intronbio 17141说明书
LPS Extraction Kit
intronbio 17141 | 100 rxn. |
产品信息
描述
能够分离/纯化存在于革兰氏阴性细菌外壁中的LPS的产品
- •革兰氏阴性菌中存在LPS分离/纯化
- •苯酚 – 水型LPS萃取
- •有效去除蛋白质和核酸等污染物
- •有效且易于提取的LPS
- •提取LPS的整个过程多在60分钟内完成
?LPS提取试剂盒是一种可以分离和纯化革兰氏阴性菌外壁中存在的LPS的产品。通常,革兰氏阴性细菌除了在细胞包膜的外层中的磷脂和蛋白质之外还具有称为脂多糖(LPS)的单独结构。这些LPS在细菌生长和存活中起重要作用,并且已知其发挥许多作用,尤其是在宿主和寄生虫之间的相互作用中。此外,LPS被理解为与免疫应答密切相关,例如当施加脓毒性休克时通过分泌内毒素引起外周血管塌陷,并且对于毒性病理生理反应也是重要的。这种LPS对每种细菌具有不同的提取模式,这允许细菌的系统发育分离。如前面提到的,细菌内毒素通常存在于革兰氏阴性细菌细胞的外壁上。它不会在细菌的生命过程中表达,但是当细菌生长或死亡时,细胞壁被破坏并释放到外面。天然内毒素由LPS,蛋白质和磷脂组成。它在自然状态下非常稳定,强热,带负电,并具有大的分子量(超过1,000,000道尔顿)。通常,用三氯艺酸,丁醇或EDTA提取蛋白质以除去脂质相关蛋白(LAP),并使用苯酚提取磷脂。通常,当您尝试提取LPS时,每细菌干重可获得约1-4%的LPS。由于LPS萃取试剂盒基于苯酚水法,
应用
- 01LPS组成和结构的研究
- 02细菌的系统研究
- 03抗生素靶向研究
- 04LPS抑制药物设计研究
- 05碳水化合物抗原免疫反应的研究
套件内容
内容 | 17141(100 Rxn) |
---|---|
裂解缓冲液 | 100毫升x 1 ea |
纯化缓冲液 | 80毫升x 1 ea |
技术数据
LPS提取产率
应变 | LPS产量(μg) | 蛋白质污染* |
---|---|---|
鼠伤寒沙门氏菌 | 200~400 | <0.2μg |
肠炎沙门氏菌 | 90~250 | <0.2μg |
S. gallinarum | 150~450 | <0.2μg |
大肠杆菌(野生型) | 220~490 | <0.2μg |
大肠杆菌(O:055) | 260~510 | <0.2μg |
大肠杆菌(O:111) | 220~500 | <0.2μg |
大肠杆菌(O:1) | 180~380 | <0.2μg |
大肠杆菌(O:2) | 180~380 | <0.2μg |
使用LPS提取试剂盒从OD600的每个G( – )菌株中提取5个LPS,并使用Purpald测定法定量提取的LPS。结果,证实了上述提取效率。另一方面,使用我们的SMART™Micro BCA Assay Kit观察蛋白质的存在,确认污染程度小于0.2μg。
通过从各种物种中提取的LPS给出条带模式
泳道1:鼠伤寒沙门氏菌 泳道2:肠炎沙门氏菌
泳道3:大肠杆菌(O055) 泳道4:大肠杆菌(O111)
泳道5:S. gallinarium 泳道6:肠炎链球菌
泳道7:鼠伤寒沙门氏菌 泳道8 :大肠杆菌(野生型)
泳道9:大肠杆菌(O111) 泳道10:大肠杆菌(O2)
?作为从各种革兰氏阴性菌提取的LPS的SDS-PAGE后的银染色的结果,根据以多聚体形式存在的LPS的特征和多聚体的数量观察到梯型带图案,观察到图案与众不同。