swant 8181说明书

 

产品：兔抗Hpcal4(hippocalcin-like 4)

 

代码编号：8181

 

批号：1898

 

形式：冻干全血清（不含防腐剂）。

 

数量：200µl。

 

复溶：用200µl双蒸馏水。

 

描述

用N端含有6-his标签的重组小鼠hpcal4免疫家兔，产生抗hpcal4的抗血清。评价抗体的特异性和效价：a）通过生物素-亲和素标记4%多聚甲醛固定大脑的冷冻、振动和石蜡切片，和b）通过免疫印迹。

本品为抗钙结合蛋白Hpcal4[1]的多克隆抗血清，  与hippocalcin相关的传感器EF手家族。这种抗血清以一种*的模式将大脑染色（图1；参见www.brain-map。。ｏｒｇ）。抗血清  通过免疫印迹测定，与啮齿类动物组织中的Hpcal4发生特异性反应 （图2）。

 

 

 

 用抗Hpcal4的抗血清1898孵育的大鼠大脑水平切片的纳米原虫扫描。标记大脑皮层上层和尾壳核(Cpu)。苍白球和丘脑仍未染色。

 

免疫印迹

从大鼠全脑中分离可溶性蛋白的提取物，并通过SDS-PAGE进行分离。在免疫印迹中，抗血清8181可特异性识别22 kDa的条带（箭头）。

 

图2大鼠脑匀浆的免疫印迹。中的箭头表示22 kDa处的条带。

 

 

用途

Hpcal4属于“传感器”钙结合蛋白类。它主要发生在大脑中，在大的神经细胞亚群中（也见Allen大脑图谱（http://www.brain-map。。ｏｒｇ/).

 

 

工作稀释度

免疫组织化学：多聚甲醛(4%)或福尔马林固定组织、冷冻状态或石蜡切片上为1:2'000-1:5'000。

免疫印迹：1:1'000-1:2'000。

对于免疫组织化学和免疫印迹，采用抗生物素蛋白-生物素法测定滴度。我们建议确定宜稀释度  by  滴定实验。

 

储存条件

复溶后，以小份（例如1µl）冷冻并保持在-80 ℃（或至少-20 ℃）。连续使用时，保持在4 ℃（含0.01%叠氮化纳）。避免反复冻融。