通常,O-连接的聚糖含有在分支和线性连接中均与半乳糖连接的另外的单糖,需要使用外切糖苷酶,例如唾液酸酶和半乳糖苷酶来除去另外的糖。

 

  • PNGase F(肽N糖苷酶F)和重组PNGase F

     

    PNGase F适用于从糖蛋白和糖肽中释放所有类型(高甘露糖,杂合和复杂)的N-连接聚糖。PNGase F不会去除植物糖蛋白上常见的含有α(1-3)连接的核心岩藻糖的寡糖。

     

    下表列出并比较了Ludger提供的PNGase F酶试剂盒。

    LZ-rPNGaseF试剂盒

    LudgerZyme重组PNGase F试剂盒(新英格兰生物实验室)。

    Elizabethkingia miricola大肠杆菌

     

    • 零件号
    • LZ-rPNGaseF试剂盒
    • 酶量
    • 150微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达150个反应。

     

    E-PNG01

    来自伊丽莎白女王脑膜炎

     

    • 零件号
    • E-PNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

     

    E-PNG01-200     *以前为E-PNG05

    来自伊丽莎白女王脑膜炎

    • 货号
    • E-PNG01-200
    • 酶量
    • 1 U / 200微升

    仅包含酶。

    足以进行多达200个反应。

     

    E-rPNG01

    重组PNG酶f起Elizabethkingia miricola

     

    • 零件号
    • E-rPNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F1

    E-EF01

    Endo F1从肽和蛋白质中裂解出高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF01
    • 酶量
    • 1 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F2

    E-EF02

    从肽和蛋白质中选择性释放双天线和高甘露糖(以降低40倍的速率)聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F3

    E-EF03

    从肽和蛋白质中选择性释放triantennarry和α(1-6)岩藻糖基化双触角N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF03
    • 酶量
    • 0.33 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶H

    E-EHO2

    Endo H裂解天冬酰胺连接的杂合或高甘露糖低聚糖,但不裂解复合低聚糖。

    从重组基因链霉菌plicatus的大肠杆菌

     

     

    • 零件号
    • E-EH02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • O型糖苷酶

    E-G001

    仅切割连接至糖蛋白或糖肽丝氨酸或苏氨酸残基的未取代的Gal-β(1-3)GalNAc- α二糖。

    重组肺炎链球菌大肠杆菌中

     

    • 零件号
    • E-G001
    • 酶量
    • 75 mU / 60 µL

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 酶促碳释放试剂盒

    KE-DG01

    该试剂盒包括使糖蛋白去糖基化,去除所有N-连接的寡糖和许多O-连接的糖所需的酶和缓冲液。

    酶被分别包装在单独的20微升小瓶中。与我们的酶混合物KE-DGMX相比,这使研究人员可以更灵活地表征与其糖蛋白相连的聚糖。

     

     

    • 货号
    • KE-DG01
    • 酶量
    • 每种酶20 µL

     

    20微升的各在分开的小瓶下列酶的:PNG酶F(Elizabethkingia脑膜),O糖苷酶(肺炎链球菌),唾液酸酶(节杆菌),β半乳糖苷酶(肺炎链球菌),葡萄糖苷酶(肺炎链球菌)。

     

    试剂盒包括酶,反应缓冲液和牛胎球蛋白(对照)。

    每种酶多可进行20个反应。

  •  

  •  
  • 酶促DeGlycoMx试剂盒

    KE-DGMX

    此用于蛋白质去糖基化的试剂盒包括我们的DeGlycoMx,它是酶预混混合物,可通过10次反应(多每次反应50微克蛋白质)从0.5 mg糖蛋白中去除所有N-连接的寡糖和大多数O-连接的糖。

    该试剂盒易于使用且有效:将2 µL DeGlycoMx酶添加到变性样品和随附的缓冲液中,并在37°C孵育3小时。

     

     

    • 货号
    • KE-DGMX
    • 酶量
    • 20 µL预混料

     

    酶可以被设置为一个20μL预混鸡尾酒包括:PNG酶F(Elizabethkingia脑膜),O糖苷酶(肺炎链球菌),唾液酸酶(节杆菌),β半乳糖苷酶(肺炎链球菌),葡萄糖苷酶(肺炎链球菌)。

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达20个反应。

  •  

  •  
  • β-半乳糖苷酶

    E-XBG01

    内-β-半乳糖苷酶在无支链,重复的聚-N-乙酰基乳糖胺结构中切割内部β(1-4)半乳糖键。

    从重组基因脆弱拟杆菌大肠杆菌

     

    • 货号
    • E-XBG01
    • 酶量
    • 0.9 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • LudgerZyme神经酰胺糖酶试剂盒

    LZ-CER-HM-KIT

    神经酰胺聚糖酶通过切割ß-糖基键来使各种糖鞘脂去糖基化。

     

     

     

     

    • 货号
    • LZ-CER-HM-KIT
    • 酶量
    • 55微升

     

    试剂盒包括酶,反应缓冲液和GM1标准品。

    多可进行25次反应。

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。本产品不含甘油,专门用于冻干试剂的配置。

 

产品信息

货号

14541ES80/14541ES92

规格

1 KU /10 KU

 

组分信息

产品名称

14541ES80  

14541ES92

RNase HII, Glycerol-free (2 U/μL)

500 μL

5× 1 mL

 

储存条件

2~8℃保存,有效期6个月。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR(rhPCR)。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240108

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

暂无内容

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

暂无内容

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。本产品不含甘油,专门用于冻干试剂的配置。

 

产品信息

货号

14541ES80/14541ES92

规格

1 KU /10 KU

 

组分信息

产品名称

14541ES80  

14541ES92

RNase HII, Glycerol-free (2 U/μL)

500 μL

5× 1 mL

 

储存条件

2~8℃保存,有效期6个月。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR(rhPCR)。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240108

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

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RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

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核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶,有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键,产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

 

产品信息

货号

14536ES80/14536ES90

规格

1,000 U/5,000 U

酶活

10 U/μL

失活条件

75℃孵育10 min

 

组分信息

组分编号

组分名称

14536ES80

14536ES90

14536-A

Endonuclease VIII

100 μL

500 μL

14536-B

10 × Endonuclease VIII Reaction Buffer

1.5 mL

1.5 mL

 

储存条件

25-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

1) 反应体系

组分

体积(μL

10×Endonuclease VIII Reaction Buffer 

2

AP位点的dsDNA

X (10 pmol)

Endonuclease VIII(10 U/μL)

1

ddH2O

To 20

*AP位点的dsDNA可由退火后的双链添加UDG(Cat#10303ES)水解制备。

2) 反应条件:充分混匀,37℃反应3060 min。

 

注意事项

1. 本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途。

 

Ver.CN20230831

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

暂无内容

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

暂无内容

 

核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶,有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键,产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

 

产品信息

货号

14536ES80/14536ES90

规格

1,000 U/5,000 U

酶活

10 U/μL

失活条件

75℃孵育10 min

 

组分信息

组分编号

组分名称

14536ES80

14536ES90

14536-A

Endonuclease VIII

100 μL

500 μL

14536-B

10 × Endonuclease VIII Reaction Buffer

1.5 mL

1.5 mL

 

储存条件

25-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

1) 反应体系

组分

体积(μL

10×Endonuclease VIII Reaction Buffer 

2

AP位点的dsDNA

X (10 pmol)

Endonuclease VIII(10 U/μL)

1

ddH2O

To 20

*AP位点的dsDNA可由退火后的双链添加UDG(Cat#10303ES)水解制备。

2) 反应条件:充分混匀,37℃反应3060 min。

 

注意事项

1. 本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途。

 

Ver.CN20230831

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

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核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

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dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

dsDNase (with RNase Inhibitor)是一种核酸内切酶,能够裂解DNA中的磷酸二酯键,生成带有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。dsDNase能够特异性的消化双链DNA而不会消化单链DNA、引物、探针和RNA。dsDNase具有热敏感性,可在65℃条件下快速失活。该产品主要用于反转录实验前快速去除RNA样本中的基因组DNA污染,与传统的使用DNase I去除基因组DNA污染的方法相比,无需额外加入EDTA失活,同时节省实验时间,保证RNA定量的准确性。

 

产品信息

货号

14533ES50 / 14533ES80

规格

50 T / 1,000 T

活性定义

根据Kunitz实验方法,在25℃ pH5.0的条件下,以过量的大分子DNA为底物,在260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加0.001的酶量定义为1个活性单位(U)

 

组分信息

组分编号

产品名称

14533ES50

14533ES80

14533-A

dsDNase (with RNase Inhibitor)

50 μL

1 mL

14533-B

10×dsDNase Buffer

200 μL

4 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

1.于冰上配制如下反应体系

组分

用量

dsDNase (with RNase Inhibitor)

1 μL

10×dsDNase Buffer

1 μL

模板 RNA

X μL

RNA

1 pg~5 μg/10 μL

mRNA

0.1 pg~500 ng/10 μL

特异性 RNA

0.01 ng~500 ng/10 μL

Nuclease-Free Water

up to 10 μL

2.轻轻吹打混匀反应体系后,将以上混合液在 37℃温育 2~5 min;

3.65℃热失活 10 min,迅速将获得的RNA置于冰上,用于后续实验。

 

注意事项

1. 抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制dsDNase的活性。

2. 若RNA样本下游用于RT-PCR,且目的基因长度≥3 kb,失活步骤前需添加终浓度为10 mM的DTT。

3. 热灭活条件:1)65℃ 10 min;2)85℃ 5 min。

3. 该反应体系无需再另外加入RNase Inhibitor。

4. 本产品仅作科研用途

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230411

dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

暂无内容

dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

暂无内容

 

dsDNase (with RNase Inhibitor)是一种核酸内切酶,能够裂解DNA中的磷酸二酯键,生成带有5'-磷酸和3'-羟基末端的寡核苷酸。dsDNase能够特异性的消化双链DNA而不会消化单链DNA、引物、探针和RNA。dsDNase具有热敏感性,可在65℃条件下快速失活。该产品主要用于反转录实验前快速去除RNA样本中的基因组DNA污染,与传统的使用DNase I去除基因组DNA污染的方法相比,无需额外加入EDTA失活,同时节省实验时间,保证RNA定量的准确性。

 

产品信息

货号

14533ES50 / 14533ES80

规格

50 T / 1,000 T

活性定义

根据Kunitz实验方法,在25℃ pH5.0的条件下,以过量的大分子DNA为底物,在260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加0.001的酶量定义为1个活性单位(U)

 

组分信息

组分编号

产品名称

14533ES50

14533ES80

14533-A

dsDNase (with RNase Inhibitor)

50 μL

1 mL

14533-B

10×dsDNase Buffer

200 μL

4 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

1.于冰上配制如下反应体系

组分

用量

dsDNase (with RNase Inhibitor)

1 μL

10×dsDNase Buffer

1 μL

模板 RNA

X μL

RNA

1 pg~5 μg/10 μL

mRNA

0.1 pg~500 ng/10 μL

特异性 RNA

0.01 ng~500 ng/10 μL

Nuclease-Free Water

up to 10 μL

2.轻轻吹打混匀反应体系后,将以上混合液在 37℃温育 2~5 min;

3.65℃热失活 10 min,迅速将获得的RNA置于冰上,用于后续实验。

 

注意事项

1. 抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制dsDNase的活性。

2. 若RNA样本下游用于RT-PCR,且目的基因长度≥3 kb,失活步骤前需添加终浓度为10 mM的DTT。

3. 热灭活条件:1)65℃ 10 min;2)85℃ 5 min。

3. 该反应体系无需再另外加入RNase Inhibitor。

4. 本产品仅作科研用途

5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230411

dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

暂无内容

dsDNase核酸内切酶(含RNase抑制剂)

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RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。

 

组分信息

产品名称

14539ES50

14539ES72

RNase HII(2 U/μL)

25 μL

125 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR(rhPCR)。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

暂无内容

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

暂无内容

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。

 

组分信息

产品名称

14539ES50

14539ES72

RNase HII(2 U/μL)

25 μL

125 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR(rhPCR)。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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内切糖苷酶产品


内切糖苷酶

– 内切
糖苷酶从清洁制剂中的糖蛋白 – 高度稳定的酶切割完整的聚糖 – 不含甘油,NaCl或其他添加剂,如EDTA。
– 测试所有酶不存在蛋白水解或意外的糖苷活性

内切糖苷酶是用于分析糖蛋白的广泛使用的酶。这些酶从糖蛋白释放完整的聚糖,而外切糖苷酶释放单个单糖(即唾液酸,半乳糖,β-N-乙酰基葡糖胺,甘露糖等)。

PNGase F通常包含在酶组中,因为其切割完整的N-连接聚糖的活性相似,尽管它实际上是酰胺酶。它在天冬酰胺氨基酸和N-连接聚糖的壳二糖核心的个β-N-乙酰葡糖胺糖(GlcNAc)之间切割。Endo F酶和Endo H在和第二GlcNAc之间切割N-连接的聚糖,留下带电荷的残基,其有助于增加去糖基化蛋白质的溶解度,降低蛋白质聚集体沉淀的可能性。PNGase F切割所有N-连接的聚糖,而Endo H和Endo F酶切除特定类型的N-连接聚糖。

酶的这种分类还包括O-糖苷酶,其从丝氨酸或苏氨酸氨基酸中除去核心1O-连接的聚糖(Galβ1,3GalNAcα)。O-连接的聚糖通常含有在分支和线性连接中与半乳糖连接的另外的单糖,需要使用外切糖苷酶如唾液酸酶和半乳糖苷酶来除去额外的糖。

内切糖苷酶有以下几个品牌产品:

(一)qa-bio E-PNG01

PNGase F.

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接的)寡糖。

产品编号 – 酶的量
E-PNG01 – 60μLs¹

E -PNG01-20 – 20μLs¹

E -PNG01-200 – 200μls²(以前的E-PNG05)
   ¹包括缓冲液,变性剂和Triton- 
   X²仅含酶

¥ 1,313.38 – ¥ 9,806.55

PNGase F,肽N糖苷酶F,N-糖苷酶,N-聚糖酶

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接的)寡糖。该酶将天冬酰胺脱氨基成天冬氨酸,使寡糖保持完整。变性增加了解理速率。大多数天然蛋白质仍然可以*N-去糖基化,但必须增加孵育时间。酶在反应条件(37℃)下保持*活性至少96小时。PNGase F不会去除通常在植物糖蛋白上发现的含有α-(1,3) – 连接的核心岩藻糖的寡糖; 为此目的,使用肽N-糖苷酶A.

有许多替代酶可用于去除N-聚糖,特别是Endo F家族的酶和Endo H.这些酶切割寡糖核心中的两个N-乙酰氨基葡萄糖残基,产生截短的糖在天冬酰胺上残留一个N-乙酰氨基葡萄糖残基的分子。这留下带电荷的糖,其可以帮助将蛋白质保持在溶液中,所述溶液在用PNGase F去糖基化后沉淀,其去除了完整的寡糖。Endo F1切割高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。Endo F2将去除双触角和高甘露糖(降低40倍速率)。Endo F3释放出triantennarry和岩藻糖基化的双触角N-聚糖。远藤H. 去除杂交或高甘露糖聚糖。

来源 Elizabethkingia miricola(是Chryseobacterium meningosepticum

EC 3.5.1.52 
PDB 1PGS 
UniProt Q9XBM8

内容
PNG酶的F的20mM的Tris-HCl,pH 7.5中

包含20μL和60μL包装尺寸:
5x反应缓冲液7.5 – 250 mM磷酸钠,pH 7.5 
变性溶液 – 2%SDS,1Mβ-巯基乙醇
Triton X-100 – 15%溶液

比活力 > 25 U / mg

活性 5U / ml

分子量 36,000道尔顿

pH范围 6-10,适7.5

方案
1.在Eppendorf管中加入高达200μg的糖蛋白。用去离子水调节至35μl终体积。
2.加入10μl5x反应缓冲液7.5和2.5μl变性溶液。在100°C加热5分钟。
很酷。加入2.5μlTritonX-100并混合。
4.向反应中加入2.0μl酶。在37°C孵育3小时。

特异性切除所有天冬酰胺连接的复合物,杂交或高甘露糖寡糖,除非α(1-3)核心岩藻糖基化; 天冬酰胺必须在两个末端肽结合,Endo F游离

比活性定义为在37℃,pH7.5下在1分钟内催化从1微摩尔变性的RNase B释放N-连接的寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割(切割的RNase B迁移更快)。

储存在4°C储存酶。

 

 

(二)ludger

酶(内切和外切糖苷酶)包括LudgerZyme™(LZ)产品

内切糖苷酶:

从糖蛋白切割聚糖的酶

  • PNGase F(肽N糖苷酶F)

    E-PNG01

    PNGase F(QABio)。足以进行多达60次反应。

    0.3 U /60μl。试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    酶学委员会编号:EC 3.5.1.52

  • E-PNG05

    PNGase F(QABio)。足以达到200次反应。

    1 U /200μl。仅含酶。

    酶学委员会编号:EC 3.5.1.52

  • 重组PNGase F.

    E-rPNG01

    重组PNGase F(QABio)。足以进行多达60次反应。

    0.3 U /60μl。试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    酶学委员会编号:EC 3.5.1.52

  • LZ-rPNGaseF-kit *新产品*

    LudgerZyme重组PNGase F试剂盒(New England BioLabs)。足以进行多达150次反应。

    150μl。试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    酶学委员会编号:EC 3.5.1.52

 

 

(三)neb 

P0704S

浓度

500,000单位/毫升

尺寸

15,000个单位

价格表

$ 180.00

 

P0704L

浓度

500,000单位/毫升

尺寸

75,000个单位

价格表

$ 718.00

PNGase F.

PNGase F是从糖蛋白中去除几乎所有N-连接的寡糖的有效的酶促方法。PNGase F是酰胺酶,其在高甘露糖,杂合和复合寡糖的内部GlcNAc和天冬酰胺残基之间切割。 

  • 通过SDS-PAGE和完整的ESI-MS测定,纯度≥95%
  • 非重组,没有可检测的内切糖苷酶F1,F2或F3污染
  • 储存在50%甘油中; 适活动和稳定性长达24个月
  • 可在天然或变性条件下使用
  • 优化糖蛋白的去糖基化; 使N-聚糖核心寡糖保持完整,适合进一步分析

 

 

(四)promega

PNGase F

Catalog number selected: V4831

PNGase F( 肽N- 糖苷酶F) 是一个重组糖苷酶,从Elizabethkingia miricola 克隆

  • 用于测定蛋白糖基化状态和位置
  • 可在N- 连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分内侧的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc) 和天冬酰氨残基之间进行切割。
  • 不会去除常见植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖连接的寡糖。
  • 产品以10u/μl浓度提供

 

PNGase F, 重组糖苷酶

PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一个重组糖苷酶,从 Elizabeth-kingia miricola 克隆,并在大肠杆菌中过表达获得。PNGase F 的分子量为 36kDa,  可以在 N-连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分内侧的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间进行切割(图1)。PNGase F 不会去除常见植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖连接的寡糖。

单位定义:一单位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分钟内催化 1nm 变性核糖核酸酶 B(RNase B)去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 单位等于 1 IUB 毫单位。

分子量:PNGase F 分子量约为 36kDa 。

物理形态:PNGase F 溶于 20mM Tris-HCl(pH 7.5,25℃),50mM NaCl和 5mM EDTA缓冲液中,浓度为10,000u/ml。

应用:

• 蛋白是否被糖基化的特征

• 确定蛋白的糖基化位点

• 聚糖结构特征

• 蛋白运输

Cleavage specificity of PNGase F on N-Glycans.

Cleavage specificity of PNGase F on N-Glycans.

Recombinant PNGase F deglycosylates multiple substrates.

Recombinant PNGase F deglycosylates multiple substrates.

Schematic illustrating the use of PNGase F and mass spec analysis of N-glycosylation.

Schematic illustrating the use of PNGase F and mass spec analysis of N-glycosylation.

 

项目 部分# 尺寸 浓度

PNGase F.

V483A 1×500个单位 10U /μl的

 

ludger糖苷内切酶

 

 

 

ludger糖苷内切酶

Endoglycosidases:

糖苷内切酶是从糖蛋白上切割完整聚糖的酶。这些酶在不含甘油,NaCl或其他添加剂(如EDTA)的清洁制剂中高度稳定。测试所有酶是否没有蛋白水解或意外的糖苷活性。

糖苷内切酶是糖蛋白分析中使用广泛的酶。这些酶从糖蛋白中释放出完整的聚糖,而糖苷外切酶则释放出单个的单糖(即唾液酸,半乳糖,β-N-乙酰氨基葡糖胺,甘露糖等)。

尽管PNGase F实际上是酰胺酶,但由于其裂解完整的N-连接聚糖的相似活性,通常将其包括在酶组中。它在天冬酰胺氨基酸和N-连接聚糖的壳二糖核心的一个β-N-乙酰氨基葡萄糖胺糖(GlcNAc)之间裂解。Endo F酶和Endo H在一个和第二个GlcNAc之间裂解N-连接的聚糖,留下带电荷的残基,这有助于增加去糖基化蛋白质的溶解度,从而降低蛋白质聚集体沉淀的可能性。PNGase F裂解所有N-连接的聚糖,而Endo H和Endo F酶则去除特定类型的N-连接的聚糖。

O-糖苷酶也包括在这种酶的分类中,其从丝氨酸或苏氨酸氨基酸中去除了核心1 O-连接的聚糖(Gal-β(1-3)GalNAc- α)。通常,O-连接的聚糖含有在分支和线性连接中均与半乳糖连接的另外的单糖,需要使用外切糖苷酶,例如唾液酸酶和半乳糖苷酶来除去另外的糖。

 

  • PNGase F(肽N糖苷酶F)和重组PNGase F

     

    PNGase F适用于从糖蛋白和糖肽中释放所有类型(高甘露糖,杂合和复杂)的N-连接聚糖。PNGase F不会去除植物糖蛋白上常见的含有α(1-3)连接的核心岩藻糖的寡糖。

     

    下表列出并比较了Ludger提供的PNGase F酶试剂盒。

    LZ-rPNGaseF-试剂盒

    LudgerZyme重组PNGase F试剂盒(新英格兰生物实验室)。

    从Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

    产品指南

    • 零件号
    • LZ-rPNGaseF-试剂盒
    • 酶量
    • 150微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达150个反应。

     

    E-PNG01

    从伊丽莎白女王脑膜炎病菌

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-PNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

     

    E-PNG01-200     *以前为E-PNG05

    从伊丽莎白女王脑膜炎病菌

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-PNG01-200
    • 酶量
    • 1 U / 200微升

     

    仅包含酶。

    足以进行多达200个反应。

     

    E-rPNG01

    重组PNG酶f起Elizabethkingia miricola。

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-rPNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F1

    E-EF01

    Endo F1从肽和蛋白质中裂解出高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF01
    • 酶量
    • 1 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F2

    E-EF02

    从肽和蛋白质中选择性释放双天线和高甘露糖(以40倍的降低速率)聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F3

    E-EF03

    从肽和蛋白质中选择性释放triantennarry和α(1-6)岩藻糖基化双触角N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF03
    • 酶量
    • 0.33 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶H

    E-EHO2

    Endo H裂解天冬酰胺连接的或高甘露糖寡糖,但不裂解复杂寡糖。

    从重组基因链霉菌plicatus的在大肠杆菌

     

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    • 零件号
    • E-EH02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • O-糖苷酶

    E-G001

    仅切割连接至糖蛋白或糖肽丝氨酸或苏氨酸残基的未取代的Gal-β(1-3)GalNAc- α二糖。

    重组肺炎链球菌在大肠杆菌中。

     

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    • 零件号
    • E-G001
    • 酶量
    • 75 mU / 60 µL

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 酶促碳释放试剂盒

    KE-DG01

    该试剂盒包括使糖蛋白去糖基化,去除所有N-连接的寡糖和许多O-连接的糖所需的酶和缓冲液。

    这些酶分别包装在20微升的小瓶中。与我们的酶混合物KE-DGMX相比,这使研究人员可以灵活地更充分地表征与其糖蛋白相连的聚糖。

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • KE-DG01
    • 酶量
    • 每种酶20 µL

     

    20微升的各在分开的小瓶下列酶的:PNG酶F(Elizabethkingia脑膜),O糖苷酶(肺炎链球菌),唾液酸酶(节杆菌),β半乳糖苷酶(肺炎链球菌),葡萄糖苷酶(肺炎链球菌)。

     

    试剂盒包括酶,反应缓冲液和牛胎球蛋白(对照)。

    每种酶多可进行20个反应。

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  • 酶促DeGlycoMx试剂盒

    KE-DGMX

    此用于蛋白质脱糖基化的试剂盒包括我们的DeGlycoMx,它是酶的预混混合物,可通过10次反应(多每次反应50微克蛋白质)从0.5 mg糖蛋白中去除所有N-连接的寡糖和大多数O-连接的糖。

    该试剂盒易于使用且有效:将2 µL DeGlycoMx酶添加到变性样品和随附的缓冲液中,并在37°C孵育3小时。

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • KE-DGMX
    • 酶量
    • 20 µL预混料

     

    酶可以被设置为一个20μL预混鸡尾酒包括:PNG酶F(Elizabethkingia脑膜),O糖苷酶(肺炎链球菌),唾液酸酶(节杆菌),β半乳糖苷酶(肺炎链球菌),葡萄糖苷酶(肺炎链球菌)。

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达20个反应。

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  • 内β-半乳糖苷酶

    E-XBG01

    内-β-半乳糖苷酶在无支链,重复的聚-N-乙酰基乳糖胺结构中裂解内部β(1-4)半乳糖键。

    从重组基因脆弱拟杆菌在大肠杆菌。

     

    查看产品文档:规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-XBG01
    • 酶量
    • 0.9 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • LudgerZyme神经酰胺糖苷酶试剂盒

    LZ-CER-HM-KIT

    神经酰胺聚糖酶通过切割ß-糖基键来使多种糖鞘脂去糖基化。

    从广ir

     

    产品总览

    产品指南

    稳定性证书

    • 零件号
    • LZ-CER-HM-KIT
    • 酶量
    • 55微升

     

    试剂盒包括酶,反应缓冲液和GM1标准品。

    多可进行25次反应。