celltechnology APODNA说明书
Apo ssDNA™
An antibody assay to detect DNA Damage (Single Stranded) in apoptotic cells
用于检测凋亡细胞中DNA损伤(单链)的抗体测定
PRODUCT CODE: APODNA
产品描述
介绍
用于评估与细胞凋亡相关的DNA损伤的广泛使用的细胞化学技术是末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位末端标记或TUNEL测定。然而,TUNEL测定法的缺点在于假阳性染色使得测定法不可靠作为细胞凋亡的标记物(参见图1)1-5。细胞凋亡的一种更普遍和特异的标志物是细胞核中的形态学变化,其反映了染色质凝聚成致密质量6-7
进一步的生物化学和细胞化学研究表明凋亡DNA对热变性的易感性增加。通过扫描量热法检测细胞核以检测热诱导的DNA变性和通过电泳分析DNA的片段化分析表明,完整的凋亡DNA在较低温度下易于变性而非非凋亡细胞变性8
主要优点
- 与TUNEL分析相比,更可靠 – 没有假阳性信号。
- 读数 – 流式细胞仪,96孔板读数器,荧光显微镜。
- 产生定量和定性结果。给出了强烈的积极信号。
- 易于使用:结果不到60分钟。
- 无需运行DNA梯度分析来检测细胞中的DNA损伤。
分析原则
Cell Technology推出了Apo ssDNA,这是一种基于抗体的检测方法,用于检测凋亡细胞中的DNA损伤(单链DNA:ssDNA)。
该测定使用针对ssDNA产生的抗体。该抗体仅在凋亡细胞9-12中识别大片热变性ssDNA
图(A)。MAb对凋亡但不是坏死细胞的ssDNA染色。在流式细胞仪上产生在甲酰胺中加热并用MAb F7-26染色的MDA-468细胞的荧光分布。星形孢菌素诱导细胞凋亡,叠氮化na,皂苷或高温诱导坏死。注意,凋亡细胞被MAb强烈染色,而坏死细胞和对照细胞的荧光谱相似。
图(B)。细胞凋亡和坏死细胞的TUNEL染色。在流式细胞仪上产生用TUNEL染色的MDA-468细胞的荧光分布。星形孢菌素诱导细胞凋亡,叠氮化na,皂苷或高温诱导坏死。注意,细胞凋亡早期的细胞(星形孢菌素3小时)被弱染色,而晚期凋亡细胞(星形孢菌素5小时)和坏死细胞被TUNEL 12强烈染色。
套件内容和长期存储
试剂 |
部分# |
温度 |
小鼠抗单链DNA |
部分#1003 |
-70°C等分试样 |
抗小鼠IgM FITC标记 |
部分#2005 |
-20℃下 |
Fixitive |
部分#3033 |
4-8℃下 |
10X洗涤缓冲液 |
部分#3037 |
4-8℃下 |