线性聚乙烯亚胺PEI的物理性质及应用特性

  线性聚乙烯亚胺PEI是一种高性能的工程塑料,具有优异的机械、热学、电学和化学性质。它由聚合物化学方法制得,是一种聚醚酰亚胺类高分子材料。PEI广泛应用于航天航空、电气电器、汽车工业、医疗器械、能源环保等领域。
  

 

  PEI是聚醚酰亚胺类高分子,主要结构单元为苯醚和苯并咪唑,其中苯醚是构成链段的部分,苯并咪唑则是链间键合的部分。PEI的链结构比较有序,链节之间存在相互作用,因此PEI的分子量很高,分子量通常在10万以上。
  
  线性聚乙烯亚胺PEI的物理性质:
  
  1.机械性能:PEI具有优异的耐冲击性、耐热性和耐腐蚀性,同时也具有较好的硬度和刚性。
  
  2.热学性能:PEI的热稳定性很高,在400℃以下能够长期使用而不发生分解,还具有较好的耐热老化性能。
  
  3.电学性能:PEI具有较好的介电性能和绝缘性能,还具有较低的介电常数和介质损耗角正切。
  
  4.化学稳定性:PEI具有优异的耐腐蚀性,能够抵抗多种化学试剂的侵蚀,包括酸、碱、溶剂和有机物等。
  
  线性聚乙烯亚胺PEI的应用:
  
  1.航天航空领域:PEI具有优异的高温性能和耐热老化性能,能够用于制造发动机、隔热材料、燃气轮机叶片等高温部件。
  
  2.电气电器领域:PEI具有优异的绝缘性能和介电性能,能够用于制造电子器件、高压电缆、电机线圈等。
  
  3.汽车工业领域:PEI的高温耐性和耐冲击性能使其成为汽车零部件的理想选择,如引擎罩、前保险杠、仪表板等。
  
  4.医疗器械领域:PEI具有较低的毒性和优异的生物相容性,还能够承受高温灭菌,因此在制备医疗器械方面得到了广泛应用。
  
  5.能源环保领域:PEI也被广泛用于油田采油技术、核废料处理、膜分离等领域,因为它具有优异的耐腐蚀性和化学稳定性。

线性聚乙烯亚胺PEI MW25000说明书

线性聚乙烯亚胺PEI MW25000说明书

产品详情

货号

规格

价格

78PEI25000-100mg

100mL

88.00

100mg

1g

3,500.00

700.00

5g

14,900.00

产品描述

Jinpan 线性聚乙烯亚胺PEI MW25000 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于AAV,LV和重组蛋白等工业化生产。

聚乙烯亚胺是一种具有较高阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(proton sponge),因此,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成带正电荷的复合物颗粒,该颗粒与细胞表面阴离子结合,很容易通过内吞作用进入细胞;并且可抵御溶酶体的降解作用,从而提高核酸分子的表达水平。

基本信息

CAS:9002-98-6

分子式:(CH2CH2NH)n

分子量:25000

熔点:73-75℃

溶解性:溶于热水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;

不溶于:苯、C2H5OC2H5、丙酮

形式白色固体

生物毒性 未知

安全防护 手套及口罩

存储 PEI 内含自由氨基,建议开封后 4℃干燥保存,减缓氧化过程。

效期:3年

运输常温

特点大量实验数据反馈,细胞通用性好,有非常好的转染效果,尤其对293,CHO细胞系有特别显著的转染效果。

配置方法

转染操作流程:(贴壁细胞转染方法)

  1. 接种细胞: 转染前一天,用胶原酶(Jinpan Cat#78CL10002)消化细 胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置 入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。

  2. 准备 DNA-PEI 复合物: DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升 至室温。依据表 1 所示,用 Opti-MEM ITM或其他适合的无蛋白培 养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线 性 PEI 转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批 DNA 比例可 能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性 PEI 转染 试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI 复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

  3. 转染细胞: 直接向每个孔中加入 DNA-PEI 复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在 无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴 DNA-PEI 复合 物。转染 3 h 后,添加½体积的包含 30%血清的生长培养基。

  4. 孵育细胞和分析结果: 在 CO2 培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染 后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。

  5. 转染 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍 以上),在 CO2 培养箱中 37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可 筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

转染操作流程:(悬浮细胞转染方法)

  1. 转染前准备:悬浮细胞传代接种于适量含悬浮细胞生长培养基中,合适条件下培养。根据培养瓶大小调整细胞密度(例100mL培养瓶,1X10 6 cells/mL),然后旋紧瓶口放入摇床继续培养,2~4小时后可以进行转染。

  2. 准备 DNA-PEI 复合物:DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

  3. 转染细胞:将PEI-DNA转染复合物逐滴加入到细胞培养液中,摇匀后旋紧瓶口放回摇床合适培养条件下培养至可以分析检测。

  4. 孵育细胞和分析结果:转染后一般24-72h即可检测到转入基因的表达。 请自行确定适合检测时间。

  5. 如果要获得更多的蛋白产量,有文献表明转染后24小时,可以适当稀释细胞,稀释比例参考范围(1:1—1:5)之间,可以增加蛋白产量,稀释效应与最佳稀释比率应根据经验确定。

产品背景

   Jinpan 生产的78Bio PEI是一种优化的线性阳离子聚合物转染试剂,分子量分别为 25000 和 40000,78BioPEI40000 相比 25000 转染效率高,但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表达系统中,相比于市面上的脂质体 78BioPEI 都表现出高的蛋白表达量(无 论是 96 孔板还是 100L 的细胞反应器),以及更小的细胞毒性、更高的转染效和更高的可 重复性,并且十分经济的高性价比转染试剂。产品具有以下特点:

1.转染效率高,细胞毒性低;  蛋白表达量高;

2.节约成本:Jinpan 78 PEI转染试剂 ,进口品质,亲民价格,至少能够降 40% 的转染试剂总成本;

3.适用于 HEK293 等真核细胞的转染;

4.适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;

5.适用于有血清和无血清的转染条件;

6. 无机试剂,无动物源成分;

7. 产品稳定,质控严格;

8. 工艺流程适用范围广,容易优化 适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。

产品反馈

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

3.加热或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点 ,搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到 pH 那么低。

4.一定要溶解充分,溶解不充分会影响后续的转染效率.

5.冷冻后可能会影响其后续转染效果。

特别提醒:初次使用 78PEI 进行不同基因转染时应先做预试,优化出适合自己实验的, 最佳 PEI 和 DNA 的比例,通常筛选范围在 1:1 到 5:1 之间,如果之前用过Polysciences品牌的 PEI,我们的活性是其1.5倍左右,用 78BioPEI 时应适当降低使用浓度。

线性聚乙烯亚胺PEI主要应用于哪些领域?

  线性聚乙烯亚胺PEI是一种具有广泛应用前景的高分子材料,由于其物理和化学性质,使其在许多领域都有着重要的应用。
  

 

  线性聚乙烯亚胺PEI的性质主要体现在以下几个方面:
  
  1.高电荷密度:由于线性聚乙烯亚胺分子中的亚胺基团含有大量的氮原子,这些氮原子带有正电荷,因此线性聚乙烯亚胺具有较高的电荷密度。这使得它在水溶液中能够有效地吸附带负电荷的离子,如磷酸根、硫酸根等。
  
  2.良好的溶解性:线性聚乙烯亚胺具有良好的水溶性和有机溶剂溶性,可以在各种极性的溶剂中形成均匀的溶液。这使得它在制备各种高分子材料时具有很大的灵活性。
  
  3.良好的生物相容性:线性聚乙烯亚胺具有良好的生物相容性,可以与生物体组织和细胞良好地相容。这使得它在生物医学领域中有着广泛的应用,如药物载体、基因传递等。
  
  4.高反应活性:线性聚乙烯亚胺分子中的亚胺基团具有较高的反应活性,可以与许多有机和无机物质发生化学反应,生成各种功能化的线性聚乙烯亚胺衍生物。这使得它在材料科学和化学领域中有着广泛的应用。
  
  线性聚乙烯亚胺PEI的应用主要集中在以下几个领域:
  
  1.药物载体:由于线性聚乙烯亚胺具有良好的生物相容性和高电荷密度,可以有效地吸附带负电荷的药物分子,因此被广泛应用于药物载体的研究和开发。
  
  2.基因传递:线性聚乙烯亚胺可以与DNA、RNA等核酸分子形成稳定的复合物,从而有效地将基因传递到细胞内,因此在基因治疗等领域有着广泛的应用。
  
  3.催化剂:线性聚乙烯亚胺分子中的亚胺基团具有较高的反应活性,可以作为催化剂参与各种化学反应,因此在催化领域有着广泛的应用。
  
  4.水处理:由于线性聚乙烯亚胺可以有效地吸附水中的有害物质,因此被广泛应用于水处理领域。

线性聚乙烯亚胺PEI MW40000说明书

线性聚乙烯亚胺PEI MW40000说明书


产品描述:

Jinpan 线性聚乙烯亚胺PEI MW25000 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于AAV,LV和重组蛋白等工业化生产。

聚乙烯亚胺是一种具有较高阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(proton sponge),因此,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成带正电荷的复合物颗粒,该颗粒与细胞表面阴离子结合,很容易通过内吞作用进入细胞;并且可抵御溶酶体的降解作用,从而提高核酸分子的表达水平。


基本信息:

CAS 9002-98-6

分子式 (CH2CH2NH)n

分子量 25,000

熔点 73-75℃

溶解性 溶于热水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;

形式 白色固体

生物毒性 未知

安全防护 手套及口罩

存储 PEI 内含自由氨基,建议开封后 4℃干燥保存,减缓氧化过程。

效期3年 

运输 常温

特点大量实验数据反馈细胞通用性好,有非常好的转染效果,尤其对293,CHO细胞系有特别显著的转染效果。


配置方法:

转染操作流程:(贴壁细胞转染方法)

    1. 接种细胞: 转染前一天,用胶原酶(Jinpan Cat#78CL10002)消化细 胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置 入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。

    2. 准备 DNA-PEI 复合物: DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升 至室温。依据表 1 所示,用 Opti-MEM ITM或其他适合的无蛋白培 养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线 性 PEI 转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批 DNA 比例可 能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性 PEI 转染 试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI 复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

    3. 转染细胞: 直接向每个孔中加入 DNA-PEI 复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在 无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴 DNA-PEI 复合 物。转染 3 h 后,添加½体积的包含 30%血清的生长培养基。

    4. 孵育细胞和分析结果: 在 CO2 培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染 后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。

    5. 转染 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍 以上),在 CO2 培养箱中 37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可 筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

转染操作流程:(悬浮细胞转染方法)

    1. 转染前准备:悬浮细胞传代接种于适量含悬浮细胞生长培养基中,合适条件下培养。根据培养瓶大小调整细胞密度(例100mL培养瓶,1X10 6 cells/mL),然后旋紧瓶口放入摇床继续培养,2~4小时后可以进行转染。

    2. 准备 DNA-PEI 复合物:DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

    3. 转染细胞:将PEI-DNA转染复合物逐滴加入到细胞培养液中,摇匀后旋紧瓶口放回摇床合适培养条件下培养至可以分析检测。

    4. 孵育细胞和分析结果:转染后一般24-72h即可检测到转入基因的表达。 请自行确定适合检测时间。

    5. 如果要获得更多的蛋白产量,有文献表明转染后24小时,可以适当稀释细胞,稀释比例参考范围(1:1—1:5)之间,可以增加蛋白产量,稀释效应与最佳稀释比率应根据经验确定。

 


产品背景:

Jinpan 生产的78Bio PEI是一种优化的线性阳离子聚合物转染试剂,分子量分别为 25000 和 40000,78BioPEI40000 相比 25000 转染效率高,但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表达系统中,相比于市面上的脂质体 78BioPEI 都表现出高的蛋白表达量(无 论是 96 孔板还是 100L 的细胞反应器),以及更小的细胞毒性、更高的转染效和更高的可 重复性,并且十分经济的高性价比转染试剂。产品具有以下特点:

1.转染效率高,细胞毒性低;  蛋白表达量高;

2.节约成本:Jinpan 78 PEI转染试剂 ,进口品质,亲民价格,至少能够降 40% 的转染试剂总成本;

3.适用于 HEK293 等真核细胞的转染;

4.适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;

5.适用于有血清和无血清的转染条件;

6. 无机试剂,无动物源成分;

7. 产品稳定,质控严格;

8. 工艺流程适用范围广,容易优化 适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。

产品反馈:

注意事项:

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

3.加热或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点 ,搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到 pH 那么低。 

4.一定要溶解充分,溶解不充分会影响后续的转染效率.

5.冷冻后可能会影响其后续转染效果。


特别提醒:初次使用 78PEI 进行不同基因转染时应先做预试,优化出适合自己实验的, 最佳 PEI 和 DNA 的比例,通常筛选范围在 1:1 到 5:1 之间,如果之前用过Polysciences品牌的 PEI,我们的活性是其1.5倍左右,用 78BioPEI 时应适当降低使用浓度。

聚乙烯亚胺 Polyethyleneimine;PEI;Epomine


聚乙烯亚胺 Polyethyleneimine;PEI;Epomine

简要描述:将外源基因导入真核细胞是分子生物学研究中的一项重要技术。转基因载体主要分为病毒载体系统和非病毒载体系统。病毒载体系统转染效率高,是体内基因治疗的主要工具,但安全性存在隐患,且有免疫原性,体内不能反复应用,制备较复杂,而且所能装载的外源DNA大小有限,使其应用受到很大限制。

详细介绍

产品咨询

将外源基因导入真核细胞是分子生物学研究中的一项重要技术。转基因载体主要分为病毒载体系统和非病毒载体系统。病毒载体系统转染效率高,是体内基因治疗的主要工具,但安全性存在隐患,且有免疫原性,体内不能反复应用,制备较复杂,而且所能装载的外源DNA大小有限,使其应用受到很大限制。非病毒载体是病毒载体的重要补充途径,一般认为安全性高,载体一般无免疫原性,而且是基于质粒的转染,易于组装[1-2]。目前已有的非病毒型载体介导基因转染的方法有裸DNA注射、磷酸钙介导、电转移法、阳离子脂质体及阳离子聚合物介导等。1995年,Boussif*报道了聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)可作为非病毒载体,其后,聚乙烯亚胺成为阳离子多聚物研究zui快的领域。为了研究PEI基因转染试剂的转染效果,本文通过PEI转染表达绿色荧光蛋白的pEGFP质粒到293T细胞,以观察其效果,并测定了多种因素对转染效率的影响。

 

订货信息如下:

货号 品名 价格¥ 规格 品牌 备注
23966-2 POLYETHYLENIMINE LINEAR 2864 2 g polysciences 大量现货
24765-2 POLYETHYLENEIMINE 'MAX'(40 000M.W.* 3184 2 g polysciences 溶解性更好,毒性更小
78002qf01 线性PEI转染液 200 1ml jinpanbio 23966配制
78002qf02 线性PEI转染液 600 50ml jinpanbio 23966配制
78002qf03 线性PEI转染液 1800 500ml jinpanbio 23966配制
78003qf01 线性PEI转染液 200 1ml jinpanbio 24765配制
78003qf02 线性PEI转染液 700 50ml jinpanbio 24765配制
78003qf03 线性PEI转染液 2200 500ml jinpanbio 24765配制
78004qf01 POLYETHYLENIMINE LINEAR 1432 1g jinpanbio 23966分装
78005qf01 POLYETHYLENEIMINE 'MAX'(40 000M.W.* 1592 1g jinpanbio 24765分装

线性聚乙烯亚胺PEI的应用领域和使用注意事项

线性聚乙烯亚胺PEI的应用领域和使用注意事项

  线性聚乙烯亚胺PEI是一种水溶性高分子聚合物,由乙烯亚胺单元通过线性聚合形成。由于其分子结构中含有大量的胺基(-NH2),PEI具有强阳离子性和高反应活性,使其在多个领域有着广泛的应用。
 

 

  基本性质:
  1.分子结构:PEI可分为线性和分支两种结构,其中线性PEI具有规则的线性链结构。
  2.溶解性:线性PEI易溶于水,也溶于某些极性有机溶剂。
  3.电荷特性:由于胺基的存在,PEI在酸性或中性水溶液中被质子化,表现出正电荷。
  4.pH敏感性:PEI的溶解性和电荷特性随pH值变化而变化。
  线性聚乙烯亚胺PEI的应用领域:
  1.基因传递:PEI作为非病毒基因载体,能够与DNA或RNA通过静电作用形成复合物(polyplexes),用于细胞转染实验和基因治疗研究。
  2.纸张增强剂:在造纸工业中,PEI用作湿强度剂,通过与纤维素纤维形成离子键,提高纸张的湿强度。
  3.水处理化学品:PEI可用作絮凝剂,在废水处理中去除重金属离子和负电荷颗粒。
  4.表面改性:PEI能够与多种材料表面发生反应,用于表面修饰,改善材料的亲水性、粘附性或生物相容性。
  5.药物载体:PEI也被研究作为药物递送系统的一部分,尤其是用于靶向和控制释放药物。
  线性聚乙烯亚胺PEI的使用注意事项:
  1.操作安全:PEI具有一定的刺激性和腐蚀性,操作时应佩戴适当的个人防护装备,避免接触皮肤和眼睛。
  2.存储条件:应将PEI存放在干燥、阴凉的环境中,避免吸潮和高温。
  3.废弃物处理:PEI的废弃溶液应按照当地环保规定进行处理,避免对环境造成污染。

线性聚乙烯亚胺PEI MW25000


线性聚乙烯亚胺PEI MW25000

简要描述:Jinpan 线性聚乙烯亚胺PEI MW25000 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于AAV,LV和重组蛋白等工业化生产。

聚乙烯亚胺是一种具有较高阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(proton sponge),因

详细介绍

产品咨询

    Jinpan 生产的78Bio PEI是一种优化的线性阳离子聚合物转染试剂,分子量分别为 25000 和 40000,78BioPEI40000 相比 25000 转染效率高,但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表达系统中,相比于市面上的脂质体 78BioPEI 都表现出高的蛋白表达量(无 论是 96 孔板还是 100L 的细胞反应器),以及更小的细胞毒性、更高的转染效和更高的可 重复性,并且十分经济的高性价比转染试剂。产品具有以下特点:

1.转染效率高,细胞毒性低;  蛋白表达量高;

2.节约成本:Jinpan 78 PEI转染试剂 ,进口品质,亲民价格,至少能够降 40% 的转染试剂总成本;

3.适用于 HEK293 等真核细胞的转染;

4.适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;

5.适用于有血清和无血清的转染条件;

6. 无机试剂,无动物源成分;

7. 产品稳定,质控严格;

8. 工艺流程适用范围广,容易优化 适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。

表1 可借鉴的转染参数(96-孔- 5L 生物反应[4)

96-孔板6-孔板

6 孔深孔板

-ThinCertTM

细胞培养体系

接种细胞量(*106

cell/mL)

200u1

0.2

悬浮细胞初始量100 ul

DNA 量-DNA (W)

/培养总体积(V)

DNA:L78BioPEI

(w:w) 比例

DNA 溶解体积

lug/ml

1: 1-1:5

20 uL

78BioPEI 溶解体积80 uL

2 mL6 mL

1.5-2.01.5-2.0

1.8 mL5.0-5.4 mL

1 ug'mL1 ug/ml

1: 1-1:5 1: 1-1:5

100 uL500-300 uL

100uL500-300 uL

125 mL 培养瓶

25 mL

1.5-2.0

22.5 mL

1 ug/ml

1: 1-1:5

1.25 mL

1.25 mL

线性聚乙烯亚胺PEI MW40000 说明书

线性聚乙烯亚胺PEI MW40000说明书

 

 

产品描述

Jinpan 线性聚乙烯亚胺PEI MW40000 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于AAV,LV和重组蛋白等工业化生产。

聚乙烯亚胺是一种具有较高阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔两个碳原子,即每第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(proton sponge),因此,非常容易结合带负电荷的核酸分子,形成带正电荷的复合物颗粒,该颗粒与细胞表面阴离子结合,很容易通过内吞作用进入细胞;并且可抵御溶酶体的降解作用,从而提高核酸分子的表达水平。

相关货号:

货号 规格 价格
78PEI40000-100mg 100mg ¥700.00
78PEI40000-1g 1g ¥3,000.00
78PEI40000-5g 5g ¥11,000.00

 

基本信息

CAS 49553-93-7

分子式 (C2H5N)n . xHCl

分子量 40,000 (~22,000 free base)

熔点 73-75℃

溶解性 溶于冷水

不溶于 常用有机溶剂(乙醇、丙酮、四氢呋喃)

形式 白色固体粉末

生物毒性 未知

安全防护 手套,护目镜,口罩

存储 粉末至少可以保存一年, PEI内含自由氨基,建议开封后4℃干燥保存,减缓氧化过程。

运输 常温运输

特点 大量实验数据反馈细胞通用性好,有非常好的转染效果,尤其对293,CHO细胞系有特别显著的转染效果。

配置方法

转染操作流程:(贴壁细胞转染方法)

1. 接种细胞: 转染前一天,用胶原酶(Jinpan Cat#78CL10002)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔加入的细胞量参考下图表1,一般18-24小时(sf9细胞为3-4小时)后转染。转染时细胞汇合度应至少达到 70~80%以上。转染前更换为含5%血清的生长培养基。

2. 准备 DNA-PEI 复合物: DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。 (稀释PEI和DNA的体积为培养体积的1/10-1/20, DNA浓度为1ug/ml)

3. 转染细胞: 直接向每个孔中加入 DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。转染4-6小时(sf9细胞为2小时 )后,更换为生长培养基。

4. 孵育细胞和分析结果: 在 CO2培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后最快 7 h 即可检测到转入基因的表达。 请自行确定适合的检测时间。

5. 转染 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍 以上),在 CO2培养箱中 37℃孵育过夜。第二天加入与转染抗性基因相匹配的筛选药物。约 1~2 周可 筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。

转染操作流程:(悬浮细胞转染方法)

1. 转染前准备:悬浮细胞传代接种于适量含悬浮细胞生长培养基中,合适条件下培养。根据培养瓶大小调整细胞密度(例100mL培养瓶,1X10 6 cells/mL),然后旋紧瓶口放入摇床继续培养,2~4小时后可以进行转染。

2. 准备 DNA-PEI 复合物:DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室。用 Opti-MEM ITM或其他适合的无血清培养基稀释适量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置 10~25 min 以形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14 mL 离心管。

3. 转染细胞:将PEI-DNA转染复合物逐滴加入到细胞培养液中,摇匀后旋紧瓶口放回摇床合适培养条件下培养至可以分析检测。

4. 孵育细胞和分析结果:转染后一般24-72h即可检测到转入基因的表达。 请自行确定适合的检测时间。

5. 如果要获得更多的蛋白产量,有文献表明转染后24小时,可以适当稀释细胞,稀释比例参考范围(1:2—1:5)之间,可以增加蛋白产量,稀释效应与最佳稀释比率应根据经验确定。

 

 

产品背景

        Jinpan 生产的78Bio PEI是一种优化的线性阳离子聚合物转染试剂,分子量分别为 25000 和 40000,78BioPEI40000 相比 25000 转染效率高,但毒性也略大于 78PIE25000。在 HEK293 和 CHO 的蛋白表达系统中,相比于市面上的脂质体 78BioPEI 都表现出高的蛋白表达量(无 论是 96 孔板还是 100L 的细胞反应器),以及更小的细胞毒性、更高的转染效和更高的可 重复性,并且十分经济的高性价比转染试剂。产品具有以下特点:

1.转染效率高,细胞毒性低;  蛋白表达量高;

2.节约成本:Jinpan 78 PEI转染试剂 ,进口品质,亲民价格,至少能够降 40% 的转染试剂总成本;

3.适用于 HEK293 等真核细胞的转染;

4.适用于贴壁细胞和悬浮细胞的转染;

5.适用于有血清和无血清的转染条件;

6. 无机试剂,无动物源成分;

7. 产品稳定,质控严格;

8. 工艺流程适用范围广,容易优化 适合小规模培养板,培养瓶到大规模的生物反应器。

产品反馈

 

注意事项

  1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

  2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

  3.加热或加酸都有助于 78BioPEI 溶解。当然酸可能不用加那么多,详细用量可试加一点 ,搅拌看看,足够溶解就行,不一定需要加到 pH 那么低。 

  4.一定要溶解充分,溶解不充分会影响后续的转染效率.

  5.冷冻后可能会影响其后续转染效果。

 

  特别提醒:初次使用 78PEI 进行不同基因转染时应先做预试,优化出适合自己实验的, 最佳 PEI 和 DNA 的比例,通常筛选范围在 1:1 到 5:1 之间,如果之前用过Polysciences品牌的 PEI,用 78BioPEI 时应适当降低使用浓度。