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热启动直扩型Taq DNA聚合酶说明书

发表于由

热启动直扩型Taq DNA聚合酶说明书

产品详情

货号

规格

价格

78DC10013-250U

250U

￥280.00

78DC10013-250U×5

250U×5

￥1120.00

78DC10013-1250U×4

1250U×4

￥3640.00

78DC10013-2500U×5

2500U×5

￥8400.00

产品详情

本酶为Taq-D DNA聚合酶（KlenTaq1）的热启动型，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活。Taq-D DNA聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶（删除了5’ 外切酶结构域）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR。本酶经基因工程改造，尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/min（72℃）。

特点

·  本酶为热启动聚合酶，可提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体；

·  热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min；

·  模板DNA耐受范围广；

·  PCR产物具有3’-dA尾巴，可直接用于T/A克隆；

·  可以掺入dUTP、dITP、荧光标记核苷酸。

·  相比普通Taq DNA 聚合酶，本酶更加适合未处理的血液、组织、唾液等样本的PCR；

浓度

2.5U/μl

活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，将10 nmole脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol. 

产品包装规格及组成

Component

78DC10013-250u

78DC10013-250U×5

 

78DC10013-1250U×4

 

78DC10013-2500U×5

HS Taq-D DNA polymerase（KlenTaq1）

250U

250U×5

1250U×4

2500U×5

10×Taq-D Buffer

0.5 ml×1

0.5 ml×5

1.0 ml×10

1.0 ml×25

运输与保存

-20℃保存 冰袋运输

适用范围

·       溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型

·       DNA荧光标记

·       血液、组织样本等直扩PCR

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系， 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

组份

体积/μl

终浓度

10×Taq-D Buffer

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

HS Taq-D（2.5U/μl）

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

      *DNA template可参照如下标准（50 μl PCR体系）：

人类基因组DNA 

0.1 μg-1 μg

λDNA 

0.5 ng-5 ng

质粒DNA 

0.01 ng-1 ng

大肠杆菌DNA

10 ng-100 ng

   PCR反应条件

95℃

5 min

95℃

15 sec

55~72℃

20 sec 

30 Cycles

72℃ 

1 min/kb

72℃

5 min

注意事项

·       本酶为热启动聚合酶，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR结果。

·       Taq-D DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物3’末端通常会加上1个多余的腺嘌呤。

· 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq-D DNA聚合酶的碱基错误率为1×10-5。

· 对非热启动酶而言，建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

· 如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性

· 本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl2/MgSO4。

 

      本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20度。

genaxxon Pwo校对聚合酶说明书

发表于由

genaxxon Pwo校对聚合酶说明书
   

货号： M3002.0100

运输：湿冰运输，-20°C 储存

‍

产品信息“Pwo校对聚合酶”

High-Fidelity Pwo校对 DNA 聚合酶是一种热稳定的、高度加工的 5' – 3' DNA 聚合酶，具有额外的 3' – 5' 核酸外切酶活性（校对），使聚合酶能够纠正核苷酸掺入的错误。Genaxxon bioscience Pfund 高保真 DNA 聚合酶是聚合酶的重组形式，最初描述自嗜热古细菌Pyrococcus woesei。相应的基因被克隆并在大肠杆菌中表达。该酶没有可检测到的 5' – 3' 核酸外切酶活性。Pwo DNA 聚合酶显示出更高的热稳定性，此外，与 Taq 聚合酶相比，其准确度提高了 10 倍 >。

一次性测试样品以*提供！在德国境内运送时无运费！测试样品价格将在产品订购时退还。

特点：

  • 比 Taq 聚合酶准确 10 倍

  • 高保真聚合酶

  • 校对功能（3' – 5' 核酸外切酶活性）

  • 高热稳定性，100°C半衰期明显高于Taq聚合酶

  • 产生平末端 PCR 产物

  • 生成用于克隆和表达的 PCR 产物

  • 可以毫无问题地使用修饰的核苷酸

Genaxxon bioscience 的其他高保真校对聚合酶：
– M3002 Pwo 校对聚合酶 >
– M3003 ReproFast 校对聚合酶 >
– M3004 Pfu 校对聚合酶 >
– M3012 ReproHot (KOD) 校对聚合酶 >
– M3030 ExactRun（Phusion 样）校对聚合酶 >

 

diatheva Hot Rescue PLUS DNA聚合酶说明书

发表于由

 

diatheva Hot Rescue PLUS DNA聚合酶说明书

Hot Rescue PLUS DNA聚合酶是-种热启动高度热稳定性Taq,可催化DNA的

5'-3'合成，没有可检测到的3'-5'校对核酸外切酶活性。这种酶具有允许TA克

隆的“延伸酶’'活性。该酶以5 U/μL的浓度与25 mM氯化镁溶液和10X反应缓

冲液一起提供。

货号: diatheva MBR0001-P

 

diatheva MBR0001-P描述

Hot Rescue PLUS DNA聚合酶是-种化学修饰的HotStart DNA聚合酶，在74°C以下没有活性，需要在95 °C下热激活10分钟才能达到最大活性，避免PCR设置过程中低温下的非特异性引发-向上。Hot Rescue PLUS DNA聚合酶比常用酶具有更高的热稳定性,特别推荐用于需要超低水平DNA的PCR应用和易于产生非特异性扩增子的模板的打增。

 

附加信息

250 U

应用

生命科学

产品类别

研究用试剂

试剂类型

聚合酶链反应

类别

分子生物学

 

 

工程DNA聚合酶-mypols

发表于由

 

工程DNA聚合酶-mypols

mypols是一家生物技术公司，起源于康斯坦茨大学（University of Konstanz），Andreas Marx教授的研究小组。
自2014年成立以来，我们就提供DNA聚合酶方面的专业知识：我们为您的biotec应用设计，定制，生产和冻干酶。我们专注于开发新一代的DNA聚合酶，用于先进且可靠的应用，例如个性化医学，病原体检测，DNA和RNA诊断，法医等等。

mypols Isotherm2G说明书

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

€349,00

Isotherm2G是一种嗜温性DNA聚合酶，非常适合等温扩增。它可以从具有高链置换活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突变，以提高反转录活性。在55-70°C之间活跃。Isotherm2G DNA聚合酶是等温扩增反应的优先选择，如环介导的等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），分枝扩增（RAM），基因组扩增等。

 

Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它与足够量的10x反应缓冲液一起使用，该缓冲液已针对等温扩增进行了优化。缓冲液中含3.25 mM镁离子，终浓度为1x。镁，引物和dNTPs的宜浓度在很大程度上取决于所应用的应用，应该对其进行优化。

该产品以冰袋包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

 

mypols Volcano2G说明书

 

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

火山2G DNA聚合酶

Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高级版本，具有进一步改善的逆转录活性。该酶是一种经过工程改造的，极耐热的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，可通过定向的人工进化获得。Volcano2G DNA聚合酶可直接从RNA模板（无需等温逆转录步骤）直接促进“零步骤” RT-PCR，因为逆转录与循环PCR延伸步骤中的DNA扩增同时进行。这也允许在高温下进行逆转录反应，从而将在高温下融化的RNA中强大的二级结构所遇到的问题降至低。

 

Volcano2G DNA聚合酶包含热启动剂配制的，具有逆转录酶活性的工程稳定的热稳定DNA聚合酶和稳健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于适体的热启动剂设计用于在低温下（例如，在移取反应混合物时）阻断非特异性DNA聚合酶活性，但会在高于50-55°C的温度下分解，从而释放出现已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚酶作为5 U / µl甘油库存与适当的5x Volcano反应缓冲液一起运输，该缓冲液针对60-300 bp的扩增子进行了优化。

Volcano2G逆转录酶可以可靠地从≥1 ng的总RNA输入中检测RNA靶标。它不需要Mn 2+即可  获得宜活性。但是，可以通过向反应中添加Mn 2+来进一步优化某些检测方法（建议范围是0.5-1 mM，未提供Mn 2+）。

 

该产品以凉爽包装出售。建议在到达-20°C时存放产品。

 

RT-PCR活性：已对 Volcano3G RT-PCR Mix进行了成功的RT-PCR性能测试。在实时PCR循环仪中从人总RNA提取物中扩增出151 bp片段（HPRT1 mRNA），并可视化为单个扩增产物。

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度由蛋白质特异性染色确定。

 

 

带有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步协议节省时间

跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。 

Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶，非常稳定，在95°C下的半衰期> 40分钟。

灵敏的RNA检测

当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。

来自细胞的直接RT-PCR

对于细胞RNA的可靠RT-PCR，样品制备步骤*。然而，这些步骤费力，费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液，您可以用快速便捷的“零步长”方案代替费力的RNA制备。

节省时间和金钱

VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤”工作流程，使您可以规避费力的纯化和提取步骤，从而节省了时间和金钱。

出色的灵敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA。

 

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

（目前缺货直至另行通知，请提出要求）

 

是一种嗜温DNA聚合酶，它从DNA和RNA模板合成DNA，具有高链置换活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代，具有进一步改善的逆转录活性。宜温度（55-70°C）使Isotherm2G DNA聚合酶成为等温扩增反应的优先选择，如环介导等温扩增（LAMP），链置换扩增（SDA），滚环扩增（RCA），衍生物扩增（RAM），基因组扩增等。

＃8801S

Isotherm2G DNA聚合酶

1600 U，8U /μl，200μl

＃8801M

Isotherm2G DNA聚合酶

8000 U，8U /μl，1000μl

 

等温扩增  

 

就是这么简单：只需在59°C温育30分钟，就可以使用LAMP方法扩增DNA目标（红色曲线）和RNA目标（蓝色曲线）。Isotherm可用于RCA，SDA，RAM，LAMP和许多其他放大技术。

 

 

 

 

 

Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆转录活性。扩增后，可以进行熔解曲线测量以确认特定产物的产生。因此可以进行DNA和RNA检测，从而实现简单的反应设置，快速的反应时间和闭管系统。

 

 

 

应用

  • 快速，等温检测和鉴定DNA和RNA靶标
  • 逆转录
  • 实时等温检测
  • LAMP，SDA，RCA，RAMP
  • 入门扩展

反应设置

零件

卷

终浓度

底漆混合物（各种浓度）

各种μl

各个

dNTPs（10 mM）

1μl

400μM

10 x Isotherm2G反应缓冲液

2.5μl

1X

等温线DNA聚合酶8 U /μl

1μl

8 U /反应

模板/样品提取物

各种μl

 各个

不含核酸酶的水

总反应体积高达25μl

 

将所有组件保存在冰上。
在使用前仔细旋转并混合所有溶液。 

引物混合物和浓度很大程度上取决于所采用的等温反应方法。

Isotherm2G和Isotherm2G反应缓冲液不含荧光染料。对于实时测量，请添加适量的合适染料。

详细的产品说明

 

内容

Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有针对等温扩增优化的10倍反应缓冲液。

 

质量控制

DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监测等温线活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
通过蛋白质特异性染色确定酶浓度。有关批次特定浓度，请通过info@mypols.de查询更多信息。

 

法律信息

某些等温扩增方法可能受到保护。购买此产品不会向购买者传达使用所购产品进行任何商业目的的任何等温扩增方法的合法权利。

 

存储

本产品采用冷藏包装。请在抵达-20°C时存放产品。

 

货号

品名

规格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U，5U /μl，50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U，5U /μl，200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

mypols

7101M 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

mypols

8801S

Isotherm2G DNA polymerase

1600 U, 8U/µl, 200 µl

mypols

8801M

Isotherm2G DNA polymerase

8000 U, 8U/µl, 1000 µl

mypols

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

jembio KlenTaq1 DNA 聚合酶说明书

发表于由

jembio KlenTaq1说明书


jembio中国代理

jembio KlenTaq1是一种热稳定性 DNA 聚合酶，从该基因的 5' 缺失表达，编码水生栖热菌 DNA 聚合酶，留下高活性和更热稳定的 DNA 聚合酶活性。在反应缓冲液 PC2 中反复暴露于 980°C 似乎不会降低酶活性。即使在暴露于 990 C 后仍保持显着活性。全长酶不能耐受这些处理。               



jembio KlenTaq1    ™ 酶缺少野生型全长 Taq DNA 聚合酶的 N 端部分。这部分蛋白质与大肠杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' – 外切核酸酶区域同源。  因此， KlenTaq1 ™ 与 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。               


对于不含甘油的KlenTaq1 （Cat# 1001 NGKT）：将酶和缓冲液储存在 4°C。储存缓冲液为 50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。               


对于50% 甘油中的KlenTaq1 （货号 1001）：将酶储存在 -200 C，缓冲液在 40 C。储存缓冲液中的甘油可防止在 -20°C 下冻结，但 Thesit 在此温度下会导致一些增稠。它是可选的，但建议在分配前在冰上加热至 0°C。对于长期储存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我们建议不要将酶冷冻一次以上。重新冷冻和解冻会导致酶的活性降解。储存缓冲液为 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸铵、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巯基乙醇、无明胶和 0.5% Thesit。                

 浓度：5   KlenTaq1™单位（在 72°C 下 30 分钟内掺入 60 nmole）。活化的鲑鱼精子DNA是模板；PC2（见下文）是缓冲区。NB 这些单位比标准单位大 6 倍。在标准单位（10 nmole/30 分钟）中，这里的酶浓度约为 30 单位/ml。                   

尽管该酶在各种条件下都能很好地发挥作用，但推荐的反应缓冲液 PC2 为：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸铵、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（按订单提供） . 请注意，与热稳定 DNA 聚合酶的其他缓冲液相比，不含 KC1 和明胶。dNTP 浓度可以从每个 50 µM 到每个 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 掺入量超过 500 bp，您将需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。KlenTaq1™ 以 25-30 u/µl 的浓度运输，因此如果使用与全长 Taq DNA 聚合酶相同的数量（罗氏推荐），它可以很容易地掺入 2000 bp。

                    1 DNA 掺入单位 = 10 nmoles / 30 min ='标准单位'。罗氏的酶每微升含有 5 个“标准单位”。KlenTaq1™每微升含有 25-30 个“标准单位”。                    


罗氏推荐每 100 微升反应 0.5 微升；也就是说，1微升将催化2个反应。进行反应所需的KlenTaq1™的量取决于掺入的长度。对于KlenTaq1™ ，在 100 微升反应中，1 微升将催化 15-20 个 500 bp 的反应和 8-10 个 1 kb 的反应和 3-5 个 2kb 模板 DNA 的反应。由于过量的 KlenTaq1™ 是无害的，我们保守地建议每次反应 0.50 微升，以确保 2.5 kb 以内的所有内容都能正常工作。这就是我们检查和滴定酶的方式。


货号：1001


Super Taq Plus DNA 聚合酶

发表于由

Super Taq Plus DNA 聚合酶

简要描述：Super Taq Plus DNA 聚合酶

详细介绍

产品咨询

目录号 规格 备注 价格 说明书下载
E032-01A 250U 含dNTP 310元
E032-01B A包装×5 含dNTP 1390元
E032-02A 250U 不含dNTP  260元
E032-02B A包装×5 不含dNTP 1170元
 

· Super Taq Plus DNA 聚合酶内容 （250 U）

Super Taq Plus DNA聚合酶（5 U/μl） 50 μl
dNTP 混合液 （各10 mM） 250 μl
10 ×Super Taq Plus Buffer with Mg2+ 1000 μl

 

· Super Taq Plus DNA 聚合酶说明
SinoBio Taq Plus DNA聚合酶是Super Taq DNA聚合酶和Fast Pfu DNA聚合酶按特定比例混合而成。Super Taq Plus DNA聚合酶具有Super Taq DNA聚合酶所有的特点：扩增快速、高灵敏度、抗干扰能力强等，同时由于Fast Pfu 酶的存在，具有一定的保真特性, 能部分纠正DNA扩增过程中所出现的错误。与Super Taq DNA聚合酶相比，具有扩增长度增加（简单模板扩增长度可达30kb,复杂模板可有效扩增10kb）, 保真度好的特点；与Fast Pfu DNA聚合酶相比，具有扩增速度更快，扩增灵敏度更高的优点。

· 用 途
1）可替代大部分Super Taq DNA聚合酶的用途；
2）需高灵敏度的PCR扩增；
3）大片段PCR扩增反应 （可达30 kb）；

· 特点
快速：SuperTaq扩增速度为普通Taq酶的数倍，72℃保温15秒可延伸1kb以上。
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
高灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段。在同样条件下对于基因组DNA的扩增显著优于Taq酶。
大片段：大片段PCR扩增反应（可达20 kb）。

· 质量保证
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议

使用本制品扩增得到的PCR产物具有3’端”A”突出，可直接克隆于T-Vector中。

· 相关图片

· 其他说明

T7 RNA聚合酶|T7 RNA polymerase(50 U/μL)

发表于由

T7 RNA聚合酶|T7 RNA polymerase(50 U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体T7 RNA聚合酶，以含有T7启动子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的反向单链DNA互补的RNA。双链线性平末端或5’突出末端DNA均可作为T7 RNA聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。

注：G*为RNA转录的第一个碱基。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10618ES90

(5000 U)

10618ES96

(25000 U)

10618ES97

(50000 U)

10618-A

T7 RNA polymerase (50 U/μL)

100 μL

500 μL

1 mL

10618-B

10×Transcription Buffer

400 μL

1 mL ×2

1 mL ×4

注：10×Transcription Buffer中含460 mM MgCl2和100 mM DTT，但不含有NTP，如需请购买本公司NTP set solution 10133。

 

产品应用

1. 单链 RNA合成（包括mRNA，siRNA，gRNA等各类RNA前体，以及同位素标记或非同位素标记的RNA探针）

2. 以（Cap analog）为引物合成Capped mRNA

 

酶活定义

在 37℃、pH8.0 的条件下，1h内使1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

 

运输和保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期一年。

 

质量控制

核酸外切酶残留检测：100 U的本酶和0.5 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带不发生变化。

切口酶残留检测：100 U的本酶和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：100 U的本酶和0.5 μg  293T细胞总RNA，37℃下孵育4 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅做科研用途！

 

应用实例

按下列体系配制反应体系

组分

体积（μL）

终浓度

10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus)

2

1×

CTP / GTP/ ATP/ UTP (100 mM each)

0.4 each

2 mM each

T7 RNA Polymerase (50 U/μL)

0.5-1

–

RNase inhibitor (40 U/μL)

1

–

RNase free H2O

Up to 18

–

模板DNA

2 (100 ng-1μg)

–

注： 1. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亚精胺，亚精胺浓度过高会引起DNA模板沉淀。

2. Buffer和水建议放置到室温，然后开始使用，反应于室温下配制，防止温度低引起亚精胺沉淀高浓度DNA模板。

3.若转录长度< 100 nt，模板投入量可增加至2 μg。

4. RNase inhibitor (40 U/μL)请购买本公司产品10603。

5.为了特定区域的有效转录，建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。

37℃反应1-2 h（若转录长度≤ 100 nt，增加时间至4-8 h）。

反应结束后，使用2 U DNaseⅠ（无RNase）37℃ 15分钟去除DNA模板。

转录产物纯化：体外转录产物可选用RNA Cleaner磁珠进行纯化（12602），以去除蛋白、盐离子和其他杂质。也可以采用酚/氯仿纯化法（具体操作步骤可联系Yeasen索取）。

 

操作建议

1.DNA模板的种类：推荐使用含T7启动子的线性化质粒和PCR产物作为模板。

2.转录模板的纯度会显著影响体外转录反应。在质粒DNA抽提过程中残留的RNase A会显著影响转录RNA的质量。通过酚-氯仿抽提的质粒DNA为最佳模板；PCR产物建议采用胶回收纯化后使用。

3.在20 μL反应体系中加入0.02 U热稳定无机焦磷酸酶可显著提高转录产量。

 HB220118

Q:如何获得特定长度的 RNA 呢？

A:可以在插入位点下游选择限制酶切割，切割产生平末端或 5-突出端最好。

Q:T7 转录酶有没有验证过除 37℃外其他温度下的活性？

A:37℃和 42℃转录能力无差别，但是不耐 50℃。

Q:转录产物有杂带（偏大）是什么原因？

A:模板线性化不完全，导致转录停不下来，所以转录条带会偏大，出现杂带。

Q: T7酶的保真性能怎么样？有没有开展相关测试？

A: 我们的T7酶测试了相对保真度，与Thermo的保真度差不多，大概万分之四的突变率。目前野生型的T7保真度都差不多，基本能满足客户的需求。现项目中没有更高保真度T7的开发计划。

Q: 使用T7聚合酶的产量是使用LiCl纯化后进行测定的吗？有没有A260/280和A260/230的数据？

A: 是通过LiCl纯化后进行测定的，我们有记录过相关数据A260/280大概比值再在2.0-2.1之间；使用我们的羧基磁珠纯化也基本在这个范围以内。具体数据可以整理之后再分享。

Q: 采用T7聚合酶转录的时候，有没有什么办法，减少polyA尾多转录的问题？

A: 这一情况是T7反应体系的自身特性，无法完全避免。根据相关的文献，控制mRNA自延长的思路主要还是两方面：

①对模板3'末端上游序列进行优化；

②控制IVT产量，高产量下自我延伸的几率会更高。

T7 RNA聚合酶|T7 RNA polymerase(50 U/μL)

暂无内容

本产品是大肠杆菌重组表达来源的噬菌体T7 RNA聚合酶，以含有T7启动子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的反向单链DNA互补的RNA。双链线性平末端或5’突出末端DNA均可作为T7 RNA聚合酶的底物模板，因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。

注：G*为RNA转录的第一个碱基。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10618ES90

(5000 U)

10618ES96

(25000 U)

10618ES97

(50000 U)

10618-A

T7 RNA polymerase (50 U/μL)

100 μL

500 μL

1 mL

10618-B

10×Transcription Buffer

400 μL

1 mL ×2

1 mL ×4

注：10×Transcription Buffer中含460 mM MgCl2和100 mM DTT，但不含有NTP，如需请购买本公司NTP set solution 10133。

 

产品应用

1. 单链 RNA合成（包括mRNA，siRNA，gRNA等各类RNA前体，以及同位素标记或非同位素标记的RNA探针）

2. 以（Cap analog）为引物合成Capped mRNA

 

酶活定义

在 37℃、pH8.0 的条件下，1h内使1 nmol 的 [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

 

运输和保存方法

干冰运输。-20℃保存，有效期一年。

 

质量控制

核酸外切酶残留检测：100 U的本酶和0.5 μg λ DNA-Hind III酶切产物37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带不发生变化。

切口酶残留检测：100 U的本酶和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：100 U的本酶和0.5 μg  293T细胞总RNA，37℃下孵育4 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅做科研用途！

 

应用实例

按下列体系配制反应体系

组分

体积（μL）

终浓度

10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus)

2

1×

CTP / GTP/ ATP/ UTP (100 mM each)

0.4 each

2 mM each

T7 RNA Polymerase (50 U/μL)

0.5-1

–

RNase inhibitor (40 U/μL)

1

–

RNase free H2O

Up to 18

–

模板DNA

2 (100 ng-1μg)

–

注： 1. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亚精胺，亚精胺浓度过高会引起DNA模板沉淀。

2. Buffer和水建议放置到室温，然后开始使用，反应于室温下配制，防止温度低引起亚精胺沉淀高浓度DNA模板。

3.若转录长度< 100 nt，模板投入量可增加至2 μg。

4. RNase inhibitor (40 U/μL)请购买本公司产品10603。

5.为了特定区域的有效转录，建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。

37℃反应1-2 h（若转录长度≤ 100 nt，增加时间至4-8 h）。

反应结束后，使用2 U DNaseⅠ（无RNase）37℃ 15分钟去除DNA模板。

转录产物纯化：体外转录产物可选用RNA Cleaner磁珠进行纯化（12602），以去除蛋白、盐离子和其他杂质。也可以采用酚/氯仿纯化法（具体操作步骤可联系Yeasen索取）。

 

操作建议

1.DNA模板的种类：推荐使用含T7启动子的线性化质粒和PCR产物作为模板。

2.转录模板的纯度会显著影响体外转录反应。在质粒DNA抽提过程中残留的RNase A会显著影响转录RNA的质量。通过酚-氯仿抽提的质粒DNA为最佳模板；PCR产物建议采用胶回收纯化后使用。

3.在20 μL反应体系中加入0.02 U热稳定无机焦磷酸酶可显著提高转录产量。

 HB220118

Q:如何获得特定长度的 RNA 呢？

A:可以在插入位点下游选择限制酶切割，切割产生平末端或 5-突出端最好。

Q:T7 转录酶有没有验证过除 37℃外其他温度下的活性？

A:37℃和 42℃转录能力无差别，但是不耐 50℃。

Q:转录产物有杂带（偏大）是什么原因？

A:模板线性化不完全，导致转录停不下来，所以转录条带会偏大，出现杂带。

Q: T7酶的保真性能怎么样？有没有开展相关测试？

A: 我们的T7酶测试了相对保真度，与Thermo的保真度差不多，大概万分之四的突变率。目前野生型的T7保真度都差不多，基本能满足客户的需求。现项目中没有更高保真度T7的开发计划。

Q: 使用T7聚合酶的产量是使用LiCl纯化后进行测定的吗？有没有A260/280和A260/230的数据？

A: 是通过LiCl纯化后进行测定的，我们有记录过相关数据A260/280大概比值再在2.0-2.1之间；使用我们的羧基磁珠纯化也基本在这个范围以内。具体数据可以整理之后再分享。

Q: 采用T7聚合酶转录的时候，有没有什么办法，减少polyA尾多转录的问题？

A: 这一情况是T7反应体系的自身特性，无法完全避免。根据相关的文献，控制mRNA自延长的思路主要还是两方面：

①对模板3'末端上游序列进行优化；

②控制IVT产量，高产量下自我延伸的几率会更高。

T7 RNA聚合酶|T7 RNA polymerase(50 U/μL)

暂无内容

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

发表于由

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

 
Hieff® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3’-dA，可直接用于TA克隆。

 

产品组分

 

编号

组分

产品编号/规格

10101ES80（1,000 U）

10101ES92（10,000 U）

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1   mL

4×10   mL

10101-B

25   mM MgCl2

2×1 mL

2×10 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase   (5 U/μL)

200 μL

2×1 mL

 

产品应用

 

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

 

活性定义

 

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

 

质量控制

 

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

 

PCR反应体系（冰上配制）

 

组分

体积（μL）                    

终浓度

ddH2O

to 50  

–

10×Taq   Buffer (Mg2+ Free)

5

1×

25   mM MgCl2

3

1.5   mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2   mM

模板DNA

optional

–

引物1(10   μM)

2 μL

0.4   μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4   μM

Hieff®   Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04   U/μL

【注】:1）Mg2+ 终浓度：Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM，如有需要，可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
2）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3）聚合酶浓度：推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50   ng-100 ng

质粒DNA

10   pg-20 ng

cDNA

1-5   μL（不超过反应体系的1/10）

 

PCR扩增程序

 

循环步骤

温度（ºC）

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec

  

退火

50-60

30 sec

35

延伸

72

60 sec/kb

  

终延伸

72

10 min

1

【注】: 1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。 
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

 

HB220701

 

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

暂无内容

[1] Lu Z, Yang S, Yuan X, et al. CRISPR-assisted multi-dimensional regulation for fine-tuning gene expression in Bacillus subtilis. Nucleic Acids Res. 2019;47(7):e40. doi:10.1093/nar/gkz072(IF:11.147)
[2] Chen X, Liang H, Xi Z, et al. BM-MSC Transplantation Alleviates Intracerebral Hemorrhage-Induced Brain Injury, Promotes Astrocytes Vimentin Expression, and Enhances Astrocytes Antioxidation via the Cx43/Nrf2/HO-1 Axis. Front Cell Dev Biol. 2020;8:302. Published 2020 May 8. doi:10.3389/fcell.2020.00302(IF:5.186)
[3] Fu C, Xu J, Jia Z, Yao K, Chen X. Cataract-causing mutations L45P and Y46D promote γC-crystallin aggregation by disturbing hydrogen bonds network in the second Greek key motif. Int J Biol Macromol. 2021;167:470-478. doi:10.1016/j.ijbiomac.2020.11.158(IF:5.162)
[4] Chen X, Xu CX, Liang H, et al. Bone marrow mesenchymal stem cells transplantation alleviates brain injury after intracerebral hemorrhage in mice through the Hippo signaling pathway. Aging (Albany NY). 2020;12(7):6306-6323. doi:10.18632/aging.103025(IF:4.831)
[5] Fu C, Xu J, Yang X, Chen X, Yao K. Cataract-causing mutations L45P and Y46D impair the thermal stability of γC-crystallin. Biochem Biophys Res Commun. 2021;539:70-76. doi:10.1016/j.bbrc.2020.12.096(IF:3.575)
[6] Fei ZY, Wang WS, Li SF, et al. High expression of the TEFM gene predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma. J Gastrointest Oncol. 2020;11(6):1291-1304. doi:10.21037/jgo-20-120(IF:2.536)
[7] Zhang L, Li Y, Bao H, et al. Population structure and antimicrobial profile of Staphylococcus aureus strains associated with bovine mastitis in China. Microb Pathog. 2016;97:103-109. doi:10.1016/j.micpath.2016.06.005(IF:1.888)

产品描述

 
Hieff® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3’-dA，可直接用于TA克隆。

 

产品组分

 

编号

组分

产品编号/规格

10101ES80（1,000 U）

10101ES92（10,000 U）

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1   mL

4×10   mL

10101-B

25   mM MgCl2

2×1 mL

2×10 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase   (5 U/μL)

200 μL

2×1 mL

 

产品应用

 

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

 

活性定义

 

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

 

质量控制

 

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

 

注意事项

 

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

 

PCR反应体系（冰上配制）

 

组分

体积（μL）                    

终浓度

ddH2O

to 50  

–

10×Taq   Buffer (Mg2+ Free)

5

1×

25   mM MgCl2

3

1.5   mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2   mM

模板DNA

optional

–

引物1(10   μM)

2 μL

0.4   μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4   μM

Hieff®   Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04   U/μL

【注】:1）Mg2+ 终浓度：Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM，如有需要，可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。
2）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3）聚合酶浓度：推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50   ng-100 ng

质粒DNA

10   pg-20 ng

cDNA

1-5   μL（不超过反应体系的1/10）

 

PCR扩增程序

 

循环步骤

温度（ºC）

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec

  

退火

50-60

30 sec

35

延伸

72

60 sec/kb

  

终延伸

72

10 min

1

【注】: 1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。 
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

 

HB220701

 

DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶|Taq DNA Polymerase

暂无内容

[1] Lu Z, Yang S, Yuan X, et al. CRISPR-assisted multi-dimensional regulation for fine-tuning gene expression in Bacillus subtilis. Nucleic Acids Res. 2019;47(7):e40. doi:10.1093/nar/gkz072(IF:11.147)
[2] Chen X, Liang H, Xi Z, et al. BM-MSC Transplantation Alleviates Intracerebral Hemorrhage-Induced Brain Injury, Promotes Astrocytes Vimentin Expression, and Enhances Astrocytes Antioxidation via the Cx43/Nrf2/HO-1 Axis. Front Cell Dev Biol. 2020;8:302. Published 2020 May 8. doi:10.3389/fcell.2020.00302(IF:5.186)
[3] Fu C, Xu J, Jia Z, Yao K, Chen X. Cataract-causing mutations L45P and Y46D promote γC-crystallin aggregation by disturbing hydrogen bonds network in the second Greek key motif. Int J Biol Macromol. 2021;167:470-478. doi:10.1016/j.ijbiomac.2020.11.158(IF:5.162)
[4] Chen X, Xu CX, Liang H, et al. Bone marrow mesenchymal stem cells transplantation alleviates brain injury after intracerebral hemorrhage in mice through the Hippo signaling pathway. Aging (Albany NY). 2020;12(7):6306-6323. doi:10.18632/aging.103025(IF:4.831)
[5] Fu C, Xu J, Yang X, Chen X, Yao K. Cataract-causing mutations L45P and Y46D impair the thermal stability of γC-crystallin. Biochem Biophys Res Commun. 2021;539:70-76. doi:10.1016/j.bbrc.2020.12.096(IF:3.575)
[6] Fei ZY, Wang WS, Li SF, et al. High expression of the TEFM gene predicts poor prognosis in hepatocellular carcinoma. J Gastrointest Oncol. 2020;11(6):1291-1304. doi:10.21037/jgo-20-120(IF:2.536)
[7] Zhang L, Li Y, Bao H, et al. Population structure and antimicrobial profile of Staphylococcus aureus strains associated with bovine mastitis in China. Microb Pathog. 2016;97:103-109. doi:10.1016/j.micpath.2016.06.005(IF:1.888)

Fast Pfu DNA 聚合酶

发表于由

Fast Pfu DNA 聚合酶

简要描述：Fast Pfu DNA 聚合酶

详细介绍

产品咨询

目录号 规格 备注 价格 说明书下载
E031-01A 250U 含dNTP 360元
E031-01B A包装×5 含dNTP 1620元
E031-02A 250U 不含dNTP  310元
E031-02B A包装×5 不含dNTP  1395元

 

· 制品内容 （250 U）

Fast Pfu DNA聚合酶（5 U/μl） 50 μl
dNTP 混合液 （各10 mM） 250 μl
5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+ 2000 μl

 

· 制品说明
Pfu DNA聚合酶为zui常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反应中广范使用,然而Pfu酶扩增灵敏度不高，延伸速度缓慢（0.5kb/分钟）给众多的使用者带来了不便。针对普通Pfu酶的以上缺点，SinoBio采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造，制备的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高灵敏度、抗干扰能力强等特点，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能获得更理想的扩增结果，并大幅度缩短扩增反应时间。

· 用 途
用于要求保真度比较高的PCR反应，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等（参见 SinoBio 实验方案）。

· 产品特点
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，为普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍，72℃保温30秒可延伸1kb以上。
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达12kb，能高效扩增≤6kb片段；对于人基因组DNA等复杂模板，能有效扩增出3kb特定基因片段。
*配方的5×Buffer：使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

· 质量保证
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

· 使用建议

Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端，无3’端”A”突出， 其PCR产物的克隆有两种方案：
1.PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中（参见 Sinobio 实验方案）。
2.将产物3’末端加A后再与T-Vector连接（参见 SinoBio 实验方案）。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度，理想的引物长度为 20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解， 尽量在冰上配置反应体系，并zui后加入Fast Pfu酶。。

· 相关图片

 

· 其他说明

 

cells-safe 无DNA- Taq 聚合酶简介

发表于由

cells-safe 无DNA- Taq 聚合酶简介


Cellsafe的无DNA- Taq 聚合酶技术

大多数 Taq DNA 聚合酶都被大肠杆菌DNA 污染，导致以下问题。

  • 生产非特异性副产品

  • · 促进引物二聚体的形成

  • 多重 PCR 中假阳性结果的诱导

  • qPCR 反应期间的 Ct 值限制 – 降低灵敏度

  • 基因诊断的应用限制

  • 在克隆过程中获得错误的基因

  • · 测序时的解码错误

DNA free -Taq DNA Polymerase 是一款可以解决这些错误的产品，可应用于一般 PCR、多重 PCR 和 qPCR 等各种实验，获得优异的结果。

大肠杆菌DNA 污染测试

PCR 在没有模板的情况下使用大肠杆菌16s rRNA 特异性引物（1.5 kb 产物）进行。

MW – 100 bp 加
1) CellSafe 的 5 单位 DNA 游离 Taq（30 次循环）
2）CellSafe 的2.5 单位 DNA 游离 Taq（30 次循环）
3) 1.25 单位 Taq（A 公司）
4）1.25 单位 Taq（B 公司） ) 
5) 1.25 单位 Taq（C 公司）
6）1.25 单位 Taq（D 公司）

  • · 1、2：Cellsafe Co., Ltd.的DNA free-Taq聚合酶未显示任何条带

  • 3~6：其他Taq聚合体有无模板DNA的条带（非特异性条带）

cells-safe


DNA Free- Taq DNA聚合酶

它是一种DNA Free-Taq DNA 聚合酶产品，可通过 CellSafe 的创新分离和纯化系统去除质粒 DNA 和大肠杆菌基因组 DNA  。

大多数 Taq DNA 聚合酶含有大肠杆菌DNA，会导致以下问题

  • 生产非特异性副产品

  • · 促进引物二聚体的形成

  • 多重 PCR 中假阳性结果的诱导

  • qPCR 反应期间的 Ct 值限制 – 降低灵敏度

  • 基因诊断的应用限制

  • 在克隆过程中获得错误的基因

  • · 测序时的解码错误

一、产品特点

  • · 来源：栖热菌

  • · 5'→3'核酸外切酶活性：是

  • · 3'→5'核酸外切酶活性：无

  • · 放大大小：<3kb

  • · A-tailing : 是

2.其他产品的比较

使用大肠杆菌16s rDNA 特异性引物（1.2 kb 产物）在没有模板的情况下进行 PCR 。

MW – 100bp的加
1）2.5unit DNA自由的Taq CellSafe的（30cycles）
2）1.25单位DNA自由的Taq CellSafe的（30cycles）
3）1.25单位的Taq竞争者A的
4）1.25单位的Taq竞争者B的
5）1.25单位竞争对手 C 的Taq
6) 1.25 单位竞争对手 D 的Taq

三、产品应用

  • · 常规PCR、多重PCR和qPCR

  • ·等位基因特异性PCR

  • · 16S和23S rRNA基因扩增

  • · 检测样本（如血液）中的细菌

  • · DNA标记反应和TA克隆

  • · 测序/循环测序

4. 产品类型

（不含增值税）

类型 产品名称 标准
酵素 DNA Free- Taq DNA聚合酶 DFT-50h 500 台
DFT-1000 1,000 台
DFT-2500 2,500 台
主混音 DNA Free- Taq 预混液 DFTM-5 5毫升
预混料 SafeDry Taq Premix 
（干式）		 LTP-96 96 次测试
（8 条 X 12 条）
LTP-480 480 次测试
（8 条 X 60 条）


游离DNA-Taq 聚合酶选择指南

产品名称 常规 高产 热启动 高CC 高保真度 Long 多路复用
DNA Free -Taq DNA 聚合酶 0
C-Taq DNA聚合酶 0
DNA Free -HotTaq DNA 聚合酶 0
DNA Free -DuoTaq DNA 聚合酶 0 0
DNA Free -DuoHotTaq DNA 聚合酶 0 0
DNA Free -DLRTaq DNA 聚合酶 0 0
DNA Free -Pfu DNA 聚合酶 0
DNA Free -Quantum Pfu DNA 聚合酶 0 0
DNA Free -Multiplex Master Mix 0 0