Haematologic HCV-0100说明书

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Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。

 

Coagulation Factor V

凝血因子V.

 

 

通过α-凝血酶
活化因子V表示α-凝血酶对单链因子V（330,000）的活化。箭头表示凝血酶切割因子V的位点，除了形成Va的重链（94,000）和轻链（74,000）外，还产生两个活化肽（71,000和120,000）。因子Va的重链和轻链仍然存在在钙离子存在下非共价结合。

HCV-0100 Human Factor V

Size

50 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

BCV-1100 Bovine Factor V

Size

100 µg

Formulation

50% glycerol/water (v/v)

 

Storage

-20°C

Purity

>95% by SDS-PAGE

 

Activity Determination

Clotting assay

Shelf Life (properly stored)

6 months

 

 

因子V是一种大的单链血浆糖蛋白，它是血液凝固级联中的必需成分（1）。在凝血过程中，通过丝氨酸蛋白酶α-凝血酶的有限蛋白水解（如上所述），将因子V的因子V转化为活性辅因子因子，并且因子Xa的效率较低。活性辅因子由NH2-末端衍生的重链（Mr = 94,000）和COOH-末端衍生的轻链（Mr = 74,000）组成，其在钙离子存在下保持非共价结合。因子Va用作丝氨酸蛋白酶因子Xa的辅因子。因子Va和Xa以非共价和钙离子依赖性方式在磷脂表面上组装，以形成凝血酶原酶复合物。凝血酶原酶复合物负责将酶原凝血酶原快速转化为活性丝氨酸蛋白酶α-凝血酶。凝血酶原酶复合物的组装相对于单独的因子Xa的速率，凝血酶原转化为凝血酶的速率提高了近300,000倍。通过活化蛋白C使因子Va失活，部分地实现了凝血酶原酶复合物的下调。

如Katzmann及其同事所述，使用免疫亲和层析从新鲜冷冻的人血浆制备人因子V.（2）。使用Nesheim及其同事描述的常规色谱技术从新鲜牛血浆制备牛因子V.（3）。纯化因子V以50％甘油（体积/体积）提供，应储存在-20℃。通过SDS-PAGE分析测定纯度，并在因子V凝固测定中测量活性。

 

凝胶

Novex 4-12％Bis-Tris

加载

人因子V，每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脱氢酶（51 kDa），酒精脱氢酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的）

特别说明

因子V是一种非常不稳定的蛋白质。一些降解的碎片通常在制剂中是显着的。

 

本土化

血浆和血小板

血浆浓度

7.0μg/ ml（人）（4,5）
35μg/ ml（牛）（5）

行动方式

Procofactor; 由凝血酶激活形成活性辅因子，因子Va

分子量

330,000（3） – （根据牛因子V确定）

消光系数

Ë

1％

1厘米，280纳米

 

= 9.6（3） – （根据牛因子V确定）

 

结构体

一个亚基，2196个氨基酸（1,6） – （根据人因子V确定）

碳水化合物百分比

约25％（基于计算的人因子V的分子量）

参考

  • Mann，KG，et al。，Ann。Rev.Biochem。，57,915（1988）。
  • Katzmann，JA，et al。，Proc。国家科。科学院。科学。美国，78,162（1981）。
  • Nesheim，ME，et al。，J.Biol。Chem。，254,508（1979）。
  • Tracy，PB等，Blood，60,59（1982）。
  • Nesheim，ME等人，Methods Enzymol。，80,249（1981）。
  • Jenny，RJ，et al。，Proc。国家科。科学院。科学。美国，84,4846（1987）

出版物

  • Ofosu，F.，et al。，Biochem。J.（1992）283,893-897。（因子V激活）
  • Ainle，F.，et al。，Blood。2009 114：1658-1665（抑制因子V激活）
  • Weeterings，C.，et al。，Blood 2008 112：3227-3233（凝血酶代）
  • Yang，X。等，Biochem。J.（1990）272,399-406（因子V的激活）

 

 

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