Haematologic HCX-GD 说明书

Haematologic HCX-GD 说明书

HTI HCX-GD 

 

Haematologic Technologies,Inc。(HTI)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

Haematologic HCX-GD 说明书

Coagulation Factor X

凝血因子IX

因子X
的结构域结构表示因子X的结构域结构,其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸残基的区域,EGF =含有与人表皮生长因子同源的序列的区域,AP =在酶原转化为时释放的活化肽。活性丝氨酸蛋白酶,催化域=含有丝氨酸蛋白酶催化三联体的区域。箭头表示在酶原激活期间被因子Xase蛋白水解切割的位点。

 

 

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HCX-0050 人因X

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尺寸

100微克,1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

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 HCX-GD Human gla-domainless Factor X 

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

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 BCX-1050 牛因子X

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

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 MCX-5050 Mouse Factor X

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 安全数据表

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尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

凝血试验

保质期(妥善保存)

12个月

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因子X是维生素K依赖性蛋白质酶原,其在肝脏中合成并作为通过二硫键连接的双链分子在血浆中循环(1,2)。在分泌到血浆中之前,翻译后修饰产生11个γ-羧基谷氨酸(gla)残基和单个b-羟基天冬氨酸残基,它们位于NH2-末端轻链内。轻链还含有两个表皮生长因子(EGF)同源结构域。因子X的COOH-末端重链含有大部分碳水化合物部分,以及潜在的丝氨酸蛋白酶结构域。因子X的活化由内因子Xase复合物(因子IXa,因子VIIIa,细胞表面和钙离子)或外在因子Xase复合物(因子VIIa,组织因子,细胞表面和钙离子)催化。通过复合物激活人因子X导致COOH-末端重链的Arg52-Ile53处的切割和随后释放的52氨基酸活化糖肽。因子Xa然后用作凝血酶原酶复合物的酶组分,其负责凝血酶原快速转化为凝血酶。gla残基使因子X / Xa以钙依赖性方式结合磷脂(即细胞表面); 组装凝血酶原酶复合物的要求。个EGF同源结构域含有Ca2 +结合位点,其作为铰链使EGF和GLA结构域彼此折叠(12)。该分子区域参与细胞结合域的识别。

通过常规技术(3)和免疫亲和层析(4)的组合从新鲜冷冻的人血浆中分离人因子X. 除了标准的人因子X制剂外,还可获得Gla无结构域人因子X. 使用Bajaj等人报道的方法的改进,从新鲜牛血浆中分离牛因子X. (5,6)。纯化的酶原以50%(体积/体积)甘油/ H 2 O供应,应储存在-20℃。通过SDS-PAGE分析确定纯度,并在因子X凝固测定中测量活性。

 

凝胶

Novex 4-12%Bis-Tris

加载

人因子X,每泳道1μg

缓冲

MOPS

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等离子体

血浆浓度

10μg/ ml

行动方式

酶原; 丝氨酸蛋白酶因子Xa的前体

分子量

58,900(人类)(7)
55,100(牛)(8)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 11.6(人类)(9)

 

 

= 12.4(牛)(10)

 

等电点

4.9-5.2(人类)(9)
4.8-5.2(牛)(9)

结构体

两个亚基,Mr = 16,200和42,000(人类),Mr = 16,500和39,300(牛),NH2末端gla结构域和两个EGF结构域

碳水化合物百分比

15%(人)(7)
10%(牛)(8)

翻译后修改

11个gla残基(7,8)
一个β-羟基天冬氨酸

 

 

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