Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES) 位于加拿大安大略省的生命科学和蛋白质化学领域高科技公司,推出新一代毛细管电泳仪系统-毛细管电泳等电聚集-全柱成像检测技术(cIEF-WCID),*颠覆了传统电泳技术在蛋白质分析中的定义,通过cIEF-WCID技术,复杂蛋白质的分离和 pI点的测定变的异常轻松。成为蛋白质药物和抗体药物研发和质量控制、蛋白质组学基础研究和生物相互作用机制探索的强有力工具,同时也是食品安全中功能蛋白检测、育种、奶制品、肉类等新的技术手段。
CEInfinite全柱成像等电聚焦毛细管电泳系统
CEInfinite毛细管电泳仪
信息量大,样品在整个微分离通道中的分离得到全程检测
CMOS照相机动态检测整个分离通道内的各组分的动态变化
分析时间缩短(10分钟分析一个样品),分析条件优化变得简单,分析方法的开发更快捷
CEInfinite毛细管电泳仪不需要样品流动化步骤,充分保持毛细管等电聚焦的高分离柱效和高分辨率
cEIF-WCID技术是蛋白质基础研究&生物医药研究的强有力工具
CEInfinite毛细管电泳仪是食品安全中功能蛋白检测、奶制品、肉类等新的仪器
毛细管电泳仪给技术特点
1) 可以得到超高蛋白质pI点的分辨率(△pI<0.01)
2) 超高通量的蛋白质和抗体药物分析(分析时间<10 min)
3) CEInfinite采用CMOS(Complementary Metal-Oxide-SemicondutorTranslator,互补性金属氧化物半导体)作为成像检测技术,代替了传统的CCD成像技术,具有高速数据采集、宽线性范围、绿色节能、超高检测灵敏度和和仪器稳定性等优势,这是工业标准的重要基础
4) CEInfinite拥有超高稳定性的自动进样系统(Alcotte719)和功能强大的操作和数据处理软件,具有自动数据匹配、pI值自动软件计算等功能
5) 目前世界上全的pI标记物 (pI Marker): 30种pI Marker(pI point from 2.8 to11);完善的pH载体(carrier ampholytes):四种专有技术*的Aeslytes pH 3-10、 Aeslytes pH 2.5-5、 Aeslytes pH 5-8 和 Aeslytes pH 8-10.5,并可以根据客户需要定制高分辨的pH范围
6) 完善和多样化的涂层毛细管Cartridge,极大提高了蛋白质分离的灵敏度和分辨率
7) 仪器的安装维护简单、快捷
8) 完备的蛋白质和抗体分析的解决方案和售前和售后团队
9) 体积小、重量轻(14公斤),适于现场便携式分析;绿色低耗能(仅1瓦电耗)
仪器系统
作为世界上个也是仅有的制备型iCIEF解决方案,CEInfinite仪器系统是传统成像毛细管等电聚焦(iCIEF)的创新。通过使用辅助设备和获得专有技术的分离和分离滤芯,该系统能够将分离的蛋白质转移到馏分收集器中,以进行进一步的质谱分析(MS)或其他分析。在转移过程中,分辨率不会改变。该实施方案是解决生物制药应用中用于微量制备,纯化蛋白质以及表征蛋白质的挑战的解决方案。
图1. CEInfinite制备型iCIEF系统
使用生命系统制造蛋白质生物制剂使它们容易受到翻译后修饰的影响。这些改变产生的蛋白质分子量几乎可以忽略不计,但明显改变了蛋白质的等电荷。
iCIEF产生通过电荷分离的蛋白质谱,从而可视化这些电荷变体相对于主要“靶”蛋白的存在。
隔离这些峰以进行鉴定将为稳定性研究以及配方和加工控制提供宝贵的信息。
CEInfinite制备型iCIEF仪器能够在聚焦后逐个推出分离的蛋白质峰。这是通过CEInfinite专有滤芯的创新设计实现的:大内径(ID)分离毛细管连接到较小的ID传输毛细管,具有接口,以大限度地减少分离后峰的重新混合。
下面在图2中使用NISTmAb RM 8671演示了这种分离。
图2.整个NISTmAb(黑色)的iCIEF和分离的电荷变体部分(颜色)
使用CEInsight CFR软件,只需标记每个感兴趣峰的开始和结束,程序将告诉您何时准备好收集峰。
该技术还可以应用于其他生物制剂,如酶,融合蛋白,抗体 – 药物偶联物(ADC)等。
使用mAb作为示例的这种分馏的潜在限制是,由于峰值动员和收集的方向,更容易获得比酸性峰更纯的碱性峰的部分。为了解决这个问题,CEInfinite制备仪器提供了反转聚焦极性的能力,允许更多的酸性峰位于仪器的收集馏分的一侧。
MS偶联是用于蛋白质鉴定的强大的高通量表征解决方案。CEInfinite制备型iCIEF仪器的出口可以直接连接到质谱仪,以提供用于表征的分级蛋白质样品(iCIEF-MS)。