DNA甲基化建库DNA二硫化物转化试剂盒 DNA Bisulfite Conversion Kit

DNA甲基化建库DNA二硫化物转化试剂盒 DNA Bisulfite Conversion Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Hieff® DNA Bisulfite Conversion Kit将DNA变性与亚硫酸氢盐转化融合为一步,3小时内即可完成转化;采用柱内脱硫技术,消除了繁琐的DNA沉淀步骤,使操作流程更为简单;可以满足500 pg-2 μg样品的转化;未甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶的转化率≥99.5%;同时,本试剂盒采用独特的DNA保护剂组分,使得转化后DNA的质量和回收率都有很大的保障。转化后的产物适用于PCR扩增和DNA测序等下游应用。

 

组分信息

组分编号

组分名称

12222ES10

12222ES50

12222ES70

12222-A

亚硫酸氢盐干粉Conversion Reagent

10 反应/管

10 反应/管(5管)

10 反应/管(20管)

12222-B

稀释缓冲液Dilution Buffer

400 μL /管

1.5 mL/管

7 mL/瓶

12222-C

溶解缓冲液Dissolving Buffer

60 μL /管

500 μL/管

1.2 mL/管

12222-D

结合液Binding Buffer

7 mL/瓶

30 mL/瓶

125 mL/瓶

12222-E

洗涤液Wash Buffer

2 mL/瓶

6 mL/瓶

24 mL/瓶

12222-F

脱硫液Desulphonation Buffer

3 mL/瓶

10 mL/瓶

40 mL/瓶

12222-G

洗脱液Elution Buffer

1 mL/管

1 mL/管

4 mL/瓶

12222-H

纯化柱C1 DNA Column C1

10 个/包

50 个/包

50 个/包(4包)

12222-I

收集管Collection Tube

10 个/包

50 个/包

200 个/包

 

储存条件

室温保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

 

Ver. CN20230614

Q:如何评估 BS 转化或酶法转化的回收率?

A:转化前双链定量,转化后单链定量;或转化前变性成单链,转化前和转化后都采用单链定量;或采用 qPCR 的方法

Q:转化过程中会把 DNA 片段化吗?

A:会片段化DNA,BS试剂会对DNA片段造成损伤、断裂,断裂是随机的,没有固定大小。

Q:Conversion之后放在4度没来得及做后续实验会有什么影响吗?

A:转化程序运行完以后可以在4度中保存20h以内。

Q:转化效率低是什么原因?

A:可能原因有:1)Conversion Reagent Mix不足或失效,检查是否配置正确或是否在有效期内,冻存过的用前需要确认涡旋混匀;2)反应温度或时间设置有误,检查确认程序设置和反应温度等;3)DNA样本投入量过高,样本投入量控制在说明书范围内,对于复杂样本的或高GC样本可以适当减少投入量或者延长转化时间。

Q:配置好的 Conversion Reagent Mix 可以保存多久?

A:可在室温(15~25℃)储存 24 h,在 4℃存储一周,冷冻条件(-20℃)储存1个月。使用时需平衡至室温,并涡旋混匀。另外该试剂对广敏感,建议现配现用。

DNA甲基化建库DNA二硫化物转化试剂盒 DNA Bisulfite Conversion Kit

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Hieff® DNA Bisulfite Conversion Kit将DNA变性与亚硫酸氢盐转化融合为一步,3小时内即可完成转化;采用柱内脱硫技术,消除了繁琐的DNA沉淀步骤,使操作流程更为简单;可以满足500 pg-2 μg样品的转化;未甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶的转化率≥99.5%;同时,本试剂盒采用独特的DNA保护剂组分,使得转化后DNA的质量和回收率都有很大的保障。转化后的产物适用于PCR扩增和DNA测序等下游应用。

 

组分信息

组分编号

组分名称

12222ES10

12222ES50

12222ES70

12222-A

亚硫酸氢盐干粉Conversion Reagent

10 反应/管

10 反应/管(5管)

10 反应/管(20管)

12222-B

稀释缓冲液Dilution Buffer

400 μL /管

1.5 mL/管

7 mL/瓶

12222-C

溶解缓冲液Dissolving Buffer

60 μL /管

500 μL/管

1.2 mL/管

12222-D

结合液Binding Buffer

7 mL/瓶

30 mL/瓶

125 mL/瓶

12222-E

洗涤液Wash Buffer

2 mL/瓶

6 mL/瓶

24 mL/瓶

12222-F

脱硫液Desulphonation Buffer

3 mL/瓶

10 mL/瓶

40 mL/瓶

12222-G

洗脱液Elution Buffer

1 mL/管

1 mL/管

4 mL/瓶

12222-H

纯化柱C1 DNA Column C1

10 个/包

50 个/包

50 个/包(4包)

12222-I

收集管Collection Tube

10 个/包

50 个/包

200 个/包

 

储存条件

室温保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

 

Ver. CN20230614

Q:如何评估 BS 转化或酶法转化的回收率?

A:转化前双链定量,转化后单链定量;或转化前变性成单链,转化前和转化后都采用单链定量;或采用 qPCR 的方法

Q:转化过程中会把 DNA 片段化吗?

A:会片段化DNA,BS试剂会对DNA片段造成损伤、断裂,断裂是随机的,没有固定大小。

Q:Conversion之后放在4度没来得及做后续实验会有什么影响吗?

A:转化程序运行完以后可以在4度中保存20h以内。

Q:转化效率低是什么原因?

A:可能原因有:1)Conversion Reagent Mix不足或失效,检查是否配置正确或是否在有效期内,冻存过的用前需要确认涡旋混匀;2)反应温度或时间设置有误,检查确认程序设置和反应温度等;3)DNA样本投入量过高,样本投入量控制在说明书范围内,对于复杂样本的或高GC样本可以适当减少投入量或者延长转化时间。

Q:配置好的 Conversion Reagent Mix 可以保存多久?

A:可在室温(15~25℃)储存 24 h,在 4℃存储一周,冷冻条件(-20℃)储存1个月。使用时需平衡至室温,并涡旋混匀。另外该试剂对广敏感,建议现配现用。

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现货clickchemistrytools 二硫化物生物素炔烃说明书

现货clickchemistrytools 二硫化物生物素炔烃说明书

clickchemistrytools 1498-1

Disulfide Biotin Alkyne

Catalog#
Unit Size

1498-1
1 mg

1498-5
5 mg

1498-25
25 mg

二硫化物生物素炔烃是一种叠氮化物活化的可裂解生物素探针,可在基于亲和性的测定中有效回收与生物素结合的蛋白质复合物。该试剂包含一个生物素部分,该生物素部分通过含有可裂解的二硫键的间隔臂与炔基连接。在还原条件下(50mM二硫苏糖醇、10mM 2-巯基y醇或1%硼氢化纳),二硫键断裂,释放生物素标签和与其结合的任何抗生物素缀合物。

规格

分子量

647.87

剩余分子量

143.20

化学成分

第二季度

CAS

不适用

溶解性

玻璃状无定形固体

外貌

黄色无定形固体至黄色油

储存条件

-20°C。

装运条件

环境温度

链霉亲和素-生物素相互作用的非凡强度允许有效捕获甚至高度稀释的目标;然而,这使得从亲和树脂中回收蛋白质具有挑战性。从固定化抗生物素中洗脱生物素化蛋白质的常规方法包括:(i)通过在变性缓冲液中煮沸树脂使链霉亲和素变性,变性缓冲液可能包括高浓度的离液盐;(ii)蛋白质与树脂结合时胰蛋白酶消化;或(iii)用过量游离生物素洗脱蛋白质。这些方案可以通过与标记的蛋白质同时释放非特异性结合的蛋白质和/或天然生物素化的蛋白质来共同洗脱污染物蛋白质。此外,这些方法中的一些可能导致高水平的树脂基肽与感兴趣的蛋白质一起洗脱,导致进一步的样品污染。

二硫化物生物素炔探针消除了链霉亲和素-生物素亲和纯化的主要限制。该试剂包含一个生物素部分,该生物素部分通过含有可裂解的二硫键的间隔臂与炔基连接。捕获的生物分子可在温和条件下(50mM二硫苏糖醇、10mM 2-巯基y醇或1%硼氢化纳)和切割后留在标记蛋白上的小分子片段(143.20Da)有效释放。这些特征使得可裂解探针在生物分子标记和蛋白质组学研究中特别有吸引力。