尿粪隐血检测试剂盒(联苯胺法)|Urine Fecal Occult Blood Test Kit

发表于2024年9月13日由上海金畔生物科技有限公司

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FAQ

COA

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产品描述

隐血即胃肠道少量出血，此时粪便中有少量红细胞被破坏，该现象肉眼及显微镜均不能证实，但可通过相应方法检测出其有无。本试剂盒通过联苯胺法对尿粪样本进行检测，其检测原理是：隐血中血红蛋白有拟过氧化酶作用，可催化过氧化氢释放新生态氧，后者将邻联甲苯胺氧化成蓝色。此外，本品对慢性消化道出血，如：消化性溃疡，药物对胃粘膜的损伤、肠结核、克隆病等和消化道恶性肿瘤（如：胃癌、结肠癌等）的筛选均具有重要价值。

本试剂盒适合用于人的粪便类样本的测定，可进行100个样本的测试。

产品组分

组分编号	组分名称	规格	保存方式
60403-A	试剂一（邻联甲苯胺液）	10 mL	4℃避光保存
60403-B	试剂二（过氧化氢液）	10 mL	4℃保存

运输与保存方法

常温运输。4℃保存。

注意事项

1）实验前自备白瓷板。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！

操作方法*

1）滴加试剂一（邻联甲苯胺溶液）2-3滴于白瓷板上；

2）滴加试剂二（过氧化氢）1-2滴；

3）如不变色，立即挑取粪便少许与上述试剂混合；

4）观察结果。

【注】：或先将粪便涂于白瓷板上（或白色滤纸）上，滴加试剂一（邻联甲苯胺液），再滴加试剂二（过氧化氢液），观察结果。

结果判定

阴性（-）：	3 min后不显蓝绿色
弱阳性（+）：	30-60 s内显蓝色
阳性（++）：	立即显蓝绿色
强阳性（+++）：	立即显深蓝色

HB190114

[1] Cui M, Sun T, Li S, et al. NIR light-responsive bacteria with live bio-glue coatings for precise colonization in the gut. Cell Rep. 2021;36(11):109690. doi:10.1016/j.celrep.2021.109690(IF:9.423)
[2] Li DP, Cui M, Tan F, Liu XY, Yao P. High Red Meat Intake Exacerbates Dextran Sulfate-Induced Colitis by Altering Gut Microbiota in Mice. Front Nutr. 2021;8:646819. Published 2021 Jul 20. doi:10.3389/fnut.2021.646819(IF:6.576)
[3] Jiang Z, Mu W, Yang Y, et al. Cadmium exacerbates dextran sulfate sodium-induced chronic colitis and impairs intestinal barrier. Sci Total Environ. 2020;744:140844. doi:10.1016/j.scitotenv.2020.140844(IF:6.551)
[4] Zhu H, Lu C, Gao F, et al. Selenium-enriched Bifidobacterium longum DD98 attenuates irinotecan-induced intestinal and hepatic toxicity in vitro and in vivo. Biomed Pharmacother. 2021;143:112192. doi:10.1016/j.biopha.2021.112192(IF:6.530)
[5] Xiao T, Zhang P, Feng T, et al. Butyrate functions in concert with myeloid-derived suppressor cells recruited by CCR9 to alleviate DSS-induced murine colitis. Int Immunopharmacol. 2021;99:108034. doi:10.1016/j.intimp.2021.108034(IF:4.932)
[6] Zhang H, Li X, Xu H, Ran F, Zhao G. Effect and safety evaluation of tacrolimus and tripterygium glycosides combined therapy in treatment of Henoch-Schönlein purpura nephritis. Int J Urol. 2021;28(11):1157-1163. doi:10.1111/iju.14665(IF:3.369)
[7] Zhang X, Zhang G, Ren Y, et al. Darunavir alleviates irinotecan-induced intestinal toxicity in Vivo. Eur J Pharmacol. 2018;834:288-294. doi:10.1016/j.ejphar.2018.07.044(IF:3.040)
[8] Huang H, Wang X, Zhang X, et al. Ganciclovir reduces irinotecan-induced intestinal toxicity by inhibiting NLRP3 activation. Cancer Chemother Pharmacol. 2020;85(1):195-204. doi:10.1007/s00280-019-03996-y(IF:3.008)
[9] Miao ST, Lu QS, Zhou YJ, Chang YN, Xu T, Zhu MY. Oral administration of octacosanol modulates the gut bacteria and protects the intestinal barrier in ulcerative colitis mice [published online ahead of print, 2022 Jun 23]. J Food Biochem. 2022;e14284. doi:10.1111/jfbc.14284(IF:2.720)
[10] Zhao D, Dai W, Tao H, Zhuang W, Qu M, Chang YN. Polysaccharide isolated from Auricularia auricular-judae (Bull.) prevents dextran sulfate sodium-induced colitis in mice through modulating the composition of the gut microbiota. J Food Sci. 2020;85(9):2943-2951. doi:10.1111/1750-3841.15319(IF:2.479)

产品描述

本试剂盒适合用于人的粪便类样本的测定，可进行100个样本的测试。

产品组分

组分编号	组分名称	规格	保存方式
60403-A	试剂一（邻联甲苯胺液）	10 mL	4℃避光保存
60403-B	试剂二（过氧化氢液）	10 mL	4℃保存

运输与保存方法

常温运输。4℃保存。

注意事项

1）实验前自备白瓷板。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！

操作方法*

1）滴加试剂一（邻联甲苯胺溶液）2-3滴于白瓷板上；

2）滴加试剂二（过氧化氢）1-2滴；

3）如不变色，立即挑取粪便少许与上述试剂混合；

4）观察结果。

【注】：或先将粪便涂于白瓷板上（或白色滤纸）上，滴加试剂一（邻联甲苯胺液），再滴加试剂二（过氧化氢液），观察结果。

结果判定

阴性（-）：	3 min后不显蓝绿色
弱阳性（+）：	30-60 s内显蓝色
阳性（++）：	立即显蓝绿色
强阳性（+++）：	立即显深蓝色

HB190114

Q：这个粪便隐血试剂盒上面的说明，写的是适合于人的粪便类样本，小鼠的不可以测吗？

A：我们基于人的样本研发的，不推荐用于其他物种，但也有客户用过小鼠并发了文章，客户不介意的话也可以使用

Q：小鼠的粪便，为什么空白对照组也显示阳性？

A：小鼠饮食问题引起的，比如高脂饲料喂养等，建议：在不影响实验的前提下，检测前3-4天禁食高脂饲料

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

发表于2024年9月13日由上海金畔生物科技有限公司

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

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白细胞介素12（IL-12）是一种异二聚体多效性细胞因子，由p40亚基和p35亚基组成，IL-12 p40亚基由IL-23共享。IL-23是另一种异二聚体细胞因子，由一个独特的 p19 亚基和 IL-12 的 p40 亚基组成，具有与IL-12相似和不同的生物活性。IL-12由巨噬细胞和B细胞产生，已被证明对T细胞和自然杀伤（NK）细胞有多种作用。IL-23由活化的树突状细胞和巨噬细胞分泌，并通过IL-23R与IL-12Rβ1复合的受体发出信号。IL-23已被证明能增强记忆性T细胞的增殖。

翌圣Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的小鼠p40(Mouse IL-12/IL-23 p40)。特异性抗小鼠p40抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的小鼠p40与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠p40的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。

产品信息

货号	98026ES48 / 98026ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	31.25-2000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	14.87 pg/mL
稀释线性	89 – 124%
回收率	94 – 107%
板内差	4.6%
板间差	5.2%

实验数据

标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

标准曲线图

浓度（pg/mL）	显色值		平均值	校准值
2000	1.967	1.883	1.925	1.925
1000	1.143	1.094	1.118	1.117
500	0.655	0.643	0.649	0.657
250	0.419	0.413	0.416	0.399
125	0.266	0.221	0.243	0.256
62.5	0.190	0.170	0.180	0.178
31.25	0.137	0.130	0.134	0.135
0	0.086	0.084	0.085	/

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

灵敏度检测

IL-12/IL-23 p40的最低检测限为14.87 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
样本	8	8	8	30	30	30
平均值	764.4	202.1	82.0	780.6	197.6	80.5
标准差	36.0	8.4	4.1	37.8	8.4	5.2
变异系数（%）	4.7	4.2	5.0	4.8	4.3	6.5

回收率检测

通过不同水平的IL-12/IL-23 p40添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	98.3	94.4-103.8
细胞培养上清	101.8	95.7-106.8

稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	109.9	102.4-117.9
1:04	106.0	93.3-112.9
1:08	109.4	101.5-116.0
1:16	113.0	101.0-121.7

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	108.7	99.0-116.3
1:04	110.2	97.2-124.0
1:08	111.4	103.8-119.0
1:16	100.7	89.2-116.3

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	93.5	91.7-95.7
1:04	94.7	91.3-99.9
1:08	101.1	96.8-108.8
1:16	102.8	96.5-107.2

样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	8	160.1	157.1-171.9
细胞培养上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠p40。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
GM-CSF	IL-6	IFN-γ
IFN-γ	IL-10	IL-1α
IL-1α	IL-12	IL-1β
IL-1β	IL-17A	IL-4
IL-2	IL-23	IL-6
IL-3	TNF-α	IL-10
IL-4		IL-17A
IL-5		TNF-α

检测简图

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

疑问解答

问题	造成原因	解决方法
标曲不好	移液量不准确	检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。
标曲不好	稀释方法不恰当	检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。
显色值偏低	孵育时间太短	给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。
显色值偏低	移液量不足或稀释不当	校准移液器和规范操作
CV偏高	酶标板清洗不当	使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。
CV偏高	受污染的洗液	准备新鲜洗液
灵敏度较低	试剂盒储存不当	按照产品组分表进行保存。

产品简介

产品信息

货号	98026ES48 / 98026ES96
规格	48 T / 96 T
检测范围	31.25-2000 pg/mL
检测方法	双抗夹心法
检测时长	4.5小时
灵敏度	14.87 pg/mL
稀释线性	89 – 124%
回收率	94 – 107%
板内差	4.6%
板间差	5.2%

实验数据

标曲数据

数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。

标准曲线图

浓度（pg/mL）	显色值		平均值	校准值
2000	1.967	1.883	1.925	1.925
1000	1.143	1.094	1.118	1.117
500	0.655	0.643	0.649	0.657
250	0.419	0.413	0.416	0.399
125	0.266	0.221	0.243	0.256
62.5	0.190	0.170	0.180	0.178
31.25	0.137	0.130	0.134	0.135
0	0.086	0.084	0.085	/

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

灵敏度检测

IL-12/IL-23 p40的最低检测限为14.87 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次，评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测30次，评估酶标板间的精密度。

项目	板内精密度			板间精密度
样本	1	2	3	1	2	3
样本	8	8	8	30	30	30
平均值	764.4	202.1	82.0	780.6	197.6	80.5
标准差	36.0	8.4	4.1	37.8	8.4	5.2
变异系数（%）	4.7	4.2	5.0	4.8	4.3	6.5

回收率检测

通过不同水平的IL-12/IL-23 p40添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:

样本类型	平均回收率(%)	范围（%）
血清	98.3	94.4-103.8
细胞培养上清	101.8	95.7-106.8

稀释线性检测

血清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	109.9	102.4-117.9
1:04	106.0	93.3-112.9
1:08	109.4	101.5-116.0
1:16	113.0	101.0-121.7

血浆稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	108.7	99.0-116.3
1:04	110.2	97.2-124.0
1:08	111.4	103.8-119.0
1:16	100.7	89.2-116.3

细胞培养上清稀释比例	平均期望值(%)	范围（%）
1:02	93.5	91.7-95.7
1:04	94.7	91.3-99.9
1:08	101.1	96.8-108.8
1:16	102.8	96.5-107.2

样本值

应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。

样本类型	样本数目	平均值（pg/mL）	样本值（pg/mL）
血清	8	160.1	157.1-171.9
细胞培养上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠p40。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
GM-CSF	IL-6	IFN-γ
IFN-γ	IL-10	IL-1α
IL-1α	IL-12	IL-1β
IL-1β	IL-17A	IL-4
IL-2	IL-23	IL-6
IL-3	TNF-α	IL-10
IL-4		IL-17A
IL-5		TNF-α

检测简图

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

疑问解答

问题	造成原因	解决方法
标曲不好	移液量不准确	检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。
标曲不好	稀释方法不恰当	检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。
显色值偏低	孵育时间太短	给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。
显色值偏低	移液量不足或稀释不当	校准移液器和规范操作
CV偏高	酶标板清洗不当	使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。
CV偏高	受污染的洗液	准备新鲜洗液
灵敏度较低	试剂盒储存不当	按照产品组分表进行保存。

Mouse IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit|IL-12/IL-23 p40体外酶联免疫吸附测定试剂盒

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辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒|Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit

发表于2024年9月13日由上海金畔生物科技有限公司

辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒|Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）是一种分子量约为61 kDa的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物萤光。海肾萤光素酶（Renilla luciferase）是一种分子量约为36 kDa的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化腔肠素（coelenterazine）氧化成coelenteramide，在氧化的过程中会发出波长为480nm左右的生物萤光。两种生物萤光都可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：

辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒|Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit

图1：萤火虫和海肾萤光素酶检测原理图

Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit是一种辉光型双萤光素酶报告基因检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点。本试剂盒中含有高纯度的萤火虫萤光素和腔肠素，在同一个样品中先以萤火虫萤光素为底物检测萤火虫萤光素酶，后淬灭萤火虫萤光素酶的萤光信号，并同时以腔肠素为底物检测海肾萤光素酶，实现双萤光素酶报告基因检测。海肾萤光素酶作为内参，消除了因孔间细胞数量、转染效率不同等造成的影响，使得检测结果的准确性更高。

相对于闪光型Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit（Cat NO.11402），本品具有以下优点：1）发光信号更稳定性，为实验设计提供了更大的灵活性。2）更符合高通量检测，无需依赖自动进样器，并且无需弃培养液、离心等步骤，大大的简化了实验流程。3）无明显刺激性气味。本试剂盒可用于多种常用细胞培养液：RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等，其半衰期均为2h左右（22℃），满足绝大多数高通量实验需求。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	11405JP60（100 T）	11405JP80（1000 T）
11405-A	D-辉光型萤火虫萤光素酶缓冲液	10 mL	100 mL
11405-B	D-辉光型萤火虫萤光素酶底物	1 vial	1 viaL
11405-C	D-辉光型海肾萤光素酶缓冲液	10 mL	100 mL
11405-D	D-辉光型海肾萤光素酶底物(100×)	100 μL	1 mL

运输与保存方式

干冰运输。未拆封试剂盒-20℃保存，有效期1年。

溶解分装后的D-辉光型萤火虫和海肾萤光素酶底物于-70℃避光保存1年，或-20℃短期保存不超过1个月。

使用说明

1.需自备的材料

单/多道移液器；不透光细胞培养白板；化学发光仪或带化学发光检测模块的酶标仪。

2.检测试剂准备

1）萤火虫萤光素酶检测试剂：首次使用时将D-辉光型萤火虫萤光素酶缓冲液一次性全部倒入D-辉光型萤火虫萤光素酶底物瓶中，充分混匀直至底物完全溶解。按使用需求分装，建议-70℃长期保存或-20℃保存不超过一个月。

2）海肾萤光素酶检测试剂：根据实际使用量，以100:1的比例将适量的D-辉光型海肾萤光素酶缓冲液与D-辉光型海肾萤光素酶底物(100×) 混匀，室温避光备用（例如：如果需要100 mL缓冲液，则需要加入1 mL的底物），建议现配现用。

注：1）两种缓冲液都可以4℃，室温或水浴融化，但温度不能超过25℃。

2）D-辉光型海肾萤光素酶底物(100×)，每次开盖前需进行短暂低速离心。

3.操作步骤

1）从细胞培养箱中取出含哺乳动物细胞的培养板，放置5-15 min，平衡至室温。

2）萤火虫萤光素酶活性检测：

①加入与待测细胞培养液等体积并平衡至室温的萤火虫萤光素酶检测试剂（例如，96孔板建议加入80 μl培养液，相应加入80 μl检测试剂；384孔板通常加入20 μl培养液，相应加入20 μl检测试剂）。

②在水平摇床上室温混匀至少10 min。（注：不要用移液器吹吸混匀，产生的气泡会影响发光检测读数。）

③在化学发光检测仪或带化学发光模块的多功能酶标仪上检测萤火虫萤光素酶发光信号，加入检测试剂后2 h内完成检测。

3）海肾萤光素酶活性检测：

①加入平衡至室温的海肾萤光素酶检测试剂，加样体积与初始细胞培养液体积相同并充分混匀。（例如，96孔板建议加入80 μl培养液，相应加入80 μl检测试剂；384孔板通常加入20 μl培养液，相应加入20 μl检测试剂）。

②在水平摇床上室温混匀至少10 min。

③在化学发光检测仪或带化学发光模块的多功能酶标仪上检测海肾萤光素酶发光信号，加入检测试剂后2 h内完成检测。海肾萤光素酶在微孔板上的检测顺序应与萤火虫萤光素酶的检测顺序相同。

4）数据分析：

①实验设计：根据不同实验目的，在每个培养板中都应设置空白对照组，实验组和对照组。

a.空白对照组

背景F：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂。

背景R：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂+海肾萤光素酶检测试剂。

注：用于空白对照组样品量必须与实验样品量相同，并且包含与实验样品相同的培养基/血清组合。

b.实验组：转染细胞经实验化合物处理(即实验组F和实验组R)。

c.对照组：转染细胞不经处理，用以标准化结果(即对照组F和对照组R)。

②计算结果：实验组比值=(实验组F-背景F）/(实验组R-背景R)，对照组比值=(对照组F-背景F）/(对照组R-背景R)。

表达倍数=实验组比值/对照组比值。

注意事项

1）反应温度：酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养液平衡至室温（20-25℃）。

2）检测仪器：能检测化学发光的仪器都适用，但由于不同仪器的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同。

3）检测板：为防止孔间干扰，推荐使用不透光细胞培养白板。

4）检测设置：Luminescence，350-700 nm，建议读板时间设为0.5-1 sec。

5）发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，应确保同组内不同样本检测条件一致。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。

相关产品

产品名称	货号	规格
Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒	11401JP60/76/80	100/500/1000T
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pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control pGM-CMV-Luc萤光素酶报告基因质粒阳性对照	11556JP03	1μg
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Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒	10911JP20	20T
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液	10149JP08	5ml
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞	11802JP80	10×100μl
Fetal Bovine Serum Origin South America Gold胎牛血清（南美特级）	40130JP76	500ml
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent脂质体核酸转染试剂	40802JP03	1ml

HB220325

辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒|Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit

图1：萤火虫和海肾萤光素酶检测原理图

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	11405JP60（100 T）	11405JP80（1000 T）
11405-A	D-辉光型萤火虫萤光素酶缓冲液	10 mL	100 mL
11405-B	D-辉光型萤火虫萤光素酶底物	1 vial	1 viaL
11405-C	D-辉光型海肾萤光素酶缓冲液	10 mL	100 mL
11405-D	D-辉光型海肾萤光素酶底物(100×)	100 μL	1 mL

运输与保存方式

干冰运输。未拆封试剂盒-20℃保存，有效期1年。

溶解分装后的D-辉光型萤火虫和海肾萤光素酶底物于-70℃避光保存1年，或-20℃短期保存不超过1个月。

使用说明

1.需自备的材料

单/多道移液器；不透光细胞培养白板；化学发光仪或带化学发光检测模块的酶标仪。

2.检测试剂准备

注：1）两种缓冲液都可以4℃，室温或水浴融化，但温度不能超过25℃。

2）D-辉光型海肾萤光素酶底物(100×)，每次开盖前需进行短暂低速离心。

3.操作步骤

1）从细胞培养箱中取出含哺乳动物细胞的培养板，放置5-15 min，平衡至室温。

2）萤火虫萤光素酶活性检测：

②在水平摇床上室温混匀至少10 min。（注：不要用移液器吹吸混匀，产生的气泡会影响发光检测读数。）

③在化学发光检测仪或带化学发光模块的多功能酶标仪上检测萤火虫萤光素酶发光信号，加入检测试剂后2 h内完成检测。

3）海肾萤光素酶活性检测：

②在水平摇床上室温混匀至少10 min。

4）数据分析：

①实验设计：根据不同实验目的，在每个培养板中都应设置空白对照组，实验组和对照组。

a.空白对照组

背景F：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂。

背景R：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂+海肾萤光素酶检测试剂。

注：用于空白对照组样品量必须与实验样品量相同，并且包含与实验样品相同的培养基/血清组合。

b.实验组：转染细胞经实验化合物处理(即实验组F和实验组R)。

c.对照组：转染细胞不经处理，用以标准化结果(即对照组F和对照组R)。

②计算结果：实验组比值=(实验组F-背景F）/(实验组R-背景R)，对照组比值=(对照组F-背景F）/(对照组R-背景R)。

表达倍数=实验组比值/对照组比值。

注意事项

1）反应温度：酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养液平衡至室温（20-25℃）。

2）检测仪器：能检测化学发光的仪器都适用，但由于不同仪器的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同。

3）检测板：为防止孔间干扰，推荐使用不透光细胞培养白板。

4）检测设置：Luminescence，350-700 nm，建议读板时间设为0.5-1 sec。

5）发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，应确保同组内不同样本检测条件一致。

6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。

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Luciferase Reporter Gene Assay Kit 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒	11401JP60/76/80	100/500/1000T
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HB220325

Q:双荧光素酶报告基因检测试剂盒中的两个底物是否需要避光的？

A:这两个底物操作过程中不需要严格避光。保存的时候避光保存，更重要的保存条件是低温，尤其是腔肠素，推荐-80℃保存。

Q:双荧光素酶报告基因载体共转染时比例该如何进行优化与调整？

A:比例：根据具体实验情况进行调整。建议做预实验：如萤火虫载体与海参载体比例分别用 1:10、1:20、1:50、1:100。萤火虫荧光素酶检测发光值大于海参荧光素酶发光值的比例比较好

Q:萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶的作用及区别？

A:萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）：主报告基因。海肾萤光素酶（ Renilla luciferase ）：内参报告基因。

辉光型双荧光素酶报告基因检测试剂盒|Dual Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit

[1] Yang D, Liu A, Zhang Y, et al. Essential Role of CRIM1 on Endometrial Receptivity in Goat. Int J Mol Sci. 2021;22(10):5323. Published 2021 May 18. doi:10.3390/ijms22105323(IF:5.924)
[2] Shen L, Ji C, Lin J, Yang H. Regulation of circADAMTS6-miR-324-5p-PIK3R3 ceRNA pathway may be a novel mechanism of IL-1β-induced osteoarthritic chondrocytes. J Bone Miner Metab. 2022;40(3):389-401. doi:10.1007/s00774-021-01308-0(IF:2.626)
[3] Chen B, Wang Y, Pei X, Wang S, Zhang H, Peng Y. Cellular Caspase-3 Contributes to EV-A71 2A^pro-Mediated Down-Regulation of IFNAR1 at the Translation Level. Virol Sin. 2020;35(1):64-72. doi:10.1007/s12250-019-00151-y(IF:2.467)
[4] Yang J, Liu B, Xu Z, Feng M. Silencing of Circ_0135889 Restrains Proliferation and Tumorigenicity of Human Neuroblastoma Cells [published online ahead of print, 2022 Jun 27]. J Surg Res. 2022;279:135-147. doi:10.1016/j.jss.2022.05.025(IF:2.192)

MR-GFP报告基因质粒(MR(Mineralocorticoid Receptor) GFP Reporter Plasmid)

发表于2024年9月13日由上海金畔生物科技有限公司

MR-GFP报告基因质粒(MR(Mineralocorticoid Receptor) GFP Reporter Plasmid)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MR-GFP报告基因是翌圣生物自主研发的用于检测MR转录活性水平为目的的报告基因。MR (mineralocorticoid receptor)是核受体家族的一员，通过激素信号的传递和激活醛固醇靶基因的表达，调节多种生理病理反应。

MR-GFP报告基因主要应用于Mineralocorticoid Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMMR-GFP是金畔生物改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个MR结合位点，可以高效地检测MR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得MR-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱

MR-GFP报告基因质粒(MR(Mineralocorticoid Receptor) GFP Reporter Plasmid)

质粒元件信息

MR response element (MR)	32-91
Minimal TA promoter (pTA)	120-142
GFP reporter gene	184-903
SV40 late poly(A) signal	938-1159
SV40 early promoter	1207-1624
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region	1650-2443
Synthetic poly(A) signal	2469-2516
Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region	3632-4491
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	4597-4750

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存。有效期1年。

使用说明

pGMMR-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项

1）本质粒未经金畔生物允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。

2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

3）本产品仅作科研用途！

4）不提供该质粒序列信息。

参考文献
[1] Lee HA, et al. Histone deacetylase inhibition attenuates transcriptional activity of mineralocorticoid receptor through its acetylation and prevents development of hypertension. Circ Res. 112(7):1004-12(2013).
[2] Kosaka H, et al. The L-, N-, and T-type triple calcium channel blocker benidipine acts as an antagonist of mineralocorticoid receptor, a member of nuclear receptor family. Eur J Pharmacol. 635(1-3):49-55(2010).

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HB210825

MR-GFP报告基因主要应用于Mineralocorticoid Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

质粒图谱

MR-GFP报告基因质粒(MR(Mineralocorticoid Receptor) GFP Reporter Plasmid)

质粒元件信息

MR response element (MR)	32-91
Minimal TA promoter (pTA)	120-142
GFP reporter gene	184-903
SV40 late poly(A) signal	938-1159
SV40 early promoter	1207-1624
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region	1650-2443
Synthetic poly(A) signal	2469-2516
Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region	3632-4491
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	4597-4750

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存。有效期1年。

使用说明

pGMMR-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项

1）本质粒未经金畔生物允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。

2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

3）本产品仅作科研用途！

4）不提供该质粒序列信息。

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HB210825

MR-GFP报告基因质粒(MR(Mineralocorticoid Receptor) GFP Reporter Plasmid)

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甲硝唑(灭滴灵) 硝基咪唑类抗生素|Metronidazole|CAS 443-48-1

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

甲硝唑(灭滴灵) 硝基咪唑类抗生素|Metronidazole|CAS 443-48-1

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已发表文献

甲硝唑（Metronidazole）是一种硝基咪唑类抗生素，主要抑制厌氧菌的生长，包括艰难梭菌和脆弱类杆菌。作用机制在于它是一种药物前体，能够选择性的被厌氧菌还原成活体形式，共价结合于DNA，破坏其双螺旋结构，从而诱导DNA链破裂，抑制细菌核酸合成，并最终导致细菌死亡。利用其诱导DNA断裂的特性，它可用来研究DNA损伤和修复。另外，有报道发现它还能够诱导猪痢疾短螺旋体（Brachyspira hyodysenteriae）产生基因转移因子VSH-1。

产品性质

中文别名（Chinese Synonym）	2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇
英文别名（English Synonym）	2-Methyl-5-nitroimidazole-1-ethanol
CAS 号（CAS NO.）	443-48-1
分子式（Molecular Formula）	C₆H₉N₃O₃
分子量（Molecular Weight）	171.15 g/mol
外观（Appearance）	白色或微黄色结晶性粉末
溶解性（Solubility）	溶于0.1 M乙酸（50 mg/mL），微溶于水和乙醇
纯度（Purity）	＞98%
结构式（Structure）

运输与保存方法

冰袋运输。粉末2-8℃避光保存。有效期2年。

注意事项

1. 甲硝唑溶液不可高压灭菌，须滤膜过滤除菌后使用。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并带一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途！

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产品名称	产品编号	规格
Ciprofloxacin hydrochloride 环丙沙星盐酸盐	60201ES05/25/60	5/25/100g
Carbenicillin,Disodium Salt 羧苄青霉素钠	60202ES08/25/60	5/25/100g
Ampicillin,Sodium Salt 氨苄青霉素钠	60203ES10/60	10/100g
Doxycycline hyclate 盐酸强力霉素	60204ES03/08/25	1/5/25g
Chloramphenicol,USP Grade 氯霉素，USP级	60205ES08/25/60	5/25/100g
Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素	60206ES10/60	10/100g
Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐	60210ES25/76	25/500 mg
Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐（USP）	60212ES25/60	25/100g
Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素	60213ES60/80/90	100mg/1g/5g
Gentamycin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素	60214ES03/08/25	1/5/25g
Spectinomycin Hydrochloride 盐酸壮观霉素	60215ES08	5g
盐酸博莱霉素	60216ES60/80	100/10×100mg
Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素	60217ES20/60	20/5×20mg
Blasticidin S 杀稻瘟菌素S （灭瘟素）	60218ES10/60	10/10×10mg
Nystatin 制真菌素	60219ES08	5g
G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素	60220ES03/08	1/5g
Hygromycin B 潮霉素B	60225ES03/10	1/10g
Erythromycin 红霉素	60228ES08/25	5/25g
Timentin 特美汀	60230ES07/32	3.2/10×3.2g
Aureobasidin A （AbA）金担子素A	60231ES03/08/10	1/5×1/10×1mg
Polymyxin B Sulfate 多粘菌素B硫酸盐	60242ES03/10	1/10MU

HB181204

产品性质

中文别名（Chinese Synonym）	2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇
英文别名（English Synonym）	2-Methyl-5-nitroimidazole-1-ethanol
CAS 号（CAS NO.）	443-48-1
分子式（Molecular Formula）	C₆H₉N₃O₃
分子量（Molecular Weight）	171.15 g/mol
外观（Appearance）	白色或微黄色结晶性粉末
溶解性（Solubility）	溶于0.1 M乙酸（50 mg/mL），微溶于水和乙醇
纯度（Purity）	＞98%
结构式（Structure）

运输与保存方法

冰袋运输。粉末2-8℃避光保存。有效期2年。

注意事项

1. 甲硝唑溶液不可高压灭菌，须滤膜过滤除菌后使用。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并带一次性手套操作。

3. 本产品仅作科研用途！

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HB181204

甲硝唑(灭滴灵) 硝基咪唑类抗生素|Metronidazole|CAS 443-48-1

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[1] Jin M, Kong L, Han Y, Zhang S. Gut microbiota enhances the chemosensitivity of hepatocellular carcinoma to 5-fluorouracil in vivo by increasing curcumin bioavailability. Phytother Res. 2021;35(10):5823-5837. doi:10.1002/ptr.7240(IF:5.882)
[2] Qiu Y, Yu J, Li Y, et al. Depletion of gut microbiota induces skeletal muscle atrophy by FXR-FGF15/19 signalling. Ann Med. 2021;53(1):508-522. doi:10.1080/07853890.2021.1900593(IF:4.709)

脱脂奶粉Skim Milk 细菌微生物培养基,WB/ELISA封闭剂|=

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

脱脂奶粉Skim Milk 细菌微生物培养基,WB/ELISA封闭剂|=

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产品描述

脱脂奶粉（Skim Milk）是将鲜牛奶脱去脂肪再干燥而成，常用于微生物培养基的制备，以及用作免疫实验如Western Blot，ELISA的封闭剂。普通脱脂奶粉由于嗜热微生物的存在常引起有偏差的培养结果，因此不适用于细菌培养基。然而本品经特殊喷雾干燥法所得，不含任何嗜热微生物，达到细菌培养级。

脱脂奶粉可单独或者作为一种复杂细菌培养基的添加成分。基于凝固和酪蛋白水解的原理，脱脂奶粉可用于分化鉴定食品和乳制品微生物。常与pH，石蕊和溴甲酚紫混合使用来分析产酸情况，也常与亚甲蓝和刃天青混合使用建立氧化还原指示系统。也可以用作微生物菌种的保藏。

本品用于封闭的常用浓度为5%（v/v）。

产品使用

首先往干粉内加入少量蒸馏水（ddH2O），搅拌成均匀糊团，然后继续加入蒸馏水该干粉将其稀释成10%（w/v）的混合液，此时的溶液等同于新鲜牛奶，需要对其进行高压灭菌121℃，5min。灭菌时需注意温度切勿过高，否则会发生焦糖化现象。

产品性质

外观（Appearance）	乳白或白色粉末
水分（moisture）	＜5%
脂肪含量（Fat content）	≤1.5%
蛋白质（Protein）	≥34%
溶解性（Solubility）	溶于水

运输与保存方法

室温运输。室温密封干燥保存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

[1] Hu LP, Zhou KX, Huo YM, et al. Single-cell RNA sequencing reveals that targeting HSP90 suppresses PDAC progression by restraining mitochondrial bioenergetics. Oncogenesis. 2021;10(3):22. Published 2021 Mar 3. doi:10.1038/s41389-021-00311-4(IF:7.485)
[2] Wang Y, Zhao M, Li W, et al. BMSC-Derived Small Extracellular Vesicles Induce Cartilage Reconstruction of Temporomandibular Joint Osteoarthritis via Autotaxin-YAP Signaling Axis. Front Cell Dev Biol. 2021;9:656153. Published 2021 Apr 1. doi:10.3389/fcell.2021.656153(IF:6.684)
[3] Yang B, Li Y, Zhang R, et al. MOB1A regulates glucose deprivation-induced autophagy via IL6-STAT3 pathway in gallbladder carcinoma. Am J Cancer Res. 2020;10(11):3896-3910. Published 2020 Nov 1. (IF:5.177)
[4] Ding Y, Xia S, Fang H, Niu B, Chen Q. Loureirin B attenuates insulin resistance in HepG2 cells by regulating gluconeogenesis signaling pathway. Eur J Pharmacol. 2021;910:174481. doi:10.1016/j.ejphar.2021.174481(IF:4.432)
[5] Zhou Y, Zhao WJ, Quan W, et al. Dynamic changes of activated AHR in microglia and astrocytes in the substantia nigra-striatum system in an MPTP-induced Parkinson's disease mouse model. Brain Res Bull. 2021;176:174-183. doi:10.1016/j.brainresbull.2021.08.013(IF:4.079)
[6] Qiao CM, Sun MF, Jia XB, et al. Sodium Butyrate Exacerbates Parkinson's Disease by Aggravating Neuroinflammation and Colonic Inflammation in MPTP-Induced Mice Model. Neurochem Res. 2020;45(9):2128-2142. doi:10.1007/s11064-020-03074-3(IF:3.996)
[7] Qiao CM, Sun MF, Jia XB, et al. Sodium butyrate causes α-synuclein degradation by an Atg5-dependent and PI3K/Akt/mTOR-related autophagy pathway. Exp Cell Res. 2020;387(1):111772. doi:10.1016/j.yexcr.2019.111772(IF:3.905)
[8] Shi Y, Qiao CM, Zhou Y, et al. Protective effects of prucalopride in MPTP-induced Parkinson's disease mice: Neurochemistry, motor function and gut barrier. Biochem Biophys Res Commun. 2021;556:16-22. doi:10.1016/j.bbrc.2021.03.109(IF:3.575)
[9] Pan K, Huang X, Jia X. SPARC promotes pancreatic cancer cell proliferation and migration through autocrine secretion into the extracellular milieu. Oncol Lett. 2021;21(6):485. doi:10.3892/ol.2021.12746(IF:2.967)
[10] Wang H, Chen X, Kong N, et al. TRIM21 inhibits porcine epidemic diarrhea virus proliferation by proteasomal degradation of the nucleocapsid protein. Arch Virol. 2021;166(7):1903-1911. doi:10.1007/s00705-021-05080-4(IF:2.574)

产品描述

本品用于封闭的常用浓度为5%（v/v）。

产品使用

产品性质

外观（Appearance）	乳白或白色粉末
水分（moisture）	＜5%
脂肪含量（Fat content）	≤1.5%
蛋白质（Protein）	≥34%
溶解性（Solubility）	溶于水

运输与保存方法

室温运输。室温密封干燥保存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

暂无内容

慢病毒包装试剂盒慢病毒包装辅助质粒混合物|Lentiviral Packaging Kit

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

慢病毒包装试剂盒慢病毒包装辅助质粒混合物|Lentiviral Packaging Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

翌圣慢病毒包装试剂盒（Lentiviral Packaging Kit）由优化的慢病毒包装辅助质粒混合物（Lentiviral Mix）、表达eGFP蛋白的对照质粒和高效转染试剂（HG Transgene^TMReagent）组成，可以兼容第二代和第三代的慢病毒包装质粒，且具有慢病毒包装时间周期短（一周之内即可拿到纯化好的高滴度慢病毒）、病毒滴度高的优势，可应用于针对不同基因和药物靶标的临床前细胞学实验和整体动物实验。非常适合于病毒包装初试者。

产品组分

类别	组分编号	组分名称	储存	产品编号/规格
类别	组分编号	组分名称	储存	41102ES10（10T）	41102ES20（20T）	41102ES40（40T）
Part Ⅰ	41102-A	Lentiviral Mix(1 μg/μL)	-20℃	100 μL	200 μL	400 μL
Part Ⅰ	41102-C	eGFP 对照质粒（Amp⁺）	-20℃	1.5 μg	1.5 μg	1.5 μg
Part Ⅱ	41102-B	HG Transgene^TMReagent	+4℃	0.6 mL	1.2 mL	2×1.2 mL

运输与保存方法

冰袋运输。HG Transgene^TMReagent（41102-B）于4 ℃保存，其余组分(41102-A、41102-C)均于-20℃保存。保质期一年有效。

慢病毒包装所需其他材料（选用）

1）DMEM：Hyclone

2）FBS,GOLD：MP

3）Penicillin-Stretomycin：YEASEN

4）HEK 293T/293FT：慢病毒包装及低度检测所用工具细胞（HEK293T cat.NO.CEH001）

5）Antibiotics：用于稳定转染细胞株筛选，如Puromycin，G418等

6）Competent cells：GMco（Cat：CCE01）

病毒包装前的准备

慢病毒表达载体：包含病毒包装，侵染和将病毒重组基因整合到基因组DNA中以便表达目的基因或者shRNA的基本元件。

DNA溶液的制备：以QIAGEN公司的质粒抽提试剂盒提取慢病毒包装系统中各种质粒DNA，质粒DNA溶于无菌的TE或ddH₂O中，以紫外光吸收法测定其浓度及纯度，保证所提质粒DNA 的A260/A280在1.8～2.0之间。

细胞状态：良好的细胞状态对病毒的包装至关重要，避免细胞培养基有细菌、真菌或支原体的污染，尽量使用传代次数较少的细胞，如果细胞是刚复苏的话，最好传两代之后再包装。

慢病毒包装

翌圣生物慢病毒载体表达系统由pGMLV慢病毒载体和Lentiviral Mix质粒组成。pGMLV慢载体中含有HIV的基本元件5’LTR和3’LTR以及其他辅助元件，例如WPRE和cPPT/CTS等。翌圣可以根据不同的实验目的针对pGMLV载体改造以进行启动

子活性研究、基因表达研究、RNA干扰等研究。Lentiviral Mix能够表达病毒包装需要的各种必需成分如：gag基因，编码病毒主要的结构蛋白；pol基因，编码病毒特异性的酶；rev基因，编码调节gag和pol基因表达的调节因子；还含有单纯疱疹病毒来源的VSV-G基因，提供病毒包装所需要的包膜蛋白，可以兼容第二代和第三代的慢病毒包装质粒。

使用流程

制备编码慢病毒颗粒的重组病毒质粒及其辅助包装原件载体质粒，重组质粒载体和辅助质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，使用HG Transgene^TM Reagent进行共转染293T细胞，转染后18 h 更换为完全培养基，培养48 h后，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液，在293T细胞中测定病毒滴度。在一定滴度范围内的慢病毒颗粒可以满足大部分体内体外实验需求。

1）293T细胞分盘：转染前一天，将已经长好的细胞以合适比例传代到10 cm培养皿中，当细胞长到~80%时准备转染。

2）转染前换液：转染前1~2 h 将需要转染的细胞换新鲜的培养基，12 mL/10 cm皿。注意：293T细胞贴壁性不是很好，换液时应小心滴加尽量避免冲起细胞。

3）转染：取无菌的1.5 mL EP管或15 mL离心管，按下列组分配制反应体系：

无血清DMEM	1 mL
DNA	10 μg
Lentiviral Mix	10 μL(10 μg)
HG Transgene^TM Reagent	60 μL

混匀后，室温放置18 min~20 min后，均匀滴加到提前换过液的培养皿中，后置于CO₂培养箱中培养。

4）换液：转染18~20 h后，小心吸掉细胞培养液弃于盛有消毒液的废液杯中（注意：此时培养基中已含有少量的病毒，必须经处理后才能丢弃，所用的移液枪头等必须经消毒液浸泡处理后才能丢弃），然后加15 mL新鲜的培养基（也可根据实验要求换为无血清的DMEM）继续培养。

5）病毒收集：换液48 h后，吸取细胞上清液于50 mL离心管，4℃，500 g离心5 min，上清液用0.45 μm滤器过滤后转移到新的离心管中。此时上清液中的病毒颗粒可以直接去检测滴度或者感染目的细胞，如果对病毒的滴度及纯度有较高要求，可对上清液进行浓缩与纯化。

6）病毒分装与保存：将病毒以40~50 μL分装，后保存于-80℃。

注意事项

1）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

2）本产品仅作科研用途！

HB220803

产品描述

产品组分

类别	组分编号	组分名称	储存	产品编号/规格
类别	组分编号	组分名称	储存	41102ES10（10T）	41102ES20（20T）	41102ES40（40T）
Part Ⅰ	41102-A	Lentiviral Mix(1 μg/μL)	-20℃	100 μL	200 μL	400 μL
Part Ⅰ	41102-C	eGFP 对照质粒（Amp⁺）	-20℃	1.5 μg	1.5 μg	1.5 μg
Part Ⅱ	41102-B	HG Transgene^TMReagent	+4℃	0.6 mL	1.2 mL	2×1.2 mL

运输与保存方法

冰袋运输。HG Transgene^TMReagent（41102-B）于4 ℃保存，其余组分(41102-A、41102-C)均于-20℃保存。保质期一年有效。

慢病毒包装所需其他材料（选用）

1）DMEM：Hyclone

2）FBS,GOLD：MP

3）Penicillin-Stretomycin：YEASEN

4）HEK 293T/293FT：慢病毒包装及低度检测所用工具细胞（HEK293T cat.NO.CEH001）

5）Antibiotics：用于稳定转染细胞株筛选，如Puromycin，G418等

6）Competent cells：GMco（Cat：CCE01）

病毒包装前的准备

慢病毒表达载体：包含病毒包装，侵染和将病毒重组基因整合到基因组DNA中以便表达目的基因或者shRNA的基本元件。

慢病毒包装

使用流程

1）293T细胞分盘：转染前一天，将已经长好的细胞以合适比例传代到10 cm培养皿中，当细胞长到~80%时准备转染。

2）转染前换液：转染前1~2 h 将需要转染的细胞换新鲜的培养基，12 mL/10 cm皿。注意：293T细胞贴壁性不是很好，换液时应小心滴加尽量避免冲起细胞。

3）转染：取无菌的1.5 mL EP管或15 mL离心管，按下列组分配制反应体系：

无血清DMEM	1 mL
DNA	10 μg
Lentiviral Mix	10 μL(10 μg)
HG Transgene^TM Reagent	60 μL

混匀后，室温放置18 min~20 min后，均匀滴加到提前换过液的培养皿中，后置于CO₂培养箱中培养。

6）病毒分装与保存：将病毒以40~50 μL分装，后保存于-80℃。

注意事项

1）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

2）本产品仅作科研用途！

HB220803

Q:慢病毒包装试剂盒中是否含有 pGMLV 慢病毒载体？稳转怎么筛选？还需要再额外购买其他质粒吗？

A: 含有该载体；稳转筛选所用为Puromycin，G418；后期分选为荧光筛选；只需要客户另外准备目的质粒。

Q: 慢病毒包装试剂盒中 pGMLV 慢病毒载体，有质粒（阳性对照）序列吗？

A: 慢病毒包装，一般用三质粒或者四质粒系统，分别构建病毒的不同组件，我们的慢病毒包装试剂盒，提供阳性对照的质粒，但是：（1）质粒序列都不提供；（2）质粒的酶切位点不能提供。

Q：为什么容易个试剂盒包装的病毒感染成功了，有的却感染不成功？

A：

质粒构建有问题，如果不是同一个质粒，可以质粒测序确定质粒是否正确，是否有移码或者脱靶问题
如果质粒没问题，可能是慢病毒载体不正确导致病毒包装不成功，我们试剂盒是兼容二代，三代的慢病毒载体
如果以上两种都没问题，可能是感染的细胞是悬浮细胞或者是贴壁不牢的细胞，可以使用聚凝胺增加病毒感染率或者是使用腺病毒包装

Q:转染试剂放-20了，还可以再用吗？

A：不建议用了，转染试剂是脂质体的，不能冰冻。

[1] Bai D, Du J, Bu X, et al. ALDOA maintains NLRP3 inflammasome activation by controlling AMPK activation. Autophagy. 2022;18(7):1673-1693. doi:10.1080/15548627.2021.1997051(IF:16.016)
[2] Hu P, Li H, Sun W, et al. Cholesterol-associated lysosomal disorder triggers cell death of hematological malignancy: Dynamic analysis on cytotoxic effects of LW-218. Acta Pharm Sin B. 2021;11(10):3178-3192. doi:10.1016/j.apsb.2021.02.004(IF:11.614)
[3] Xu C, Wu J, Wu Y, et al. TNF-α-dependent neuronal necroptosis regulated in Alzheimer's disease by coordination of RIPK1-p62 complex with autophagic UVRAG. Theranostics. 2021;11(19):9452-9469. Published 2021 Sep 13. doi:10.7150/thno.62376(IF:11.556)
[4] Hu P, Wang J, Qing Y, et al. FV-429 induces autophagy blockage and lysosome-dependent cell death of T-cell malignancies via lysosomal dysregulation. Cell Death Dis. 2021;12(1):80. Published 2021 Jan 13. doi:10.1038/s41419-021-03394-4(IF:8.469)
[5] Qing Y, Li H, Zhao Y, et al. One-Two Punch Therapy for the Treatment of T-Cell Malignancies Involving p53-Dependent Cellular Senescence. Oxid Med Cell Longev. 2021;2021:5529518. Published 2021 Sep 21. doi:10.1155/2021/5529518(IF:6.543)
[6] Cao B, Deng H, Cui H, et al. Knockdown of PGM1 enhances anticancer effects of orlistat in gastric cancer under glucose deprivation. Cancer Cell Int. 2021;21(1):481. Published 2021 Sep 10. doi:10.1186/s12935-021-02193-3(IF:5.722)
[7] Qing Y, Wang X, Wang H, et al. Pharmacologic targeting of the P-TEFb complex as a therapeutic strategy for chronic myeloid leukemia. Cell Commun Signal. 2021;19(1):83. Published 2021 Aug 9. doi:10.1186/s12964-021-00764-5(IF:5.712)
[8] Gao Z, Zhong M, Ye Z, et al. PAK3 promotes the metastasis of hepatocellular carcinoma by regulating EMT process. J Cancer. 2022;13(1):153-161. Published 2022 Jan 1. doi:10.7150/jca.61918(IF:4.207)

蛋白酶K(Proteinase K) 蛋白酶k水溶液

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

蛋白酶K(Proteinase K) 蛋白酶k水溶液

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

Proteinase K（蛋白酶 K）是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶，其相对分子量约为29 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。Proteinase K 应用广泛，可用于制备脉冲电泳的染色体 DNA，蛋白质印迹以及去除 DNA 和 RNA制备中的核酸酶等实验，而变性剂如 SDS（1%）可提高其活性，常用工作浓度为 50-100 µg/mL，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH、温度等因素确定具体的工作浓度。

产品信息

货号	10401JP60/ 10401JP80 /10401JP95/ 10401JP98
规格	100 mg /1 g/10 g/100 g

组分性质

1）本品来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album)；

2）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg 蛋白；

3）不含 RNase 和 DNase；

4）在尿素和 SDS 中活性稳定存在；

5）在较广的 pH 范围内（pH 4.5 – 12.5）均有活性，最佳 pH 范围为 pH 7.0 – 12.0；

6）反应条件：反应缓冲液中 37℃ – 65℃温育 1 h。推荐反应温度选择 65℃；

7）活力单位定义：在规定条件下，每分钟水解酪蛋白生成 1 μmol L-酪氨酸所需的酶量；

8）失活方法：反应体系中加入 PMSF 或 DFIP 抑制剂即可失活。

储存条件

-25～-15 ℃干燥储存，有效期 3 年

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）启用后如需反复使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。

3）本产品仅作科研用途！

使用说明

1. 20-40 mg/mL Proteinase K 储存液的配制

1）将干粉溶解于稀释缓冲液中，配制成 40-80 mg/mL 原液；

【注】：稀释缓冲液配方：20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl₂。

2）使用低蛋白吸附的 0.22 µm 滤器过滤除菌；

3）加入等体积无菌甘油，配制成含 50%甘油的 Proteinase K 储存液。

【注】：Proteinase K 储存液 4℃保存2年。若需反复使用，需分装保存。

2. 按照核酸提取说明书添加指定量Proteinase K储存液即可。

Ver.CN20231201

[1] Li W, Qiu S, Chen J, et al. Chimeric Antigen Receptor Designed to Prevent Ubiquitination and Downregulation Showed Durable Antitumor Efficacy. Immunity. 2020;53(2):456-470.e6. doi:10.1016/j.immuni.2020.07.011(IF:22.553)
[2] Zhang Z, Mou Z, Xu C, et al. Autophagy-associated circular RNA hsa_circ_0007813 modulates human bladder cancer progression via hsa-miR-361-3p/IGF2R regulation. Cell Death Dis. 2021;12(8):778. Published 2021 Aug 7. doi:10.1038/s41419-021-04053-4(IF:8.469)
[3] Ni H, Qin H, Sun C, et al. MiR-375 reduces the stemness of gastric cancer cells through triggering ferroptosis. Stem Cell Res Ther. 2021;12(1):325. Published 2021 Jun 5. doi:10.1186/s13287-021-02394-7(IF:6.832)
[4] Chen S, Jia Z, Cai M, et al. SP1-Mediated Upregulation of Long Noncoding RNA ZFAS1 Involved in Non-syndromic Cleft Lip and Palate via Inactivating WNT/β-Catenin Signaling Pathway. Front Cell Dev Biol. 2021;9:662780. Published 2021 Jun 29. doi:10.3389/fcell.2021.662780(IF:6.684)
[5] Ma J, Chen S, Hao L, et al. Hypermethylation-mediated down-regulation of lncRNA TBX5-AS1:2 in Tetralogy of Fallot inhibits cell proliferation by reducing TBX5 expression. J Cell Mol Med. 2020;24(11):6472-6484. doi:10.1111/jcmm.15298(IF:4.486)
[6] Shi L, Gong Y, Zhuo L, Wang S, Chen S, Ke B. Methyltransferase-like 3 upregulation is involved in the chemoresistance of non-small cell lung cancer. Ann Transl Med. 2022;10(3):139. doi:10.21037/atm-21-6608(IF:3.932)
[7] Ma J, Chen S, Hao L, et al. Long non-coding RNA SAP30-2:1 is downregulated in congenital heart disease and regulates cell proliferation by targeting HAND2. Front Med. 2021;15(1):91-100. doi:10.1007/s11684-020-0778-5(IF:3.297)
[8] Huang Q, Xie Y, Yang Z, et al. The cytoplasmic loops of AgrC contribute to the quorum-sensing activity of Staphylococcus aureus. J Microbiol. 2021;59(1):92-100. doi:10.1007/s12275-021-0274-x(IF:2.845)
[9] Guo T, Xing Y, Chen Z, et al. Core-binding factor beta is required for osteoblast differentiation during fibula fracture healing. J Orthop Surg Res. 2021;16(1):313. Published 2021 May 14. doi:10.1186/s13018-021-02410-9(IF:2.359)
[10] Zhang W, Zhang T, Yan Y, et al. Exosomal miR-22-3p Derived from Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps Regulates Vascular Permeability by Targeting VE-Cadherin. Biomed Res Int. 2020;2020:1237678. Published 2020 Nov 12. doi:10.1155/2020/1237678(IF:2.276)
[11] Cheng L, Yi X, Shi Y, et al. Abnormal lipid metabolism induced apoptosis of spermatogenic cells by increasing testicular HSP60 protein expression. Andrologia. 2020;52(11):e13781. doi:10.1111/and.13781(IF:1.951)
[12] Zhang T, Zhou Y, You B, et al. miR-30a-5p Inhibits Epithelial-to-Mesenchymal Transition by Targeting CDK6 in Nasal Polyps. Am J Rhinol Allergy. 2021;35(2):152-163. doi:10.1177/1945892420939814(IF:1.943)

产品简介

产品信息

货号	10401JP60/ 10401JP80 /10401JP95/ 10401JP98
规格	100 mg /1 g/10 g/100 g

组分性质

1）本品来源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album)；

2）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg 蛋白；

3）不含 RNase 和 DNase；

4）在尿素和 SDS 中活性稳定存在；

5）在较广的 pH 范围内（pH 4.5 – 12.5）均有活性，最佳 pH 范围为 pH 7.0 – 12.0；

6）反应条件：反应缓冲液中 37℃ – 65℃温育 1 h。推荐反应温度选择 65℃；

7）活力单位定义：在规定条件下，每分钟水解酪蛋白生成 1 μmol L-酪氨酸所需的酶量；

8）失活方法：反应体系中加入 PMSF 或 DFIP 抑制剂即可失活。

储存条件

-25～-15 ℃干燥储存，有效期 3 年

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）启用后如需反复使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷冻或者配制成溶液后过滤除菌分装保存。

3）本产品仅作科研用途！

使用说明

1. 20-40 mg/mL Proteinase K 储存液的配制

1）将干粉溶解于稀释缓冲液中，配制成 40-80 mg/mL 原液；

【注】：稀释缓冲液配方：20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl₂。

2）使用低蛋白吸附的 0.22 µm 滤器过滤除菌；

3）加入等体积无菌甘油，配制成含 50%甘油的 Proteinase K 储存液。

【注】：Proteinase K 储存液 4℃保存2年。若需反复使用，需分装保存。

2. 按照核酸提取说明书添加指定量Proteinase K储存液即可。

Ver.CN20231201

Q：蛋白酶 K 主要有哪些应用？

A：原位杂交样本制备；核酸纯化等实验蛋白质的切割清除。

Human IL-2 重组人白细胞介素-2(人白介素-2)

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

Human IL-2 重组人白细胞介素-2(人白介素-2)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

The human IL-2 protein, also known as interleukin-2, is an important cytokine that plays a vital role in regulating the immune system. It is produced by activated T cells and stimulates the proliferation and activation of various immune cells, such as T cells, B cells, and natural killer cells. IL-2 also promotes the development of immune memory and enhances the effectiveness of the immune response against infections and cancers. In addition, IL-2 has been used therapeutically in the treatment of certain diseases, such as cancer and autoimmune disorders, to boost the immune system.

性能参数

Synonyms	Interleukin-2; T-Cell Growth Factor; TCGF; Aldesleukin
Uniprot No.	P60568
Source	HEK293 cells-derived human IL-2 protein, Ala21-Thr153, with N-terminal his tag.
Molecular Weight	Approximately 17.35 kDa.
Purity	> 90% as determined by SDS-PAGE.
Biological Activity	Human IL-2R immobilized on CM5 chip can bind human IL-2, His tag, with an affinity constant of 3.84 x 10^-7 M as determined in a SPR assay (Biacore 8K).
Endotoxin	< 1 EU per 1μg of the protein by the LAL method.
Formulation	Lyophilized from a 0.2 μm filtered concentrated solution in PBS.
Reconstitution	Centrifuge tubes before opening. Dissolve lyophilized protein with PBS. Recommend to aliquot the protein into smaller quantities when first used and avoid repeated freeze-thaw cycles.

储存条件

The product should be stored at -25~–15℃ for 1 year from date of receipt.

2-7 days, 2 ~8 °C under sterile conditions after reconstitution.

3 months, -25~–15℃ under sterile conditions after reconstitution.

注意事项

1.Please operate with lab coats and disposable gloves, for your safety.

2.This product is for research use only.

产品数据

SDS-PAGE SPR Data

Human IL-2 重组人白细胞介素-2(人白介素-2)

性能参数

Synonyms	Interleukin-2; T-Cell Growth Factor; TCGF; Aldesleukin
Uniprot No.	P60568
Source	HEK293 cells-derived human IL-2 protein, Ala21-Thr153, with N-terminal his tag.
Molecular Weight	Approximately 17.35 kDa.
Purity	> 90% as determined by SDS-PAGE.
Biological Activity	Human IL-2R immobilized on CM5 chip can bind human IL-2, His tag, with an affinity constant of 3.84 x 10^-7 M as determined in a SPR assay (Biacore 8K).
Endotoxin	< 1 EU per 1μg of the protein by the LAL method.
Formulation	Lyophilized from a 0.2 μm filtered concentrated solution in PBS.
Reconstitution	Centrifuge tubes before opening. Dissolve lyophilized protein with PBS. Recommend to aliquot the protein into smaller quantities when first used and avoid repeated freeze-thaw cycles.

储存条件

The product should be stored at -25~–15℃ for 1 year from date of receipt.

2-7 days, 2 ~8 °C under sterile conditions after reconstitution.

3 months, -25~–15℃ under sterile conditions after reconstitution.

注意事项

1.Please operate with lab coats and disposable gloves, for your safety.

2.This product is for research use only.

产品数据

SDS-PAGE SPR Data

Human IL-2 重组人白细胞介素-2(人白介素-2)

暂无内容

Collagenase I 胶原酶I型蛋白酶肽链内切酶

发表于2024年9月12日由上海金畔生物科技有限公司

Collagenase I 胶原酶I型蛋白酶肽链内切酶

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胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型。

在应用上有所偏向：

1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥250 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途!

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS（Hank’s平衡盐溶液，含Ca²⁺、Mg²⁺），轻轻旋涡震荡使其充分溶解，制备成100 mg/mL（即100×）的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌，分装成小份量，然后于-20℃避光冻存。

使用前于冰上解冻，避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为：0.5-2.5 mg/mL，用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL，需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

3）将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛，从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来，未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

[1] Sun X, He X, Zhang Y, et al. Inflammatory cell-derived CXCL3 promotes pancreatic cancer metastasis through a novel myofibroblast-hijacked cancer escape mechanism. Gut. 2022;71(1):129-147. doi:10.1136/gutjnl-2020-322744(IF:23.059)
[2] Tan T, Hu H, Wang H, et al. Bioinspired lipoproteins-mediated photothermia remodels tumor stroma to improve cancer cell accessibility of second nanoparticles. Nat Commun. 2019;10(1):3322. Published 2019 Jul 25. doi:10.1038/s41467-019-11235-4(IF:11.878)
[3] Wang D, Zhao C, Xu F, et al. Cisplatin-resistant NSCLC cells induced by hypoxia transmit resistance to sensitive cells through exosomal PKM2. Theranostics. 2021;11(6):2860-2875. Published 2021 Jan 1. doi:10.7150/thno.51797(IF:11.556)
[4] Yu Q, Han F, Yuan Z, et al. Fucoidan-loaded nanofibrous scaffolds promote annulus fibrosus repair by ameliorating the inflammatory and oxidative microenvironments in degenerative intervertebral discs. Acta Biomater. 2022;148:73-89. doi:10.1016/j.actbio.2022.05.054(IF:8.947)
[5] He R, Shi J, Xu D, et al. SULF2 enhances GDF15-SMAD axis to facilitate the initiation and progression of pancreatic cancer. Cancer Lett. 2022;538:215693. doi:10.1016/j.canlet.2022.215693(IF:8.679)
[6] Wang Y, Sun Q, Ye Y, et al. FGF-2 signaling in nasopharyngeal carcinoma modulates pericyte-macrophage crosstalk and metastasis. JCI Insight. 2022;7(10):e157874. Published 2022 May 23. doi:10.1172/jci.insight.157874(IF:8.315)
[7] Zhang L, Shi J, Du D, et al. Ketogenesis acts as an endogenous protective programme to restrain inflammatory macrophage activation during acute pancreatitis. EBioMedicine. 2022;78:103959. doi:10.1016/j.ebiom.2022.103959(IF:8.143)
[8] Yuan Q, Liang Q, Sun Z, et al. Development of bispecific anti-c-Met/PD-1 diabodies for the treatment of solid tumors and the effect of c-Met binding affinity on efficacy. Oncoimmunology. 2021;10(1):1914954. Published 2021 Jul 21. doi:10.1080/2162402X.2021.1914954(IF:8.110)
[9] Zhan T, Cui S, Shou H, et al. Transcriptome aberration in mice uterus associated with steroid hormone response and inflammation induced by dioxybenzone and its metabolites. Environ Pollut. 2021;286:117294. doi:10.1016/j.envpol.2021.117294(IF:8.071)
[10] Zhang W, Wang H, Yuan Z, et al. Moderate mechanical stimulation rescues degenerative annulus fibrosus by suppressing caveolin-1 mediated pro-inflammatory signaling pathway. Int J Biol Sci. 2021;17(5):1395-1412. Published 2021 Apr 3. doi:10.7150/ijbs.57774(IF:6.582)
[11] Hu D, Shen W, Gong C, et al. Grain-sized moxibustion promotes NK cell antitumour immunity by inhibiting adrenergic signalling in non-small cell lung cancer. J Cell Mol Med. 2021;25(6):2900-2908. doi:10.1111/jcmm.16320(IF:5.310)
[12] Zhao Z, Liang M, He H, et al. Ovalbumin-Induced Allergic Inflammation Diminishes Cross-Linked Collagen Structures in an Experimental Rabbit Model of Corneal Cross-Linking. Front Med (Lausanne). 2022;9:762730. Published 2022 May 26. doi:10.3389/fmed.2022.762730(IF:5.093)
[13] Tao X, Chen Q, Li N, et al. Serotonin-RhoA/ROCK axis promotes acinar-to-ductal metaplasia in caerulein-induced chronic pancreatitis. Biomed Pharmacother. 2020;125:109999. doi:10.1016/j.biopha.2020.109999(IF:4.545)
[14] Liu M, Yang Y, Kang W, et al. Berberine inhibits pancreatic intraepithelial neoplasia by inhibiting glycolysis via the adenosine monophosphate -activated protein kinase pathway. Eur J Pharmacol. 2022;915:174680. doi:10.1016/j.ejphar.2021.174680(IF:4.432)

产品描述

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型。

在应用上有所偏向：

2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；

3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；

4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶，≥250 U/mg solid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃，pH7.5 的条件下，5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存，2年有效。储存液-20℃避光冻存。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途!

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

2．组织的分离

1）使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块；

2）利用含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS洗涤组织块数次；

3）加入足量的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS，使其浸没组织块，并加入胶原酶至需要工作浓度；

4）于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl₂补充消化可以提高消化效率。

5）已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得，收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育；

6）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

7）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3．器官灌注

1）向37℃预热的含Ca²⁺、Mg²⁺的HBSS中加入胶原酶，另添加3 mM的CaCl₂有助于提高分离效率；

2）按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液；

4）利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次；

5）细胞培养液重悬上述细胞，利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6）于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

HB221202

Q：只用于分离细胞，选哪种胶原酶合适？

A：对于组织解离，常使用粗制胶原酶制剂，例如弹性蛋白酶，胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等；对于胶原蛋白结构和生物合成研究，常使用更高纯度的胶原酶制剂，不含其他蛋白水解活性。

Q：要把肿瘤细胞分散成单个细胞做流式检测，选择哪一种胶原酶比较适合？需要区分肿瘤发生的部位吗？后续用来做流式，不同消化强度对细胞表面抗原的影响大吗？

A：会影响细胞表面抗原，可以选择对抗原影响较小的胶原酶Ⅲ、胶原酶Ⅳ。

Q：胶原酶使用会受到血清影响吗？

A：胶原不会受到培养细胞所用的血清影响。

Q：胶原酶的使用会受哪些抑制剂影响？

A：胶原酶的抑制剂有 EDTA 、EGTA 等；二是重金属离子（Hg2+,Pb2+,Cd2+）；还有一些化学试剂如 Cysteine、 histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline 等对胶原酶也有抑制作用。

Q：用 PBS 溶解可以吗？用什么工作液浓度溶解？

A：建议在 Hank’s，Earle’s 或者其他平衡盐溶液中溶解，推荐使用工作浓度 0.05 % ~0.5 % (w/v)。

Q：实验过程中消化作用不佳

A：(1)如果是酶活不强或钙离子不足导致，应在低温干燥条件下储存胶原酶，胶原酶溶液分装后冻存(2)如果是钙离子不足导致，应将胶原酶溶液中钙离子浓度设置为 5mM。

Q：使用过程中出现细胞死亡

A：（1）如果是蛋白酶过量，应减少蛋白酶接触时间或是加入白蛋白或灭活血清（2）如果是 pH 改变应使用缓冲液（如 HBSS）；经常检查并重新调节 pH（3）如果氧气太少，应给消化液通无菌空气

Q：实验中出现细胞受损怎么办？

A：如果是蛋白酶过多导致，应减少蛋白酶用量或是加入白蛋白或灭活血清