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RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

发表于由

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.)，经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割，但对单链RNA切割活性极低，对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性，但是室温下活性极低。本品极度耐热，95°C孵育45 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。本产品不含甘油，专门用于冻干试剂的配置。

 

产品信息

货号

14541ES80/14541ES92

规格

1 KU /10 KU

 

组分信息

产品名称

14541ES80  

14541ES92

RNase HII, Glycerol-free (2 U/μL)

500 μL

5× 1 mL

 

储存条件

2～8℃保存，有效期6个月。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR（rhPCR）。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240108

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

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RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

暂无内容

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.)，经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割，但对单链RNA切割活性极低，对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性，但是室温下活性极低。本品极度耐热，95°C孵育45 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。本产品不含甘油，专门用于冻干试剂的配置。

 

产品信息

货号

14541ES80/14541ES92

规格

1 KU /10 KU

 

组分信息

产品名称

14541ES80  

14541ES92

RNase HII, Glycerol-free (2 U/μL)

500 μL

5× 1 mL

 

储存条件

2～8℃保存，有效期6个月。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR（rhPCR）。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240108

RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

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RNase HII内切酶 RNase HII核糖核酸内切酶(不含甘油 2U/μL)

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核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

发表于由

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶，有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键，产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

 

产品信息

货号

14536ES80/14536ES90

规格

1,000 U/5,000 U

酶活

10 U/μL

失活条件

75℃孵育10 min

 

组分信息

组分编号

组分名称

14536ES80

14536ES90

14536-A

Endonuclease VIII

100 μL

500 μL

14536-B

10 × Endonuclease VIII Reaction Buffer

1.5 mL

1.5 mL

 

储存条件

–25～-15℃保存，有效期1年。

 

使用方法

1) 反应体系

组分

体积（μL）

10×Endonuclease VIII Reaction Buffer 

2

含AP位点的dsDNA

X (10 pmol)

Endonuclease VIII(10 U/μL)

1

ddH2O

To 20

*含AP位点的dsDNA可由退火后的双链添加UDG(Cat#10303ES)水解制备。

2) 反应条件：充分混匀，37℃反应30～60 min。

 

注意事项

1. 本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途。

 

Ver.CN20230831

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

暂无内容

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

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核酸内切酶 Ⅷ(Endonuclease VIII)是一种DNA损伤修复酶，有N-糖基化酶活性和AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在AP位点切割磷酸二酯键，产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。核酸内切酶 Ⅷ识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲。

 

产品信息

货号

14536ES80/14536ES90

规格

1,000 U/5,000 U

酶活

10 U/μL

失活条件

75℃孵育10 min

 

组分信息

组分编号

组分名称

14536ES80

14536ES90

14536-A

Endonuclease VIII

100 μL

500 μL

14536-B

10 × Endonuclease VIII Reaction Buffer

1.5 mL

1.5 mL

 

储存条件

–25～-15℃保存，有效期1年。

 

使用方法

1) 反应体系

组分

体积（μL）

10×Endonuclease VIII Reaction Buffer 

2

含AP位点的dsDNA

X (10 pmol)

Endonuclease VIII(10 U/μL)

1

ddH2O

To 20

*含AP位点的dsDNA可由退火后的双链添加UDG(Cat#10303ES)水解制备。

2) 反应条件：充分混匀，37℃反应30～60 min。

 

注意事项

1. 本产品中在使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途。

 

Ver.CN20230831

核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

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核酸内切酶Ⅷ(Endonuclease VIII) DNA损伤修复酶

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ludger糖苷内切酶

发表于由

 

 

 

ludger糖苷内切酶

Endoglycosidases:

糖苷内切酶是从糖蛋白上切割完整聚糖的酶。这些酶在不含甘油，NaCl或其他添加剂（如EDTA）的清洁制剂中高度稳定。测试所有酶是否没有蛋白水解或意外的糖苷活性。

糖苷内切酶是糖蛋白分析中使用广泛的酶。这些酶从糖蛋白中释放出完整的聚糖，而糖苷外切酶则释放出单个的单糖（即唾液酸，半乳糖，β-N-乙酰氨基葡糖胺，甘露糖等）。

尽管PNGase F实际上是酰胺酶，但由于其裂解完整的N-连接聚糖的相似活性，通常将其包括在酶组中。它在天冬酰胺氨基酸和N-连接聚糖的壳二糖核心的一个β-N-乙酰氨基葡萄糖胺糖（GlcNAc）之间裂解。Endo F酶和Endo H在一个和第二个GlcNAc之间裂解N-连接的聚糖，留下带电荷的残基，这有助于增加去糖基化蛋白质的溶解度，从而降低蛋白质聚集体沉淀的可能性。PNGase F裂解所有N-连接的聚糖，而Endo H和Endo F酶则去除特定类型的N-连接的聚糖。

O-糖苷酶也包括在这种酶的分类中，其从丝氨酸或苏氨酸氨基酸中去除了核心1 O-连接的聚糖（Gal-β（1-3）GalNAc- α）。通常，O-连接的聚糖含有在分支和线性连接中均与半乳糖连接的另外的单糖，需要使用外切糖苷酶，例如唾液酸酶和半乳糖苷酶来除去另外的糖。

 

  • PNGase F（肽N糖苷酶F）和重组PNGase F

     

    PNGase F适用于从糖蛋白和糖肽中释放所有类型（高甘露糖，杂合和复杂）的N-连接聚糖。PNGase F不会去除植物糖蛋白上常见的含有α（1-3）连接的核心岩藻糖的寡糖。

     

    下表列出并比较了Ludger提供的PNGase F酶试剂盒。

    LZ-rPNGaseF-试剂盒

    LudgerZyme重组PNGase F试剂盒（新英格兰生物实验室）。

    从Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

    产品指南

    • 零件号
    • LZ-rPNGaseF-试剂盒
    • 酶量
    • 150微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达150个反应。

     

    E-PNG01

    从伊丽莎白女王脑膜炎病菌

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-PNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

     

    E-PNG01-200     *以前为E-PNG05

    从伊丽莎白女王脑膜炎病菌

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-PNG01-200
    • 酶量
    • 1 U / 200微升

     

    仅包含酶。

    足以进行多达200个反应。

     

    E-rPNG01

    重组PNG酶f起Elizabethkingia miricola。

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-rPNG01
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F1

    E-EF01

    Endo F1从肽和蛋白质中裂解出高甘露糖和一些杂合型N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF01
    • 酶量
    • 1 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F2

    E-EF02

    从肽和蛋白质中选择性释放双天线和高甘露糖（以40倍的降低速率）聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

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    • 零件号
    • E-EF02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶F3

    E-EF03

    从肽和蛋白质中选择性释放triantennarry和α（1-6）岩藻糖基化双触角N-聚糖。

    从重组基因Elizabethkingia miricola在大肠杆菌

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EF03
    • 酶量
    • 0.33 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 糖苷内切酶H

    E-EHO2

    Endo H裂解天冬酰胺连接的或高甘露糖寡糖，但不裂解复杂寡糖。

    从重组基因链霉菌plicatus的在大肠杆菌

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-EH02
    • 酶量
    • 0.3 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • O-糖苷酶

    E-G001

    仅切割连接至糖蛋白或糖肽丝氨酸或苏氨酸残基的未取代的Gal-β（1-3）GalNAc- α二糖。

    重组肺炎链球菌在大肠杆菌中。

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-G001
    • 酶量
    • 75 mU / 60 µL

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • 酶促碳释放试剂盒

    KE-DG01

    该试剂盒包括使糖蛋白去糖基化，去除所有N-连接的寡糖和许多O-连接的糖所需的酶和缓冲液。

    这些酶分别包装在20微升的小瓶中。与我们的酶混合物KE-DGMX相比，这使研究人员可以灵活地更充分地表征与其糖蛋白相连的聚糖。

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • KE-DG01
    • 酶量
    • 每种酶20 µL

     

    20微升的各在分开的小瓶下列酶的：PNG酶F（Elizabethkingia脑膜），O糖苷酶（肺炎链球菌），唾液酸酶（节杆菌），β半乳糖苷酶（肺炎链球菌），葡萄糖苷酶（肺炎链球菌）。

     

    试剂盒包括酶，反应缓冲液和牛胎球蛋白（对照）。

    每种酶多可进行20个反应。

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  • 酶促DeGlycoMx试剂盒

    KE-DGMX

    此用于蛋白质脱糖基化的试剂盒包括我们的DeGlycoMx，它是酶的预混混合物，可通过10次反应（多每次反应50微克蛋白质）从0.5 mg糖蛋白中去除所有N-连接的寡糖和大多数O-连接的糖。

    该试剂盒易于使用且有效：将2 µL DeGlycoMx酶添加到变性样品和随附的缓冲液中，并在37°C孵育3小时。

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • KE-DGMX
    • 酶量
    • 20 µL预混料

     

    酶可以被设置为一个20μL预混鸡尾酒包括：PNG酶F（Elizabethkingia脑膜），O糖苷酶（肺炎链球菌），唾液酸酶（节杆菌），β半乳糖苷酶（肺炎链球菌），葡萄糖苷酶（肺炎链球菌）。

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达20个反应。

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  • 内β-半乳糖苷酶

    E-XBG01

    内-β-半乳糖苷酶在无支链，重复的聚-N-乙酰基乳糖胺结构中裂解内部β（1-4）半乳糖键。

    从重组基因脆弱拟杆菌在大肠杆菌。

     

    查看产品文档：规格表/ CofA / MSDS

    • 零件号
    • E-XBG01
    • 酶量
    • 0.9 U / 60微升

     

    试剂盒包括酶加反应缓冲液。

    足以进行多达60个反应。

  • LudgerZyme神经酰胺糖苷酶试剂盒

    LZ-CER-HM-KIT

    神经酰胺聚糖酶通过切割ß-糖基键来使多种糖鞘脂去糖基化。

    从广ir

     

    产品总览

    产品指南

    稳定性证书

    • 零件号
    • LZ-CER-HM-KIT
    • 酶量
    • 55微升

     

    试剂盒包括酶，反应缓冲液和GM1标准品。

    多可进行25次反应。

 

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

发表于由

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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FAQ

COA

已发表文献

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.)，经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割，但对单链RNA切割活性极低，对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性，但是室温下活性极低。本品极度耐热，95°C孵育45 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。

 

组分信息

产品名称

14539ES50

14539ES72

RNase HII（2 U/μL）

25 μL

125 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR（rhPCR）。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

暂无内容

 

RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.)，经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链，在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割，但对单链RNA切割活性极低，对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割，切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性，在50°C~75°C间均具有活性，但是室温下活性极低。本品极度耐热，95°C孵育45 min后，几乎没有活性损失，可与PCR各反应体系兼容。

 

组分信息

产品名称

14539ES50

14539ES72

RNase HII（2 U/μL）

25 μL

125 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

产品应用

1. LAMP 高灵敏度探针法检测。

2. RNase HII 依赖性 PCR（rhPCR）。

3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。

4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20231222

RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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RNase HII核糖核酸内切酶 (2 U/μL) RNase HII酶

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BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

发表于由

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

BsmBI属于Type IIs型内切酶，可识别非回文序列，并在识别序列之外进行切割，常用于Golden Gate组装。本产品提供优化的反应缓冲液，可使BsmBI最大限度发挥功能，同时反应缓冲液包含重组白蛋白，可增强多种酶的稳定性。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15203-A

BsmBI（10 U/μL）

100 μL

15203-B

10×BsmBI Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。

 

识别位置

5'-CGTCTC(N)1↓-3'

3'-GCAGAG(N)5↑-5'

 

推荐反应条件

1×BsmBI Buffer；

55°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min。

 

注意事项

1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；

2）受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切受阻；

3）受EcoBI甲基化影响，序列可能重叠，剪切可能受影响；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；

4）本产品仅作科研用途！

 

质量控制

1. 超长时间孵育检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，但延长孵育时间可能出现星号活性。

2. 酶切–连接–再酶切检测：最适反应温度下，使用1 μL酶消化底物，回收酶切产物，在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

3. DNase残留检测：将1 μL酶与双链DNA底物在37°C下孵育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链DNA底物无变化。

 

使用方法

DNA酶切流程

1）按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）：

组分

体系

10×BsmBI Buffer

5 μL

底物DNA*

1 μg

BsmBI（10 U/μL）

1 μL

ddH2O

up to 50 μL

*DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响BsmBI酶活性。

注：反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性。

2）轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3）55°C孵育15 min-1 h。一般推荐5-10 U酶/μg质粒DNA，10-20 U酶/μg基因组DNA，孵育1 h。如需过夜酶切，请将酶量调整为1 U。

4）停止反应（可选）：80°C孵育20 min即可使酶失活，或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。

5）如进行小体系反应，可参考如下反应体系配制（冰上操作）：

组分

10 μL

25 μL

10×BsmBI Buffer

1 μL

2.5 μL

底物DNA

0.1 μg

0.5 μg

BsmBI（10 U/μL）

1 U

5 U

ddH2O

up to 10 μL

up to 25 μL

注：为避免蒸发，10 μL反应体系的孵育时间不应超过1 h。

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

M13mp18/19

Adeno2

14

0

1

2

2

1

21

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠，

剪切阻断

无影响

序列可能重叠,

剪切可能受影响

 

HB221019

Q：15048ES和15203ES这两款产品的区别是什么？

A：两款产品是同一个酶切位点的同工酶，15203酶切效果更好，但价格相对较贵。15048相对酶切效果弱于15203，并且属于温度敏感型，使用和保存要谨慎，性价比较高。

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

暂无内容

 

BsmBI属于Type IIs型内切酶，可识别非回文序列，并在识别序列之外进行切割，常用于Golden Gate组装。本产品提供优化的反应缓冲液，可使BsmBI最大限度发挥功能，同时反应缓冲液包含重组白蛋白，可增强多种酶的稳定性。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品规格

15203-A

BsmBI（10 U/μL）

100 μL

15203-B

10×BsmBI Buffer

1 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。

 

识别位置

5'-CGTCTC(N)1↓-3'

3'-GCAGAG(N)5↑-5'

 

推荐反应条件

1×BsmBI Buffer；

55°C孵育。

 

失活条件

80°C孵育20 min。

 

注意事项

1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；

2）受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切受阻；

3）受EcoBI甲基化影响，序列可能重叠，剪切可能受影响；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；

4）本产品仅作科研用途！

 

质量控制

1. 超长时间孵育检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg λDNA共孵育3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，但延长孵育时间可能出现星号活性。

2. 酶切–连接–再酶切检测：最适反应温度下，使用1 μL酶消化底物，回收酶切产物，在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。

3. DNase残留检测：将1 μL酶与双链DNA底物在37°C下孵育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，双链DNA底物无变化。

 

使用方法

DNA酶切流程

1）按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）：

组分

体系

10×BsmBI Buffer

5 μL

底物DNA*

1 μg

BsmBI（10 U/μL）

1 μL

ddH2O

up to 50 μL

*DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响BsmBI酶活性。

注：反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性。

2）轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3）55°C孵育15 min-1 h。一般推荐5-10 U酶/μg质粒DNA，10-20 U酶/μg基因组DNA，孵育1 h。如需过夜酶切，请将酶量调整为1 U。

4）停止反应（可选）：80°C孵育20 min即可使酶失活，或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。

5）如进行小体系反应，可参考如下反应体系配制（冰上操作）：

组分

10 μL

25 μL

10×BsmBI Buffer

1 μL

2.5 μL

底物DNA

0.1 μg

0.5 μg

BsmBI（10 U/μL）

1 U

5 U

ddH2O

up to 10 μL

up to 25 μL

注：为避免蒸发，10 μL反应体系的孵育时间不应超过1 h。

不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

M13mp18/19

Adeno2

14

0

1

2

2

1

21

甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠，

剪切阻断

无影响

序列可能重叠,

剪切可能受影响

 

HB221019

Q：15048ES和15203ES这两款产品的区别是什么？

A：两款产品是同一个酶切位点的同工酶，15203酶切效果更好，但价格相对较贵。15048相对酶切效果弱于15203，并且属于温度敏感型，使用和保存要谨慎，性价比较高。

BsmBI限制性内切酶 Type IIs型内切酶

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牛胰腺脱氧核糖核酸酶I DNase I核酸内切酶|Deoxyribonuclease I from bovine pancreas

发表于由

牛胰腺脱氧核糖核酸酶I DNase I核酸内切酶|Deoxyribonuclease I from bovine pancreas

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸酶，属核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺，分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以粉末形式供应，酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。

 

产品性质

CAS号（CAS NO.）

9003-98-9

分子量（Molecular Weight）

~31 kDa

孔尼茨单位（Kunitz   Units）

≥2000Kunitz Units/mg protein

类型（Type）

Type IV

最佳PH（Optimal pH）

7～8

外观（Appearance）

白色至浅黄色粉末

纯度（Purity）

Protein: ≥80% by Biuret

激活剂（Activators）

多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+,   Ca2+, Co2+, and Zn2+

抑制剂（Inhibitors）

β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白

活力单位定义（Unit Definition）

25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

 

运输和保存方法

冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

 

DNase Ⅰ储存溶液

20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2，0.1 mM PMSF，50%甘油。

 

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

 

使用方法（应用于蛋白提取实验，仅供参考）

1）反应体系：蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液（使其终浓度为20 U/mL），1/100体积加入1 M MgCl2。

2）反应条件：37℃，30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。

【注】：由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase I的消化能力。

HB210721

 

Q：10607ES 和 10608ES 的区别？

A：10607 以含氯化钙的冻干粉形式供应；10608 以粉末形式供应。两者用途一样，用于清除蛋白中的 DNA。

Q: 我想问一下这个Kunitz跟u如何换算呢？那如果说反应体系中需要加入150U，那我该怎么换算呀?

A: Kunitz Units和U是不同的单位，不能直接换算，它的酶活就是Kunitz Units不是U，是孔尼茨单位，不能换算的。

如果是要要加入150U是没法计算的，但如果是要150 Kunitz Units，可以根据每个批次的COA上的测试的酶活情况计算。比如，某批次酶活是2500Kunitz Units/mg，那就是加入150/2500=0.06mg。

[1] Wang Z, Gong X, Li J, et al. Oxygen-Delivering Polyfluorocarbon Nanovehicles Improve Tumor Oxygenation and Potentiate Photodynamic-Mediated Antitumor Immunity. ACS Nano. 2021;15(3):5405-5419. doi:10.1021/acsnano.1c00033(IF:15.881)
[2] Huang Y, Chen Y, Zhou S, et al. Dual-mechanism based CTLs infiltration enhancement initiated by Nano-sapper potentiates immunotherapy against immune-excluded tumors. Nat Commun. 2020;11(1):622. Published 2020 Jan 30. doi:10.1038/s41467-020-14425-7(IF:12.121)
[3] Wang Y, Gong X, Li J, et al. M2 macrophage microvesicle-inspired nanovehicles improve accessibility to cancer cells and cancer stem cells in tumors. J Nanobiotechnology. 2021;19(1):397. Published 2021 Nov 27. doi:10.1186/s12951-021-01143-5(IF:10.435)
[4] Liu J, Shen Z, Tang J, et al. Extracellular DNA released by glycine-auxotrophic Staphylococcus epidermidis small colony variant facilitates catheter-related infections. Commun Biol. 2021;4(1):904. Published 2021 Jul 22. doi:10.1038/s42003-021-02423-4(IF:6.268)

产品描述

脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸酶，属核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺，分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以粉末形式供应，酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。

 

产品性质

CAS号（CAS NO.）

9003-98-9

分子量（Molecular Weight）

~31 kDa

孔尼茨单位（Kunitz   Units）

≥2000Kunitz Units/mg protein

类型（Type）

Type IV

最佳PH（Optimal pH）

7～8

外观（Appearance）

白色至浅黄色粉末

纯度（Purity）

Protein: ≥80% by Biuret

激活剂（Activators）

多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+,   Ca2+, Co2+, and Zn2+

抑制剂（Inhibitors）

β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白

活力单位定义（Unit Definition）

25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

 

运输和保存方法

冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

 

DNase Ⅰ储存溶液

20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2，0.1 mM PMSF，50%甘油。

 

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

 

使用方法（应用于蛋白提取实验，仅供参考）

1）反应体系：蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液（使其终浓度为20 U/mL），1/100体积加入1 M MgCl2。

2）反应条件：37℃，30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。

【注】：由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase I的消化能力。

HB210721

 

Q：10607ES 和 10608ES 的区别？

A：10607 以含氯化钙的冻干粉形式供应；10608 以粉末形式供应。两者用途一样，用于清除蛋白中的 DNA。

Q: 我想问一下这个Kunitz跟u如何换算呢？那如果说反应体系中需要加入150U，那我该怎么换算呀?

A: Kunitz Units和U是不同的单位，不能直接换算，它的酶活就是Kunitz Units不是U，是孔尼茨单位，不能换算的。

如果是要要加入150U是没法计算的，但如果是要150 Kunitz Units，可以根据每个批次的COA上的测试的酶活情况计算。比如，某批次酶活是2500Kunitz Units/mg，那就是加入150/2500=0.06mg。

[1] Wang Z, Gong X, Li J, et al. Oxygen-Delivering Polyfluorocarbon Nanovehicles Improve Tumor Oxygenation and Potentiate Photodynamic-Mediated Antitumor Immunity. ACS Nano. 2021;15(3):5405-5419. doi:10.1021/acsnano.1c00033(IF:15.881)
[2] Huang Y, Chen Y, Zhou S, et al. Dual-mechanism based CTLs infiltration enhancement initiated by Nano-sapper potentiates immunotherapy against immune-excluded tumors. Nat Commun. 2020;11(1):622. Published 2020 Jan 30. doi:10.1038/s41467-020-14425-7(IF:12.121)
[3] Wang Y, Gong X, Li J, et al. M2 macrophage microvesicle-inspired nanovehicles improve accessibility to cancer cells and cancer stem cells in tumors. J Nanobiotechnology. 2021;19(1):397. Published 2021 Nov 27. doi:10.1186/s12951-021-01143-5(IF:10.435)
[4] Liu J, Shen Z, Tang J, et al. Extracellular DNA released by glycine-auxotrophic Staphylococcus epidermidis small colony variant facilitates catheter-related infections. Commun Biol. 2021;4(1):904. Published 2021 Jul 22. doi:10.1038/s42003-021-02423-4(IF:6.268)

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

发表于由

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

酶切位点

5'-GGTAC↓C-3'

3'-C↑CATGG-5'

 

产品简介

FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

货号

15015ES70

规格

200 T

识别位置

5'-GGTAC↓C-3'

3'-C↑CATGG-5'

推荐反应条件

1×FuniCut® 缓冲液；最适37℃孵育

酶活

100 U/μL

失活条件

80℃孵育20 min
常用搜索字词 KpnI、Kpn I、Kpn i、Kpn1、Kpn 1、KpnⅠ、Kpn Ⅰ、Kpn

 

组分信息

组分编号

组分名称

15015ES70

15015-A

FuniCut® KpnI

200 μL

15015-B

10×FuniCut® Buffer

2×1 mL

15015-C

10×FuniCut® Color Buffer*

2×1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3.本产品仅作科研用途。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® KpnI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min（质粒），或15~30 min（PCR产物），或30~60 min（基因组DNA）。

4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积（20 μL）

体积（20 μL）

体积（50 μL）*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut® KpnI

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL，可使用水浴、金属浴或沙浴，并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

2

0

0

1

1

1

1

8

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

无影响

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

Ver.CN20230828

 

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

暂无内容

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

暂无内容

酶切位点

5'-GGTAC↓C-3'

3'-C↑CATGG-5'

 

产品简介

FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

货号

15015ES70

规格

200 T

识别位置

5'-GGTAC↓C-3'

3'-C↑CATGG-5'

推荐反应条件

1×FuniCut® 缓冲液；最适37℃孵育

酶活

100 U/μL

失活条件

80℃孵育20 min
常用搜索字词 KpnI、Kpn I、Kpn i、Kpn1、Kpn 1、KpnⅠ、Kpn Ⅰ、Kpn

 

组分信息

组分编号

组分名称

15015ES70

15015-A

FuniCut® KpnI

200 μL

15015-B

10×FuniCut® Buffer

2×1 mL

15015-C

10×FuniCut® Color Buffer*

2×1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3.本产品仅作科研用途。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® KpnI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min（质粒），或15~30 min（PCR产物），或30~60 min（基因组DNA）。

4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积（20 μL）

体积（20 μL）

体积（50 μL）*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

FuniCut® KpnI

1 μL

2 μL

5 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL，可使用水浴、金属浴或沙浴，并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

2

0

0

1

1

1

1

8

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

无影响

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

Ver.CN20230828

 

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

暂无内容

FuniCut™ KpnI限制性内切酶,KpnI内切酶,快速内切酶KpnI

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RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

发表于由

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

RNase H（核糖核酸酶 H）是一种内切核糖核酸酶，特异性地水解 DNA/RNA 杂交链上的RNA的磷酸二酯键，但不会水解单链和双链 DNA 或RNA 中的磷酸二酯键。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

  

12906ES60

(100 U)

12906ES76

(500 U)

12906ES90

(5,000 U)

12906ES20

(20 mL)

12906-A

RNase   H

20   μL

100   μL

1 mL

20   mL

12906-B

10×RNase   H Reaction Buffer*

200   μL

1 mL

10×1   mL

4×50   mL

【注】：*10×RNase H Reaction Buffer：750 mM KCl，500 mM Tris-HCl，30 mM MgCl2，100 mM Dithiothreitol，pH 8.3 @ 25℃。

 

产品应用

1. cDNA二链合成前去除mRNA；

2. RT-PCR/RT-qPCR实验中，cDNA一链合成后去除RNA；

3. Oligo(dT)与mRNA杂交之后去除poly(A)；

4. RNA特异位点的剪切。

 

单位定义

在50 μL的应体系中，37℃下反应20 min时，水解RNA-DNA杂交链生成1 nmol核糖核苷酸所需要的酶量定义为1 U。

 

质量控制

1. 脱氧核糖核酸内切酶检测：RNase H孵育超螺旋质粒DNA，未见明显降解；

2. 核糖核酸酶测定：RNase H孵育[3H]-RNA后未见明显降解；

3. 寡核苷酸标记实验：RNase H孵育放射性标记的单链或者双链DNA，未见明显降解。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期两年。

 

注意事项

1. RNase H对物理变性敏感，混合时轻轻颠倒试管摇匀，请勿剧烈振荡；

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；

3. 本产品仅做科研用途；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220707

 

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H（核糖核酸酶 H）是一种内切核糖核酸酶，特异性地水解 DNA/RNA 杂交链上的RNA的磷酸二酯键，但不会水解单链和双链 DNA 或RNA 中的磷酸二酯键。

 

产品组分

组分编号

组分名称

产品编号/规格

  

12906ES60

(100 U)

12906ES76

(500 U)

12906ES90

(5,000 U)

12906ES20

(20 mL)

12906-A

RNase   H

20   μL

100   μL

1 mL

20   mL

12906-B

10×RNase   H Reaction Buffer*

200   μL

1 mL

10×1   mL

4×50   mL

【注】：*10×RNase H Reaction Buffer：750 mM KCl，500 mM Tris-HCl，30 mM MgCl2，100 mM Dithiothreitol，pH 8.3 @ 25℃。

 

产品应用

1. cDNA二链合成前去除mRNA；

2. RT-PCR/RT-qPCR实验中，cDNA一链合成后去除RNA；

3. Oligo(dT)与mRNA杂交之后去除poly(A)；

4. RNA特异位点的剪切。

 

单位定义

在50 μL的应体系中，37℃下反应20 min时，水解RNA-DNA杂交链生成1 nmol核糖核苷酸所需要的酶量定义为1 U。

 

质量控制

1. 脱氧核糖核酸内切酶检测：RNase H孵育超螺旋质粒DNA，未见明显降解；

2. 核糖核酸酶测定：RNase H孵育[3H]-RNA后未见明显降解；

3. 寡核苷酸标记实验：RNase H孵育放射性标记的单链或者双链DNA，未见明显降解。

 

运输与保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期两年。

 

注意事项

1. RNase H对物理变性敏感，混合时轻轻颠倒试管摇匀，请勿剧烈振荡；

2. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；

3. 本产品仅做科研用途；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220707

 

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

RNase H 核糖核酸酶H 内切核糖核酸酶

暂无内容

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

发表于由

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

酶切点位

5'-GG↓CGCGCC-3'

3'-CCGCGC↑GG-5'

 

产品简介

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5～15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

货号

15001ES50

规格

50 T

识别位置

5'-GG↓CGCGCC-3'

3'-CCGCGC↑GG-5'

推荐反应条件

1×FuniCut™ 缓冲液；最适37℃孵育

酶活

10 U/μL

失活条件

80℃孵育20 min

同裂酶

PalAI, SgsI

 

组分信息

组分编号

组分名称

15001ES50

15001-A

FuniCut™ AscI

50 μL

15001-B

10×FuniCut™ Buffer

1 mL

15001-C

10×FuniCut™ Color Buffer*

1 mL

*10×FuniCut™ Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut™ Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

-25～-15℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。

2.受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4.本产品仅作科研用途。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (～1 μg)

10 μL (～0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut™ AscI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCutTM Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min（质粒），或15～30 min（PCR产物），或30～60 min（基因组DNA）。

4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。

5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积（20 μL）

体积（20 μL）

体积（50 μL）*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

FuniCut™ AscI

1 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL，可使用水浴、金属浴或沙浴，并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

2

0

0

0

0

0

0

2

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠，剪切阻断

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut™ Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

keywords: AscI、Asc I、Asc i、Asc1、Asc 1、AscⅠ、Asc Ⅰ、Asc

Ver.CN20230704

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

暂无内容

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

暂无内容

酶切点位

5'-GG↓CGCGCC-3'

3'-CCGCGC↑GG-5'

 

产品简介

FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5～15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

货号

15001ES50

规格

50 T

识别位置

5'-GG↓CGCGCC-3'

3'-CCGCGC↑GG-5'

推荐反应条件

1×FuniCut™ 缓冲液；最适37℃孵育

酶活

10 U/μL

失活条件

80℃孵育20 min

同裂酶

PalAI, SgsI

 

组分信息

组分编号

组分名称

15001ES50

15001-A

FuniCut™ AscI

50 μL

15001-B

10×FuniCut™ Buffer

1 mL

15001-C

10×FuniCut™ Color Buffer*

1 mL

*10×FuniCut™ Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut™ Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

-25～-15℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。

2.受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断。

3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4.本产品仅作科研用途。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (～1 μg)

10 μL (～0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut™ AscI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCutTM Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37℃孵育15 min（质粒），或15～30 min（PCR产物），或30～60 min（基因组DNA）。

4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。

5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积（20 μL）

体积（20 μL）

体积（50 μL）*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

FuniCut™ AscI

1 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL，可使用水浴、金属浴或沙浴，并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

2

0

0

0

0

0

0

2

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

序列完全重叠，剪切阻断

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut™ Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性数据来自金畔生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

keywords: AscI、Asc I、Asc i、Asc1、Asc 1、AscⅠ、Asc Ⅰ、Asc

Ver.CN20230704

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

暂无内容

FuniCut™ AscI限制性内切酶 AscI内切酶 快速内切酶AscI

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牛胰腺脱氧核糖核酸酶I Dnase I核酸内切酶|Deoxyribonuclease I from bovine pancreas

发表于由

牛胰腺脱氧核糖核酸酶I Dnase I核酸内切酶|Deoxyribonuclease I from bovine pancreas

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺，由四种色谱区分的组分A，B，C，D构成，摩尔比为4:1:1，而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应，酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。

 

产品性质

CAS号（CAS NO.）

9003-98-9

分子量（Molecular Weight）

~31 kDa

孔尼茨单位（Kunitz Units）

≥2000 Kunitz Units/mg protein

类型（Type）

Type IV

最佳PH（Optimal pH）

7～8

外观（Appearance）

白色至浅褐色冻干粉

纯度（Purity）

Protein:≥80% by Biuret

溶解性（Solubility）

0.15 M NaCl：5 mg/mL，无色透明溶液

激活剂（Activators）

多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+

抑制剂（Inhibitors）

β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白

活力单位定义（Unit   Definition）

25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

 

运输和保存方法 

冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

 

DNase Ⅰ储存溶液

20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2，0.1 mM PMSF，50%甘油。

 

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

 

使用方法（应用于蛋白提取实验，仅供参考）

1）反应体系：蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液（使其终浓度为20 U/mL），1/100体积加入1 M MgCl2。

2）反应条件：37℃，30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。

【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase I的消化能力。

HB210811

 Q：DNase Ⅰ储存溶液配置后可保存多久？保存温度是多少？

A：最好快速用完，或者现配现用。-20℃保存。

Q：主要用途是什么？

A：常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA 中引入缺口使标记碱基插入DNA。

 

[1] Xu Y, Hu Y, Xu T, et al. RNF8-mediated regulation of Akt promotes lung cancer cell survival and resistance to DNA damage. Cell Rep. 2021;37(3):109854. doi:10.1016/j.celrep.2021.109854(IF:9.423)
[2] Jain S, Hu C, Kluza J, et al. Metabolic targeting of cancer by a ubiquinone uncompetitive inhibitor of mitochondrial complex I. Cell Chem Biol. 2022;29(3):436-450.e15. doi:10.1016/j.chembiol.2021.11.002(IF:8.116)
[3] Sun H, Chen D, Zhan S, et al. Design and Discovery of Natural Cyclopeptide Skeleton Based Programmed Death Ligand 1 Inhibitor as Immune Modulator for Cancer Therapy. J Med Chem. 2020;63(19):11286-11301. doi:10.1021/acs.jmedchem.0c01262(IF:6.205)
[4] Zhao X, Hu S, Zeng L, et al. Irradiation combined with PD-L1-/- and autophagy inhibition enhances the antitumor effect of lung cancer via cGAS-STING-mediated T cell activation. iScience. 2022;25(8):104690. Published 2022 Jun 30. doi:10.1016/j.isci.2022.104690(IF:6.107)

产品描述

脱氧核糖核酸酶I（DNase I），即Deoxyribonuclease I，一种发现于多种细胞和组织的核酸内切酶，靶向切割邻近嘧啶的磷酸二酯键，产生5’端为磷酸基团、3’端为羟基的多聚核苷酸，平均消化产物最小为多聚四核苷酸。DNase可催化多种形式DNA，如单链DNA、双链DNA，甚至染色质（其切割速率受组蛋白影响）。最佳的工作范围是pH7-8，DNase的活性依赖于Ca2+，并可被二价金属离子如Co 2+，Mn2+，Zn2+等激活。5 mM Ca2+可保护酶使其不被水解。在Mg2+存在下，该酶可随机识别和切断DNA任一条链上的任意位点；而在Mn2+存在的条件下，可同时识别DNA的两条链并在几乎相同的位点进行切割。DNase I最早从胰腺中分离而来，至今哺乳动物胰腺也是该酶的最主要的来源之一。
本品来自牛胰腺，由四种色谱区分的组分A，B，C，D构成，摩尔比为4:1:1，而D组分非常少。分子生物学实验中常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA中引入缺口使标记碱基插入DNA。本品以含氯化钙的冻干粉形式供应，酶活力≥2000 Kunitz Units/mg蛋白。

 

产品性质

CAS号（CAS NO.）

9003-98-9

分子量（Molecular Weight）

~31 kDa

孔尼茨单位（Kunitz Units）

≥2000 Kunitz Units/mg protein

类型（Type）

Type IV

最佳PH（Optimal pH）

7～8

外观（Appearance）

白色至浅褐色冻干粉

纯度（Purity）

Protein:≥80% by Biuret

溶解性（Solubility）

0.15 M NaCl：5 mg/mL，无色透明溶液

激活剂（Activators）

多种二价金属离子如Mg2+、Mn2+, Ca2+, Co2+, and Zn2+

抑制剂（Inhibitors）

β-巯基乙醇；螯合剂；SDS；肌动蛋白

活力单位定义（Unit   Definition）

25℃，pH5.0条件下DNase催化底物DNA，使每毫升每分钟ΔA260增加0.001的变化定义为一个酶活力单位（Kunitz unit）。

 

运输和保存方法 

冰袋运输。冻干粉末于-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

 

DNase Ⅰ储存溶液

20 mM sodium acetate（pH 6.5），5 mM CaCl2，0.1 mM PMSF，50%甘油。

 

DNase Ⅰ失活或抑制

加入EDTA至终浓度为2.5 mM后，65℃加热10 min可使DNase Ⅰ失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂，达到毫摩尔/升浓度的锌离子，0.1%的SDS，DTT、巯基乙醇等还原剂，50-100 mM以上盐浓度均对DNase Ⅰ有显著抑制作用。

 

使用方法（应用于蛋白提取实验，仅供参考）

1）反应体系：蛋白提取液中按照1/100体积加入DNase I储存液（使其终浓度为20 U/mL），1/100体积加入1 M MgCl2。

2）反应条件：37℃，30-60 min。继续后续蛋白提取实验即可。

【注】由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否则会降低DNase I的消化能力。

HB210811

 Q：DNase Ⅰ储存溶液配置后可保存多久？保存温度是多少？

A：最好快速用完，或者现配现用。-20℃保存。

Q：主要用途是什么？

A：常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA 中引入缺口使标记碱基插入DNA。

 

[1] Xu Y, Hu Y, Xu T, et al. RNF8-mediated regulation of Akt promotes lung cancer cell survival and resistance to DNA damage. Cell Rep. 2021;37(3):109854. doi:10.1016/j.celrep.2021.109854(IF:9.423)
[2] Jain S, Hu C, Kluza J, et al. Metabolic targeting of cancer by a ubiquinone uncompetitive inhibitor of mitochondrial complex I. Cell Chem Biol. 2022;29(3):436-450.e15. doi:10.1016/j.chembiol.2021.11.002(IF:8.116)
[3] Sun H, Chen D, Zhan S, et al. Design and Discovery of Natural Cyclopeptide Skeleton Based Programmed Death Ligand 1 Inhibitor as Immune Modulator for Cancer Therapy. J Med Chem. 2020;63(19):11286-11301. doi:10.1021/acs.jmedchem.0c01262(IF:6.205)
[4] Zhao X, Hu S, Zeng L, et al. Irradiation combined with PD-L1-/- and autophagy inhibition enhances the antitumor effect of lung cancer via cGAS-STING-mediated T cell activation. iScience. 2022;25(8):104690. Published 2022 Jun 30. doi:10.1016/j.isci.2022.104690(IF:6.107)