Haematologic BCIX-1040说明书
HTI BCIX-1040
Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注册公司，是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质，以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质，包括酶原，酶，辅因子和抑制剂，以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管，用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化，蛋白质修饰，化验开发，合同制造和合同研究。
Haematologic BCIX-1040说明书
Coagulation Factor IX
凝血因子IX
HCIX-0040 人因IX
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尺寸 |
100微克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
凝血试验 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
BCIX-1040 牛因子IX
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尺寸 |
100微克 |
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公式 |
50％甘油/水（v / v） |
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存储 |
-20℃下 |
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纯度 |
通过SDS-PAGE> 95％ |
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活动决定 |
凝血试验 |
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保质期（妥善保存） |
12个月 |
酶原因子IX是单链维生素K依赖性糖蛋白，其在肝脏中合成（1-3）。因子IX的结构域结构类似于其他维生素K依赖性凝血因子的结构域结构。NH 2 – 末端区域含有12个γ-羧基谷氨酸（gla）残基，其促进因子IX与带负电荷的磷脂表面的钙依赖性结合。与表皮生长因子（EGF）同源的两个结构域跨越NH2-末端gla结构域和活化肽（Ala-146至Arg-180）之间的区域。
因子IX由因子XIa或因子VIIa /组织因子/磷脂复合物激活。位点A处的切割（参见图）产生中间体IXa，其随后通过在位点B处的切割而转化为*活性形式IXaβ.NH2-末端轻链（GLA和EGF结构域）保持共价连接至COOH-末端重链。通过二硫键。丝氨酸蛋白酶催化三联体（Ser-365，His 221，Asp-269）位于重链中。因子IXaβ是“内因子Xase复合物”（因子VIIIa / IXa / Ca2 + /磷脂）的催化组分，其将因子X蛋白水解活化为因子Xa。
通过常规方法（4）和免疫亲和层析（5）的组合从新鲜冷冻血浆制备人因子IX。通过Fujikawa等人描述的方法的改进，从新鲜的柠檬酸化牛血浆制备牛因子IX。（6）。纯化的蛋白质以50％（vol / vol）甘油/ H2O提供，应储存在-20oC。通过SDS-PAGE分析确定纯度，并使用因子IX凝固测定法测量活性。
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凝胶 |
Novex 4-12％Bis-Tris |
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加载 |
人因子IX，每泳道1μg |
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缓冲 |
MOPS |
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标准 |
SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脱氢酶（51 kDa），酒精脱氢酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌红蛋白红（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） |
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本土化 |
等离子体 |
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血浆浓度 |
4-5ug / ml（人）（1） |
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行动方式 |
酶原; 丝氨酸蛋白酶因子IXa的前体 |
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分子量 |
55,000（人类）（8） |
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消光系数 |
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等电点 |
4.2-4.5（人类）（7） |
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结构体 |
单链，NH2-末端gla-结构域，两个EGF结构域 |
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碳水化合物百分比 |
17％（人类）（7） |
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翻译后修改 |
一个β-羟基天冬氨酸（9），十二个玻璃残留物（7） |
- Thompson，AR，Blood，67,565（1986）。
- Hedner，U。，et al。，In Hemostasis and Thrombosis，2nd edition，ed。RW Colman，J。Hirsh，VJ Marder，EW
- 萨尔兹曼，第39-47页。JP Lippincott Co，费城，1987年。
- Fujikawa，K.，Davie，EW。，Methods in Enzymology，45,74（1976）。
- Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
- Jenny，RJ，et al。，Prep。Biochem。，16,227（1986）。
- Fujikawa，K。等，Biochemistry，12,4938（1973）。
- Discipio，RG等，Biochemistry，16,698（1977）。
- Osterud，B.，et al。，J.Biol。Chem。，253,5946（1978）。
- McMullen，BA，et al。，BBRC，115,8（1983）。
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