avacta重组抗体专家，avacta使命是通过发展我们的一种*Affimer安全和有效的药物来塑造医学的未来®平台，并提供了强大的Affimer ®用于研究和诊断试剂
重组抗体表达是利用基因重组技术,将抗体序列转入表达载体并在表达系统中表达,终纯化得到重组抗体.相较于传统的抗体制备方法,利用基因重组技术表达抗体具有诸多优势
周期短:重组抗体生产周期为6~8周,而传统制备方法需4~6个月;
可控性高:抗体的基因是确定的,因此实验的重复性好且批次间差导小;
免疫原性低:不需要免疫动物,抗体不会产生鼠源性,不容易激起人体的免疫反应;
基因工程改造:利用基因重组技术,可以实现抗体片段的生产以及鼠源单抗的人源化改造。
Anti-Human SUMO1 Affimer Reagent (HS1-A1) Biotinylated
抗人SUMO1 Affimer试剂（HS1-A1）生物素化
目录代码AVA00024-
规格100μg
Affimer ® （HS1-A1）到人力SUMO1生物素化
一般
名称 抗人SUMO1 Affimer试剂（HS1-A1）生物素化
目录代码 AVA00024生物素
概观
克隆ID HS1-A1
尺寸（μg） 100
经测试的应用程序 共免疫沉淀，ITC，Western Blotting
标签 C-term 6His
共轭 生物素化
属性
形成 液体
存储说明 短期使用，储存在4°C。我们建议在-20°C下长期等分和储存。Affimers通常不受3-4次冷冻/解冻循环的影响
缓冲 100mM磷酸钠，75mM氯化钠，0.02％Sodium Azide，pH7.4
纯度 > 95％
净化方法 IMAC随后进行脱盐
克隆 单克隆
目标
目标 人类SUMO1
物种反应性 人的
目标Uniprot ID P63165
目标功能
泛素样蛋白质，可以作为单体或赖氨酸连接的聚合物共价附着在蛋白质上。通过异肽键与其底物的共价连接需要E1复合物SAE1-SAE2的预先活化和与E2酶UBE2I的连接，并且可以通过E3连接酶如PIAS1-4，RANBP2或CBX4促进。这种对蛋白质赖氨酸残基的翻译后修饰在许多细胞过程中起着至关重要的作用，例如核转运，DNA复制和修复，有丝分裂和信号转导。例如，涉及将RANGAP1靶向核孔复合蛋白RANBP2。聚合SUMO1链也易受多泛素化的影响，其作为蛋白酶体降解修饰蛋白的信号。也可能调节参与腭发育的基因网络。
Affimers的设计在许多方面比抗体表现更好。
研究领域 Cell Signaling，UPS
此Affimer仅在下面详述的应用程序中进行了测试。应用说明包括推荐的起始浓度，但是，宜条件应由终用户确定。
等温滴定量热法
克隆HS1-A1显示出对人SUMO1特异性（K d = 97nM），但通过等温滴定量热法与人SUMO2没有相互作用。
免疫共沉淀
用携带靶标（GFP，GFP-SUMO1或GFP-SUMO2）和Affimer（具有FLAG标签）的质粒（共）转染HEK293T细胞48小时。将细胞在PBS中洗涤，并将蛋白质在含有50mM Tris（pH 7.4），150mM NaCl，1％NP-40和1x蛋白酶抑制剂混合物（Roche）的1ml裂解缓冲液中在冰上提取15分钟，并通过在12,000℃离心澄清。 xg 10分钟，4°C。将裂解物与GFP-Trap（Chromotek）一起温育，用于GFP标记物质的共免疫沉淀。免疫沉淀的蛋白质在Laemmli缓冲液中洗脱并进行免疫印迹分析。如标记但红色框，Affimer（HS1-A1）在GFP-SUMO1存在下共沉淀，但不存在GFP-SUMO2。
Western Blotting
SDS-PAGE和印迹
在Bolt 4-12％Bis-Tris Plus凝胶（Life Tech）上分离蛋白质样品（每孔100ng），并使用iBlot2（Life Tech）印迹到硝酸纤维素上。
闭塞
使用1x TBS + 3％脱脂奶粉（1小时，RT°C，400rpm）封闭膜
洗1
3 x 5ml的1xTBS-T（0.05％吐温-20）
Affimer孵化
1 x TBS + 3％脱脂奶粉中5μg/ ml（16 h，4°C，400 rpm）
洗2
3 x 5ml的1xTBS-T（0.05％吐温-20）
发现
兔抗6xHis HRP结合物，在1 x TBS + 3％脱脂奶粉中1 / 5,000稀释（1小时，RT°C，400 rpm）
洗3
3 x 5ml的1xTBS-T（0.05％吐温-20）
基质
ECL（Amersham）
只有当Affimer存在时才会形成可检测的复合物：Affimer识别免疫球蛋白，并且通过Affimer上的6xHis标签介导复合物的检测。抗-6xHis结合剂不检测不存在Affimer的膜4上的IgG。
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货号 |
品名 |
规格 |
品牌 |
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AVA00109 |
Anti-Ipilimumab Affimer Reagent – HA, 6xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00108 |
Anti-Adalimumab Affimer® Reagent – HA, 6xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00107 |
Anti-Rituximab Affimer Reagent – HA, 6xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00104 |
Anti-diUbiquitin K33 Affimer Reagent – 6xHis tag, Cysteine |
100µg |
avacta |
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AVA00106 |
Anti-Trastuzumab Affimer Reagent – 6xHis tag, Cysteine |
100µg |
avacta |
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AVA00105 |
Anti-diUbiquitin K33 Affimer Reagent – GFP, 7xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00103 |
Anti-diUbiquitin K33 Affimer Reagent – 6xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00102 |
Anti-diUbiquitin K6 Affimer Reagent – GFP, 7xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00101 |
Anti-diUbiquitin K6 Affimer Reagent – 6xHis tag, Cysteine |
100µg |
avacta |
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AVA00100 |
Anti-diUbiquitin K6 Affimer Reagent – 6xHis tag |
100µg |
avacta |
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AVA00026 |
Anti-Human SUMO1/2 Affimer Reagent (HS-D5) |
100µg |
avacta |
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AVA00025 |
Anti-Human SUMO2 Affimer Reagent (HS2-B3) |
100µg |
avacta |
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AVA00024-Biotin |
Anti-Human SUMO1 Affimer Reagent (HS1-A1) Biotinylated |
100µg |
avacta |
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AVA00020 |
Anti-Ubiquitin Affimer Reagent (UX-K63-20) |
100µg |
avacta |
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AVA00019 |
Anti-diUbiquitin K48-linkage Affimer Reagent (36-28) |
100µg |
avacta |
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AVA00018 |
Anti-diUbiquitin K48-linkage Affimer Reagent (36-16) |
100µg |
avacta |
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AVA00024 |
Anti-Human SUMO1 Affimer Reagent (HS1-A1) |
100µg |
avacta |
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AVA00022-Biotin |
Anti-Yeast SUMO Affimer Reagent (YS1-15) Biotinylated |
100µg |
avacta |
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AVA00022 |
Anti-Yeast SUMO Affimer Reagent (YS1-15) |
100µg |
avacta |
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AVA00067-Biotin |
Anti-GST Affimer Reagent (L4-B1) Biotinylated |
100µg |
avacta |
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AVA00067 |
Anti-GST Affimer Reagent (L4-B1) |
100µg |
avacta |
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AVA00068-Biotin |
Anti-GST Affimer Reagent (L4-A2) Biotinylated |
100µg |
avacta |
|
AVA00068 |
Anti-GST Affimer Reagent (L4-A2) |
100µg |
avacta |
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